疾病樣品分析裝置、分析系統(tǒng)及分析方法

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疾病樣品分析裝置、分析系統(tǒng)及分析方法
【專利摘要】本發(fā)明的課題是通過氨基酸立體異構體的全分析，使氨基酸立體異構體量、變化與疾病的關系明確，開發(fā)出新的疾病診斷方法、和實行該疾病診斷方法的新的疾病診斷裝置。作為解決本發(fā)明的課題的方法涉及本發(fā)明的疾病樣品分析裝置，其包括下述機構：將被檢者的生物材料中的氨基酸立體異構體進行分離、定量的機構；將該氨基酸立體異構體的量代入判別式進行計算，獲得病態(tài)指標值的機構；和基于上述病態(tài)指標值輸出上述患者的病態(tài)信息的機構。上述判別式有下述情況：病態(tài)指標值＝(上述被檢者的生物材料中的測定值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的測定值)/(健常者的生物材料中的基準值)等。本發(fā)明的疾病樣品分析方法包括下述步驟：測定被檢者的生物材料中的氨基酸立體異構體的量的步驟；和將該氨基酸立體異構體的量代入判別式進行計算，獲得病態(tài)指標值的步驟等。
【專利說明】疾病樣品分析裝置、分析系統(tǒng)及分析方法

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及基于將氨基酸的立體異構體區(qū)分開的定量法的疾病樣品分析裝置、分析系統(tǒng)以及分析方法。具體而言，涉及下述疾病樣品分析裝置、疾病樣品分析系統(tǒng)和疾病樣品分析方法，所述疾病樣品分析裝置包括下述機構：將被檢者的生物材料的氨基酸立體異構體進行分離、定量的機構；將該氨基酸立體異構體的定量值代入判別式進行計算，獲得病態(tài)指標值的機構；和基于上述病態(tài)指標值輸出上述被檢者的病態(tài)信息的機構，所述疾病樣品分析系統(tǒng)包括：將被檢者的生物材料的氨基酸立體異構體進行分離、定量的定量分析部；將該氨基酸立體異構體的定量值代入判別式進行計算，獲得病態(tài)指標值的病態(tài)指標值演算部；和基于上述病態(tài)指標值輸出上述患者的病態(tài)信息的病態(tài)信息輸出部，所述疾病樣品分析方法包括下述步驟：將被檢者的生物材料的氨基酸立體異構體進行分離、定量的步驟；將該氨基酸立體異構體的定量值代入判別式進行計算，獲得病態(tài)指標值的步驟；和基于上述病態(tài)指標值獲得上述被檢者的病態(tài)息的步驟。

【背景技術】
[0002] 除了甘氨酸以外的全部氨基酸中存在D-體和L-體這2種立體異構體。L-氨基酸為生物的蛋白質的構成要素，蛋白質所包含的氨基酸原則上為L-氨基酸。與此相對，D-氨基酸包含于低等生物的一部分的生物活性肽中，但其大多數(shù)為經(jīng)由翻譯后修飾的工藝而被生物合成。因此，構成蛋白質或肽的氨基酸主要是L-氨基酸，D-氨基酸為例外的存在。
[0003] D-氨基酸為細菌的細胞壁的肽聚糖的構成成分之一。此外，關于不構成肽的游離的D-氨基酸，以前報告了存在于水生動物、昆蟲等低等動物中。然而，有相信高等動物中存在的氨基酸為L體，D體不參與生理活動的時代（非專利文獻1)。
[0004] 然而，關于包含人的哺乳類中的D-氨基酸的存在和其作用，隨著近年來的分析技術的進步帶來的分辨率、靈敏度的提高而變得逐漸明確（非專利文獻2)。關于D-天冬氨酸，通過使用了抗D-天冬氨酸抗體的雙重染色法等，明確了在大鼠下垂體中局部存在于促乳素分泌細胞。此外，可以認為在大鼠下垂體來源的細胞株中通過對合成、分泌促乳素的細胞施與D-天冬氨酸而促乳素分泌用量依存地增加了。由以上可知在促乳素分泌細胞中 D-天冬氨酸控制促乳素的分泌（非專利文獻3)。
[0005] 另一方面，報告了在大鼠精巢的靜脈中與其它靜脈血相比經(jīng)常檢測到高濃度的 D-天冬氨酸，除此以外通過對由大鼠精巢離析、精制的Leydig細胞施加 D-天冬氨酸而睪酮的合成和分泌被用量依存地促進（非專利文獻4)。
[0006] 報告了 D-絲氨酸選擇性地刺激推測與精神分裂癥相關的NMDA型谷氨酸受體的甘氨酸結合部位，通過增強介由谷氨酸的本受體的作用而促進神經(jīng)傳導（非專利文獻5)。報告了實際上通過D-絲氨酸的施與而精神分裂癥改善、精神分裂癥患者血清中的D-絲氨酸濃度比健常者低。此外最近報告了 D-絲氨酸與肌萎縮性側索硬化癥（ALS)中的運動神經(jīng) 的變性有關（非專利文獻6)。
[0007] 財津等開發(fā)了 D、L-氨基酸同步高靈敏度分析系統(tǒng)（專利文獻1，非專利文獻 7-9)，將氨基酸立體異構體的同步高靈敏度分析技術實用化了。由此，能夠將人的生物材料所包含的極微量的D-氨基酸與較大量存在的L-氨基酸從同一樣品中網(wǎng)羅地分離、定量。
[0008] 本發(fā)明中，由各種疾病患者的氨基酸立體異構體的定量分析結果發(fā)現(xiàn)，健常者的生物材料中的D-氨基酸和L-氨基酸的量保持一定的平衡，個體差異小，以及通過將患者的生物材料中的D-氨基酸和L-氨基酸進行分離、定量才可以確認差異的平衡的崩潰存在于一部分。本發(fā)明是基于這樣的預料之外的發(fā)現(xiàn)而想到的。
[0009] 現(xiàn)有技術文獻
[0010] 專利文獻
[0011] 專利文獻1 :日本特許第4291628號
[0012] 非專利文獻
[0013] 非專利文獻 I: Corrigan J. J. , Science 164 :142 (1969)
[0014] 非專利文獻 2:Hamase K，Morikawa A, and Zaitsu Κ·，J Chromatogr B 781 : 73(2002)
[0015] 非專利文獻 3:D'Aniello A 等，F(xiàn)ASEB J 14 :699(2000)
[0016] 非專利文獻 4:Nagata Y 等，F(xiàn)EBS Lett. 444 :160(1999)
[0017] 非專利文獻 5:Nishikawa T，Biol. Pharm. Bull. 28 :1561 (2005)
[0018] 非專利文獻 6: Sasabe，J.，等，Proc. Natl. Acad. Sci. 109 :627(2012)
[0019] 非專利文獻 7:Hamase Κ·，等，J. Chromatogr. A，1143 :105 (2007)
[0020] 非專利文獻 8:HamaseK.，等，J. Chromatogr. A，1217 :1056 (2010)
[0021] 非專利文獻 9:MiyoshiΥ·，等，J. Chromatogr. B，879 :3184 (2011)

【發(fā)明內容】

[0022] 發(fā)明所要解決的課題
[0023] 需要通過氨基酸立體異構體的全分析，使氨基酸立體異構體量、變化與疾病的關系明確，開發(fā)新的疾病診斷方法和實行該疾病診斷方法的新的疾病診斷裝置。
[0024] 用于解決課題的方法
[0025] 本發(fā)明提供疾病樣品分析裝置。本發(fā)明的疾病樣品分析裝置包括下述機構：將被檢者的生物材料中的氨基酸立體異構體進行分離、定量的機構；將該氨基酸立體異構體的量代入判別式進行計算，獲得病態(tài)指標值的機構；和基于上述病態(tài)指標值輸出上述患者的病態(tài)信息的機構。
[0026] 本發(fā)明的疾病樣品分析裝置中，有下述情況：上述判別式為：
[0027] 病態(tài)指標值=(上述被檢者的生物材料中的測定值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的測定值）八健常者的生物材料中的與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的基準值），或者
[0028] 病態(tài)指標值=[(上述被檢者的生物材料中的測定值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的測定值）/{(上述被檢者的生物材料中的測定值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的測定值）+ (上述被檢者的生物材料中的測定值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的對映異構體的測定值）}] + [(健常者的基準值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的基準值）/{(上述健常者的基準值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的基準值）+(上述健常者的基準值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的對映異構體的基準值）}]。
[0029] 本發(fā)明的疾病樣品分析裝置中，有下述情況：基于上述病態(tài)指標值輸出上述被檢者的病態(tài)信息的機構是，當上述病態(tài)指標值為2. 0或2. 0以上時，輸出上述被檢者罹患上述疾病的上述被檢者的病態(tài)信息的機構。
[0030] 本發(fā)明的疾病樣品分析裝置中，有下述情況：在上述疾病為腎臟病時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為選自D-絲氨酸、D-蘇氨酸、D-丙氨酸、D-天冬酰胺、D-別蘇氨酸、D-谷氨酰胺、D-脯氨酸和D-苯基丙氨酸中的1種或2種以上的氨基酸，在上述疾病為前列腺癌時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-組氨酸和/或D-天冬酰胺，在上述疾病為骨質疏松癥時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-天冬酰胺，在上述疾病為擴張型心肌病時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-絲氨酸、L-精氨酸、D-谷氨酸和D-脯氨酸，在上述疾病為更年期障礙時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-組氨酸、L-苯基丙氨酸和D-天冬氨酸，在上述疾病為肉瘤時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-精氨酸，在上述疾病為阿爾茨海默病時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為 D-別異亮氨酸、D-絲氨酸、D-丙氨酸、D-蛋氨酸、D-亮氨酸、D-天冬氨酸、D-苯基丙氨酸和L-苯基丙氨酸，在上述疾病為DAO缺損時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-絲氨酸、D-別蘇氨酸、D-丙氨酸、D-脯氨酸、D-殼氨酸和D-苯基丙氨酸，在上述疾病為DDO 缺損時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-天冬酰胺、D-天冬氨酸和D-精氨酸，在上述疾病為苯丙酮酸尿癥時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-苯基丙氨酸，在上述疾病為楓糖尿癥時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-纈氨酸、L-別異亮氨酸、 D-異亮氨酸、L-異亮氨酸和L-亮氨酸，在上述疾病為類風濕性關節(jié)炎時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-谷氨酸、L-谷氨酰胺和L-半胱氨酸，在上述疾病為腎臟癌時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-絲氨酸和D-丙氨酸，在上述疾病為肺癌時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-丙氨酸，在上述疾病為心血管疾病時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-精氨酸和L-谷氨酸，在上述疾病為多發(fā)性硬化癥時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-絲氨酸和L-半胱氨酸，在上述疾病為急性骨髓性白血病時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-半胱氨酸，在上述疾病為淋巴瘤時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-半胱氨酸，在上述疾病為急性淋巴性白血病時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-谷氨酸和L-半胱氨酸，在上述疾病為銀屑病時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-精氨酸和L-半胱氨酸，在上述疾病為糖尿病時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-丙氨酸、L-半胱氨酸和L-谷氨酸。
