一種外用治療干眼癥的中藥組合物的檢測方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種治療干眼癥的中藥組合物眼貼制劑的檢測方法，其原料藥組成為：枸杞子、菊花、丹參、黃柏、珍珠粉、冰片、薄荷腦。本發(fā)明檢測方法專屬性強，精密度、穩(wěn)定性、重復性良好。
【專利說明】一種外用治療干眼癥的中藥組合物的檢測方法

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種中藥組合物檢測方法，具體涉及一種外用治療干眼癥的中藥組合 物的檢測方法，屬于中醫(yī)藥領域。

【背景技術】
[0002] 干眼癥（Dry eye syndrome)，又名角結膜干燥癥（Xerophthalmia)，是多種因素所 致的一種淚液和眼表疾病，包括眼表不適癥狀，視力變化和淚膜不穩(wěn)定并且有潛在的眼表 損害，伴隨淚液滲透壓升高和眼表炎癥反應。常見的癥狀為：干澀感、異物感、燒灼感、癢 感、畏光、眼紅、視物模糊、視力波動等。嚴重干眼者可引起視力明顯下降從而影響其正常的 工作和生活，甚至導致失明。目前治療干眼癥的常規(guī)方法是滴具有潤滑功能的眼藥水或人 工淚液緩解癥狀。新的治療方法則是針對干眼癥潛在的病因而不是單純的緩解癥狀。資料 顯示，干眼癥的發(fā)病與炎癥、淚腺腺泡細胞和眼表上皮細胞的凋亡、性激素失調、血流動力 學改變、血液循環(huán)障礙、組織血流量降低等因素有密切關系。
[0003] 干眼癥與中醫(yī)的"白澀癥"，"干澀昏花癥"，"神水將枯癥"類似，中醫(yī)認為干眼癥屬 燥證范疇，燥邪損傷氣血津液，而使陰津耗損，氣血虧虛不能上榮于目，目失濡養(yǎng)出現(xiàn)一系 列癥狀。多種原因導致臟腑經(jīng)絡失調是產(chǎn)生干眼癥的關鍵因素。
[0004] 干眼癥（xerophthalmia)可分為以下兩類：①淚液不足型干眼，水液性淚液生成 不足而引起的Siogren綜合征，許多全身因素可引起該類干眼；②蒸發(fā)過強型干眼，主要由 于脂質腺分泌異常（量或質的異常）而引起，如眼瞼的缺損或異?；虿€緣炎等引起蒸發(fā)量 增加。臨床上以淚液不足型干眼最為常見。臨床主要表現(xiàn)為眼睛干澀、灼熱、異物感、波動 感、眼紅、畏光、分泌物增多、視力模糊、視疲勞等；嚴重時還會引起角膜表面磨損、絲狀角膜 炎、角膜潰瘍，最終導致視力下降以至于視力喪失等嚴重后果。屬于中醫(yī)"神水將枯"、"神 氣枯癢"、"干澀昏花"等病證的范疇。由于環(huán)境污染日益嚴重、人口老齡化進一步加劇，尤其 是佩戴各種角膜接觸鏡的人數(shù)的迅速增加以及計算機終端操作的日漸普遍，干眼癥的發(fā)病 率日趨上升，已成為眼科疾病中發(fā)病率最高的眼表疾病之一。
[0005] 中國專利申請201010194077. 9公開了一種治療干眼癥的中藥組合物，其原料藥 包含：菊花、枸杞子、黃柏、丹參、珍珠、冰片、薄荷腦。具體用量配比可以為：菊花2. 5-3份、 枸杞子2. 5-3份、黃柏2. 5-3份、丹參1. 5-2份、珍珠0. 08-0. 1份、冰片0. 08-0. 1份、薄荷 腦0. 15-0. 2份。該組合物可以制成濕敷劑，但該濕敷制劑皮膚順應性不佳，且不利于有效 成分的吸收。


【發(fā)明內容】

[0006] 本發(fā)明的目的在于提供一種治療干眼癥療程短、效果佳的中藥眼貼制劑的檢測方 法。
[0007] 本發(fā)明的目的是通過如下技術方案實現(xiàn)的：
[0008] -種治療干眼癥的中藥眼貼制劑的檢測方法，該方法包括如下鑒別方法和/或含 量測定中的一種或幾種：
[0009]鑒別 A :
[0010] 該鑒別方法包括如下步驟：
[0011] 步驟a，取眼貼內容物，加水提取，提取液以與水互不相溶的有機溶劑萃取，取萃取 液制備供試品溶液；
[0012] 步驟b，取枸杞子藥材，加水提取，提取液以與水互不相溶的有機溶劑萃取，取萃取 液制備對照藥材溶液；
[0013] 步驟c，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液，分別點于同一硅膠薄層板上，以 25-35:5-15:0.5-2的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇為展開劑，展開，置紫外燈下檢視；供試品 色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
