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香芋南瓜的篩選方法與流程

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香芋南瓜的篩選方法與制造工藝

本發(fā)明涉及蔬菜育種領(lǐng)域,特別是涉及一種香芋南瓜的篩選方法。



背景技術(shù):

南瓜作為葫蘆科植物中一種重要的園藝作物,具有較高的商業(yè)價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值,是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)作物之一。其中香芋南瓜因其具備香味濃郁、品質(zhì)佳等特點(diǎn),是市場(chǎng)上深受消費(fèi)者青睞的小果型南瓜品種之一,銷(xiāo)售價(jià)格較高,具有較好的經(jīng)濟(jì)效益。

香芋南瓜的香味是其品質(zhì)構(gòu)成的重要指標(biāo),在香芋南瓜品種選育過(guò)程中,十分關(guān)鍵的問(wèn)題是對(duì)香味性狀的準(zhǔn)確鑒定,目前,育種家常采用感官鑒定的方法,主要依靠主觀嗅覺(jué)來(lái)進(jìn)行香味性狀的判斷,但是此方法具有一定的局限性,缺乏客觀判斷的標(biāo)準(zhǔn),檢測(cè)人的嗅覺(jué)閾值差異不同,感官差異較大,鑒定結(jié)果準(zhǔn)確定和可靠性難以保證,會(huì)對(duì)香芋南瓜的鑒定、篩選產(chǎn)生主觀影響,而不能對(duì)香芋南瓜的篩選做出一種數(shù)據(jù)化的、客觀的評(píng)價(jià)。由于香味組成復(fù)雜,且各種香味成分互相影響,使得準(zhǔn)確、快速、簡(jiǎn)單的對(duì)香芋南瓜的香味進(jìn)行鑒定成為香芋南瓜育種的難題之一。

并且,目前為止還未見(jiàn)關(guān)于南瓜香味物質(zhì)檢測(cè)技術(shù)以及香芋南瓜特征香味化合物的報(bào)道。



技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:

基于此,有必要針對(duì)上述問(wèn)題,提供一種香芋南瓜的篩選方法。

具體技術(shù)方案如下:

一種香芋南瓜的篩選方法,先采用氣相色譜-質(zhì)譜法檢測(cè)南瓜果肉是否含有特征化合物2-乙?;?1-吡咯啉,含有該特征化合物的南瓜為香芋南瓜。

在其中一些實(shí)施例中,所述氣相色譜-質(zhì)譜法的檢測(cè)步驟如下:

樣品預(yù)處理:取南瓜果肉切薄片,液氮冷凍,在-70~-80℃保存,得樣品,檢測(cè)前將樣品冷凍干燥,脫水,加入液氮中研磨成粉,液氮揮發(fā)后得粉狀樣品;

檢測(cè):準(zhǔn)確稱(chēng)取1~3g所述粉狀樣品,放入20ml頂空瓶中,加入1μL濃度為4μg/μL的3-壬酮作為內(nèi)標(biāo)物,溶劑為乙醇,迅速擰緊頂空瓶瓶蓋,放入40~70℃水浴中,然后迅速插入固相微萃取裝置,平衡2~30min,40~70℃吸附35~50min;吸附后把萃取頭插入氣相色譜-質(zhì)譜儀的進(jìn)樣口進(jìn)行解吸附,進(jìn)樣口溫度為270℃,解吸附時(shí)間為4.5min;解吸附后采用所述氣相色譜-質(zhì)譜儀對(duì)樣品的揮發(fā)性成分進(jìn)行數(shù)據(jù)采集和分析。

在其中一些實(shí)施例中,所述氣相色譜-質(zhì)譜法的檢測(cè)步驟如下:

樣品預(yù)處理:取南瓜果肉切薄片,液氮冷凍,在-80℃保存,得樣品,檢測(cè)前將樣品冷凍干燥,然后加入液氮中研磨成細(xì)粉,液氮揮發(fā)后得預(yù)處理干燥粉狀樣品;

檢測(cè):準(zhǔn)確稱(chēng)取1g所述粉狀樣品,放入20ml頂空瓶中,加入1μL濃度為4μg/μL的3-壬酮作為內(nèi)標(biāo)物,溶劑為乙醇,迅速擰緊頂空瓶瓶蓋,放入70℃水浴中,然后迅速插入固相微萃取裝置,平衡2min,70℃吸附35min;吸附后把萃取頭插入氣相色譜-質(zhì)譜儀的進(jìn)樣口進(jìn)行解吸附,進(jìn)樣口溫度為270℃,解吸附時(shí)間為4.5min;解吸附后采用所述氣相色譜-質(zhì)譜儀對(duì)樣品的揮發(fā)性成分進(jìn)行數(shù)據(jù)采集和分析。