[0031] 本發(fā)明提供疾病樣品分析系統(tǒng)。本發(fā)明的疾病樣品分析系統(tǒng)包括：將被檢者的生物材料中的氨基酸立體異構體進行分離、定量的定量分析部；將該氨基酸立體異構體的量代入判別式進行計算，獲得病態(tài)指標值的病態(tài)指標值演算部；和基于上述病態(tài)指標值輸出上述患者的病態(tài)信息的病態(tài)信息輸出部。
[0032] 本發(fā)明的疾病樣品分析系統(tǒng)中，有下述情況：上述判別式為：
[0033] 病態(tài)指標值=(上述被檢者的生物材料中的測定值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的測定值）八健常者的生物材料中的與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的基準值），或者
[0034] 病態(tài)指標值=[(上述被檢者的生物材料中的測定值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的測定值）/{(上述被檢者的生物材料中的測定值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的測定值）+ (上述被檢者的生物材料中的測定值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的對映異構體的測定值）}] + [(健常者的基準值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的基準值）/{(上述健常者的基準值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的基準值）+ (上述健常者的基準值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的對映異構體的基準值）}]。
[0035] 本發(fā)明的疾病樣品分析系統(tǒng)中，有下述情況：上述病態(tài)信息輸出部是，當上述病態(tài) 指標值為2. 0或2. 0以上時，輸出上述被檢者罹患上述疾病的上述被檢者的病態(tài)信息。
[0036] 本發(fā)明的疾病樣品分析系統(tǒng)中，有下述情況：在上述疾病為腎臟病時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為選自D-絲氨酸、D-蘇氨酸、D-丙氨酸、D-天冬酰胺、D-別蘇氨酸、D-谷氨酰胺、D-脯氨酸和D-苯基丙氨酸中的1種或2種以上的氨基酸，在上述疾病為前列腺癌時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-組氨酸和/或D-天冬酰胺，在上述疾病為骨質疏松癥時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-天冬酰胺，在上述疾病為擴張型心肌病時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-絲氨酸、L-精氨酸、D-谷氨酸和D-脯氨酸，在上述疾病為更年期障礙時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-組氨酸、L-苯基丙氨酸和D-天冬氨酸，在上述疾病為肉瘤時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-精氨酸，在上述疾病為阿爾茨海默病時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為 D-別異亮氨酸、D-絲氨酸、D-丙氨酸、D-蛋氨酸、D-亮氨酸、D-天冬氨酸、D-苯基丙氨酸和L-苯基丙氨酸，在上述疾病為DAO缺損時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-絲氨酸、D-別蘇氨酸、D-丙氨酸、D-脯氨酸、D-殼氨酸和D-苯基丙氨酸，在上述疾病為DDO 缺損時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-天冬酰胺、D-天冬氨酸和D-精氨酸，在上述疾病為苯丙酮酸尿癥時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-苯基丙氨酸，在上述疾病為楓糖尿癥時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-纈氨酸、L-別異亮氨酸、 D-異亮氨酸、L-異亮氨酸和L-亮氨酸，在上述疾病為類風濕性關節(jié)炎時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-谷氨酸、L-谷氨酰胺和L-半胱氨酸，在上述疾病為腎臟癌時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-絲氨酸和D-丙氨酸，在上述疾病為肺癌時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-丙氨酸，在上述疾病為心血管疾病時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-精氨酸和L-谷氨酸，在上述疾病為多發(fā)性硬化癥時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-絲氨酸和L-半胱氨酸，在上述疾病為急性骨髓性白血病時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-半胱氨酸，在上述疾病為淋巴瘤時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-半胱氨酸，在上述疾病為急性淋巴性白血病時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-谷氨酸和L-半胱氨酸，在上述疾病為銀屑病時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-精氨酸和L-半胱氨酸，在上述疾病為糖尿病時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-丙氨酸、L-半胱氨酸和L-谷氨酸。
[0037] 本發(fā)明提供疾病樣品分析方法。本發(fā)明的疾病樣品分析方法包括下述步驟：測定被檢者的生物材料中的氨基酸立體異構體的量的步驟；將該氨基酸立體異構體的量代入判別式進行計算，獲得病態(tài)指標值的步驟；和基于上述病態(tài)指標值輸出上述患者的病態(tài)信息的步驟。
[0038] 本發(fā)明的疾病樣品分析方法中，有下述情況：上述判別式為：
[0039] 病態(tài)指標值=(上述被檢者的生物材料中的測定值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的測定值）八健常者的生物材料中的與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的基準值），或者
[0040] 病態(tài)指標值=[(上述被檢者的生物材料中的測定值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的測定值）/{(上述被檢者的生物材料中的測定值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的測定值）+(上述被檢者的生物材料中的測定值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的對映異構體的測定值）}] + [(健常者的基準值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的基準值）/{(上述健常者的基準值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的基準值）+(上述健常者的基準值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的對映異構體的基準值）}]。
[0041] 本發(fā)明的疾病樣品分析方法中，有下述情況：基于上述病態(tài)指標值輸出上述被檢者的病態(tài)信息的步驟是，當上述病態(tài)指標值為2. 0或2. 0以上時，輸出上述被檢者罹患上述疾病的上述被檢者的病態(tài)信息的步驟。
[0042] 本發(fā)明的疾病樣品分析方法中，有下述情況：在上述疾病為腎臟病時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為選自D-絲氨酸、D-蘇氨酸、D-丙氨酸、D-天冬酰胺、D-別蘇氨酸、D-谷氨酰胺、D-脯氨酸和D-苯基丙氨酸中的1種或2種以上的氨基酸，在上述疾病為前列腺癌時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-組氨酸和/或D-天冬酰胺，在上述疾病為骨質疏松癥時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-天冬酰胺，在上述疾病為擴張型心肌病時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-絲氨酸、L-精氨酸、D-谷氨酸和D-脯氨酸，在上述疾病為更年期障礙時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-組氨酸、L-苯基丙氨酸和D-天冬氨酸，在上述疾病為肉瘤時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-精氨酸，在上述疾病為阿爾茨海默病時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為 D-別異亮氨酸、D-絲氨酸、D-丙氨酸、D-蛋氨酸、D-亮氨酸、D-天冬氨酸、D-苯基丙氨酸和L-苯基丙氨酸，在上述疾病為DAO缺損時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-絲氨酸、D-別蘇氨酸、D-丙氨酸、D-脯氨酸、D-殼氨酸和D-苯基丙氨酸，在上述疾病為DDO 缺損時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-天冬酰胺、D-天冬氨酸和D-精氨酸，在上述疾病為苯丙酮酸尿癥時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-苯基丙氨酸，在上述疾病為楓糖尿癥時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-纈氨酸、L-別異亮氨酸、 D-異亮氨酸、L-異亮氨酸和L-亮氨酸，在上述疾病為類風濕性關節(jié)炎時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-谷氨酸、L-谷氨酰胺和L-半胱氨酸，在上述疾病為腎臟癌時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-絲氨酸和D-丙氨酸，在上述疾病為肺癌時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-丙氨酸，在上述疾病為心血管疾病時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-精氨酸和L-谷氨酸，在上述疾病為多發(fā)性硬化癥時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-絲氨酸和L-半胱氨酸，在上述疾病為急性骨髓性白血病時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-半胱氨酸，在上述疾病為淋巴瘤時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-半胱氨酸，在上述疾病為急性淋巴性白血病時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-谷氨酸和L-半胱氨酸，在上述疾病為銀屑病時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-精氨酸和L-半胱氨酸，在上述疾病為糖尿病時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-丙氨酸、L-半胱氨酸和L-谷氨酸。
