一種食糖中塑化劑的高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種食糖中塑化劑的高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)方法，包括以下步驟：（1）制備標(biāo)準(zhǔn)溶液，利用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)，得保留時(shí)間和標(biāo)準(zhǔn)譜圖；（2）將標(biāo)準(zhǔn)譜圖按鄰苯二甲酸酯品種分別制作濃度與色譜峰面積關(guān)系曲線圖；（3）食糖樣品的預(yù)處理及高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)得樣品譜圖；（4）將步驟3中獲得的檢測(cè)結(jié)果與步驟2中得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線比對(duì)，計(jì)算確定食糖中塑化劑含量。本發(fā)明檢測(cè)步驟簡(jiǎn)單、檢測(cè)時(shí)間快，可為食品生產(chǎn)企業(yè)或食品檢測(cè)機(jī)構(gòu)提供一種簡(jiǎn)便可行的檢測(cè)塑化劑方法，通過(guò)本發(fā)明的實(shí)施，可以實(shí)現(xiàn)食糖中塑化劑含量的檢測(cè)，尤其是實(shí)現(xiàn)DINP的高靈敏度檢測(cè)。
【專利說(shuō)明】一種食糖中塑化劑的高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種檢測(cè)塑化劑的方法，特別是涉及一種檢測(cè)食糖中塑化劑的高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]塑化劑，又稱增塑劑，廣泛應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)中，以增強(qiáng)材料的可塑性和柔韌性，常用的塑化劑主要是鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)(Phthalate Acid Esters,縮寫PAEs)。塑化劑被普遍地應(yīng)用到各種塑料制品中，且極易從各種塑料制品中遷移到環(huán)境甚至于各類食品中，對(duì)人體具有急毒性、引發(fā)激素失調(diào)以及致癌、致畸、致突變性等危害作用。因此，世界各國(guó)對(duì)食品中鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)的殘留都作了嚴(yán)格的監(jiān)管。在我國(guó)，鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)已被明確為違禁添加的非食用物質(zhì)禁止在食品中使用，衛(wèi)生部也專門發(fā)布了部分鄰苯二甲酸酯的限量標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)(衛(wèi)辦監(jiān)督函[2011]551號(hào))規(guī)定，食品中的鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)、鄰苯二甲酸二異壬酯(DINP)和鄰苯二甲酸二正丁酯(DBP)最大殘留量分別為1.5mg/kg、9.0 mg/kg 和 0.3 mg/kg。
[0003]食糖作為食品和食品工業(yè)的重要原料，其質(zhì)量安全關(guān)系著眾多相關(guān)食品的質(zhì)量安全。在食糖的生產(chǎn)中，存在接觸到塑料制品的環(huán)節(jié)，尤其是后期的產(chǎn)品包裝環(huán)節(jié)，由此產(chǎn)生增塑劑遷移到食糖中的風(fēng)險(xiǎn)。因此，檢測(cè)食糖中鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)的殘留量，對(duì)掌握和控制食糖質(zhì)量水平顯得十分重要。
[0004]目前，食品中塑化劑的檢測(cè)方法主要是氣相色譜質(zhì)譜法，如國(guó)內(nèi)已頒布了GB/T21911-2008《食品中鄰苯二甲酸酯的測(cè)定》檢測(cè)方法，該方法主要是利用氣相色譜質(zhì)譜法對(duì)16種塑化劑進(jìn)行檢測(cè)，乳粉中塑化劑的氣相色譜質(zhì)譜檢測(cè)方法也有專利報(bào)道(公布號(hào)CN103091418 A)。氣相色譜質(zhì)譜法在檢測(cè)沸點(diǎn)較低的塑化劑時(shí)具有較高的靈敏度，而檢測(cè)沸點(diǎn)較高的塑化劑(如鄰苯二甲酸二壬酯DNP、鄰苯二甲酸二異壬酯DINP、鄰苯二甲酸二異葵酯DIDP等)，其檢測(cè)靈敏度則顯著下降。如標(biāo)準(zhǔn)SN/T 2250-2009《塑料原料及其制品中增塑劑的測(cè)定氣相色譜-質(zhì)譜法》顯示，DINP的總離子流色譜峰形為一組多重峰，DINP檢出限為