在其中一些實(shí)施例中,所述氣相色譜-質(zhì)譜法檢測(cè)中的氣相色譜條件如下:氣相色譜柱DB-5MS;載氣為氦氣,流速為1.0ml/min;進(jìn)樣模式為SPME手動(dòng)進(jìn)樣;進(jìn)樣口溫度為270℃;程序化升溫:50℃保持3min,隨后以5℃/min的速率上升至250℃,保持5min;

質(zhì)譜條件如下:EI離子源;電離電壓70eV;離子源溫度230℃;四級(jí)桿溫度150℃;接口溫度280℃;掃描模式為全掃,m/z 35-450。

在其中一些實(shí)施例中,所述色譜柱的規(guī)格參數(shù)為60m×0.32mm×0.25μm。

在其中一些實(shí)施例中,所述樣品預(yù)處理步驟中的冷凍干燥為在-45~-55℃的溫度以及壓力≤100pa的條件下凍干46~50小時(shí)。

在其中一些實(shí)施例中,所述干燥粉狀樣品的粒徑為<0.5mm。

本發(fā)明相較現(xiàn)有技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)和有益效果為:

發(fā)明人通過(guò)大量研究,利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù),通過(guò)香芋南瓜與其它普通南瓜相比較,獲得香芋南瓜的特征物質(zhì)成分:2-乙?;?1-吡咯啉,化學(xué)式為C6H9NO,又被稱(chēng)為古嗎啉,為淡黃色液體,是一種天然香物質(zhì),易溶于熱水、乙醇和乙醚,上述特征物質(zhì)成分的確定為香芋南瓜的鑒定篩選提供能夠量化的物質(zhì)。進(jìn)一步地,發(fā)明人所優(yōu)選的檢測(cè)條件,可以快速、準(zhǔn)確的鑒定香芋南瓜中上述特征化合物的有無(wú)。

附圖說(shuō)明

圖1為香芋南瓜編號(hào)為YJ-1的樣品的總離子流圖;

圖2為香芋南瓜編號(hào)為YJ-2的樣品的總離子流圖;

圖3為香芋南瓜編號(hào)為YJ-3的樣品的總離子流圖;

圖4為香芋南瓜編號(hào)為YJ-4的樣品的總離子流圖;

圖5為香芋南瓜編號(hào)為YJ-5的樣品的總離子流圖;

圖6為香芋南瓜編號(hào)為YJ-6的樣品的總離子流圖;

圖7為非香芋南瓜編號(hào)為EY-1的樣品的總離子流圖;

圖8為非香芋南瓜編號(hào)為EY-2的樣品的總離子流圖;

圖9為非香芋南瓜編號(hào)為EY-3的樣品的總離子流圖;

圖10為非香芋南瓜編號(hào)為EY-4的樣品的總離子流圖;

圖11為非香芋南瓜編號(hào)為EY-5的樣品的總離子流圖;

圖12為非香芋南瓜編號(hào)為EY-6的樣品的總離子流圖;

圖13為香芋南瓜編號(hào)為YJ-7的樣品的總離子流圖;

圖14為非香芋南瓜編號(hào)為BX-1的樣品的總離子流圖;

圖15為香芋南瓜編號(hào)YJ-8的樣品的總離子流圖;

圖16為香芋南瓜編號(hào)為HS-1的樣品的總離子流圖;

圖17為香芋南瓜編號(hào)為HS-2的樣品的總離子流圖;

圖18為香芋南瓜編號(hào)為HS-3的樣品的總離子流圖;

圖19為香芋南瓜編號(hào)為HS-4的樣品的總離子流圖;

圖20為香芋南瓜編號(hào)為HS-5的樣品的總離子流圖;

圖21為香芋南瓜編號(hào)為HS-6的樣品的總離子流圖。

具體實(shí)施方式

以下通過(guò)實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明。

本發(fā)明實(shí)施例中所用樣品均為廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所選育的香芋南瓜以及非香芋南瓜,所用設(shè)備、試劑均為市售普通產(chǎn)品,其中:

香芋南瓜樣品為兩類(lèi)廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所選育的香芋南瓜材料,均為多代自交純合自交系材料,性狀穩(wěn)定,樣品編號(hào)為YJ-1~YJ-8和HS-1~HS-6。

