一種檢測、分析糧食中苯并[a]芘的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種檢測糧食中苯并[a]芘的方法，前處理采用超聲萃取，以二氯甲烷和丙酮作為萃取溶劑，極大的縮短了前處理時間，并節(jié)省溶劑；用硅酸鎂吸附劑凈化萃取液，操作簡單，凈化效果好；另外本發(fā)明運用了氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀對苯并[a]芘進行檢測，方法重現(xiàn)性好，準確度高，適用于多種糧食的苯并[a]芘測定，可用于復(fù)雜體系中痕量組分苯并[a]芘的快速定量測定。
【專利說明】一種檢測、分析糧食中苯并[a]芘的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于痕量分析【技術(shù)領(lǐng)域】，具體是一種檢測、分析糧食中苯并[a]芘的方法。

【背景技術(shù)】
[0002] -方面由于工業(yè)"三廢"的排放，致使糧食的自然污染非常普遍。無論是工業(yè)區(qū)還 是非工業(yè)區(qū)，全部測出苯并[a]芘，且工業(yè)區(qū)糧食污染較非工業(yè)區(qū)高出4-5倍。另一方面由 于受高額利潤的誘惑，一些不法商販將礦物油摻入陳米、黃變米、霉變米中，使其表面光滑 油潤，以新米的價格出售給消費者。人們食用"油大米"以后，會出現(xiàn)頭暈、惡心、嘔吐、腹瀉 等癥狀。因為加入大米中的油是從石油中萃取的礦物油，混有多種對人體有害的多環(huán)芳烴 化合物，特別是可致癌的苯并[a]芘。因此，研究更加高效的糧食中苯并[a]芘檢測方法迫 在眉睫，尋找出檢測時間短、靈敏度高、選擇性強、重現(xiàn)性好、樣品前處理技術(shù)操作簡單的檢 測方法，這對保證糧食安全具有重要意義。目前，苯并[a]芘測定有國家標準的熒光分光光 度法及常見液相色譜儀-熒光光度法，但這些方法前處理過程需要很長時間，從而導(dǎo)致檢 測效率大大折扣，不宜于苯并[a]芘的快速檢測。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是現(xiàn)有技術(shù)中苯并[a]芘分析存在的樣品前處理時間 長、操作復(fù)雜、靈敏度低、重現(xiàn)性差等問題，并使用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀進行分析檢測。
[0004] 一種檢測、分析糧食中苯并[a]芘的方法，包括以下步驟：
[0005] (1)樣品前處理：采用超聲溶劑萃取糧食樣品，并用硅酸鎂吸附劑凈化萃取液，過 濾后得到待測樣品溶液；
[0006] (2)標準曲線的建立：以濃度為5. 05ug/ml苯并[a]芘標準溶液作為標準物質(zhì)，配 制成五個不同濃度外標溶液，以氣相色譜-質(zhì)譜儀檢測外標溶液建立定量標準曲線；
[0007] (3)用氣相色譜-質(zhì)譜儀檢測樣品溶液，以定量標準曲線計算樣品溶液中苯并[a] 花的含量。
[0008] 所述樣品前處理的步驟包括：稱取一定質(zhì)量的糧食樣品，將樣品碾碎，加入二氯甲 烷和丙酮作為萃取溶劑，用超聲萃取，萃取結(jié)束后，萃取液靜置冷卻后，用硅酸鎂吸附劑凈 化，經(jīng)0. 45 μ m有機相濾膜過濾后，得到待測樣品溶液。
[0009] 進一步，二氯甲烷和丙酮的體積比是1?2:1，萃取溶劑的用量是每克樣品加 2-6ml萃取溶劑，超聲萃取的溫度是50°C _60°C，萃取時間是2h。硅酸鎂吸附劑的制備方法 是：稱取硅酸鎂，置入馬弗爐烘焙，烘培的溫度是600°C，烘培的時間為3h。將冷卻后保存于 干燥器即可。