[0043] 本發(fā)明提供疾病的診斷方法。本發(fā)明的疾病的診斷方法包括下述步驟：測定被檢者的生物材料中的氨基酸立體異構體的量的步驟；和基于該氨基酸立體異構體的量的測定值與健常者的基準值進行上述疾病的診斷的步驟。
[0044] 本發(fā)明提供疾病的診斷方法。本發(fā)明的疾病的診斷方法包括下述步驟：將被檢者的生物材料中的氨基酸立體異構體進行分離、定量的步驟；將該氨基酸立體異構體的量代入判別式進行計算，獲得病態(tài)指標值的機構；和基于上述病態(tài)指標值診斷上述患者的步驟。 [0045] 本發(fā)明的疾病的診斷方法中，有下述情況：上述判別式為：
[0046] 病態(tài)指標值=(上述被檢者的生物材料中的測定值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的測定值）八健常者的生物材料中的與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的基準值），或者
[0047] 病態(tài)指標值=[(上述被檢者的生物材料中的測定值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的測定值）/{(上述被檢者的生物材料中的測定值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的測定值）+ (上述被檢者的生物材料中的測定值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的對映異構體的測定值）}] + [(健常者的基準值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的基準值）/{(上述健常者的基準值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的基準值）+ (上述健常者的基準值中與上述疾病相關的氨基酸立體異構體的對映異構體的基準值）}]。
[0048] 本發(fā)明的疾病的診斷方法中，有下述情況：基于上述病態(tài)指標值輸出上述被檢者的病態(tài)信息的步驟是，當上述病態(tài)指標值為2. 0或2. 0以上時,診斷上述被檢者摧患上述疾病的步驟。
[0049] 本發(fā)明的疾病的診斷方法中，有下述情況：在上述疾病為腎臟病時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為選自D-絲氨酸、D-蘇氨酸、D-丙氨酸、D-天冬酰胺、D-別蘇氨酸、 D-谷氨酰胺、D-脯氨酸和D-苯基丙氨酸中的1種或2種以上的氨基酸，在上述疾病為前列腺癌時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-組氨酸和/或D-天冬酰胺，在上述疾病為骨質疏松癥時，與上述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-天冬酰胺。
[0050] 本發(fā)明的所謂氨基酸立體異構體，是指蛋白質的翻譯所用的20種氨基酸、該氨基酸中除了甘氨酸以外的19種L-氨基酸的光學異構體D-氨基酸19種、以及L-別蘇氨酸、 D-別蘇氨酸和D-別異亮氨酸。
[0051] 本發(fā)明的疾病樣品分析裝置包括下述機構：測定生物材料中的氨基酸立體異構體的量的機構；將該氨基酸立體異構體的量代入判別式進行計算，獲得病態(tài)指標值的機構；和基于上述病態(tài)指標值輸出上述患者的病態(tài)信息的機構。測定上述生物材料中的氨基酸立體異構體的量的機構為樣品的自動分取部、和利用反相柱等的HPLC分離和峰檢測部。將上述氨基酸立體異構體的量代入判別式進行計算，獲得病態(tài)指標值的機構為存儲上述判別式、各疾病的健常者的基準值等數(shù)據(jù)的存儲部、和基于該數(shù)據(jù)進行判別式的計算的演算部。基于上述病態(tài)指標值輸出上述患者的病態(tài)信息的機構為病態(tài)信息選擇部和病態(tài)信息輸出部。此外，本發(fā)明的疾病樣品分析裝置中包括將全體總括地控制的CPU等控制部、與輸入裝置和輸出裝置連接的輸入輸出接口部、和能夠與網(wǎng)絡通信連接的通信接口部。
[0052] 在本發(fā)明中所謂生物材料，是指血液、血漿、血清、腹水、羊水、淋巴液、唾液、精液、尿等體液，糞便、汗、鼻涕等排泄物，和體毛、指甲、皮膚組織、內臟組織等身體組織，但不限定于此。
[0053] 在本發(fā)明中，所謂判別式，有為算出氨基酸立體異構體量的被檢者測定值是預先由健常者的測定值設定的基準值的多少倍的式子的情況。此外，有為算出上述氨基酸立體異構體的量相對于氨基酸立體異構體的量與該異構體的對映異構體的量之和的比例或百分率的式子的情況。此外，有為由多種氨基酸立體異構體的量的組合算出病態(tài)指標值的式子的情況。有上述多個氨基酸立體異構體為具有成為D-氨基酸氧化酶或D-天冬氨酸氧化酶的底物等共同點的氨基酸組的情況。例如，有在成為同一酶的底物的氨基酸立體異構體中，將與疾病相關的氨基酸的量以與疾病不相關的氨基酸的量進行標準化的情況。
[0054] 本發(fā)明的判別式中，所謂健常者的生物材料中的與疾病相關的氨基酸立體異構體的基準值，對于與疾病相關的氨基酸立體異構體，由健常者的生物材料、該氨基酸立體異構體沒有相關性的其它疾病患者的生物材料中的任一方或兩方的生物材料中的量的平均值或中心值決定。有上述基準值被預先設定的情況，但也有為在本發(fā)明的實施時作為對照實驗被準備，同時被試驗的生物材料的測定值、或其平均值或中心值的情況。
[0055] 作為本發(fā)明的病態(tài)信息，有下述情況：由本發(fā)明的判別式算出的病態(tài)指標值為 1. 〇或其附近時，輸出被檢者為健常者。在上述病態(tài)指標值為2. 0或2. 0以上時，輸出被檢者罹患疾病的可能性大。然而，有下述情況：即使上述病態(tài)指標值小于2. 0,也輸出被檢者有罹患上述疾病的可能性。
[0056] 通過本發(fā)明的疾病樣品分析裝置、分析系統(tǒng)和分析方法獲得的被檢者的生物材料中的氨基酸立體異構體的定量數(shù)據(jù)，作為各種疾病的診斷和預防的指標來使用。此外，上述定量數(shù)據(jù)作為上述疾病病情的進展的指標來使用。此外，上述定量數(shù)據(jù)作為用于判斷用于上述疾病的治療和/或預防的藥物的藥效的指標來使用。此外，上述定量數(shù)據(jù)作為用于判斷藥物、準藥品、化妝品、食品其它化學物質對生物體的影響、其它物理和/或生物學環(huán)境因素對成體的影響的指標來使用。
[0057] 本說明書中所提及的全部文獻，其整體通過引用并入本說明書中。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0058] 圖1為將對于健常者和各種疾病患者的各個最初樣品的D-氨基酸的分析結果歸納而得的表。
[0059] 圖2-1為D-絲氨酸的血清濃度的每個疾病樣品的分布圖。
[0060] 圖2-2為L-絲氨酸的血清濃度的每個疾病樣品的分布圖。
[0061] 圖2-3為D-蘇氨酸的血清濃度的每個疾病樣品的分布圖。
[0062] 圖2-4為L-蘇氨酸的血清濃度的每個疾病樣品的分布圖。
[0063] 圖2-5為D-丙氨酸的血清濃度的每個疾病樣品的分布圖。
[0064] 圖2-6為L-丙氨酸的血清濃度的每個疾病樣品的分布圖。
[0065] 圖3-1為絲氨酸的樣品的D-體量相對于D-體和L-體的量之和的百分率（％ D) 的分布圖。
[0066] 圖3-2為蘇氨酸的樣品的D-體量相對于D-體和L-體的量之和的百分率D) 的分布圖。
[0067] 圖3-3為丙氨酸的樣品的D-體量相對于D-體和L-體的量之和的百分率（％ D) 的分布圖。
[0068] 圖4-1為擴張型心肌病模型小鼠（MLP-K0小鼠，以下，稱為"疾病"。）3只、與對照正常小鼠（以下，稱為"正常"。）4只的尿中的D-絲氨酸濃度的平均值和標準誤差的棒圖。縱軸為D-絲氨酸濃度（納摩爾/mL)。
[0069] 圖4-2為擴張型心肌病模型小鼠（以下，稱為"疾病"。）3只、與對照正常小鼠（以下，稱為"正常"。）4只的尿中的L-絲氨酸濃度的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為L-絲氨酸濃度（納摩爾/mL)。
[0070] 圖4-3為擴張型心肌病模型小鼠（以下，稱為"疾病"。）3只、與對照正常小鼠（以下，稱為"正常"。）4只的尿中的總絲氨酸濃度（D-絲氨酸濃度和L-絲氨酸濃度之和）的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為總絲氨酸濃度（納摩爾/mL)。
[0071] 圖4-4為擴張型心肌病模型小鼠（以下，稱為"疾病"。）3只、與對照正常小鼠（以下，稱為"正常"。）4只的尿中的D-絲氨酸濃度相對于總絲氨酸濃度的百分率（％D)的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為％D。關于正常與疾病的顯著性差異，在Student的t檢驗中P小于0. 02。
[0072] 圖4-5為擴張型心肌病模型小鼠（以下，稱為"疾病"。）3只、與對照正常小鼠（以下，稱為"正常"。）4只的尿中的D-精氨酸濃度的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為D-精氨酸濃度（納摩爾/mL)。
[0073] 圖4-6為擴張型心肌病模型小鼠（以下，稱為"疾病"。）3只、與對照正常小鼠（以下，稱為"正常"。）4只的尿中的L-精氨酸濃度的平均值和標準誤差的棒圖。縱軸為L-精氨酸濃度（納摩爾/mL)。關于正常與疾病的顯著性差異，在Student的t檢驗中P小于 0. Olo
[0074] 圖4-7為擴張型心肌病模型小鼠（以下，稱為"疾病"。）3只、與對照正常小鼠（以下，稱為"正常"。）4只的尿中的總精氨酸濃度（D-精氨酸濃度和L-精氨酸濃度之和）的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為總精氨酸濃度（納摩爾/mL)。
[0075] 圖4-8為擴張型心肌病模型小鼠（以下，稱為"疾病"。）3只、與對照正常小鼠（以下，稱為"正常"。）4只的尿中的D-谷氨酸濃度的平均值和標準誤差的棒圖。縱軸為D-谷氨酸濃度（納摩爾/mL)。關于正常與疾病的顯著性差異，在Student的t檢驗中P小于 0· 02。
[0076] 圖4-9為擴張型心肌病模型小鼠（以下，稱為"疾病"。）3只、與對照正常小鼠（以下，稱為"正常"。）4只的尿中的L-谷氨酸濃度的平均值和標準誤差的棒圖。縱軸為L-谷氨酸濃度（納摩爾/mL)。
[0077] 圖4-10為擴張型心肌病模型小鼠（以下，稱為"疾病"。）3只、與對照正常小鼠 (以下，稱為"正常"。）4只的尿中的總谷氨酸濃度（D-谷氨酸濃度和L-谷氨酸濃度之和）的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為總谷氨酸濃度（納摩爾/mL)。
[0078] 圖4-11為擴張型心肌病模型小鼠（以下，稱為"疾病"。）3只、與對照正常小鼠 (以下，稱為"正常"。）4只的尿中的D-脯氨酸濃度的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為 D-脯氨酸濃度（納摩爾/mL)。關于正常與疾病的顯著性差異，在Student的t檢驗中P小于 0. 01。
