帶有掩蔽劑的檢測(cè)中草藥鎘含量的試紙條的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種帶有掩蔽劑的檢測(cè)中草藥鎘含量的試紙條；所述試紙條包括依次重疊設(shè)置的帶測(cè)試孔、對(duì)照孔的加樣基板，帶有掩蔽劑的玻璃纖維層，帶有鎘顯色劑的反應(yīng)基板以及帶有兩個(gè)觀察孔的支持基板；所述兩個(gè)觀察孔分別與測(cè)試孔、對(duì)照孔相對(duì)應(yīng)。所述掩蔽劑為以下五種配方中的兩種或兩種以上的組合：配方1：鹽酸羥胺、氨基乙酸，配方2：硫代硫酸鈉、檸檬酸鈉，配方3：硫脲、焦磷酸鈉，配方4：酒石酸鉀鈉、硫脲，配方5：二乙基二硫代氨基甲酸鈉、鄰菲啰啉。本發(fā)明的試紙條便于攜帶、操作簡(jiǎn)單、成本低廉、檢測(cè)靈敏度高且特異性強(qiáng)、應(yīng)用范圍廣，可實(shí)現(xiàn)中草藥中重金屬鎘的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。
【專利說(shuō)明】帶有掩蔽劑的檢測(cè)中草藥鎘含量的試紙條
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及快速檢測(cè)中草藥中鎘元素含量【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種帶有掩蔽劑的檢測(cè)中草藥鎘含量的試紙條。
【背景技術(shù)】
[0002]中藥材中重金屬含量超標(biāo)問(wèn)題已經(jīng)在一定程度上制約了我國(guó)中藥的出口及進(jìn)入國(guó)際市場(chǎng)，損害了我國(guó)中藥的形象，造成極大的經(jīng)濟(jì)損失，同時(shí)也嚴(yán)重危協(xié)著我國(guó)人民的體質(zhì)健康。中國(guó)貿(mào)易報(bào)曾報(bào)道，我國(guó)某中藥集團(tuán)出口到德國(guó)的中藥飲片中，30余種不合格藥材中，重金屬含量超標(biāo)的不合格藥材占34%。2008年中國(guó)中藥雜志第18期曾發(fā)表了有關(guān)我國(guó)中藥材重金屬污染狀況的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果表明，中草藥材中銅、鎘、鉛、砷、汞等元素超標(biāo)仍是當(dāng)前最為普遍的重金屬污染問(wèn)題，涉及被污染中藥材有山藥、龍骨、細(xì)辛、半枝蓮、黃芪、三七等30多種。另外，單樣本或同一批次藥材中多項(xiàng)重金屬同時(shí)污染的現(xiàn)象也非常見(jiàn)。在被調(diào)查的169項(xiàng)銅含量超標(biāo)的樣本中，鋪、鉛等兀素同時(shí)超標(biāo)的樣本有30多項(xiàng)。鋪中毒可使人或動(dòng)物的肌肉萎縮關(guān)節(jié)變形，骨胳疼痛難忍，不能入睡，發(fā)生病理性骨折，嚴(yán)重時(shí)導(dǎo)致死亡。鎘長(zhǎng)期攝入可顯著提高女性乳腺癌疾病的發(fā)病率。同時(shí)，鎘元素長(zhǎng)期時(shí)間的攝入直接導(dǎo)致腎損害和其它系統(tǒng)的疾病。因此，為保證中草藥質(zhì)量和控制重金屬元素超標(biāo)，必須從中藥生產(chǎn)的源頭開(kāi)始，系統(tǒng)監(jiān)測(cè)中草藥原產(chǎn)地水土生態(tài)鏈及加工過(guò)程中重金屬含量。建立快速、靈敏及實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)的分析技術(shù)和產(chǎn)品顯得非常迫切。
[0003]當(dāng)前檢測(cè)中草藥中汞的傳統(tǒng)儀器測(cè)試方法有原子吸收法、電感耦合等離子體發(fā)射光譜法、基于鎘試劑的分光光度法及電化學(xué)分析法。原子吸收法、電感耦合等離子體發(fā)射光譜法及電化學(xué)分析法是較為理想的測(cè)試中草藥重金屬元素殘留的方法，但仍需要大型昂貴的儀器及專業(yè)操作人員，檢測(cè)周期長(zhǎng)，操作復(fù)雜，無(wú)法實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。分光光度法由于測(cè)試過(guò)程相當(dāng)復(fù)雜、穩(wěn)定性及重復(fù)性差而受到極大的限制。