10mg/L。這顯然難以滿足衛(wèi)生部對(duì)DINP限量監(jiān)管的需要。高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法在塑化劑的檢測(cè)中具有檢測(cè)時(shí)間更短、檢測(cè)靈敏度更高的優(yōu)點(diǎn)，尤其是針對(duì)DINP等高沸點(diǎn)的塑化劑也能得到較高的檢測(cè)靈敏度，滿足塑化劑殘留量較低的檢測(cè)需要。目前，食糖中塑化劑高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)方法未見(jiàn)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是提供一種食糖中塑化劑的高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)方法，其可滿足食糖中塑化劑痕量檢測(cè)的需要，具有檢測(cè)時(shí)間短、檢測(cè)靈敏度高的特點(diǎn)。
[0006]本發(fā)明的目的可采用以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn):
一種食糖中塑化劑的高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)方法，包括以下步驟。
[0007](I)制備標(biāo)準(zhǔn)溶液并進(jìn)行高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè) 將所需測(cè)試的鄰苯二甲酸酯的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液用甲醇分別稀釋成至少5種不同濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，將不同濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)并得到標(biāo)準(zhǔn)譜圖，標(biāo)準(zhǔn)譜圖中保留時(shí)間確定鄰苯二甲酸酯的品種，色譜峰面積與對(duì)應(yīng)的鄰苯二甲酸酯濃度成函數(shù)關(guān)系。
[0008](2)將步驟I獲得的標(biāo)準(zhǔn)譜圖按鄰苯二甲酸酯品種分別制作濃度與色譜峰面積關(guān)系曲線圖。
[0009](3)食糖樣品的預(yù)處理及高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)
稱取已粉碎的食糖樣品加入到玻璃離心管中，加入甲醇，渦旋混合2?3 min，然后超聲提??；離心5?10 min，取上清液稀釋后過(guò)濾膜過(guò)濾，取濾液利用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀在與步驟I相同的條件下進(jìn)行檢測(cè)，得樣品譜圖。
[0010](4)食糖中的各鄰苯二甲酸酯含量的確定
將步驟3中獲得的樣品譜圖的保留時(shí)間確定鄰苯二甲酸酯品種并將其色譜峰面積與步驟2對(duì)應(yīng)的鄰苯二甲酸酯品種的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比對(duì)，用插入法確定樣品中的各鄰苯二甲酸酯的含量。
[0011]高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜的檢測(cè)條件是:
色譜條件:
a)色譜柱,色譜柱:RestekUltra AQ C18 (100X2.1 mmX3 μ m)；
b)流動(dòng)相及梯度洗脫條件:
0?3 min，流動(dòng)相0.1%甲酸水50%，流動(dòng)相甲醇50% ；
3?7 min，流動(dòng)相0.1%甲酸水從50%到20%，流動(dòng)相甲醇從50%到80% ；
7?8 min,流動(dòng)相0.1%甲酸水從20%到2%，流動(dòng)相甲醇從80%到98% ；
8?10 min，流動(dòng)相0.1%甲酸水2%，流動(dòng)相甲醇98% ；
10?13 min，流動(dòng)相0.1%甲酸水2%到50%，流動(dòng)相甲醇98%到50% ；
c)進(jìn)樣量:5?20UL ；