[0079] 圖4-12為擴張型心肌病模型小鼠（以下，稱為"疾病"。）3只、與對照正常小鼠（以下，稱為"正常"。）4只的尿中的L-脯氨酸濃度的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為L-脯氨酸濃度（納摩爾/mL)。
[0080] 圖4-13為擴張型心肌病模型小鼠（以下，稱為"疾病"。）3只、與對照正常小鼠 (以下，稱為"正常"。）4只的尿中的總脯氨酸濃度（D-脯氨酸濃度和L-脯氨酸濃度之和）的平均值和標準誤差的棒圖。縱軸為總脯氨酸濃度（納摩爾/mL)。
[0081] 圖4-14為擴張型心肌病模型小鼠（以下，稱為"疾病"。）3只、與對照正常小鼠 (以下，稱為"正常"。）4只的尿中的D-賴氨酸濃度的平均值和標準誤差的棒圖。縱軸為 D-賴氨酸濃度（納摩爾/mL)。關于正常與疾病的顯著性差異，在Student的t檢驗中P小于 0. 01。
[0082] 圖4-15為擴張型心肌病模型小鼠（以下，稱為"疾病"。）3只、與對照正常小鼠（以下，稱為"正常"。）4只的尿中的L-賴氨酸濃度的平均值和標準誤差的棒圖。縱軸為L-賴氨酸濃度（納摩爾/mL)。
[0083] 圖4-16為擴張型心肌病模型小鼠（以下，稱為"疾病"。）3只、與對照正常小鼠 (以下，稱為"正常"。）4只的尿中的總賴氨酸濃度（D-賴氨酸濃度和L-賴氨酸濃度之和）的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為總賴氨酸濃度（納摩爾/mL)。
[0084] 圖5-1為表示從9周齡HR-I小鼠摘出卵巢后的更年期模型小鼠（以下，稱為 "0VX"。）12只、與對相同周齡的雌小鼠不進行卵巢摘出而僅進行了皮膚的切開和縫合的對照小鼠（以下，稱為"sham"。）6只的體重的平均值和標準偏差的變化的圖?？v軸表示小鼠的體重（克）。涂黑和斜線影線的棒圖分別表示施行手術前的9周齡小鼠、與施行手術后第1周（10周齡）、第2周（11周齡）、第3周（12周齡）、第4周（13周齡）的更年期模型小鼠（OVX)和對照小鼠（sham)的體重的平均值和標準偏差。關于更年期模型小鼠（OVX) 和對照小鼠（sham)的體重的顯著性差異，在Student的t檢驗中P小于0· 05( * )或小于 0. 01 ( * * )。對于摘出卵巢后的更年期模型小鼠，從術后第2周起體重與對照小鼠相比顯著地增加，顯示出更年期模型小鼠制作成功了。
[0085] 圖5-2為表示更年期模型小鼠（0VX)3只中的第1只（0VX-3)的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的表。甘氨酸由于不存在光學異構體，
[0086] 因此記載于L體的欄中。氨基酸全部通過NBD-F而被熒光衍生物化，使用本發(fā)明的全部氨基酸光學異構體含量分析裝置進行了解析。色氨酸由于NBD衍生物的靈敏度低，因此在這次解析中設為nd。關于半胱氨酸，由于通過空氣氧化而生成胱氨酸，因此作為半胱氨酸的含量極其低。因此在這次解析中設為nd。
[0087] 圖5-3為表示更年期模型小鼠（0VX)3只中的第2只（0VX-4)的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的表。甘氨酸由于不存在光學異構體，因此記載于L體的欄中。氨基酸全部通過NBD-F而被熒光衍生物化，使用本發(fā)明的全部氨基酸光學異構體含量分析裝置進行了解析。色氨酸由于NBD衍生物的靈敏度低，因此在這次解析中設為nd。關于半胱氨酸，由于通過空氣氧化而生成胱氨酸，因此作為半胱氨酸的含量極其低。因此在這次解析中設為nd。
[0088] 圖5-4為表示更年期模型小鼠（0VX)3只中的第3只（0VX-5)的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的表。甘氨酸由于不存在光學異構體，因此記載于L體的欄中。氨基酸全部通過NBD-F而被熒光衍生物化，使用本發(fā)明的全部氨基酸光學異構體含量分析裝置進行了解析。色氨酸由于NBD衍生物的靈敏度低，因此在這次解析中設為nd。關于半胱氨酸，由于通過空氣氧化而生成胱氨酸，因此作為半胱氨酸的含量極其低。因此在這次解析中設為nd。
[0089] 圖5-5為表示對照小鼠（sham) 4只中的第1只（Sham-16)的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的表。甘氨酸由于不存在光學異構體，因此記載于L體的欄中。氨基酸全部通過NBD-F而被熒光衍生物化，使用本發(fā)明的全部氨基酸光學異構體含量分析裝置進行了解析。色氨酸由于NBD衍生物的靈敏度低，因此在這次解析中設為nd。關于半胱氨酸，由于通過空氣氧化而生成胱氨酸，因此作為半胱氨酸的含量極其低。因此在這次解析中設為nd。
[0090] 圖5-6為表示對照小鼠（sham) 4只中的第2只（Sham-17)的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的表。甘氨酸由于不存在光學異構體，因此記載于L體的欄中。氨基酸全部通過NBD-F而被熒光衍生物化，使用本發(fā)明的全部氨基酸光學異構體含量分析裝置進行了解析。色氨酸由于NBD衍生物的靈敏度低，因此在這次解析中設為nd。關于半胱氨酸，由于通過空氣氧化而生成胱氨酸，因此作為半胱氨酸的含量極其低。因此在這次解析中設為nd。
[0091] 圖5-7為表示對照小鼠（sham) 4只中的第3只（Sham-19)的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的表。甘氨酸由于不存在光學異構體，因此記載于L體的欄中。氨基酸全部通過NBD-F而被熒光衍生物化，使用本發(fā)明的全部氨基酸光學異構體含量分析裝置進行了解析。色氨酸由于NBD衍生物的靈敏度低，因此在這次解析中設為nd。關于半胱氨酸，由于通過空氣氧化而生成胱氨酸，因此作為半胱氨酸的含量極其低。因此在這次解析中設為nd。
[0092] 圖5-8為表示對照小鼠（sham) 4只中的第4只（Sham-20)的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的表。甘氨酸由于不存在光學異構體，因此記載于L體的欄中。氨基酸全部通過NBD-F而被熒光衍生物化，使用本發(fā)明的全部氨基酸光學異構體含量分析裝置進行了解析。色氨酸由于NBD衍生物的靈敏度低，因此在這次解析中設為nd。關于半胱氨酸，由于通過空氣氧化而生成胱氨酸，因此作為半胱氨酸的含量極其低。因此在這次解析中設為nd。
[0093] 圖5-9為將更年期模型小鼠（OVX) 3只和對照小鼠（sham) 4只的尿中的D-氨基酸含量進行比較的表。關于D-天冬氨酸，與更年期模型小鼠（OVX)相比對照小鼠（sham)低，關于顯著性差異，在Student的t檢驗中P為0. 015。
[0094] 圖5-10為將更年期模型小鼠（0VX)3只和對照小鼠（sham)4只的尿中的L-氨基酸含量進行比較的表。關于L-組氨酸和L-苯基丙氨酸，與對照小鼠（sham)相比更年期模型小鼠（OVX)低，關于顯著性差異，在Student的t檢驗中P分別為0. 017和0. 037。
[0095] 圖5-11為將更年期模型小鼠（OVX) 3只和對照小鼠（sham) 4只的尿中的各氨基酸的D-體濃度相對于D-體濃度和L-體的濃度之和的百分率D)進行比較的表。關于蘇氨酸和異亮氨酸，生物體內的D-體成為別體，因此％ D作為D-別體濃度相對于D-別體濃度和L-體濃度之和的百分率來評價。關于D-天冬氨酸，與對照小鼠（sham)相比更年期模型小鼠（OVX)低，關于顯著性差異，在Student的t檢驗中P為0. 002。
[0096] 圖5-12為將更年期模型小鼠（0VX)3只和對照小鼠（sham)4只的尿中的各D-氨基酸濃度相對于全部L-氨基酸的濃度之和的百分率D/總L)進行比較的表。關于D-天冬氨酸，與對照小鼠（sham)相比更年期模型小鼠（OVX)低，關于顯著性差異，在Student的 t檢驗中P為0.005。
[0097] 圖5-13為將更年期模型小鼠（OVX) 3只和對照小鼠（sham) 4只的尿中的各D-氨基酸濃度相對于全部D-氨基酸的濃度之和的百分率D/總D)進行比較的表。關于D-天冬氨酸，與對照小鼠（sham)相比更年期模型小鼠（OVX)低，關于顯著性差異，在Student的 t檢驗中P為0.017。
[0098] 圖5-14為將更年期模型小鼠（0VX)3只和對照小鼠（sham)4只的尿中的各D-氨基酸濃度相對于D-谷氨酸濃度的百分率（％D/D-Glu)進行比較的表。D-天冬氨酸為酸性 D-氨基酸，因此以被認為受到同樣的代謝的D-谷氨酸濃度進行校正后評價。即使是％ D/ D-Glu，關于D-天冬氨酸，與對照小鼠（sham)相比更年期模型小鼠（OVX)低，關于顯著性差異，在Student的t檢驗中P為0. 006。
[0099] 圖6-1為表示移植了 2X IO7個肉瘤細胞的ICR系雄6周齡小鼠中，移植3周后確認了外植的腫瘤的生長的個體3只中的第1只（S3)的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的表。甘氨酸由于不存在光學異構體，因此記載于L體的欄中。氨基酸全部通過 NBD-F而被熒光衍生物化，使用本發(fā)明的全部氨基酸光學異構體含量分析裝置進行了解析。色氨酸由于NBD衍生物的靈敏度低，因此在這次解析中設為nd。關于半胱氨酸，由于通過空氣氧化而生成胱氨酸，因此作為半胱氨酸的含量極其低。因此在這次解析中設為nd。
[0100] 圖6-2為表示移植了 2X IO7個肉瘤細胞的ICR系雄6周齡小鼠中，移植3周后確認了外植的腫瘤的生長的個體3只中的第2只（S4)的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的表。甘氨酸由于不存在光學異構體，因此記載于L體的欄中。氨基酸全部通過 NBD-F而被熒光衍生物化，使用本發(fā)明的全部氨基酸光學異構體含量分析裝置進行了解析。色氨酸由于NBD衍生物的靈敏度低，因此在這次解析中設為nd。關于半胱氨酸，由于通過空氣氧化而生成胱氨酸，因此作為半胱氨酸的含量極其低。因此在這次解析中設為nd。
[0101] 圖6-3為表示移植了 2X IO7個肉瘤細胞的ICR系雄6周齡小鼠中，移植3周后確認了外植的腫瘤的生長的個體3只中的第3只（S5)的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的表。甘氨酸由于不存在光學異構體，因此記載于L體的欄中。氨基酸全部通過 NBD-F而被熒光衍生物化，使用本發(fā)明的全部氨基酸光學異構體含量分析裝置進行了解析。色氨酸由于NBD衍生物的靈敏度低，因此在這次解析中設為nd。關于半胱氨酸，由于通過空氣氧化而生成胱氨酸，因此作為半胱氨酸的含量極其低。因此在這次解析中設為nd。
[0102] 圖6-4為表示作為肉瘤移植小鼠的對照實驗而在相同環(huán)境下飼養(yǎng)的ICR系雄9周齡小鼠個體3只中的第1只（C3)的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的表。甘氨酸由于不存在光學異構體，因此記載于L體的欄中。氨基酸全部通過NBD-F而被熒光衍生物化，使用本發(fā)明的全部氨基酸光學異構體含量分析裝置進行了解析。色氨酸由于NBD衍生物的靈敏度低，因此在這次解析中設為nd。關于半胱氨酸，由于通過空氣氧化而生成胱氨酸，因此作為半胱氨酸的含量極其低。因此在這次解析中設為nd。
[0103] 圖6-5為表示作為肉瘤移植小鼠的對照實驗而在相同環(huán)境下飼養(yǎng)的ICR系雄9周齡小鼠個體3只中的第2只（C4)的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的表。甘氨酸由于不存在光學異構體，因此記載于L體的欄中。氨基酸全部通過NBD-F而被熒光衍生物化，使用本發(fā)明的全部氨基酸光學異構體含量分析裝置進行了解析。色氨酸由于NBD衍生物的靈敏度低，因此在這次解析中設為nd。關于半胱氨酸，由于通過空氣氧化而生成胱氨酸，因此作為半胱氨酸的含量極其低。因此在這次解析中設為nd。