[0014] 鑒別 B:
[0015] 該鑒別方法包括如下步驟：
[0016] 步驟a，取眼貼內容物，加水提取，提取液以與水互不相溶的有機溶劑萃取，取萃取 液制備供試品溶液；
[0017] 步驟b，取鹽酸小檗堿和鹽酸巴馬汀對照品，以與水互溶的有機溶劑制備成對照品 溶液；
[0018] 步驟c，取黃柏藥材，以與水互溶的有機溶劑提取，制備成對照藥材溶液；
[0019] 步驟d，照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液，分別點于同一硅膠薄層板上，以 5-10:0.5-2:1-4的正丁醇-甲酸-水為展開劑，展開，取出，置紫外燈下下檢視；供試品色 譜中，在與對照品、對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
[0020] 鑒別 C :
[0021] 該鑒別方法包括如下步驟：
[0022] 步驟a，取眼貼內容物，加有機酸和與水互不相溶的有機溶劑提取，制備供試品溶 液；
[0023] 步驟b，取丹酚酸B對照品，以與水互溶的有機溶劑制備成對照品溶液；
[0024] 步驟c，取丹參藥材，加水提取，提取液加有機酸和與水互不相溶的有機溶劑提取， 制備對照藥材溶液；
[0025] 步驟d，照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液，分別點于同一硅膠薄層板上，以 1-5:1-5:2-8:0. 5-2:1-4的甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，噴以 三氯化鐵醇溶液顯色；供試品色譜中，在與對照品色譜和對照藥材色譜相應的位置上，顯示 相同顏色的斑點。
[0026] 鑒別 D :
[0027] 該鑒別方法包括如下步驟：
[0028] 步驟a，取眼貼內容物，加有機酸和與水互不相溶的有機溶劑提取，制備供試品溶 液；
[0029] 步驟b，取木犀草苷對照品，以與水互溶的有機溶劑制備成對照品溶液；
[0030] 步驟c，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以 0. 5-2:0. 5-2的甲醇-甲酸為展開劑，展開，噴以三氯化鐵醇溶液顯色；供試品色譜中，在與 對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
[0031] 含量測定：
[0032] 該含量測定方法包括如下步驟：
[0033] 色譜條件：以乙腈（A)-磷酸水溶液⑶為流動相，檢測波長為250_300nm ;
[0034] 洗脫程序為：0?17min，流動相為A :B = 20-25:80-75 ;
[0035] 17 ?18min，流動相由 A :B = 20-25 :80-75 到 A :B = 75-85:25-15 ;
[0036] 18 ?23min，流動相為 A :B = 75-85:25-15 ;
[0037] 對照品溶液制備：取丹酚酸B對照品，加甲醇制備成對照品溶液；
[0038] 供試品溶液制備：取眼貼內容物，以甲醇提取，制備成供試品溶液；
[0039] 測定法：分別吸取對照品和供試品溶液注入高效液相色譜儀，照高效液相色譜法 測定，即得；
[0040] 相當于原藥材2-5g的眼貼內容物含丹參以丹酚酸B(C36H3(l0 16)計，應為不低于 0. 6mg〇
[0041] 進一步，上述鑒別和含量測定方法中所述與水互不相溶的有機溶劑選自乙醚、石 油醚、正己烷、乙酸乙酯、三氯甲烷的任意一種或幾種；
[0042] 所述與水互溶的有機溶劑選自甲醇、乙醇、丙酮的任意一種或幾種；
[0043] 所述有機酸選自甲酸、乙酸中的任意一種。
[0044] 進一步，上述含量測定方法中流動相B為0. 05-0. 3 %磷酸水溶液；
[0045] 檢測波長為286nm ;
[0046] 洗脫程序為：0?17min，流動相為A :B = 22:78 ;
[0047] 17 ?18min，流動相由 A :B = 22:78 到 A :B = 80:20 ;
[0048] 18 ?23min，流動相為 A :B = 80:20。
[0049] 更進一步，本發(fā)明眼貼內容物檢測方法包括如下鑒別方法和/或含量測定方法中 的一種或幾種：