d)柱溫:30?40V ；
e)流速:0.4 mL/min ο
[0012]質(zhì)譜條件:
a)電離模式=ESI+；
b)氣簾氣壓力344.5 kPa，碰撞氣壓力中檔，離子噴霧電壓5500 V，離子源溫度550 °C，霧化氣壓力344.5 kPa，輔助加熱氣壓力344.5 kPa，接口加熱器為開(kāi)；
c)采集模式:多反應(yīng)檢測(cè)(MRM)模式。
[0013]本發(fā)明具有如下突出的實(shí)質(zhì)性特點(diǎn)和顯著進(jìn)步:
本發(fā)明檢測(cè)步驟簡(jiǎn)單、檢測(cè)時(shí)間快，可為食品生產(chǎn)企業(yè)或食品檢測(cè)機(jī)構(gòu)提供一種簡(jiǎn)便可行的檢測(cè)塑化劑方法，通過(guò)本發(fā)明的實(shí)施，可以實(shí)現(xiàn)食糖中塑化劑含量的檢測(cè)，尤其是實(shí)現(xiàn)DINP的高靈敏度檢測(cè)。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0014]圖1為16種塑化劑混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.5 mg/L)液相色譜質(zhì)譜圖。
[0015]圖2為16種塑化劑混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖(濃度與色譜峰面積關(guān)系圖)。[0016]圖3為白砂糖空白樣品的液相色譜質(zhì)譜圖。
[0017]圖4為白砂糖中添加16種塑化劑混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(加標(biāo)量為0.1 mg/kg)的液相色譜質(zhì)譜圖。
[0018]圖5為冰糖樣品塑化劑檢測(cè)的液相色譜質(zhì)譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0019]下面通過(guò)具體實(shí)例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的描述，這些描述并不是對(duì)本
【發(fā)明內(nèi)容】
進(jìn)一步的限定。本領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)理解，對(duì)本
【發(fā)明內(nèi)容】
所做的等同替換或相應(yīng)的改進(jìn)，仍屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
[0020](I)儀器與試劑
各種鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1000 mg/L);甲醇(色譜純)，其余試劑均為分析純；高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀，電子天平(精確到0.1 mg),渦旋振蕩器，高速離心機(jī)，實(shí)驗(yàn)室常用玻璃器皿(所用玻璃器皿洗凈后，用蒸餾水淋洗三次，丙酮浸泡I小時(shí)，在250°C下烘烤2小時(shí)，冷卻至室溫備用)。
[0021](2)檢測(cè)條件 色譜條件:
a)色譜柱,色譜柱:RestekUltra AQ C18 (100X2.1 mmX3 μ m)；
b)流動(dòng)相及梯度洗脫條件:
0?3 min，流動(dòng)相0.1%甲酸水50%，流動(dòng)相甲醇50% ；
3?7 min，流動(dòng)相0.1%甲酸水從50%到20%，流動(dòng)相甲醇從50%到80% ；
7?8 min,流動(dòng)相0.1%甲酸水從20%到2%，流動(dòng)相甲醇從80%到98% ；
8?10 min，流動(dòng)相0.1%甲酸水2%，流動(dòng)相甲醇98% ；
10?13 min，流動(dòng)相0.1%甲酸水2%到50%，流動(dòng)相甲醇98%到50% ；
c)進(jìn)樣量:5UL ；
d)柱溫:40V ；
e)流速:0.4 mL/min ο
[0022]質(zhì)譜條件:
a)電離模式=ESI+；
b)氣簾氣壓力344.5 kPa，碰撞氣壓力中檔，離子噴霧電壓5500 V，離子源溫度550 °C，霧化氣壓力344.5 kPa，輔助加熱氣壓力344.5 kPa，接口加熱器為開(kāi)；
c)采集模式:多反應(yīng)檢測(cè)(MRM)模式。
[0023](3)檢驗(yàn)過(guò)程 步驟(I):標(biāo)準(zhǔn)溶液配制