[0104] 圖6-6為表示作為肉瘤移植小鼠的對照實驗而在相同環(huán)境下飼養(yǎng)的ICR系雄9周齡小鼠個體3只中的第3只（C5)的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的表。甘氨酸由于不存在光學異構體，因此記載于L體的欄中。氨基酸全部通過NBD-F而被熒光衍生物化，使用本發(fā)明的全部氨基酸光學異構體含量分析裝置進行了解析。色氨酸由于NBD衍生物的靈敏度低，因此在這次解析中設為nd。關于半胱氨酸，由于通過空氣氧化而生成胱氨酸，因此作為半胱氨酸的含量極其低。因此在這次解析中設為nd。
[0105] 圖6-7為將肉瘤移植小鼠3只（S3、S4和S5)和對照小鼠（C3、C4和C5) 3只的尿中的D-氨基酸含量進行比較的表。關于D-精氨酸，與對照小鼠相比肉瘤移植小鼠高，關于顯著性差異，在Student的t檢驗中P為0. 008。
[0106] 圖6-8為將肉瘤移植小鼠3只（S3、S4和S5)和對照小鼠（C3、C4和C5) 3只的尿中的L-氨基酸含量進行比較的表。
[0107] 圖6-9為將肉瘤移植小鼠3只（S3、S4和S5)和對照小鼠（C3、C4和C5) 3只的尿中的各氨基酸的D-體濃度相對于D-體濃度和L-體的濃度之和的百分率（％ D)進行比較的表。肉瘤移植小鼠的絲氨酸的％ D比對照小鼠低，關于顯著性差異，在Student的t檢驗中 P 為 0. 016。
[0108] 圖6-10為將肉瘤移植小鼠3只（S3、S4和S5)和對照小鼠（C3、C4和C5) 3只的尿中的各D-氨基酸濃度相對于全部L-氨基酸的濃度之和的百分率（％ D/總L)進行比較的表。
[0109] 圖6-11為將肉瘤移植小鼠3只（S3、S4和S5)和對照小鼠（C3、C4和C5)3只的尿中的各D-氨基酸濃度相對于全部D-氨基酸的濃度之和的百分率（％ D/總D)進行比較的表。關于D-天冬酰胺和D-精氨酸，有與對照小鼠相比肉瘤移植小鼠高的傾向，關于D-精氨酸的顯著性差異，在Student的t檢驗中P為0. 035。
[0110] 圖6-12為將肉瘤移植小鼠3只（S3、S4和S5)和對照小鼠（C3、C4和C5)3只的尿中的各D-氨基酸濃度相對于D-天冬酰胺濃度的百分率（％D/D-Asn)進行比較的表。由于 D-天冬酰胺在哺乳類尿中較高濃度地存在，以及相對于總D-氨基酸濃度的比率最穩(wěn)定，因此作為尿中濃度的校正的指標使用。關于D-精氨酸，有與對照小鼠相比肉瘤移植小鼠高的傾向，關于顯著性差異，在Student的t檢驗中P為0.016。
[0111] 圖7-1為阿爾茨海默病模型小鼠（淀粉樣β前體蛋白質高表達轉基因小鼠 Tg2576半合子雄8周齡小鼠，以下，稱為"hemi"。）3只、與對照正常小鼠（C57BL，以下，稱為 "Wild"。）3只的尿中的D-絲氨酸濃度（D-Ser)、L-絲氨酸濃度（L-Ser)和兩者合計（Ser) 的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為濃度（納摩爾/mL)。
[0112] 圖7-2為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi)3只、與對照正常小鼠（Wild)3只的尿中的D-絲氨酸濃度相對于總絲氨酸濃度的百分率（％D)的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為％ D。
[0113] 圖7-3為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi)3只、與對照正常小鼠（Wild)3只的尿中的D-絲氨酸相對于D-別蘇氨酸濃度的相對比（D-Ser/D-allo-Thr)，或尿中的D-絲氨酸相對于D-別異亮氨酸濃度的相對比（D-Ser/D-allo-Ile)的圖。關于尿中的D-絲氨酸相對于D-別蘇氨酸濃度的相對比，尿中的D-絲氨酸相對于D-別異亮氨酸濃度的相對比，都是阿爾茨海默病模型小鼠比對照小鼠高，關于顯著性差異，在Student的t檢驗中P都小于 0. Olo
[0114] 圖7-4為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi)3只、與對照正常小鼠（Wild)3只的尿中的D-丙氨酸濃度（D-Ala)、L-丙氨酸濃度（L-Ala)和兩者合計（Ala)的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為濃度（納摩爾/mL)。關于尿中的D-丙氨酸濃度，阿爾茨海默病模型小鼠比對照正常小鼠高，關于顯著性差異，在Student的t檢驗中P小于0. 01。
[0115] 圖7-5為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi)3只、與對照正常小鼠（Wild)3只的尿中的D-丙氨酸濃度相對于總丙氨酸濃度的百分率（％D)的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為％D。關于尿中的D-丙氨酸濃度相對于總丙氨酸濃度的百分率（％D)，阿爾茨海默病模型小鼠比對照正常小鼠高，關于顯著性差異，在Student的t檢驗中P小于0. 01。
[0116] 圖7-6為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi)3只、與對照正常小鼠（Wild)3只的尿中的D-蛋氨酸濃度（D-Met)、L_蛋氨酸濃度（L-Met)和兩者合計（Met)的平均值和標準誤差的棒圖。縱軸為濃度（納摩爾/mL)。關于尿中的D-Met濃度，有阿爾茨海默病模型小鼠比對照正常小鼠高的傾向。
[0117] 圖7-7為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi)3只、與對照正常小鼠（Wild)3只的尿中的D-蛋氨酸濃度相對于總絲氨酸濃度的百分率（％D)的平均值和標準誤差的棒圖。縱軸為％ D。
[0118] 圖7-8為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi)3只、與對照正常小鼠（Wild)3只的尿中的D-蛋氨酸相對于D-別蘇氨酸濃度的相對比（D-Met/D-allo-Thr)或尿中的D-蛋氨酸相對于D-別異亮氨酸濃度的相對比（D-Met/D-allo-Ile)的圖。關于尿中的D-蛋氨酸相對于 D-別蘇氨酸濃度的相對比、尿中的D-蛋氨酸相對于D-別異亮氨酸濃度的相對比，都是阿爾茨海默病模型小鼠比對照小鼠高，關于顯著性差異，在Student的t檢驗中P都小于0. 05。
[0119] 圖7-9為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi)3只、與對照正常小鼠（Wild)3只的尿中的D-亮氨酸濃度（D-Leu)、L-亮氨酸濃度（L-Leu)和兩者合計（Leu)的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為濃度（納摩爾/mL)。
[0120] 圖7-10為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi)3只、與對照正常小鼠（Wild)3只的尿中的D-亮氨酸濃度相對于總絲氨酸濃度的百分率（％D)的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為％ D。
[0121] 圖7-11為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi)3只、與對照正常小鼠（Wild)3只的尿中的D-亮氨酸相對于D-別蘇氨酸濃度的相對比（D-Leu/D-al Io-Thr)或尿中的D-亮氨酸相對于D-別異亮氨酸濃度的相對比（D-Leu/D-allo-Ile)的圖。關于尿中的D-亮氨酸相對于D-別蘇氨酸濃度的相對比、尿中的D-亮氨酸相對于D-別異亮氨酸濃度的相對比，都是阿爾茨海默病模型小鼠比對照小鼠高，關于顯著性差異，在Student的t檢驗中P分別為小于0. 05和小于0. 01。
[0122] 圖7-12為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi)3只、與對照正常小鼠（Wild)3只的尿中的D-天冬氨酸濃度（D-Asp)、L-天冬氨酸濃度（L-Asp)和兩者合計（Asp)的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為濃度（納摩爾/mL)。關于尿中的D-天冬氨酸濃度，阿爾茨海默病模型小鼠比對照正常小鼠低，關于顯著性差異，在Student的t檢驗中P小于0. 05。
[0123] 圖7-13為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi)3只、與對照正常小鼠（Wild)3只的尿中的D-天冬氨酸濃度相對于總天冬氨酸濃度的百分率（％D)的平均值和標準誤差的棒圖。縱軸為％ D。
[0124] 圖7-14為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi)3只、與對照正常小鼠（Wild)3只的尿中的D-苯基丙氨酸濃度（D-Phe)、L_苯基丙氨酸濃度（L-Phe)和兩者合計（Phe)的平均值和標準誤差的棒圖。縱軸為濃度（納摩爾/mL)。
[0125] 圖7-15為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi)3只、與對照正常小鼠（Wild)3只的尿中的D-苯基丙氨酸濃度相對于總苯基丙氨酸濃度的百分率（％D)的平均值和標準誤差的棒圖。縱軸為％ D。
[0126] 圖7-16為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi) 3只、與對照正常小鼠（Wild) 3只的尿中的D-苯基丙氨酸相對于D-別蘇氨酸濃度的相對比（D-Phe/D-allo-Thr)或尿中的D-苯基丙氨酸相對于D-別異亮氨酸濃度的相對比（D-Phe/D-allo-Ile)的圖。關于尿中的D-苯基丙氨酸相對于D-別異亮氨酸濃度的相對比，阿爾茨海默病模型小鼠比對照小鼠高，關于顯著性差異，在Student的t檢驗中P小于0. 05。
[0127] 圖8-1為表示D-氨基酸氧化酶（DAO)野生型小鼠（ddY/DAO+，以下，稱為 "DA0+/+"。）個體3只中的第1只（DAO+/+ 1)的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的表。甘氨酸由于不存在光學異構體，因此記載于L體的欄中。氨基酸全部通過NBD-F而被熒光衍生物化，使用本發(fā)明的全部氨基酸光學異構體含量分析裝置進行了解析。色氨酸由于NBD衍生物的靈敏度低，因此在這次解析中設為nd。關于半胱氨酸，由于通過空氣氧化而生成胱氨酸，因此作為半胱氨酸的含量極其低。因此在這次解析中設為nd。
[0128] 圖8-2為表示D-氨基酸氧化酶（DAO)野生型小鼠（ddY/DAO+，以下，稱為 "DA0+/+"。）個體3只中的第2只（DA0+/+ 2)的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的表。甘氨酸由于不存在光學異構體，因此記載于L體的欄中。氨基酸全部通過NBD-F而被熒光衍生物化，使用本發(fā)明的全部氨基酸光學異構體含量分析裝置進行了解析。色氨酸由于NBD衍生物的靈敏度低，因此在這次解析中設為nd。關于半胱氨酸，由于通過空氣氧化而生成胱氨酸，因此作為半胱氨酸的含量極其低。因此在這次解析中設為nd。
[0129] 圖8-3為表示D-氨基酸氧化酶（DAO)野生型小鼠（ddY/DAO+，以下，稱為 "DA0+/+"。）個體3只中的第3只（DA0+/+ 3)的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的表。甘氨酸由于不存在光學異構體，因此記載于L體的欄中。氨基酸全部通過NBD-F而被熒光衍生物化，使用本發(fā)明的全部氨基酸光學異構體含量分析裝置進行了解析。色氨酸由于NBD衍生物的靈敏度低，因此在這次解析中設為nd。關于半胱氨酸，由于通過空氣氧化而生成胱氨酸，因此作為半胱氨酸的含量極其低。因此在這次解析中設為nd。
[0130] 圖8-4為表示D-氨基酸氧化酶（DAO)缺損小鼠（ddY/DA〇-，以下，稱為"DA0-/-"。）個體3只中的第1只（DAO-/- 1)的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的表。甘氨酸由于不存在光學異構體，因此記載于L體的欄中。氨基酸全部通過NBD-F而被熒光衍生物化，使用本發(fā)明的全部氨基酸光學異構體含量分析裝置進行了解析。色氨酸由于NBD衍生物的靈敏度低，因此在這次解析中設為nd。關于半胱氨酸，由于通過空氣氧化而生成胱氨酸，因此作為半胱氨酸的含量極其低。因此在這次解析中設為nd。