非香芋南瓜樣品為兩類(lèi)廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所選育的不具有香芋南瓜香味性狀的南瓜材料,均為多代自交純合自交系材料,性狀穩(wěn)定,分別編號(hào)為EY-1~EY-6和BX-1。

氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀為7890A-7000C氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀,購(gòu)自美國(guó)Agilent公司。

固相微萃取裝置50/30μm DVB/CAR/PDMS萃取頭,購(gòu)自美國(guó)Supleco公司。

烷烴標(biāo)準(zhǔn)品(C7-C40)購(gòu)自sigma。

實(shí)驗(yàn)例1香芋南瓜特征化合物確定

選取編號(hào)為YJ-1~YJ-6的一類(lèi)香芋南瓜材料,共從6個(gè)成熟的瓜上取樣,另外選取一類(lèi)編號(hào)為EY-1~EY-6的非香芋南瓜材料6個(gè)瓜,按照以下步驟進(jìn)行檢測(cè):

將上述南瓜果肉取樣,切薄片,然后迅速液氮冷凍,放置-80℃超低溫冰箱待處理。

將保存的南瓜樣品進(jìn)行冷凍干燥(-50℃,壓力≤100pa,凍干48小時(shí)),冷凍干燥后,將南瓜樣本加入液氮中研磨成粉,液氮揮發(fā)后得到干燥的粉狀樣品(粒徑<0.5mm),用于后期檢測(cè)。

準(zhǔn)確稱(chēng)取1g粉狀樣品,放入20ml頂空瓶中,加入1μL 3-壬酮(4μg/μL)作為內(nèi)標(biāo)物,溶劑為乙醇,迅速擰緊頂空瓶瓶蓋,放入70℃水浴中。迅速插入固相微萃取裝置(50/30μm DVB/CAR/PDMS萃取頭,美國(guó)Supleco公司),平衡2min,70℃吸附35min。吸附后,把萃取頭插入安捷倫7890A氣相色譜串聯(lián)7000C質(zhì)譜儀中的色譜儀的進(jìn)樣口進(jìn)行解吸附,進(jìn)樣口溫度為270℃,解吸附時(shí)間為4.5min。利用安捷倫7890A氣相色譜串聯(lián)7000C質(zhì)譜儀對(duì)樣品揮發(fā)性成分進(jìn)行數(shù)據(jù)采集和分析。

氣相條件:氣相色譜柱DB-5MS(60m×0.32mm×0.25μm);載氣為氦氣,流速為1.0ml/min;進(jìn)樣模式為SPME手動(dòng)進(jìn)樣;進(jìn)樣口溫度為270℃;程序化升溫:50℃保持3min,隨后以5℃/min的速率上升至250℃,保持5min。質(zhì)譜條件:EI離子源;電離電壓70eV;離子源溫度230℃;四級(jí)桿溫度150℃;接口溫度280℃;掃描模式為全掃,m/z 35-450。

對(duì)采集到的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。根據(jù)各樣本的總離子流圖能初步判斷YJ和EY之間的差異化合物(圖1~12)。利用Masshunter定性分析軟件(Agilent Masshunter Qualitative Analysis B.07.00)對(duì)采集到的全掃數(shù)據(jù)進(jìn)行解卷積,RT窗口比例系數(shù)100.00;排除m/z 28;信噪比閾值2.0;提取窗口:左側(cè)m/z變化量0.3amu,右側(cè)m/z變化量0.7amu;絕對(duì)峰高≥300;絕對(duì)峰面積≥1000。

解卷積后的數(shù)據(jù)文件轉(zhuǎn)化為.cef文件后直接導(dǎo)入MPP分析軟件(Mass Profile Professional Software Package 13.1)進(jìn)行分析。

化合物初步過(guò)濾:最小絕對(duì)豐度2000counts;保留時(shí)間范圍4.5-46min;質(zhì)量數(shù)范圍35.0-450.0;碎片離子數(shù)目≥5。

化合物對(duì)齊參數(shù):保留時(shí)間偏差范圍0.05min;匹配因子0.3;最低分辨率0.2;基線設(shè)定為所有樣品的一半。

化合物篩選分析參數(shù):至少在一個(gè)處理組中出現(xiàn)60%;至少在一組樣品中的變異系數(shù)<30%;顯著性檢驗(yàn)(ANOVA)p<0.05。