將所需測(cè)試的鄰苯二甲酸酯的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液用甲醇稀釋至濃度為0.5 mg/L,0.2 mg/L,
0.1 mg/L, 0.05 mg/L, 0.02 mg/L 系列的標(biāo)準(zhǔn)溶液；
將所制備的16種鄰苯二甲酸酯的標(biāo)準(zhǔn)溶液在上述的儀器條件下進(jìn)行測(cè)定并得到標(biāo)準(zhǔn)譜圖，標(biāo)準(zhǔn)譜圖中保留時(shí)間確定鄰苯二甲酸酯的品種(表I)。
[0024]表I塑化劑保留時(shí)間與多反應(yīng)監(jiān)測(cè)條件
【權(quán)利要求】
1.一種食糖中塑化劑的高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)方法，其特征在于包括如下步驟: (1)制備標(biāo)準(zhǔn)溶液并進(jìn)行高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè) 將所需測(cè)試的鄰苯二甲酸酯的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液用甲醇分別稀釋成至少5種不同濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，將不同濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)并得到標(biāo)準(zhǔn)譜圖，標(biāo)準(zhǔn)譜圖中保留時(shí)間確定鄰苯二甲酸酯的品種，色譜峰面積與對(duì)應(yīng)的鄰苯二甲酸酯濃度成函數(shù)關(guān)系； (2)將步驟I獲得的標(biāo)準(zhǔn)譜圖按鄰苯二甲酸酯品種分別制作濃度與色譜峰面積關(guān)系曲線圖； (3)食糖樣品的預(yù)處理及高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè) 稱取已粉碎的食糖樣品加入到玻璃離心管中，加入甲醇，渦旋混合2~3 min,然后超聲提取；離心5~10 min，取上清液稀釋后過(guò)濾膜過(guò)濾，取濾液利用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀在與步驟(1)相同的條件下進(jìn)行檢測(cè)，得樣品譜圖； (4)食糖中的各鄰苯二甲酸酯含量的確定 將步驟3中獲得的樣品 譜圖中的保留時(shí)間確定鄰苯二甲酸酯品種并將其色譜峰面積與步驟2對(duì)應(yīng)的鄰苯二甲酸酯品種的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比對(duì)，用插入法確定樣品中的各鄰苯二甲酸酯的含量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)食糖中塑化劑的方法，其特征在于:在步驟I和3中高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜的檢測(cè)條件是: 色譜條件: a)色譜柱,色譜柱:RestekUltra AQ C18 (100X2.1 mmX3 μ m)； b)流動(dòng)相及梯度洗脫條件: 0~3 min，流動(dòng)相0.1%甲酸水50%，流動(dòng)相甲醇50% ； 3~7 min，流動(dòng)相0.1%甲酸水從50%到20%，流動(dòng)相甲醇從50%到80% ； 7~8 min,流動(dòng)相0.1%甲酸水從20%到2%，流動(dòng)相甲醇從80%到98% ； 8~10 min，流動(dòng)相0.1%甲酸水2%，流動(dòng)相甲醇98% ； 10~13 min，流動(dòng)相0.1%甲酸水2%到50%，流動(dòng)相甲醇98%到50% ； c)進(jìn)樣量:5~20uL； d)柱溫:30~40V ；
e)流速:0.4 mL/min ； 質(zhì)譜條件: a)電離模式=ESI+； b)氣簾氣壓力344.5 kPa，碰撞氣壓力中檔，離子噴霧電壓5500 V，離子源溫度550 °C，霧化氣壓力344.5 kPa，輔助加熱氣壓力344.5 kPa，接口加熱器為開(kāi)；c)采集模式:多反應(yīng)檢測(cè)(MRM)模式。
【文檔編號(hào)】G01N30/88GK103995075SQ201410192427
【公開(kāi)日】2014年8月20日 申請(qǐng)日期:2014年5月8日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月8日
【發(fā)明者】高裕鋒, 甄振鵬, 郭劍雄, 李海喬, 余構(gòu)彬 申請(qǐng)人:廣州甘蔗糖業(yè)研究所