[0131] 圖8-5為表示D-氨基酸氧化酶（DAO)缺損小鼠（ddY/DAO-，以下，稱為"DAO-/-"。）個體3只中的第2只（DAO-/- 2)的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的表。甘氨酸由于不存在光學異構體，因此記載于L體的欄中。氨基酸全部通過NBD-F而被熒光衍生物化，使用本發(fā)明的全部氨基酸光學異構體含量分析裝置進行了解析。色氨酸由于NBD衍生物的靈敏度低，因此在這次解析中設為nd。關于半胱氨酸，由于通過空氣氧化而生成胱氨酸，因此作為半胱氨酸的含量極其低。因此在這次解析中設為nd。
[0132] 圖8-6為表示D-氨基酸氧化酶（DAO)缺損小鼠（ddY/DAO-，以下，稱為"DAO-/-"。）個體3只中的第3只（DAO-/- 3)的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的表。甘氨酸由于不存在光學異構體，因此記載于L體的欄中。氨基酸全部通過NBD-F而被熒光衍生物化，使用本發(fā)明的全部氨基酸光學異構體含量分析裝置進行了解析。色氨酸由于NBD衍生物的靈敏度低，因此在這次解析中設為nd。關于半胱氨酸，由于通過空氣氧化而生成胱氨酸，因此作為半胱氨酸的含量極其低。因此在這次解析中設為nd。
[0133] 圖8-7為將D-氨基酸氧化酶（DAO)野生型小鼠3只（DA0+/+ 1、DAO+/+ 2和 DAO+/+ 3)、與D-氨基酸氧化酶（DAO)缺損小鼠3只（DAO-/- UDAO-/- 2和DAO-/- 3)的尿中的D-氨基酸含量進行比較的表。關于D-絲氨酸、D-別蘇氨酸、D-丙氨酸、D-脯氨酸、 D-亮氨酸和D-苯基丙氨酸，與D-氨基酸氧化酶（DAO)野生型小鼠相比，DAO酶缺損小鼠顯著地高。
[0134] 圖8-8為將D-氨基酸氧化酶（DAO)野生型小鼠3只（DA0+/+ 1、DAO+/+ 2和 DAO+/+ 3)、與D-氨基酸氧化酶（DAO)缺損小鼠3只（DAO-/- UDAO-/- 2和DAO-/- 3)的尿中的L-氨基酸含量進行比較的表。
[0135] 圖8-9為將D-氨基酸氧化酶（DAO)野生型小鼠3只（DA0+/+ 1、DAO+/+ 2和 DAO+/+ 3)、與D-氨基酸氧化酶（DAO)缺損小鼠3只（DAO-/- UDAO-/- 2和DAO-/- 3)的尿中的各氨基酸的D-體濃度相對于D-體濃度和L-體的濃度之和的百分率D)進行比較的表。關于D-絲氨酸、D-別蘇氨酸、D-丙氨酸、D-脯氨酸、D-亮氨酸和D-苯基丙氨酸，與D-氨基酸氧化酶（DAO)野生型小鼠相比，DAO酶缺損小鼠顯著地高。
[0136] 圖8-10為將D-氨基酸氧化酶（DAO)野生型小鼠3只（DA0+/+ 1、DAO+/+ 2和 DAO+/+ 3)、與D-氨基酸氧化酶（DAO)缺損小鼠3只（DAO-/- UDAO-/- 2和DAO-/- 3)的尿中的各D-氨基酸濃度相對于全部L-氨基酸的濃度之和的百分率D/總L)進行比較的表。關于D-絲氨酸、D-別蘇氨酸、D-丙氨酸、D-亮氨酸和D-苯基丙氨酸，與D-氨基酸氧化酶（DAO)野生型小鼠相比，DAO酶缺損小鼠顯著地高。
[0137] 圖8-11為將D-氨基酸氧化酶（DAO)野生型小鼠3只（DA0+/+ 1、DAO+/+ 2和 DAO+/+ 3)、與D-氨基酸氧化酶（DAO)缺損小鼠3只（DAO-/- UDAO-/- 2和DAO-/- 3)的尿中的各D-氨基酸濃度相對于全部D-氨基酸的濃度之和的百分率D/總D)進行比較的表。
[0138] 圖8-12為將D-氨基酸氧化酶（DAO)野生型小鼠3只（DA0+/+ 1、DAO+/+ 2和 DAO+/+ 3)、與D-氨基酸氧化酶（DAO)缺損小鼠3只（DAO-/- UDAO-/- 2和DAO-/- 3)的尿中的各D-氨基酸濃度相對于D-天冬酰胺濃度的百分率（％D/D-Asn)進行比較的表。關于D-絲氨酸、D-別蘇氨酸、D-丙氨酸、D-脯氨酸、D-亮氨酸和D-苯基丙氨酸，與D-氨基酸氧化酶（DAO)野生型小鼠相比，DAO酶缺損小鼠顯著地高。
[0139] 圖9-1為表示D-天冬氨酸氧化酶（DDO)野生型小鼠（DD0+)個體4只中的第1只的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的波形圖。
[0140] 圖9-2為表示D-天冬氨酸氧化酶（DDO)野生型小鼠（DD0+)個體4只中的第2只的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的波形圖。
[0141] 圖9-3為表示D-天冬氨酸氧化酶（DDO)野生型小鼠（DD0+)個體4只中的第3只的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的波形圖。
[0142] 圖9-4為表示D-天冬氨酸氧化酶（DDO)野生型小鼠（DD0+)個體4只中的第4只的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的波形圖。
[0143] 圖9-5為表示D-天冬氨酸氧化酶（DDO)缺損小鼠（DD0-)個體4只中的第1只的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的波形圖。
[0144] 圖9-6為表示D-天冬氨酸氧化酶（DDO)缺損小鼠（DD0-)個體4只中的第2只的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的波形圖。
[0145] 圖9-7為表示D-天冬氨酸氧化酶（DDO)缺損小鼠（DD0-)個體4只中的第3只的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的波形圖。
[0146] 圖9-8為表示D-天冬氨酸氧化酶（DDO)缺損小鼠（DD0-)個體4只中的第4只的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的波形圖。
[0147] 圖10-1為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠， PahenuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的D-纈氨酸濃度（納摩爾/mL) 和標準誤差的棒圖。
[0148] 圖10-2為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠， PahenuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的D-別異亮氨酸濃度（納摩爾 /mL)和標準誤差的棒圖。
[0149] 圖10-3為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠， PahenuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的D-異亮氨酸濃度（納摩爾/ mL)和標準誤差的棒圖。
[0150] 圖10-4為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠， PahenuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的D-亮氨酸濃度（納摩爾/mL) 和標準誤差的棒圖。
[0151] 圖10-5為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠， PahenuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的D-苯基丙氨酸濃度（納摩爾 /mL)和標準誤差的棒圖。關于顯著性差異，p小于0. 01。
[0152] 圖10-6為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠， PahenuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的L-纈氨酸濃度（納摩爾/mL) 和標準誤差的棒圖。
[0153] 圖10-7為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠， PahenuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的L-別異亮氨酸濃度（納摩爾 /mL)和標準誤差的棒圖。
[0154] 圖10-8為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠， PahenuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的L-異亮氨酸濃度（納摩爾/ mL)和標準誤差的棒圖。
[0155] 圖10-9為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠， PahenuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的L-亮氨酸濃度（納摩爾/mL) 和標準誤差的棒圖。
[0156] 圖10-10為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠，Pah enuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的L-苯基丙氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于顯著性差異，p小于0. 01。
[0157] 圖10-11為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠，Pah enuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的D-纈氨酸濃度（納摩爾/ mL)和標準誤差的棒圖。
[0158] 圖10-12為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠，Pah enuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的D-別異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。
[0159] 圖10-13為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠，Pah enuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的D-異亮氨酸濃度（納摩爾 /mL)和標準誤差的棒圖。
[0160] 圖10-14為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠，Pah enuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的D-亮氨酸濃度（納摩爾/ mL)和標準誤差的棒圖。
[0161] 圖10-15為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠，Pah enuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的D-苯基丙氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。
[0162] 圖10-16為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠，Pah enuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的L-纈氨酸濃度（納摩爾/ mL)和標準誤差的棒圖。