[0050] 鑒別A :取相當于原藥材2_5g的眼貼內容物，加水超聲處理，水液加三氯甲烷振搖 提取，提取液蒸干，殘渣加甲醇lml溶解，作為供試品溶液；取枸杞子對照藥材0. 2-lg，加水 煎煮，離心，取上清液，加三氯甲烷振搖提取，提取液蒸干，殘渣加甲醇lml溶解，作為對照 品溶液；照薄層色譜法（中國藥典2010年版附錄VI B)試驗，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分 別點于同一娃膠G薄層板上，以25-35:5-15:0. 5-2的三氯甲燒-乙酸乙酯-甲醇為展開 齊U，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的 位置上，顯相同顏色的熒光斑點；
[0051] 鑒別B :取相當于原藥材2-5g的眼貼內容物，加水超聲處理，水液加三氯甲烷振搖 提取，提取液蒸干，殘渣加甲醇lml溶解，作為供試品溶液；取鹽酸小檗堿和鹽酸巴馬汀對 照品，加甲醇制成每lml含鹽酸小檗堿、鹽酸巴馬汀各0. 2-lmg的混合溶液，作為對照品溶 液；另取黃柏對照藥材〇. 05-0. 2g，加甲醇2-8ml，超聲提取，提取液濾過，濾液作為對照藥 材溶液；照薄層色譜法（中國藥典2010年版附錄VIB)試驗，吸取上述對照品溶液和供試品 溶液各5 μ 1，分別點于同一娃膠G薄層板上，以5-10:0. 5-2:1-4的正丁醇-甲酸-水為展 開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的 位置上，顯相同顏色的熒光斑點；
[0052] 鑒別C :取相當于原藥材12-30g的眼貼內容物，加甲酸0. 5-2mL，加乙醚20-40ml 振搖提取，提取液低溫揮干乙醚，殘渣加甲醇lmL使溶解，作為供試品溶液；另取丹參對 照藥材〇. 5-2g，加水煎煮，濾過，濾液加甲酸0. 5-2mL，加乙醚20-40ml振搖提取，提取 液低溫揮干乙醚，殘渣加甲醇lmL使溶解，作為對照藥材溶液；再取丹酚酸B對照品，力口 甲醇制成每lmL含丹酚酸Bl-3mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法（中國藥典 2010年版附錄VI B)試驗，吸取上述三種溶液各5 μ L，分別點于同一硅膠G薄層板上，以 1-5:1-5:2-8:0. 5-2:1-4的甲苯：三氯甲烷：乙酸乙酯：甲醇：甲酸為展開劑，展開，取出，晾 干，噴以1%三氯化鐵乙醇溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥 材色譜和對照品色譜相應的位置上，顯示相同顏色的斑點；
[0053] 鑒別D :取相當于原藥材12-30g的眼貼內容物，加甲酸0. 5-2mL，加乙醚20-40ml 振搖提取，提取液低溫揮干乙醚，殘渣加甲醇lmL使溶解，作為供試品溶液；取木犀草苷對 照品，加甲醇制成每lmL含木犀草苷0. 1-0. 4mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法 (中國藥典2010年版附錄VI B)試驗，吸取上述兩種溶液各5 μ L，分別點于同一聚酰胺薄膜 上，以0. 5-2:0. 5-2的甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1 %三氯化鐵乙醇溶液， 在105°C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色 的斑點；
[0054] 含量測定：色譜條件：以乙腈（A)-0. 1 %磷酸水溶液（B)為流動相，洗脫程序為： 0?17min，等度洗脫，流動相為A :B = 22:78 ;17?18min，梯度洗脫，流動相由A :B = 22:78 到A :B = 80:20 ; 18?23min，等度洗脫，流動相為A :B = 80:20 ;檢測波長為286nm ;
[0055] 對照品溶液制備：取丹酚酸B對照品，加甲醇制備成每1ml含30-50 μ g的對照品 溶液；
[0056] 供試品溶液制備：取相當于原藥材0. 5-3g的眼貼內容物，置于25ml量瓶中，加甲 醇約20ml，超聲處理，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；