[0004]經(jīng)對(duì)現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)檢索發(fā)現(xiàn)，專利申請(qǐng)?zhí)枮?00510048467.4的中國(guó)專利，名稱為“鎘測(cè)定液及比色測(cè)定管”，該專利利用對(duì)硝基苯重氮氨基偶氮苯為顯色劑，將其和表面活性劑溴化十六烷基甲酰胺及緩沖液混合后，密封保存在經(jīng)特殊設(shè)計(jì)的玻璃管中。在測(cè)定時(shí)，折斷玻璃測(cè)試管的毛細(xì)管部分，自動(dòng)吸入水樣，發(fā)生顯色后，對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)色階可實(shí)現(xiàn)對(duì)水質(zhì)的快速檢測(cè)。該檢測(cè)管設(shè)計(jì)簡(jiǎn)單，攜帶方便，易于操作。但其缺點(diǎn)是該發(fā)明檢測(cè)鎘含量的特異性差，其它在水質(zhì)中存在的二價(jià)金屬離子如銅離子、鋅離子、鉛離子、汞離子、鐵離子、鈷離子、鎳離子等會(huì)對(duì)測(cè)試造成嚴(yán)重的干擾，從而產(chǎn)生假陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果而無(wú)法對(duì)鎘進(jìn)行定性及定量檢測(cè)。
[0005]目前國(guó)內(nèi)有關(guān)鎘的檢測(cè)試紙條方面的發(fā)明專利幾乎為空白。主要原因是用常規(guī)浸泡法制備的試紙條很容易氧化失效，無(wú)法常時(shí)間貯存。在進(jìn)行重金屬鎘或鉛測(cè)定的顯色反應(yīng)時(shí)，一些文獻(xiàn)應(yīng)用了一些常規(guī)的掩蔽劑以消除其它金屬離子的干擾，但沒(méi)有應(yīng)用到試紙條上，原因在于常規(guī)的掩蔽劑不適用試紙條檢測(cè)的精度要求；正因如此，有關(guān)應(yīng)用了固化掩蔽劑的試劑條的發(fā)明專利或文獻(xiàn)報(bào)道幾乎為空白。另外，同常規(guī)顯色法來(lái)比較，常規(guī)顯色法中所配制的試劑也不能長(zhǎng)期存放，需要在測(cè)試時(shí)現(xiàn)用現(xiàn)配。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的在于針對(duì)當(dāng)前檢測(cè)中草藥中鎘元素技術(shù)的不足，提供了一種帶有掩蔽劑的檢測(cè)中草藥鎘含量的試紙條；具有特異性好、靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、檢測(cè)時(shí)間短、重復(fù)性及穩(wěn)定性好、檢測(cè)試劑存放穩(wěn)定、不需要貴重儀器的優(yōu)點(diǎn)，可實(shí)現(xiàn)中草藥中鎘殘留的現(xiàn)場(chǎng)靈敏檢測(cè)。與常規(guī)浸泡法制備的試紙條相比，利用本發(fā)明制作的試紙條使用了底物保護(hù)劑較易長(zhǎng)時(shí)間存放；穩(wěn)定性達(dá)半年以上，在現(xiàn)場(chǎng)測(cè)試時(shí)直接能夠應(yīng)用。
[0007]本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。
[0008]本發(fā)明涉及一種帶有掩蔽劑的檢測(cè)中草藥鎘含量的試紙條，所述試紙條包括依次重疊設(shè)置的帶測(cè)試孔、對(duì)照孔的加樣基板，帶有掩蔽劑的玻璃纖維層，帶有鎘顯色劑的反應(yīng)基板以及帶有兩個(gè)觀察孔的支持基板；所述兩個(gè)觀察孔分別與測(cè)試孔、對(duì)照孔相對(duì)應(yīng)。
[0009]優(yōu)選的，所述掩蔽劑為以下五種配方中的兩種或兩種以上的組合:配方1:鹽酸羥胺、氨基乙酸，配方2:硫代硫酸鈉、檸檬酸鈉，配方3:硫脲、焦磷酸鈉，配方4:酒石酸鉀鈉、硫脲，配方5:二乙基二硫代氨基甲酸鈉、鄰菲啰啉。
[0010]更優(yōu)選的，所述掩蔽劑為鹽酸羥胺、氨基乙酸、二乙基二硫代氨基甲酸鈉和鄰菲啰啉。
[0011]更優(yōu)選的，所述帶有掩蔽劑的玻璃纖維層的制備包括:分別取所述掩蔽劑中各組分溶解于去離子水中形成掩蔽劑溶液，將玻璃纖維膜浸潰所述掩蔽劑溶液中5?15分鐘，取出，真空干燥后截成比所述支持基板觀察孔徑稍大的方形小片，即可；每100毫升去離子水中所述掩蔽劑中各組分的用量分別為0.5?1.5克。
[0012]優(yōu)選的，所述反應(yīng)基板的反應(yīng)涂層中含有鎘顯色劑、底物保護(hù)劑、賦形劑、增敏劑和緩沖劑；所述鎘顯色劑為對(duì)硝基苯重氮氨基偶氮苯、二苯基硫代二氨基脲、5-氯-2-羥基重氮基偶氮苯或4-溴-2-磺酸基苯基重氮氨基偶氮苯。
[0013]更優(yōu)選的，所述增敏劑為曲拉通X-100、吐溫-20、十二烷基磺酸鈉或聚乙二醇辛
基苯基醚。
[0014]更優(yōu)選的，所述帶有鎘顯色劑的反應(yīng)基板的制備包括:稱取0.2?0.5克殼聚糖放入燒杯中，加入3%?6%的冰乙酸10?50毫升，低溫靜置形成溶化好的殼聚糖乙酸液；力口入鎘顯色劑0.02?0.10克、底物保護(hù)劑1.0?3.0克、賦形劑1.5?3.0克、增敏劑0.5?2毫升、緩沖劑2.85?6.747克，研磨混勻，真空干燥，取出后在反應(yīng)基板上涂布形成80?200微米的濕膜，冷凍干燥，截成比所述支持基板觀察孔徑稍大的方形小片，即可。
[0015]本發(fā)明還涉及一種上述的帶有掩蔽劑的檢測(cè)中草藥鎘含量的試紙條在檢測(cè)中草藥鎘含量中的用途。
[0016]優(yōu)選的，所述檢測(cè)中草藥鎘含量包括如下步驟:
[0017]A、對(duì)中草藥樣品進(jìn)行消化前處理，將其中的重金屬轉(zhuǎn)化為無(wú)機(jī)態(tài)離子，形成樣品液；
[0018]B、取50微升樣品液滴加測(cè)試孔中，另取50微升pH為8.0的0.1M磷酸鹽緩沖液滴加在對(duì)照孔中；
[0019]C、對(duì)照實(shí)際顯色程度與比色卡，即可檢測(cè)得出中草藥中鎘元素含量。[0020]更優(yōu)選的，所述消化前處理包括如下步驟:
[0021]A、稱取中草藥樣品藥粉，置于不銹鋼高壓消解罐專用的四氟乙烯內(nèi)管中；
[0022]B、加入硝酸過(guò)夜；次日加入30%過(guò)氧化氫，蓋緊消解罐內(nèi)蓋，再旋緊消解罐外套，置干便攜式消毒罐中，120°C高壓2小時(shí)；每克所述中草藥樣品藥粉中加入硝酸10毫升，所述硝酸與過(guò)氧化氫的體積比為5: 3 ；
[0023]C、用二蒸水定容至所述硝酸體積的5倍，在測(cè)試前用lmmol/L的氫氧化鈉將pH調(diào)節(jié)到8.0，即可。
[0024]國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法中的檢測(cè)中草藥重金屬的前處理方法是濕法消化法，需要專用的消化爐、消化管及通風(fēng)廚，且消化溫度不易控制，通常超過(guò)150°C，使一些其它重金屬元素如汞、砷、硒等揮發(fā)而無(wú)法實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確測(cè)試。另外，現(xiàn)有的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法的消化過(guò)程中使用高氯酸等氧化劑而易發(fā)生爆炸，造成對(duì)測(cè)試人員的危害。本發(fā)明中所用的前處理方法中只用到濃硝酸及過(guò)氧化氫，一次性在密閉的空間里高壓消化而成，簡(jiǎn)單易行，消化效果好，無(wú)危險(xiǎn)性，一次性消化后可測(cè)試包括汞、砷在內(nèi)的十幾種甚至幾十種元素的檢測(cè)。
[0025]本發(fā)明利用涂布有鎘顯色劑的反應(yīng)基板和帶有重金屬掩蔽劑的玻璃纖維層組裝而成檢測(cè)中草藥中鎘含量的快速試紙條，建立了檢測(cè)中草藥中鎘殘留的快速現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)新方法及手段，與現(xiàn)有技術(shù)相比較，本發(fā)明具有如下有益效果:
[0026]1、本發(fā)明首次提出了鎘顯色試紙條的涂布式制作方法；首次將帶有掩蔽劑結(jié)構(gòu)層引入重金屬檢測(cè)試紙條；帶有保護(hù)劑的試紙條存放時(shí)間較長(zhǎng)，穩(wěn)定性達(dá)半年以上。
[0027]2、便于攜帶、操作簡(jiǎn)單。本發(fā)明的試紙條輕巧微小，包裝在鋁箔袋中，在常溫化可常時(shí)間保存，便于攜帶。在實(shí)際樣品檢測(cè)時(shí)，只需將消化好的中草藥材樣品PH調(diào)節(jié)到7.5?
9.0左右，取樣品待測(cè)液2?3滴，加入到試紙條上的測(cè)試孔中，并在對(duì)照孔中加入相同pH的磷酸鹽緩沖液，顯色5?10分鐘后，與標(biāo)準(zhǔn)色階卡進(jìn)行比較，直接讀出樣品中鎘的濃度。在此過(guò)程中，不需要特殊的儀器及專業(yè)化的操作程序。
[0028]3、成本低廉。本發(fā)明采取了微形化的試紙條，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，設(shè)計(jì)新穎。所用的主要檢測(cè)試劑均固化在試紙條上，與傳統(tǒng)的比色法比較，極大地減少了試劑的浪費(fèi)。同原子吸收分光光度法及電感耦合離子發(fā)射光譜法相比較，這些儀器測(cè)試法對(duì)一個(gè)樣品的檢測(cè)成本平均在150?250元。而采用本發(fā)明的技術(shù)可使檢測(cè)成本降為2?3元。
[0029]4、檢測(cè)靈敏度高且特異性強(qiáng)。在利用本發(fā)明的快速試紙條檢測(cè)中草藥中鎘元素含量時(shí)，其檢測(cè)下限達(dá)到0.lOppm，檢測(cè)準(zhǔn)確度及精確度基本與原子吸收分光光度法相當(dāng)。由于在本發(fā)明的試紙條中應(yīng)用了帶有重金屬掩蔽劑的玻璃纖維層，其它重金屬離子如銅離子、鉛離子、鋅離子、鎂離子、鐵離子、鎘離子、鉻離子等均不會(huì)產(chǎn)生顯著干擾，大大提高了檢測(cè)的特異性。
[0030]5、應(yīng)用范圍廣。本發(fā)明所建立的檢測(cè)技術(shù)及裝置可以應(yīng)用到:①中草藥；②土壤；③糧食作物；④水質(zhì)；⑤飼料；⑥加工食品；⑦化妝品等物質(zhì)中汞含量的檢測(cè)。需要說(shuō)明的是，上述樣品在測(cè)試前必須經(jīng)過(guò)消化處理，使鎘元素從有機(jī)態(tài)中釋放出來(lái)，轉(zhuǎn)化成無(wú)機(jī)態(tài)的鎘離子后進(jìn)行測(cè)試。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0031]通過(guò)閱讀參照以下附圖對(duì)非限制性實(shí)施例所作的詳細(xì)描述，本發(fā)明的其它特征、目的和優(yōu)點(diǎn)將會(huì)變得更明顯:
[0032]圖1為帶有掩蔽劑的檢測(cè)中草藥鎘含量的試紙條模式圖；
[0033]其中，I為測(cè)試加樣孔，2為對(duì)照加樣孔，3為加樣基板，4為帶有掩蔽劑的玻璃纖維層，5為隔離基板，6為帶有鎘顯色劑的反應(yīng)基板，7為測(cè)試觀察孔，8為對(duì)照觀察孔，9為支持基板；所示箭頭為試紙條各部分組裝順序。
【具體實(shí)施方式】
[0034]下面結(jié)合具體實(shí)施例和附圖對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。以下實(shí)施例將有助于本領(lǐng)域的技術(shù)人員進(jìn)一步理解本發(fā)明，但不以任何形式限制本發(fā)明。應(yīng)當(dāng)指出的是，對(duì)本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進(jìn)。這些都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0035]本發(fā)明的鎘檢測(cè)試紙條，是一種利用涂布有鎘顯色劑的反應(yīng)基板與帶有重金屬掩蔽劑的玻璃纖維層組裝而成的重疊式片狀結(jié)構(gòu)。如圖1所示，這種組裝式片狀結(jié)構(gòu)主要由四層組成，第一層為帶有兩個(gè)加樣孔的加樣基板3，其中一孔為測(cè)試加樣孔1，另一孔為對(duì)照加樣孔2 ;第二層為帶有重金屬掩蔽劑的玻璃纖維層4，是經(jīng)浸泡一定劑量的重金屬掩蔽齊U，冷凍干燥后制成，該層具有清除鎘元素以外的重金屬干擾并能有效清除樣品中的固態(tài)雜質(zhì)的作用；第三層為帶有鎘顯色劑的反應(yīng)基板6，是將含有鎘顯色劑、底物保護(hù)劑、賦形齊U、增敏劑和緩沖劑等混合物配制成膠狀物均勻地涂布于無(wú)色透明的塑料膠片上而制成。第四層為帶有兩個(gè)觀察孔(測(cè)試觀察孔7、對(duì)照觀察孔8)的支持基板9，這兩個(gè)孔的位置與第一層的測(cè)試孔及對(duì)照孔精確對(duì)應(yīng)。將以上四層按次序粘帖后，組裝成檢測(cè)中草藥中鎘元素的試紙條，并密封于鋁箔袋中，常溫保存待用。需要說(shuō)明的是，在裝配帶有觀察孔的支持基板9、帶有鎘顯色劑的反應(yīng)基板6后，需要在支持基板9上的帶有鎘顯色劑的反應(yīng)基板6周圍地方粘貼隔離基板5，其大小與帶有觀察孔的支持基板9相一致，只是留出帶有鎘顯色劑的反應(yīng)基板部分，其材料與加樣基板3材質(zhì)相同。
[0036]在檢測(cè)時(shí)，只需將消化好的中草藥樣品分別滴加到測(cè)試孔及對(duì)照孔中，在10分鐘內(nèi)與標(biāo)準(zhǔn)顯色卡比較，直接讀出中草藥中鎘的含量。
[0037]本發(fā)明試紙條的制備包括如下步驟:
[0038]第I步:加樣塑料基板的制備。所述的加樣塑料基板，其材料為聚氯乙烯、聚對(duì)苯二甲酸乙二酯、丙烯晴-丁二烯-苯乙烯共聚物等，優(yōu)選地是商品化的聚氯乙烯板，厚度為75?180nm,寬度為8?12mm,長(zhǎng)度為25?40mm。用沖壓的方式在塑料基板打開(kāi)兩圓形孔，孔徑為4?6mm。兩孔中心相距為12?20mm。
[0039]第2步:帶有重金屬掩蔽劑的玻璃纖維層的制備。所述的玻璃纖維膜是由100%硼硅酸玻璃纖維制壓制而成的商品化玻璃纖維濾膜，厚度為0.25?0.52mm，型號(hào)有GFA、GFB、GFC、GFD、GFF、GF6、GF8、GF9、GF10等，優(yōu)先地選用GFD。所述的重金屬掩蔽劑配方有以下類型:
[0040]掩蔽劑配方1:鹽酸輕胺0.5?1.5克、氨基乙酸0.5?1.5克。主要用于掩蔽銅離子、鈷離子、鎳離子、鐵離子及鋅離子等的干擾。
[0041]掩蔽劑配方2:硫代硫酸鈉0.2?1.0克、檸檬酸鈉0.2?1.0克。主要用于掩蔽
鈣離子、鎂離子、汞離子、鉛離子等的干擾。[0042]掩蔽劑配方3:硫脲0.5?1.5克、焦磷酸鈉0.5?1.5克。主要用于掩蔽鋅離子、鐵離子、汞離子、銅離子、錳離子、鉛離子等的干擾。
[0043]掩蔽劑配方4:酒石酸鉀鈉0.5?1.5克、硫脲0.5?1.5克。主要用于掩蔽銀離子、汞離子、銅離子、鉛離子等的干擾。
[0044]掩蔽劑配方5:二乙基二硫代氨基甲酸鈉0.5?1.5克、鄰菲啰啉0.5?1.5克。主要用于掩蔽銀離子、汞離子、銅離子、鉛離子等的干擾。
[0045]在制備重金屬掩蔽劑的玻璃纖維層的過(guò)程中，對(duì)掩蔽劑配方可根據(jù)檢測(cè)樣品的不同而進(jìn)行兩種或兩種以上的組合，以便達(dá)到最顯著的掩蔽效果而不顯著降低檢測(cè)鎘的靈敏度。優(yōu)選地，在本發(fā)明中選用配方I及配方5的組合。