[0163] 圖10-17為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠，Pah enuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的L-別異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。
[0164] 圖10-18為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠，Pah enuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的L-異亮氨酸濃度（納摩爾 /mL)和標準誤差的棒圖。
[0165] 圖10-19為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠，Pah enuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的L-亮氨酸濃度（納摩爾/ mL)和標準誤差的棒圖。
[0166] 圖10-20為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠，Pah enuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的L-苯基丙氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于顯著性差異，p小于0. 01。
[0167] 圖11-1為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，Dbttmieeh/ Dbttml'涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的D-纈氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。
[0168] 圖11-2為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，Dbttmieeh/ Dbttml'涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的D-別異亮氨酸濃度（納摩爾/mL) 和標準誤差的棒圖。
[0169] 圖11-3為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，Dbttmieeh/ Dbttml'涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的D-異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于顯著性差異，P小于0.05。
[0170] 圖11-4為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，Dbttmieeh/ Dbttml'涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的D-亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。
[0171] 圖11-5為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，Dbttmieeh/ Dbttml'涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的D-苯基丙氨酸濃度（納摩爾/mL) 和標準誤差的棒圖。
[0172] 圖11-6為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，Dbttmieeh/ DbttmlGeh，涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的L-纈氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于顯著性差異，P小于0.01。
[0173] 圖11-7為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，Dbttmieeh/ DbttmlGeh，涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的L-別異亮氨酸濃度（納摩爾/mL) 和標準誤差的棒圖。關于顯著性差異，P小于0.01。
[0174] 圖11-8為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，Dbttmieeh/ DbttmlGeh，涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的L-異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于顯著性差異，P小于0.01。
[0175] 圖11-9為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，Dbttmieeh/ DbttmlGeh，涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的L-亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于顯著性差異，P小于0.05。
[0176] 圖11-10為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，Dbttmieeh/ DbttmlGeh，涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的L-苯基丙氨酸濃度（納摩爾/mL) 和標準誤差的棒圖。
[0177] 圖11-11為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，+/ Dbttml'涂灰）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的D-異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于顯著性差異，P小于0.01。
[0178] 圖11-12為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，+/ Dbttmieeh,涂灰）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的L-纈氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。
[0179] 圖11-13為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，+/ DbttmlGeh，涂灰）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的L-別異亮氨酸濃度（納摩爾/mL) 和標準誤差的棒圖。
[0180] 圖11-14為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，+/ DbttmlGeh，涂灰）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的L-異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。
[0181] 圖11-15為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，+/ Dbttmieeh,涂灰）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的L-亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。
[0182] 圖12-1為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，Dbttmieeh/ Dbttml'涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的D-纈氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。
[0183] 圖12-2為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，Dbttmieeh/ Dbttml'涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的D-別異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。
[0184] 圖12-3為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，Dbttmieeh/ Dbttml'涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的D-異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于顯著性差異，P小于0.05。
[0185] 圖12-4為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，Dbttmieeh/ Dbttml'涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的D-亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。
[0186] 圖12-5為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，Dbttmieeh/ Dbttmlfeh，涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的D-苯基丙氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。
[0187] 圖12-6為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，DbttmiedV Dbttml'涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的L-纈氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于顯著性差異，P小于0.01。
[0188] 圖12-7為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，Dbttmieeh/ Dbttml'涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的L-別異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于顯著性差異，P小于0.01。
[0189] 圖12-8為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，Dbttmieeh/ Dbttml'涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的L-異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于顯著性差異，P小于0.05。
[0190] 圖12-9為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，Dbttmieeh/ Dbttml'涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的L-亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于顯著性差異，P小于0.01。