利用Masshunter定性分析軟件對(duì)差異化合物進(jìn)行核實(shí),根據(jù)烷烴標(biāo)準(zhǔn)品(C7-C40)提供的可靠信息計(jì)算保留指數(shù),根據(jù)化合物保留指數(shù)及NIST MS分析結(jié)果進(jìn)行定性,所使用的數(shù)據(jù)庫(kù)為NIST 14,保留的定性化合物至少在一組內(nèi)的平均得分≥80分。

根據(jù)差異化合物的定性結(jié)果從而獲得香芋南瓜的特征化合物2-乙?;?1-吡咯啉,這類(lèi)化合物在非香芋南瓜材料的樣品中均沒(méi)有檢測(cè)到,并且在香芋南瓜材料共6個(gè)樣品中都能檢測(cè)到,且在檢測(cè)到的各類(lèi)香氣化合物中含量偏高(請(qǐng)見(jiàn)表1以及圖1~12)。在后續(xù)的香芋南瓜選育過(guò)程中,通過(guò)檢測(cè)這一特征化合物的有無(wú)及高低來(lái)鑒定、篩選香芋南瓜種質(zhì)。

表1:2-乙?;?1-吡咯啉在香芋南瓜YJ-1~YJ-6與非香芋南瓜EY-1~EY-6中的峰面積比較

從表1以及圖1~6樣品總離子流圖可以看出,YJ-1~YJ-6樣品在保留時(shí)間11.75分鐘附近都能檢測(cè)到較大峰面積的單峰,經(jīng)定性分析為化合物2-乙酰基-1-吡咯啉,而非香芋南瓜EY1~EY6種質(zhì)不能檢測(cè)到該化合物(請(qǐng)見(jiàn)圖7~12)。初步斷定該化合物為香芋南瓜的香氣特征化合物。

實(shí)驗(yàn)例2

為驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)例1所得香芋南瓜的特征化合物2-乙?;?1-吡咯啉,選取編號(hào)為YJ-7的一類(lèi)香芋南瓜材料以及另外一類(lèi)編號(hào)為BX-1的非香芋南瓜材料來(lái)進(jìn)行實(shí)驗(yàn):

實(shí)驗(yàn)步驟如下:

分別以YJ-7和BX-1材料為研究對(duì)象,將上述南瓜果肉取樣,切薄片,然后迅速液氮冷凍,放置-80℃超低溫冰箱待處理。

將保存的南瓜樣品進(jìn)行冷凍干燥,脫水。待干燥后,將南瓜樣本加入液氮中研磨成粉,液氮揮發(fā)后得到南瓜干燥的粉樣,用于后期檢測(cè)。

準(zhǔn)確稱(chēng)取1g粉狀樣品,放入20ml頂空瓶中,加入1μL 3-壬酮(4μg/μL)作為內(nèi)標(biāo)物,迅速擰緊頂空瓶瓶蓋,放入70℃水浴中。迅速插入固相微萃取裝置,平衡2min,70℃吸附35min。隨后,把萃取頭插入安捷倫7890A氣相色譜串聯(lián)7000C質(zhì)譜儀的色譜儀的進(jìn)樣口進(jìn)行解吸附,進(jìn)樣口溫度為270℃,解吸附時(shí)間為4.5min。利用安捷倫7890A氣相色譜串聯(lián)7000C質(zhì)譜儀對(duì)樣品揮發(fā)性成分進(jìn)行數(shù)據(jù)采集和分析。

氣相條件:氣相色譜柱DB-5MS(60m×0.32mm×0.25μm);載氣為氦氣,流速為1.0ml/min;進(jìn)樣模式為SPME手動(dòng)進(jìn)樣;進(jìn)樣口溫度為270℃;程序化升溫:50℃保持3min,隨后以5℃/min的速率上升至250℃,保持5min。質(zhì)譜條件:EI離子源;電離電壓70eV;離子源溫度230℃;四級(jí)桿溫度150℃;接口溫度280℃;掃描模式為全掃,m/z 35-450。

對(duì)采集到的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。利用Masshunter定性分析軟件(Agilent Masshunter Qualitative Analysis B.07.00)對(duì)采集到的全掃數(shù)據(jù)進(jìn)行解卷積,RT窗口比例系數(shù)100.00;排除m/z 28;信噪比閾值2.0;提取窗口:左側(cè)m/z變化量0.3amu,右側(cè)m/z變化量0.7amu;絕對(duì)峰高≥300;絕對(duì)峰面積≥1000。