[0046]重金屬掩蔽劑的玻璃纖維的制備(以選用配方I及配方5的組合為例):稱取鹽酸羥胺0.5?1.5克、氨基乙酸0.5?1.5克、二乙基二硫代氨基甲酸鈉0.5?1.5克、鄰菲啰啉0.5?1.5克，溶解到100毫升去離子水中，將其傾倒在一方形盤(pán)中，然后在其中浸入玻璃纖維膜，5?15分鐘后撈出，放入真空干燥器中干燥后截成與第四層支持基板觀察孔徑稍大的方形小片。
[0047]第3步:帶有鎘顯色劑反應(yīng)基板的制備。鎘顯色劑反應(yīng)基板是無(wú)色透明的塑料膜片，其材料由聚乙烯、聚苯乙烯、聚丙烯、聚甲基丙烯酸甲酯、聚四氟乙烯、聚碳酸酯等組成，優(yōu)選地是聚苯乙烯，厚度為75?180nm。鎘顯色劑反應(yīng)基板上的反應(yīng)涂層中含有鎘顯色劑、底物保護(hù)劑、賦形劑、增敏劑和緩沖劑。所述的鎘顯色劑有對(duì)硝基苯重氮氨基偶氮苯、二苯基硫代二氨基脲、5-氯-2-羥基重氮基偶氮苯、4-溴-2-磺酸基苯基重氮氨基偶氮苯等，優(yōu)選地是二苯基硫代二氨基脲。所述的底物保護(hù)劑有海藻糖、蔗糖、抗壞血酸等，優(yōu)選地選用價(jià)廉的蔗糖。所述的賦形劑是層析用硅膠、三氧化二鋁納米粉、二氧化鈦納米粉等，優(yōu)選地采用層析用硅膠。所述的增敏劑為表面活性劑類物質(zhì)，如曲拉通X-100、吐溫-20、十二烷基磺酸鈉、聚乙二醇辛基苯基醚等，優(yōu)先地選用聚乙二醇辛基苯基醚。所述的緩沖劑有磷酸鹽緩沖劑、碳酸鹽緩沖劑、三羥甲基氨基甲烷-甘氨酸緩沖劑等，優(yōu)選地選用磷酸鹽緩沖劑。
[0048]鎘顯色劑反應(yīng)基板的制備的方法舉例如下:稱取0.2?0.5克殼聚糖放入燒杯中，加入3%?6%的冰乙酸10?50毫升，放入冰箱中過(guò)夜。次日將溶化好的殼聚糖乙酸液加入白瓷研缽中，并加入二苯基硫代二氨基脲0.02?0.10克、蔗糖1.0?3.0克、層析硅膠1.5?3.0克、聚乙二醇辛基苯基醚0.5?2毫升、二水磷酸氫二鈉2.7?3.4克、一水磷酸二氫鈉0.15?3.347克。將上述試劑在研缽中研磨混勻25?35分鐘。放入真空干燥器抽真空15?25分鐘。取出后將上述顯色劑混合物倒在反應(yīng)基板上，用涂布器涂敷成80?200微米的濕膜，并進(jìn)行冷凍干燥，截成與第四層支持基板觀察孔徑稍大的方形小片。
[0049]第4步:帶有觀察孔的支持基板的制備:所述的帶有觀察孔的支持基板，其材料與第I步所述的第一層的加樣塑料基板的材料相同，其大小尺寸也等同于第I步所述的第一層的加樣塑料基板。用沖壓的方式在支持基板打開(kāi)兩圓形孔，孔徑為4?6mm。兩孔中心相距為12?20mm，位置與第I步所述的第一層的加樣塑料基板上的加樣孔準(zhǔn)確對(duì)應(yīng)。
[0050]第5步:試紙條的組裝:將帶有觀察孔的支持基板、鎘顯色劑反應(yīng)透明基板、帶有重金屬掩蔽劑的玻璃纖維層及加樣塑料基板依次用雙面膠粘合于一體，組裝成檢測(cè)中草藥中鎘含量的快速檢測(cè)試紙條。
[0051]第6步:模擬檢測(cè)色階比色卡的制作:將制備好的鎘標(biāo)準(zhǔn)試劑加入到上述對(duì)照孔與測(cè)試孔中，等待2~10分鐘后，用數(shù)碼相機(jī)拍攝顯色情況，然后在計(jì)算機(jī)上用Photoshop7.0軟件設(shè)計(jì)出比色卡,并標(biāo)注好相應(yīng)的檢測(cè)濃度范圍。
[0052]具體見(jiàn)以下各實(shí)施例:
[0053]實(shí)施例1、三七粉中鎘元素含暈的檢測(cè)
[0054]1、帶有重金屬掩蔽劑的試紙的制作
[0055]帶有掩蔽劑的檢測(cè)中草藥鎘含量的試紙條模式圖如圖1所示；
[0056]在本實(shí)施例中，加樣塑料基板采用聚氯乙烯聚氯乙烯板，厚度為75nm，寬度為8mm,長(zhǎng)度為25mm。用沖壓的方式在塑料基板打開(kāi)兩圓形孔,孔徑為4mm。兩孔中心相距為12mm。
[0057]在制作重金屬掩蔽劑的玻璃纖維層時(shí)，選用型號(hào)為GFD的商品化玻璃纖維濾膜，厚度為0.25mm。掩蔽劑配方組合了配方I及配方5。制備過(guò)程如下:稱取鹽酸羥胺0.5克、氨基乙酸0.5克、二乙基二硫代氨基甲酸鈉0.5克、鄰菲啰啉0.5克，溶解到100毫升去離子水中，將其傾倒在一方形盤(pán)中，然后在其中浸入玻璃纖維膜，5分鐘后撈出，放入真空干燥器中干燥后截成與第四層支持基板觀察孔徑稍大的方形小片。
[0058]在制備鎘顯色劑反應(yīng)透明基板時(shí)，選用厚度為75nm的聚苯乙烯,鎘顯色劑基板上的反應(yīng)涂層中鎘顯色劑、底物保護(hù)劑、賦形劑、增敏劑和緩沖劑分別選用二苯基硫代二氨基脲、蔗糖、層析用硅膠、聚乙二醇辛基苯基醚及磷酸鹽緩沖劑。鎘顯色劑反應(yīng)基板的制備過(guò)程式如下:稱取0.2克殼聚糖放入燒杯中，加入3%的冰乙酸10毫升，放入冰箱中過(guò)夜。次日將溶化好的殼聚糖乙酸液加入白瓷研缽中，并加入二苯基硫代二氨基脲0.02克、蔗糖
1.0克、層析硅膠1.5克、聚`乙二醇辛基苯基醚0.5毫升、二水磷酸氫二鈉2.7克、一水磷酸二氫鈉0.15克。將上述試劑在研缽中研磨混勻25分鐘。放入真空干燥器抽真空15分鐘。取出后將上述顯色劑混合物倒在鎘顯色劑反應(yīng)基板上，用涂布器涂敷成80微米的濕膜，并進(jìn)行冷凍干燥，截成與第四層支持基板觀察孔徑稍大的方形小片。