[0057] 測定法：分別吸取對照品和供試品溶液各5 μ 1，注入高效液相色譜儀，照高效液 相色譜法測定，即得；
[0058] 相當于原藥材2_5g的眼貼內容物含丹參以丹酚酸B(C36H3(l0 16)計，應為不低于 0. 6mg〇
[0059] 本發(fā)明所述中藥眼貼制劑的原料藥組成為：
[0060] 枸杞子250-300重量份、菊花250-300重量份、丹參150-200重量份、黃柏250-300 重量份、珍珠粉8-10重量份、冰片0. 1-10重量份、薄荷腦0. 2-20重量份。
[0061] 進一步，其原料藥組成為：
[0062] 枸杞子250-300重量份、菊花250-300重量份、丹參150-200重量份、黃柏250-300 重量份、珍珠粉8-10重量份、冰片0. 1-2重量份、薄荷腦0. 2-4重量份；
[0063] 或，枸杞子250-300重量份、菊花250-300重量份、丹參150-200重量份、黃柏 250-300重量份、珍珠粉8-10重量份、冰片8-10重量份、薄荷腦15-20重量份。
[0064] 本發(fā)明中藥組合物眼貼制劑的制備方法為：取枸杞子、菊花、丹參、黃柏加水煎煮， 濾過，濾液濃縮，冷卻至室溫，加入乙醇使含醇量達到40-80%，冷藏靜置，濾過，回收乙醇得 清膏，備用；取珍珠粉，以乳酸水解制備成珍珠水解液，備用；以上清膏與珍珠水解液合并， 加水稀釋制成藥液；加入冰片、薄荷腦，灌裝，滅菌，即得。
[0065] 本發(fā)明檢測方法中所述"相當于原藥材…g的中藥組合物制劑"是指中藥組合物制 劑與原藥材在重量或體積上的對應關系。如lOOOg原藥材可制成中藥組合物外用眼貼藥液 1000ml，即lml藥液相當于原藥材lg，那么"取相當于原藥材3g的中藥組合物制劑"即取外 用眼貼藥液3ml。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0066] 圖1丹酚酸B紫外吸收圖
[0067] 圖2丹酚酸B對照品色譜圖
[0068] 圖3杞菊潤目貼供試品色譜圖
[0069] 圖4缺丹參陰性供試品色譜圖
[0070] 圖5丹酚酸B線性曲線圖
[0071] 實驗例1含量測定方法學考察
[0072] 1.儀器與試劑
[0073] 儀器：AgilentllOO高效液相色譜儀；
[0074] 色譜柱：Agilent Zorbax SB-C184. 6mmX 250mm，5 μ m ;
[0075] 對照品：丹酚酸B由中國食品藥品檢定研究院（供含量測定用，批號 111562-200504)；
[0076] 供試品：批號：101201、101202、101203,均按實施例1方法制備。
[0077] 其他試劑：乙腈：色譜純；水：超純水；其它試劑均為分析純。
[0078] 2.方法與結果
[0079] 2. 1色譜條件：
[0080] 流動相：乙腈-0.1 %磷酸水溶液，梯度洗脫，洗脫程序見表1 ;
[0081] 流速：lmL/min ;檢測波長：286nm ;
[0082] 色譜柱的理論板數(shù)按丹酚酸B峰峰計算，應不低于5000。
[0083] 表1梯度洗脫程序
[0084]
[0085]

【權利要求】
1. 一種治療干眼癥的中藥眼貼制劑的檢測方法，該方法包括如下鑒別方法和/或含量 測定中的一種或幾種： 鑒別A : 該鑒別方法包括如下步驟： 步驟a，取眼貼內容物，加水提取，提取液以與水互不相溶的有機溶劑萃取，取萃取液制 備供試品溶液； 步驟b，取枸杞子藥材，加水提取，提取液以與水互不相溶的有機溶劑萃取，取萃取液制 備對照藥材溶液； 步驟c，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液，分別點于同一硅膠薄層板上，以 25-35:5-15:0. 5-2的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇為展開劑，展開，置紫外燈下檢視；供試品 色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。 