首先根據(jù)出峰差異,確定兩類(lèi)材料中具有差異的化合物,主要關(guān)注峰的有無(wú)(圖13,圖14)。利用Masshunter定性分析軟件對(duì)差異化合物進(jìn)行識(shí)別,根據(jù)烷烴標(biāo)準(zhǔn)品(C7-C40)提供的可靠信息計(jì)算保留指數(shù),根據(jù)化合物保留指數(shù)及NIST MS分析結(jié)果進(jìn)行定性,所使用的數(shù)據(jù)庫(kù)為NIST 14。

在非香芋南瓜樣品BX-1中同樣未檢測(cè)到化合物2-乙?;?1-吡咯啉(保留時(shí)間約為11.75分鐘),進(jìn)一步驗(yàn)證香芋南瓜香味的特征化合物為2-乙?;?1-吡咯啉。

實(shí)驗(yàn)例3

為驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)例1所得香芋南瓜的特征化合物2-乙酰基-1-吡咯啉,以編號(hào)為YJ-8的南瓜材料為樣本,在不同的萃取溫度,平衡時(shí)間、以及吸附時(shí)間條件下再次進(jìn)行實(shí)驗(yàn):

將上述南瓜果肉取樣,切薄片,然后迅速液氮冷凍,放置-80℃超低溫冰箱待處理。

將保存的南瓜樣品進(jìn)行冷凍干燥,脫水。待干燥后,將南瓜樣本加入液氮中研磨成粉,液氮揮發(fā)后得到南瓜干燥的粉樣,用于后期檢測(cè)。

準(zhǔn)確稱(chēng)取1g粉狀樣品,放入20ml頂空瓶中,加入1μL 3-壬酮(4μg/μL)作為內(nèi)標(biāo)物,迅速擰緊頂空瓶瓶蓋,放入50℃水浴中。迅速插入固相微萃取裝置,平衡5min,50℃吸附40min。隨后,把萃取頭插入安捷倫7890A氣相色譜串聯(lián)7000C質(zhì)譜儀的色譜儀的進(jìn)樣口進(jìn)行解吸附,進(jìn)樣口溫度為270℃,解吸附時(shí)間為4.5min。利用安捷倫7890A氣相色譜串聯(lián)7000C質(zhì)譜儀對(duì)樣品揮發(fā)性成分進(jìn)行數(shù)據(jù)采集和分析。

氣相條件:氣相色譜柱DB-5MS(60m×0.32mm×0.25μm);載氣為氦氣,流速為1.0ml/min;進(jìn)樣模式為SPME手動(dòng)進(jìn)樣;進(jìn)樣口溫度為270℃;程序化升溫:50℃保持3min,隨后以5℃/min的速率上升至250℃,保持5min。質(zhì)譜條件:EI離子源;電離電壓70eV;離子源溫度230℃;四級(jí)桿溫度150℃;接口溫度280℃;掃描模式為全掃,m/z 35-450。

首先在總離子流圖發(fā)現(xiàn)在保留時(shí)間11.75分鐘處有單一峰(請(qǐng)見(jiàn)圖15)。然后對(duì)采集到的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。利用Masshunter定性分析軟件(Agilent Masshunter Qualitative Analysis B.07.00)對(duì)采集到的全掃數(shù)據(jù)進(jìn)行解卷積,RT窗口比例系數(shù)100.00;排除m/z 28;信噪比閾值2.0;提取窗口:左側(cè)m/z變化量0.3amu,右側(cè)m/z變化量0.7amu;絕對(duì)峰高≥300;絕對(duì)峰面積≥1000。

利用Masshunter定性分析軟件對(duì)化合物進(jìn)行識(shí)別,根據(jù)烷烴標(biāo)準(zhǔn)品(C7-C40)提供的可靠信息計(jì)算保留指數(shù),根據(jù)化合物保留指數(shù)及NIST MS分析結(jié)果進(jìn)行定性,所使用的數(shù)據(jù)庫(kù)為NIST 14。

根據(jù)定性結(jié)果表明,在保留時(shí)間11.75分鐘測(cè)到的化合物為2-乙?;?1-吡咯啉,說(shuō)明該化合物在不同的萃取溫度、平衡時(shí)間、以及吸附時(shí)間下,能夠被穩(wěn)定檢測(cè)到,進(jìn)一步驗(yàn)證香芋南瓜香味的特征化合物為2-乙酰基-1-吡咯啉。

實(shí)施例1

一種香芋南瓜的篩選方法,包括以下步驟:

樣品預(yù)處理:以編號(hào)為HS-1-HS-6的一類(lèi)香芋南瓜材料作為測(cè)試樣品,共6個(gè)供試成熟果實(shí),取樣時(shí)期為2016年6月。取南瓜果肉切薄片,液氮冷凍,在-80℃保存;將保存的南瓜樣品進(jìn)行冷凍干燥(-50℃,壓力≤100pa,凍干48小時(shí)),干燥后,將南瓜樣本加入液氮中研磨成粉,液氮揮發(fā)后得到南瓜干燥的粉狀樣品(<0.5mm),用于后期檢測(cè)。

檢測(cè):準(zhǔn)確稱(chēng)取1g粉狀樣品,放入20ml頂空瓶中,加入1μL 3-壬酮(4μg/μL)作為內(nèi)標(biāo)物,溶劑為乙醇,迅速擰緊頂空瓶瓶蓋,放入70℃水浴中。迅速插入固相微萃取裝置,平衡2min,70℃吸附35min。隨后,把萃取頭插入安捷倫7890A氣相色譜串聯(lián)7000C質(zhì)譜儀中色譜儀的進(jìn)樣口進(jìn)行解吸附,進(jìn)樣口溫度為270℃,解吸附時(shí)間為4.5min。利用安捷倫7890A氣相色譜串聯(lián)7000C質(zhì)譜儀對(duì)樣品揮發(fā)性成分進(jìn)行數(shù)據(jù)采集和分析。

氣相條件:氣相色譜柱DB-5MS(60m×0.32mm×0.25μm);載氣為氦氣,流速為1.0ml/min;進(jìn)樣模式為SPME手動(dòng)進(jìn)樣;進(jìn)樣口溫度為270℃;程序化升溫:50℃保持3min,隨后以5℃/min的速率上升至250℃,保持5min。質(zhì)譜條件:EI離子源;電離電壓70eV;離子源溫度230℃;四級(jí)桿溫度150℃;接口溫度280℃;掃描模式為全掃,m/z35-450。

對(duì)采集到的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。首先根據(jù)各重復(fù)樣本的總離子流圖(請(qǐng)見(jiàn)圖16~21),可以發(fā)現(xiàn)約在11.75分鐘有單一峰出現(xiàn),并且該化合物分離較好。隨后,利用Masshunter定性分析軟件(Agilent Masshunter Qualitative Analysis B.07.00)對(duì)6個(gè)供試樣本采集到的全掃數(shù)據(jù)進(jìn)行解卷積,RT窗口比例系數(shù)100.00;排除m/z 28;信噪比閾值2.0;提取窗口:左側(cè)m/z變化量0.3amu,右側(cè)m/z變化量0.7amu;絕對(duì)峰高≥300;絕對(duì)峰面積≥1000。

利用Masshunter定性分析軟件對(duì)6個(gè)供試樣本中的化合物進(jìn)行核實(shí),并根據(jù)烷烴標(biāo)準(zhǔn)品(C7-C40)提供的可靠信息計(jì)算保留指數(shù),根據(jù)化合物保留指數(shù)及NIST MS分析結(jié)果進(jìn)行定性,所使用的數(shù)據(jù)庫(kù)為NIST 14,保留的定性化合物平均得分≥80分。

根據(jù)定性結(jié)果從而進(jìn)一步確定在11.75分鐘出現(xiàn)的化合物為香芋南瓜種質(zhì)HS的特征化合物2-乙?;?1-吡咯啉。并且該化合物出峰保留時(shí)間穩(wěn)定,能夠與其他化合物很好的分離(請(qǐng)見(jiàn)圖16-21)。

以上所述實(shí)施例的各技術(shù)特征可以進(jìn)行任意的組合,為使描述簡(jiǎn)潔,未對(duì)上述實(shí)施例中的各個(gè)技術(shù)特征所有可能的組合都進(jìn)行描述,然而,只要這些技術(shù)特征的組合不存在矛盾,都應(yīng)當(dāng)認(rèn)為是本說(shuō)明書(shū)記載的范圍。

以上所述實(shí)施例僅表達(dá)了本發(fā)明的幾種實(shí)施方式,其描述較為具體和詳細(xì),但并不能因此而理解為對(duì)發(fā)明專(zhuān)利范圍的限制。應(yīng)當(dāng)指出的是,對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō),在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下,還可以做出若干變形和改進(jìn),這些都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。因此,本發(fā)明專(zhuān)利的保護(hù)范圍應(yīng)以所附權(quán)利要求為準(zhǔn)。

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