[0059]在制備帶有觀察孔的支持基板時(shí)，所選用的材料同加樣塑料基板，其大小尺寸也等同于第I步所述的第一層的加樣塑料基板。用沖壓的方式在支持基板打開(kāi)兩圓形孔，孔徑為4mm。兩孔中心相距為12mm，位置與第I步所述的第一層的加樣塑料基板上的加樣孔準(zhǔn)確對(duì)應(yīng)。
[0060]試紙條的組裝同前述的第5步。將組裝好的試紙條裝入規(guī)格為8.3cmX 11.8cm的鋁箔袋中，放入一小包干燥劑和50微升一次性塑料小滴管2個(gè)，用封口機(jī)密封后常溫存放。
[0061]在制作模擬檢測(cè)色階比色卡時(shí)，將制備好的鎘標(biāo)準(zhǔn)試劑加入到上述試紙條的對(duì)照孔與測(cè)試孔中，等待2分鐘后，用數(shù)碼相機(jī)拍攝顯色情況，然后在計(jì)算機(jī)上用Photoshop?.0軟件設(shè)計(jì)出比色卡，并標(biāo)注好相應(yīng)的檢測(cè)濃度范圍，本實(shí)施例的檢測(cè)鎘的范圍為 0.03ppm ~lOOppm。
[0062]2、樣品的消化前處理
[0063]在本實(shí)施例中，首先將5份三七粉中藥樣品進(jìn)行消化前處理。對(duì)于含有重金屬的樣品的前處理，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法均要求樣品經(jīng)高溫、強(qiáng)酸及強(qiáng)氧化劑消化處理，使金屬?gòu)挠袡C(jī)態(tài)轉(zhuǎn)為無(wú)機(jī)態(tài)離子。考慮到現(xiàn)場(chǎng)測(cè)試中草藥中重金屬含量的需求，本專利采用高壓消解方法，應(yīng)用了便于攜帶的小型手提式常用消毒罐、25毫升高壓消解罐及簡(jiǎn)易式定容管。本發(fā)明所應(yīng)用的消化過(guò)程具體如下:①準(zhǔn)確稱取待檢樣品三七粉中藥粉0.500克，置于消解罐專用的四氟乙烯內(nèi)管中；②加入硝酸5毫升過(guò)夜；次日加入30%過(guò)氧化氫3毫升；③蓋緊消解內(nèi)蓋，再旋緊不銹鋼高壓消解罐外套，置干便攜式消毒罐中，120°C高壓2小時(shí)；④用二蒸水定容成25毫升，在測(cè)試前用lmmol/L的氫氧化鈉將pH調(diào)節(jié)到8.0。
[0064]3、實(shí)際樣品的測(cè)試
[0065]從鋁箔袋中取出試劑條，平放于桌面上，用50微升一次性塑料小滴管吸取上述處理好的三七粉樣品液，小心地在滴加在鎘試紙條測(cè)試加樣孔中；用另外一個(gè)50微升一次性塑料小滴管吸取pH為8.0的0.1M磷酸鹽緩沖液小心地在滴加在鎘試紙條對(duì)照加樣孔中。放置2分鐘后，從觀察孔觀察試紙條顏色的變化來(lái)判定結(jié)果。對(duì)照實(shí)際顯色程度與比色卡來(lái)半定量三七粉中鎘含量，檢測(cè)結(jié)果表明，5份三七粉樣品中，有4份檢出鎘殘留，其含量分別為0.2ppm、0.30ppm、0.4ppm、0.60ppm,另外一個(gè)樣品中鎘未檢出。對(duì)上述檢測(cè)結(jié)果應(yīng)用電感耦合等離子體發(fā)射光譜法進(jìn)行確證性測(cè)試，檢測(cè)結(jié)果表明，5份三七粉樣品中，有4份相對(duì)應(yīng)樣品檢出鎘殘留，其含量分別為0.2327ppm、0.1788ppm、0.3584ppm、0.4081ppm，另外一個(gè)樣品中鎘未檢出，說(shuō)明此實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)基合吻合本發(fā)明的檢測(cè)結(jié)果。
[0066]實(shí)施例2、茯苓粉中鎘元素含暈的檢測(cè)
[0067]1、帶有重金屬掩蔽劑的試紙條的制作
[0068]在本實(shí)施例中，加樣塑料基板采用聚對(duì)苯二甲酸乙二酯塑料板，厚度為120nm，寬度為IOmm,長(zhǎng)度為30mm。用沖壓的方式在塑料基板打開(kāi)兩圓形孔,孔徑為5mm。兩孔中心相距為16臟。
[0069]在制作重金屬掩蔽劑的玻璃纖維層時(shí)，選用型號(hào)為6FA的商品化玻璃纖維濾膜，厚度為0.35mm。掩蔽劑配方組合了配方2及配方4。制備過(guò)程如下:稱取硫代硫酸鈉0.5克、檸檬酸鈉0.5克、酒石酸鉀鈉1.0克、硫脲1.0克，其它制作過(guò)程同實(shí)施例1。
[0070]在制備鎘顯色劑反應(yīng)透明基板時(shí)，選用厚度為IOOnm的聚乙烯，鎘顯色劑基板上的反應(yīng)涂層中鎘顯色劑、底物保護(hù)劑、賦形劑、增敏劑和緩沖劑分別選用對(duì)硝基苯重氮氨基偶氮苯、海藻糖、三氧化二鋁納米粉、吐溫-20及碳酸鹽緩沖劑緩沖劑。鎘顯色劑反應(yīng)基板的制備過(guò)程式如下:稱取0.3克殼聚糖放入燒杯中，加入4%的冰乙酸30毫升，放入冰箱中過(guò)夜。次日將溶化好的殼聚糖乙酸液加入白瓷研缽中，并加入對(duì)硝基苯重氮氨基偶氮苯