鑒別B : 該鑒別方法包括如下步驟： 步驟a，取眼貼內容物，加水提取，提取液以與水互不相溶的有機溶劑萃取，取萃取液制 備供試品溶液； 步驟b，取鹽酸小檗堿和鹽酸巴馬汀對照品，以與水互溶的有機溶劑制備成對照品溶 液； 步驟c，取黃柏藥材，以與水互溶的有機溶劑提取，制備成對照藥材溶液； 步驟d，照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液，分別點于同一硅膠薄層板上，以 5-10:0.5-2:1-4的正丁醇-甲酸-水為展開劑，展開，取出，置紫外燈下下檢視；供試品色 譜中，在與對照品、對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。 鑒別C : 該鑒別方法包括如下步驟： 步驟a，取眼貼內容物，加有機酸和與水互不相溶的有機溶劑提取，制備供試品溶液； 步驟b，取丹酚酸B對照品，以與水互溶的有機溶劑制備成對照品溶液； 步驟c，取丹參藥材，加水提取，提取液加有機酸和與水互不相溶的有機溶劑提取，制備 對照藥材溶液； 步驟d，照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液，分別點于同一硅膠薄層板上，以 1-5:1-5:2-8:0. 5-2:1-4的甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，噴以 三氯化鐵醇溶液顯色；供試品色譜中，在與對照品色譜和對照藥材色譜相應的位置上，顯示 相同顏色的斑點。 鑒別D : 該鑒別方法包括如下步驟： 步驟a，取眼貼內容物，加有機酸和與水互不相溶的有機溶劑提取，制備供試品溶液； 步驟b，取木犀草苷對照品，以與水互溶的有機溶劑制備成對照品溶液； 步驟c，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以 0. 5-2:0. 5-2的甲醇-甲酸為展開劑，展開，噴以三氯化鐵醇溶液顯色；供試品色譜中，在與 對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。 含量測定： 該含量測定方法包括如下步驟： 色譜條件：以乙腈（A)-磷酸水溶液（B)為流動相，檢測波長為250-300nm ; 洗脫程序為：〇?17min，流動相為A :B = 20-25:80-75 ; 17 ?18min，流動相由 A :B = 20-25 :80-75 到 A :B = 75-85:25-15 ; 18 ?23min，流動相為 A :B = 75-85:25-15 ; 對照品溶液制備：取丹酚酸B對照品，加甲醇制備成對照品溶液； 供試品溶液制備：取眼貼內容物，以甲醇提取，制備成供試品溶液； 測定法：分別吸取對照品和供試品溶液注入高效液相色譜儀，照高效液相色譜法測定， 即得； 其中，所述中藥眼貼制劑的原料藥組成為： 枸杞子250-300重量份、菊花250-300重量份、丹參150-200重量份、黃柏250-300重 量份、珍珠粉8-10重量份、冰片0. 1-10重量份、薄荷腦0. 2-20重量份。
2. 如權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述與水互不相溶的有機溶劑選自乙 醚、石油醚、正己烷、乙酸乙酯、三氯甲烷的任意一種或幾種；所述與水互溶的有機溶劑選自 甲醇、乙醇、丙酮的任意一種或幾種；所述有機酸選自甲酸、乙酸中的任意一種。
3. 如權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述含量測定方法中流動相B為 0.05-0. 3 %磷酸水溶液。
4. 如權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述檢測波長為286nm。
5. 如權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述洗脫程序為： 0 ?17min，流動相為 A :B = 22:78 ; 17 ?18min，流動相由 A :B = 22:78 到 A :B = 80:20 ; 18 ?23min，流動相為 A :B = 80:20。