[0010]用氣相色譜-質(zhì)譜儀檢測不同濃度的苯并[a]芘標準溶液，計算得出苯并[a]芘 的標準曲線及回歸方程；用氣相色譜-質(zhì)譜儀檢測待測樣品溶液，通過標準曲線和回歸方 程計算得到待測樣品溶液中苯并[a]芘的濃度，進而計算得出樣品中苯并[a]芘的含量。 [0011] 所述氣相色譜-質(zhì)譜儀檢測采用的氣相色譜-質(zhì)譜儀分析條件如下：
[0012] a)色譜柱：RTX-5MS毛細管色譜柱，長30m，內(nèi)徑0.25謹，膜厚0.254 111;
[0013] b)溫度：
[0014] 進樣口溫度250°C，程序升溫過程如下：
[0015] 初始溫度70°C，保持2min ;
[0016] 以 10°C /min 的速率升至 320°C，保持 3min ;
[0017] 總運行時間為30min;
[0018] c)柱流速：1. OlmL/min ;
[0019] d)MS :離子源溫度：230°C接口溫度：280°C ;
[0020] 定量離子：252m/z ;定性離子：253m/z 125m/z ;
[0021] e)進樣方式：不分流進樣，自動進樣，進樣量1 μ L ;
[0022] f)采集模式：SM模式；
[0023] g)載氣類型：氦氣純度為99. 999%。
[0024] 本發(fā)明的檢測方法前處理過程采用超聲溶劑萃取，以二氯甲烷和丙酮作為萃取溶 齊U，極大的縮短了前處理時間，并節(jié)省溶劑樣品；超聲提取時溶劑不同，會對提取效率有很 大影響，本發(fā)明也著重研究提取溶劑對于樣品的影響，提取溶劑包括環(huán)己烷，二氯甲烷，二 氯甲烷-環(huán)己烷，丙酮-環(huán)己烷，二氯甲烷-丙酮等，確定最終高效、可靠的提取溶劑，最終 選用二氯甲烷-丙酮作為提取溶劑；用硅酸鎂吸附劑凈化萃取液，操作簡單，凈化效果好； 同時用基質(zhì)混合標準溶液對方法的回收率和檢出限進行評價，證明方法的檢出限低，重現(xiàn) 性好，準確度高；另外本發(fā)明運用了氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀對于苯并[a]芘進行檢測，方 法優(yōu)于目前國家標準的熒光分光光度法及常見液相色譜儀-熒光光度法，相比于液相色譜 儀-熒光光度法，本申請的方法適用于多種糧食的苯并[a]芘測定，該色譜技術(shù)花費低，分 離效果及色譜重現(xiàn)性好，可用于復(fù)雜體系中痕量組分苯并[a]芘的定量快速測定，結(jié)果更 加準確，更有利于目前市場的發(fā)展與推廣。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0025] 圖1是苯并[a]芘濃度為0. 1 μ g/mL的標準溶液的SM色譜圖；
[0026] 圖2是苯并[a]芘質(zhì)譜圖；
[0027] 圖3是苯并[a]芘標準曲線圖。

【具體實施方式】
[0028] 下面將結(jié)合【具體實施方式】對本發(fā)明中的技術(shù)方案進行清楚、完整地描述。
[0029] 實施例1
[0030] 為了得到更優(yōu)提取效率的溶劑，用本發(fā)明的檢測方法對具體的同一糧食樣品，不 同提取溶劑中苯并[a]芘進行檢測，并對比最終提取效率，選擇最優(yōu)提取溶劑或溶劑組合。 提取溶劑包括環(huán)己烷，二氯甲烷，二氯甲烷-環(huán)己烷，丙酮-環(huán)己烷，二氯甲烷-丙酮等，都 是常見的提取溶劑。
[0031] 稱取已知苯并[a]芘濃度的5. OOOOg左右糧食樣品若干份，分別加入30mL環(huán)己 燒、30mL二氯甲燒、30mL二氯甲燒-環(huán)己燒（v: V = I: I)、30mL丙酮-環(huán)己燒（v: V = 1:1)、 30mL二氯甲烷-丙酮（v:v= 1:1)進行超聲提取，在50°C用微波超聲提取2h，提取結(jié)束后， 靜置冷卻，用硅酸鎂吸附劑凈化，過濾后用二氯甲烷：丙酮=1:1定容得待測樣品溶液。將 待測樣品溶液在上述氣相色譜-質(zhì)譜條件下進行檢測，對比苯并[a]芘測定結(jié)果，計算其回 收率，看哪組提取溶劑回收率最1?，具體如表1所:
[0032] 表1不同溶劑提取后苯并[a]芘的測定結(jié)果
[0033]

【權(quán)利要求】
1. 一種檢測、分析糧食中苯并[a]芘的方法，其特征在于，包括以下步驟： (1) 樣品前處理：采用溶劑超聲萃取糧食樣品，并用硅酸鎂吸附劑凈化萃取液，過濾后 得到待測樣品溶液； (2) 標準曲線的建立：以濃度為5. 05ug/ml的苯并[a]芘標準溶液作為標準物質(zhì)，配制 成五個不同濃度外標溶液，以氣相色譜-質(zhì)譜儀檢測外標溶液建立定量標準曲線； (3) 用氣相色譜-質(zhì)譜儀檢測樣品溶液，以定量標準曲線計算樣品溶液中苯并[a]芘的 含量。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述樣品前處理的步驟包括：稱取糧食樣 品，將樣品碾碎，加入二氯甲烷和丙酮作為萃取溶劑，用超聲萃取，超聲頻率為40KHZ，萃取 結(jié)束后，萃取液靜置冷卻后，用硅酸鎂吸附劑凈化，經(jīng)〇. 45 y m有機相濾膜過濾后，得到待 測樣品溶液。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：二氯甲烷和丙酮的體積比是1?2:1，萃 取溶劑的用量是每克樣品加2-6ml萃取溶劑。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的樣品前處理方法，其特征在于：超聲萃取的溫度是 50°C -60°C，萃取時間是2h。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：包括：用氣相色譜-質(zhì)譜儀檢測不同濃度 的苯并[a]芘外標溶液，計算得出苯并[a]芘的定量標準曲線及回歸方程；用氣相色譜-質(zhì) 譜儀檢測待測樣品溶液，通過定量標準曲線和回歸方程計算得到待測樣品溶液中苯并[a] 芘的濃度，進而計算得出樣品中苯并[a]芘的含量。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項所述的方法，其特征在于：所述氣相色譜-質(zhì)譜儀檢測 采用的氣相色譜-質(zhì)譜儀分析條件如下： a) 色譜柱：RTX-5MS毛細管色譜柱，長30m，內(nèi)徑0? 25mm，膜厚0? 25 ii m ; b) 溫度： 進樣口溫度250°C ; 程序升溫過程如下： 初始溫度70°C，保持2min ; 以10°C /min的速率升至320°C，保持3min ; 總運行時間為30min ; c) 柱流速：1. OlmL/min ; d) 離子源溫度：230°C ;接口溫度：280°C ; 定量離子：252m/z ;定性離子：253m/z 125m/z ; e) 進樣方式：不分流進樣，自動進樣，進樣量1 U L ; f) 采集模式：SIM模式； g) 載氣類型：氦氣，純度為99. 999%。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述硅酸鎂吸附劑的制備方法是：稱取硅 酸鎂，置入馬弗爐烘焙，將冷卻后保存于干燥器即可。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于：烘培的溫度是600°C，烘培的時間為3h。
【文檔編號】G01N30/02GK104391055SQ201410655383
【公開日】2015年3月4日 申請日期:2014年11月17日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月17日
【發(fā)明者】何姝, 王志苗, 葉文婷, 孫巖 申請人:深圳市宇馳檢測技術(shù)有限公司