0.05克、海藻糖2.0克、三氧化二鋁納米粉2.0克、吐溫-201.0毫升、碳酸氫鈉1.5克、碳酸鈉0.2克。將上述試劑在研缽中研磨混勻30分鐘。放入真空干燥器抽真空20分鐘。取出后將上述顯色劑混合物倒在鎘顯色劑反應(yīng)基板上，用涂布器涂敷成100微米的濕膜，并進(jìn)行冷凍干燥，截成與第四層支持基板觀察孔徑稍大的方形小片。
[0071]在制備帶有觀察孔的支持基板時(shí)，其制作過(guò)程中實(shí)施例1，不同之處是孔徑為5mm。兩孔中心相距為16mm，位置與第I步所述的第一層的加樣塑料基板上的加樣孔準(zhǔn)確對(duì)應(yīng)。
[0072]試紙條的組裝同實(shí)施例1。
[0073]在制作模擬檢測(cè)色階比色卡時(shí)，基本制作過(guò)程同實(shí)施例1，不同之處是將制備好的鎘標(biāo)準(zhǔn)試劑加入到上述試紙條的對(duì)照孔與測(cè)試孔中，等待5分鐘后，本實(shí)施例的檢測(cè)鎘的范圍為 0.1Oppm ?50ppm。
[0074]2、樣品的消化前處理
[0075]在本實(shí)施例中，選用5份茯苓粉中藥樣品進(jìn)行消化前處理。對(duì)樣品的高壓消化處理過(guò)程同實(shí)施例1。
[0076]3、實(shí)際樣品的測(cè)試
[0077]樣品測(cè)試基本步驟同實(shí)施例1。檢測(cè)結(jié)果表明，5份茯苓粉中藥樣品中，有3份檢出鎘殘留，其含量分別為0.8ppm、0.60ppm及0.2ppm，另外兩個(gè)樣品中鎘未檢出。對(duì)上述檢測(cè)結(jié)果應(yīng)用電感耦合等離子體發(fā)射光譜法進(jìn)行確證性測(cè)試，檢測(cè)結(jié)果表明，5份三七粉樣品中，有3份相對(duì)應(yīng)樣品檢出鎘殘留，其含量分別為0.7578ppm、0.5658ppm及0.1784ppm，另外兩份樣品中鎘未檢出，說(shuō)明此實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)基合吻合本發(fā)明的檢測(cè)結(jié)果。
[0078]實(shí)施例3、蘆根提取物中鎘元素含暈的檢測(cè)
[0079]1、帶有重金屬掩蔽劑的試紙條的制作
[0080]在本實(shí)施例中，加樣塑料基板采用丙烯晴-丁二烯-苯乙烯共聚物板，厚度為180nm,寬度為12mm,長(zhǎng)度為40mm。用沖壓的方式在塑料基板打開(kāi)兩圓形孔,孔徑為6mm。兩孔中心相距為20mm。
[0081]在制作重金屬掩蔽劑的玻璃纖維層時(shí)，選用型號(hào)為GF6的商品化玻璃纖維濾膜，厚度為0.52_。掩蔽劑配方組合了配方3及配方5。制備過(guò)程如下:稱取硫脲1.5克、焦磷酸鈉1.5克、二乙基二硫代氨基甲酸鈉1.5克、鄰菲啰啉1.5克，其它制作過(guò)程同實(shí)施例1。
[0082]在制備鋪顯色劑反應(yīng)透明基板時(shí)，選用厚度為180nm的聚四氣乙稀,鋪顯色劑基板上的反應(yīng)涂層中鎘顯色劑、底物保護(hù)劑、賦形劑、增敏劑和緩沖劑分別選用對(duì)4-溴-2-磺酸基苯基重氮氨基偶氮苯、抗壞血酸、二氧化鈦納米粉、曲拉通X-100及三羥甲基氨基甲烷-甘氨酸緩沖劑。鎘顯色劑反應(yīng)基板的制備過(guò)程式如下:稱取0.5克殼聚糖放入燒杯中，加入6%的冰乙酸50毫升，放入冰箱中過(guò)夜。次日將溶化好的殼聚糖乙酸液加入白瓷研缽中，并加入4-溴-2-磺酸基苯基重氮氨基偶氮苯0.10克、抗壞血酸3.0克、二氧化鈦納米粉3.0克、曲拉通X-1002.0毫升、三羥甲基氨基甲烷2.5克、甘氨酸2.0克。將上述試劑在研缽中研磨混勻35分鐘。放入真空干燥器抽真空25分鐘。取出后將上述顯色劑混合物倒在鎘顯色劑反應(yīng)基板上，用涂布器涂敷成200微米的濕膜，并進(jìn)行冷凍干燥，截成與第四層支持基板觀察孔徑稍大的方形小片。
[0083]在制備帶有觀察孔的支持基板時(shí)，其制作過(guò)程中實(shí)施例1，不同之處是孔徑為6mm。兩孔中心相距為20mm，位置與第I步所述的第一層的加樣塑料基板上的加樣孔準(zhǔn)確對(duì)應(yīng)。
[0084]試紙條的組裝同實(shí)施例1。
[0085]在制作模擬檢測(cè)色階比色卡時(shí)，基本制作過(guò)程同實(shí)施例1，不同之處是將制備好的鎘標(biāo)準(zhǔn)試劑加入到上述試紙條的對(duì)照孔與測(cè)試孔中，等待10分鐘后，本實(shí)施例的檢測(cè)鎘的范圍為 0.1Oppm ?lOOppm。
[0086]2、樣品的消化前處理
[0087]在本實(shí)施例中，選用5份蘆根提取物中藥樣品進(jìn)行消化前處理。對(duì)樣品的高壓消化處理過(guò)程同實(shí)施例1。
[0088]3、實(shí)際樣品的測(cè)試
[0089]樣品測(cè)試基本步驟同實(shí)施例1。檢測(cè)結(jié)果表明，5份5份蘆根提取物樣品中，有4份檢出鎘殘留，其含量分別為1.0ppm,2.0ppm、0.5ppm及0.2ppm，另外I個(gè)樣品中鎘未檢出。對(duì)上述檢測(cè)結(jié)果應(yīng)用電感耦合等離子體發(fā)射光譜法進(jìn)行確證性測(cè)試，檢測(cè)結(jié)果表明，5份三七粉樣品中，有3份相對(duì)應(yīng)樣品檢出鎘殘留，其含量分別為0.9126ppm、l.7849ppm、0.4683ppm及0.2537ppm，另外I個(gè)樣品中鎘未檢出，說(shuō)明此實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)基合吻合本發(fā)明的檢測(cè)結(jié)果。