6. 如權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，該方法包括如下鑒別方法和/或含量測 定方法中的一種或幾種： 鑒別A :取相當于原藥材2-5g的眼貼內容物，加水超聲處理，水液加三氯甲烷振搖提 取，提取液蒸干，殘渣加甲醇lml溶解，作為供試品溶液；取枸杞子對照藥材0. 2-lg，加水煎 煮，離心，取上清液，加三氯甲烷振搖提取，提取液蒸干，殘渣加甲醇lml溶解，作為對照品 溶液；照薄層色譜法（中國藥典2010年版附錄VI B)試驗，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別 點于同一娃膠G薄層板上，以25-35:5-15:0. 5-2的三氯甲燒-乙酸乙酯-甲醇為展開劑， 展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置 上，顯相同顏色的熒光斑點； 鑒別B :取相當于原藥材2-5g的眼貼內容物，加水超聲處理，水液加三氯甲烷振搖提 取，提取液蒸干，殘渣加甲醇lml溶解，作為供試品溶液；取鹽酸小檗堿和鹽酸巴馬汀對照 品，加甲醇制成每lml含鹽酸小檗堿、鹽酸巴馬汀各0. 2-lmg的混合溶液，作為對照品溶液； 另取黃柏對照藥材〇. 05-0. 2g，加甲醇2-8ml，超聲提取，提取液濾過，濾液作為對照藥材溶 液；照薄層色譜法（中國藥典2010年版附錄VI B)試驗，吸取上述對照品溶液和供試品溶 液各5 μ 1，分別點于同一娃膠G薄層板上，以5-10:0. 5-2:1-4的正丁醇-甲酸-水為展開 齊U，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位 置上，顯相同顏色的熒光斑點； 鑒別c :取相當于原藥材12-30g的眼貼內容物，加甲酸0. 5-2mL，加乙醚20-40ml振搖 提取，提取液低溫揮干乙醚，殘渣加甲醇lmL使溶解，作為供試品溶液；另取丹參對照藥材 0. 5-2g，加水煎煮，濾過，濾液加甲酸0. 5-2mL，加乙醚20-40ml振搖提取，提取液低溫揮干 乙醚，殘渣加甲醇lmL使溶解，作為對照藥材溶液；再取丹酚酸B對照品，加甲醇制成每lmL 含丹酚酸Bl-3mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法（中國藥典2010年版附錄VIB)試 驗，吸取上述三種溶液各5 μ L，分別點于同一硅膠G薄層板上，以1-5:1-5:2-8:0. 5-2:1-4 的甲苯：三氯甲烷：乙酸乙酯：甲醇：甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1%三氯化鐵乙 醇溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相 應的位置上，顯示相同顏色的斑點； 鑒別D :取相當于原藥材12-30g的眼貼內容物，加甲酸0. 5-2mL，加乙醚20-40ml振搖 提取，提取液低溫揮干乙醚，殘渣加甲醇lmL使溶解，作為供試品溶液；取木犀草苷對照品， 加甲醇制成每lmL含木犀草苷0. 1-0. 4mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法（中國 藥典2010年版附錄VI B)試驗，吸取上述兩種溶液各5 μ L，分別點于同一聚酰胺薄膜上， 以0.5-2:0. 5-2的甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1%三氯化鐵乙醇溶液，在 l〇5°C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的 斑點； 含量測定：色譜條件：以乙腈（A)-0. 1 %磷酸水溶液（B)為流動相，洗脫程序為：0? 17min，流動相為 A :B = 22:78 ; 17 ?18min，流動相由 A :B = 22:78 到 A :B = 80:20 ; 18 ? 23min，流動相為A :B = 80:20 ;檢測波長為286nm ; 對照品溶液制備：取丹酚酸B對照品，加甲醇制備成每lml含30-50 μ g的對照品溶液； 供試品溶液制備：取相當于原藥材〇. 5-3g的眼貼內容物，置于25ml量瓶中，加甲醇約 20ml，超聲處理，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得； 測定法：分別吸取對照品和供試品溶液各5 μ 1，注入高效液相色譜儀，照高效液相色 譜法測定，即得。
【文檔編號】G01N30/02GK104280506SQ201410268761
【公開日】2015年1月14日 申請日期:2014年6月16日 優(yōu)先權日:2013年7月3日
【發(fā)明者】張曉娟 申請人:鄭州市新視明科技工程有限公司