一種結(jié)核桿菌的檢測(cè)方法
【專利摘要】本發(fā)明公開一種結(jié)核桿菌的檢測(cè)方法，包括采集樣本和挑選待測(cè)標(biāo)本，用噬菌體感染待測(cè)樣本；殺死結(jié)核桿菌外未感染噬菌體，并用噬菌體生物擴(kuò)增法擴(kuò)增已感染的噬菌體；用抗噬菌體的抗體將噬菌體標(biāo)金，采用快速免疫層析法檢測(cè)噬菌體的存在與否從而判斷樣品中是否有結(jié)核桿菌。該結(jié)核桿菌的檢測(cè)方法具有準(zhǔn)確性高，成本低，步驟簡(jiǎn)單，檢測(cè)時(shí)間短的優(yōu)點(diǎn)。
【專利說明】—種結(jié)核桿菌的檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種結(jié)核桿菌的檢測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]結(jié)核桿菌，是引起結(jié)核病的病原菌。可侵犯全身各器官，但以肺結(jié)核為最多見。結(jié)核病至今仍為重要的傳染病。估計(jì)世界人口中1/3感染結(jié)核分枝桿菌。據(jù)WHO報(bào)道，每年約有800萬新病例發(fā)生，至少有300萬人死于該病。我國(guó)建國(guó)前死亡率達(dá)200-300人/10萬，居各種疾病死亡原因之首，建國(guó)后人民生活水平提高，衛(wèi)生狀態(tài)改善，特別是開展了群防群治，兒童普遍接種卡介苗，結(jié)核病的發(fā)病率和死亡率大為降低。但應(yīng)注意，世界上有些地區(qū)因艾滋病、吸毒、免疫抑制劑的應(yīng)用、酗酒和貧困等原因，發(fā)病率又有上升趨勢(shì)。結(jié)核分枝桿菌為細(xì)長(zhǎng)略帶彎曲的桿菌，大小I?4X0.4 μ m。分枝桿菌屬的細(xì)菌細(xì)胞壁脂質(zhì)含量較高，約占干重的60 %，特別是有大量分枝菌酸包圍在肽聚糖層的外面，可影響染料的穿入。分枝桿菌一般用齊尼抗酸染色法，以5%石炭酸復(fù)紅加溫染色后可以染上，但用3%鹽酸乙醇不易脫色。若再加用美藍(lán)復(fù)染，則分枝桿菌呈紅色，而其他細(xì)菌和背景中的物質(zhì)為藍(lán)色。結(jié)核桿菌的檢測(cè)與預(yù)防是降低結(jié)核病的發(fā)病率和死亡率的關(guān)鍵。目前檢測(cè)結(jié)核桿菌的方法主要有結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn)、結(jié)核菌Y干擾素釋放試驗(yàn)、微生物學(xué)檢查法和快速檢測(cè)法等。其中結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn)適合實(shí)驗(yàn)室研究，不適合疾病的診斷；結(jié)核菌Y干擾素釋放試驗(yàn)所需技術(shù)高，成本高；微生物學(xué)檢查法步驟繁瑣；快速檢測(cè)法準(zhǔn)確性不高。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種具有準(zhǔn)確性高，成本低，步驟簡(jiǎn)單，檢測(cè)時(shí)間短的結(jié)核桿菌的檢測(cè)方法。
[0004]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案:包括如下步驟:
[0005]I)用直接涂片的方式采集樣本，挑出能檢測(cè)出抗酸桿菌的涂片，標(biāo)記此種樣本，待測(cè)；
[0006]2)用待測(cè)樣本感染噬菌體，并殺死結(jié)核桿菌外未感染噬菌體，既得已感染結(jié)核桿菌的噬菌體，備用；
[0007]3)將步驟2)中所得噬菌體用生物擴(kuò)增法擴(kuò)增已感染的噬菌體，備用；
[0008]4)將步驟3)中所得噬菌體用抗噬菌體的抗體標(biāo)金，采用快速免疫層析法檢測(cè)噬菌體的存在與否從而判斷樣品中是否有結(jié)核桿菌。
[0009]本發(fā)明的一種結(jié)核桿菌的檢測(cè)方法及其制備方法的有益效果是:準(zhǔn)確性高，成本低，步驟簡(jiǎn)單，檢測(cè)時(shí)間短。
【具體實(shí)施方式】
[0010]為能進(jìn)一步了解本發(fā)明的特征、技術(shù)手段及所達(dá)到的具體功能，下面以【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明做詳細(xì)描述。[0011]實(shí)施例:
[0012]一種結(jié)核桿菌的檢測(cè)方法，
[0013]所述結(jié)核桿菌的檢測(cè)方法的制備方法過程如下:
[0014]I)用直接涂片的方式采集樣本，挑出能檢測(cè)出抗酸桿菌的涂片，標(biāo)記此種樣本，待測(cè)；
[0015]2)用待測(cè)樣本感染噬菌體，并殺死結(jié)核桿菌外未感染噬菌體，既得已感染結(jié)核桿菌的噬菌體，備用；
[0016]3)將步驟2)中所得噬菌體用生物擴(kuò)增法擴(kuò)增已感染的噬菌體，備用；
[0017]4)將步驟3)中所得噬菌體用抗噬菌體的抗體標(biāo)金，采用快速免疫層析法檢測(cè)噬菌體的存在與否從而判斷樣品中是否有結(jié)核桿菌。
[0018]實(shí)驗(yàn)例:
[0019]實(shí)驗(yàn)對(duì)象:200名感染結(jié)核桿菌程度不同的患者。
[0020]實(shí)驗(yàn)方法:200名患者全部用本發(fā)明的結(jié)核桿菌的檢測(cè)方法檢測(cè)。
[0021]實(shí)驗(yàn)結(jié)果:通過本發(fā)明的結(jié)核桿菌的檢測(cè)方法檢測(cè)，所有患者都成功地檢測(cè)出來丙型結(jié)核桿菌。
[0022]由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，使用本結(jié)核桿菌的檢測(cè)方法準(zhǔn)確性高，成本低，步驟簡(jiǎn)單，檢測(cè)時(shí)間短。
[0023]以上已將本發(fā)明做一詳細(xì)說明，以上所述，僅為本發(fā)明之較佳實(shí)施例而已，當(dāng)不能限定本發(fā)明實(shí)施范圍，即凡依本申請(qǐng)范圍所作均等變化與修飾，皆應(yīng)仍屬本發(fā)明涵蓋范圍內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種結(jié)核桿菌的檢測(cè)方法，其特征在于:包括以下步驟: 1)用直接涂片的方式采集樣本，挑出能檢測(cè)出抗酸桿菌的涂片，標(biāo)記此種樣本，待測(cè)； 2)用待測(cè)樣本感染噬菌體，并殺死結(jié)核桿菌外未感染噬菌體，既得已感染結(jié)核桿菌的噬菌體，備用； 3)將步驟2)中所得噬菌體用生物擴(kuò)增法擴(kuò)增已感染的噬菌體，備用； 4)將步驟3)中所得噬菌體用抗噬菌體的抗體標(biāo)金，采用快速免疫層析法檢測(cè)噬菌體的存在與否從而判斷樣品中是否有結(jié)核桿菌。
【文檔編號(hào)】G01N33/569GK104034889SQ201410260553
【公開日】2014年9月10日 申請(qǐng)日期:2014年6月12日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月12日
【發(fā)明者】江崇才, 李作臻, 仇彩霞 申請(qǐng)人:江崇才