[0090]以上對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施例進(jìn)行了描述。需要理解的是，本發(fā)明并不局限于上述特定實(shí)施方式，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以在權(quán)利要求的范圍內(nèi)做出各種變形或修改，這并不影響本發(fā)明的實(shí)質(zhì)內(nèi)容。
【權(quán)利要求】
1.一種帶有掩蔽劑的檢測(cè)中草藥鎘含量的試紙條，其特征在于，所述試紙條包括依次重疊設(shè)置的帶測(cè)試孔、對(duì)照孔的加樣基板，帶有掩蔽劑的玻璃纖維層，帶有鎘顯色劑的反應(yīng)基板以及帶有兩個(gè)觀察孔的支持基板；所述兩個(gè)觀察孔分別與測(cè)試孔、對(duì)照孔相對(duì)應(yīng)。
2.如權(quán)利要求1所述的帶有掩蔽劑的檢測(cè)中草藥鎘含量的試紙條，其特征在于，所述掩蔽劑為以下五種配方中的兩種或兩種以上的組合:配方1:鹽酸羥胺、氨基乙酸，配方2:硫代硫酸鈉、檸檬酸鈉，配方3:硫脲、焦磷酸鈉，配方4:酒石酸鉀鈉、硫脲，配方5:二乙基二硫代氨基甲酸鈉、鄰菲啰啉。
3.如權(quán)利要求2所述的帶有掩蔽劑的檢測(cè)中草藥鎘含量的試紙條，其特征在于，所述掩蔽劑為鹽酸羥胺、氨基乙酸、二乙基二硫代氨基甲酸鈉和鄰菲啰啉。
4.如權(quán)利要求2所述的帶有掩蔽劑的檢測(cè)中草藥鎘含量的試紙條，其特征在于，所述帶有掩蔽劑的玻璃纖維層的制備包括:分別取所述掩蔽劑中各組分溶解于去離子水中形成掩蔽劑溶液，將玻璃纖維膜浸潰所述掩蔽劑溶液中5~15分鐘，取出，真空干燥后截成比所述支持基板觀察孔徑稍大的方形小片，即可；每100毫升去離子水中所述掩蔽劑中各組分的用量分別為0.5~1.5克。
5.如權(quán)利要求1所述的帶有掩蔽劑的檢測(cè)中草藥鎘含量的試紙條，其特征在于，所述反應(yīng)基板的反應(yīng)涂層中含有鎘顯色劑、底物保護(hù)劑、賦形劑、增敏劑和緩沖劑；所述鎘顯色劑為對(duì)硝基苯重氮氨基偶氮苯、二苯基硫代二氨基脲、5-氯-2-羥基重氮基偶氮苯或4-溴-2-磺酸基苯基重氮氨基偶氮苯。
6.如權(quán)利要求5所述的帶有掩蔽劑的檢測(cè)中草藥鎘含量的試紙條，其特征在于，所述增敏劑為曲拉通X-100、吐溫-20、十二烷基磺酸鈉或聚乙二醇辛基苯基醚。
7.如權(quán)利要求5所述的帶有掩蔽劑的檢測(cè)中草藥鎘含量的試紙條，其特征在于，所述帶有鎘顯色劑的反應(yīng)基板的制備包括:稱取0.2~0.5克殼聚糖放入燒杯中，加入3%~6%的冰乙酸10~50毫升，低溫靜置形成溶化好的殼聚糖乙酸液；加入鎘顯色劑0.02~0.10克、底物保護(hù)劑1.0~3.0克、賦形劑1.5~3.0克、增敏劑0.5~2毫升、緩沖劑2.85~6.747克，研磨混勻，真空干燥，取出后在反應(yīng)基板上涂布形成80~200微米的濕膜，冷凍干燥，截成比所述支持基板觀察孔徑稍大的方形小片，即可。
8.—種如權(quán)利要求1~7中任一項(xiàng)所述的帶有掩蔽劑的檢測(cè)中草藥鎘含量的試紙條在檢測(cè)中草藥鎘含量中的用途。
9.如權(quán)利要求8所述的用途，其特征在于，所述檢測(cè)中草藥鎘含量包括如下步驟: A、對(duì)中草藥樣品進(jìn)行消化前處理，將其中的重金屬轉(zhuǎn)化為無(wú)機(jī)態(tài)離子，形成樣品液； B、取50微升樣品液滴加測(cè)試孔中，另取50微升pH為8.0的0.1M磷酸鹽緩沖液滴加在對(duì)照孔中； C、對(duì)照實(shí)際顯色程度與比色卡，即可檢測(cè)得出中草藥中鎘元素含量。
10.如權(quán)利要求9所述的用途，其特征在于，所述消化前處理包括如下步驟: A、稱取中草藥樣品藥粉，置于不銹鋼高壓消解罐專用的四氟乙烯內(nèi)管中； B、加入硝酸過(guò)夜；次日加入30%過(guò)氧化氫，蓋緊消解內(nèi)蓋，再旋緊消解罐外套，置干便攜式消毒罐中，120°C高壓2小時(shí)；每克所述中草藥樣品藥粉中加入硝酸10毫升，所述硝酸與過(guò)氧化氫的體積比為5: 3 ； C、用二蒸水定容至所述硝酸體積的5倍，在測(cè)試前用lmmol/L的氫氧化鈉將pH調(diào)節(jié)到.8.0，即可。
【文檔編號(hào)】G01N21/78GK103776826SQ201410021261
【公開(kāi)日】2014年5月7日 申請(qǐng)日期:2014年1月16日 優(yōu)先權(quán)日:2014年1月16日
【發(fā)明者】黃生權(quán), 付萌, 柴春彥, 劉國(guó)艷, 唐青濤, 趙娜, 秦垂新 申請(qǐng)人:無(wú)限極（中國(guó)）有限公司