[0191] 圖12-10為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，Dbttmieeh/ Dbttmlfeh，涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的L-苯基丙氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。
[0192] 圖12-11為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，+/ Dbttml'涂灰）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的D-異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于顯著性差異，P小于0.05。
[0193] 圖12-12為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，+/ Dbttmlfeh，涂灰）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的L-纈氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。
[0194] 圖12-13為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，+/ Dbttml'涂灰）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的L-別異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。
[0195] 圖12-14為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，+/ Dbttml'涂灰）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的L-異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。
[0196] 圖12-15為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，+/ Dbttmlfeh，涂灰）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的L-亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。
[0197] 圖13-1為將對于各種疾病患者的各個最初樣品的D-氨基酸的分析結果歸納而得的追加的表。
[0198] 圖13-2為將對于各種疾病患者的各個最初樣品的L-氨基酸的分析結果歸納而得的追加的表。

【具體實施方式】
[0199] 以下所說明的本發(fā)明的實施例僅以例示作為目的，不限定本發(fā)明的技術范圍。本發(fā)明的技術范圍僅由權利要求的記載來限定。將不脫離本發(fā)明的宗旨作為條件，可以進行本發(fā)明的變更，例如，本發(fā)明的構成要件的追加、刪除和置換。
[0200] 以下的實施例按照美國國立衛(wèi)生研究所（National Institutes of Health(NIH))的指導原則，由資生堂研究中心的倫理委員會承認后實施。
[0201] 實施例1
[0202] 各種疾病患者來源的樣品的氨基酸立體異構體的全分析（1)
[0203] 1.材料和方法
[0204] (1)樣品
[0205] 健常人和各種疾病來源的血清樣品由美國A ^才寸一 7''社（BioServe Biotechnologies,Ltd,美國，馬里蘭州，Beltsville)獲得。上述樣品由被當前^才寸一 7''社收購的GenomicCollaborative Inc.社采集。采血在患者的醫(yī)師的管理下進行，根據(jù) 與美國的醫(yī)療保險的互通性和說明責任相關的法律（HIPAA)的文件中規(guī)定的采血者的同意已經(jīng)確認。這次分析所用的樣品的提供者中健常者選擇男女各4名全體人員為50歲的白人，且沒有研究對象疾病的既往癥的人。腎臟病患者選擇未并發(fā)糖尿病的人。癡呆患者選擇診斷為由阿爾茨海默病協(xié)會規(guī)定的7階段的重癥度的5期（每天的生活開始需要他人的輔助的階段）的男性4名。大腸癌患者選擇診斷為II期的男性4名。乳癌患者選擇僅單側發(fā)生并診斷為II期的女性4名。前列腺癌選擇診斷為II期，未接受激素療法和化學療法的男性。肝損傷患者選擇僅單側發(fā)生并診斷為II期的女性。骨質疏松癥患者選擇女性。卵巢癌患者選擇II期的女性。這次分析所用的樣品的提供者中排除吸煙者。
[0206] (2)氨基酸立體異構體的全分析
[0207] 上述樣品供于采用由財津等開發(fā)的D、L-氨基酸同步高靈敏度分析系統(tǒng)（日本特許第4291628號）的氨基酸立體異構體的全分析。各氨基酸的分析條件的詳細情況在 Hamase K.等，J. Chromatogr. A，1143 :105(2007)、HamaseK.,等，J. Chromatogr. A，1217 : 1056 (2010)、MiyoshiY.，等，J. Chromatogr. B，879 :3184(2011)中說明。簡言之，樣品在其 20倍容積的甲醇中，以4°C、3,500rpm、2分鐘用微均質系統(tǒng)（Micro Smash MS-100R，株式會社卜彡一精工）被均質化，以20, 400Xg進行10分鐘離心。離心上清液10 μ L在40°C被減壓干燥。在殘渣中添加20 μ L的200mM硼酸鈉緩沖液（pH8. 0)和40mM NBD-F(4-氟-7-硝基-2, 1，3-苯并5惡二唑，東京化成工業(yè)株式會社）的無水乙腈溶液5 μ L，在60°C加熱2 分鐘。反應后，添加75μ L的2% (v/v)三氟乙酸水溶液。該混合液的2μ L供于HPLC系統(tǒng)（NANOSPACE SI-2,株式會社資生堂，參照 Sasabe，J.等，Proc. Natl. Acad. Sci.，109 : 627(2012)的補充信息。）。簡言之，反相分離用分析柱使用保溫于40°C的自社制的整體 ODS柱（內徑759mmX0. 53臟，裝填于石英玻璃毛細管）。流動相使用乙腈-三氟乙酸-水 (容積比5:0. 05:95)。流速為每分鐘35 μ L。反相分離后，經(jīng)由安裝有150 μ L環(huán)的柱切換閥，目標的NBD化氨基酸分級自動地轉移至對映選擇性柱。對映異構體分離中，使用了作為手性選擇劑采用（S)-萘基甘氨酸的7> 0A-2500S柱（內徑250mmX I. 5mml. D.，自家填充，材料為株式會社住化分析中心制）。突光檢測以激發(fā)波長470nm、檢測波長530nm 實行。
[0208] 2.結果
[0209] 圖1為將對于健常者和各種疾病患者的各個最初樣品的D-氨基酸的分析結果歸納而得的表。表的各行表不樣品提供者的疾病名，各列表不被分析的D-氨基酸的種類。表中，ND表示檢測限度以下。色氨酸、半胱氨酸和酪氨酸的列的粗的右上斜影線表示這些氨基酸在這次樣品中不能定量。向上的箭頭表示該樣品與第1行的健常男性的樣品相比氨基酸量高，向下的箭頭表示與第1行的健常男性的樣品相比該樣品的氨基酸量低。細的右上斜影線（例如，腎臟病樣品的天冬酰胺等）表示這些樣品的氨基酸量相對于上述健常男性的樣品的氨基酸量的比例為2倍以上（向上箭頭）或1/2以下（向下箭頭）。粗的左上斜影線（例如，腎臟病樣品的谷氨酰胺等）表示這些樣品的氨基酸量相對于上述健常男性的樣品的氨基酸量的比例小于2倍（向上箭頭）或小于1/2(向下箭頭）。
[0210] 圖1的腎臟病患者樣品中與健常男性樣品相比血清濃度高的D-氨基酸中，絲氨酸、D-別蘇氨酸、蘇氨酸、丙氨酸、脯氨酸和苯基丙氨酸為D-氨基酸氧化酶的底物，天冬氨酸和谷氨酰胺為D-天冬氨酸氧化酶的底物。此外，即使一樣是D-氨基酸氧化酶的底物，組氨酸、精氨酸、蛋氨酸（^ ^ 纈氨酸、D-別異亮氨酸和異亮氨酸在腎臟病患者和健常男性中判斷為血清濃度沒有變化。此外，天冬氨酸和谷氨酸為D-天冬氨酸氧化酶的底物，在腎臟病患者和健常男性中判斷為血清濃度沒有變化。因此，腎臟病患者樣品中與健常男性樣品相比血清濃度高的D-氨基酸的種類，不能僅由以往已知的D-氨基酸的代謝酶的特異性來說明。前列腺癌患者樣品中與健常男性樣品相比血清濃度高的D-氨基酸為D-組氨酸和D-天冬酰胺，以及骨質疏松癥患者樣品中與健常男性樣品相比血清濃度高的D-氨基酸為D-天冬酰胺，也不能僅由以往已知的D-氨基酸的代謝酶的特異性來說明。已知D-氨基酸氧化酶和D-天冬氨酸氧化酶都局部存在于腎臟的近曲小管。因此，對于腎臟病的患者而言，可以預測這些酶活性降低。在該情況下，可以認為成為這些酶的底物的D-氨基酸全部的分解被抑制，體內量上升。然而，實際上并不是全部的D-氨基酸，而是限于僅一部分D-氨基酸的體內量上升。其機理不清楚。暗示出這些疾病特異性的D-氨基酸的血清濃度的變化可以用于疾病的診斷。
[0211] 由圖1觀察到，大部分種類的D-氨基酸在健常男性和各種疾病患者中沒有差異，對于一部分氨基酸，與健常男性相比高2倍以上或低1/2以下。因此首先，關注于與健常男性樣品相比較多的D-氨基酸中觀察到大的變化的腎臟病，對于相同疾病，詳細地研究了 4 名提供者的樣品。
[0212] 圖2-1、圖2-2、圖2-3、圖2-4、圖2-5和圖2-6分別為D-絲氨酸、L-絲氨酸、D-蘇氨酸、L-蘇氨酸、D-丙氨酸和L-丙氨酸的血清濃度的每個疾病樣品的分布圖。樣品1為健常男性，樣品2為腎臟病患者，樣品3為癡呆患者，樣品4為健常女性，樣品5為大腸癌患者，以及樣品6為乳癌患者。圖2-1中顯示，健常者的男性和女性、與癡呆、大腸癌和乳癌的D-絲氨酸的血清濃度基本上一定且低，與此相對腎臟病患者的D-絲氨酸的血清濃度比其它樣品高至少2倍以上。圖2-3中顯示，健常者的男性和女性、與癡呆、大腸癌和乳癌的 D-蘇氨酸的血清濃度基本上一定且低，與此相對腎臟病患者的D-蘇氨酸的血清濃度比其它樣品高至少2倍以上。同樣地圖2-5中顯示，健常者的男性和女性、與癡呆、大腸癌和乳癌的D-丙氨酸的血清濃度基本上一定且低，與此相對腎臟病患者的D-丙氨酸的血清濃度， 4人中的3人比其它樣品高至少2倍以上。與此相對圖2-2、圖2-4和圖2-6中，對于L-絲氨酸、L-蘇氨酸和L-丙氨酸，健常者與這次研究的4種疾病患者的氨基酸量的分布都根據(jù) 個體差異而分布范圍寬。而且腎臟病患者的樣品中，健常者的男女與其它疾病患者的樣品相比有稍低的傾向，但作為整體，未確認到D-絲氨酸、D-蘇氨酸和D-丙氨酸那樣的顯著的不同。
[0213] 由圖2-1?圖2-6明確的D-氨基酸血清濃度的特征在于，對于健常者的男性和女性的樣品，D-氨基酸的血清濃度都非常低，偏差也小。這一點對于其它D-氨基酸而目也是相同的（未顯示數(shù)據(jù)）。此外，患者樣品的D-氨基酸的血清濃度，在未確認到與疾病相關的變化的情況下，與健常者的情況同樣地，對于D-氨基酸，血清濃度都為非常低的量，偏差也小。這導致診斷時假陽性少，因此成為利用D-氨基酸量進行的診斷的有用性的重要依據(jù)。此外，以將疾病特異性地變化的D-氨基酸量與其它因子進行了組合的參數(shù)表示時，該其它因子本身與上述D-氨基酸量相比與疾病的相互關系低的情況下，實質上僅得到與僅基于上述D-氨基酸量進行診斷的相同診斷特性。
[0214] 圖3-1、圖3-2和圖3-3分別為絲氨酸、蘇氨酸和丙氨酸的樣品的D-體量相對于 D-體和L-體的量之和的百分率（％D)的分布圖。圖3-1中顯示，健常者的男性和女性、與癡呆、大腸癌和乳癌的D-絲氨酸的血清濃度占絲氨酸的總血清濃度的百分率基本上一定且低，與此相對腎臟病患者的D-絲氨酸的血清濃度占絲氨酸的總血清濃度的百分率比其它樣品高4倍以上。圖3-2中顯示，健常者的男性和女性、與癡呆、大腸癌和乳癌的D-蘇氨酸的血清濃度占蘇氨酸的總血清濃度的百分率基本上一定且低，與此相對腎臟病患者的 D-蘇氨酸的血清濃度占蘇氨酸的總血清濃度的百分率比其它樣品高4倍以上。同樣地圖 3-3中顯示，健常者的男性和女性、與癡呆、大腸癌和乳癌的D-丙氨酸的血清濃度占丙氨酸的總血清濃度的百分率為基本上一定的低值，與此相對腎臟病患者的D-丙氨酸的血清濃度占丙氨酸的總血清濃度的百分率，對于4人中的3人，比其它樣品高4倍以上。
[0215] 實施例2
[0216] 小鼠疾病模型來源的樣品的氨基酸立體異構體的全分析
[0217] 1.材料和方法
[0218] I. 1氨基酸立體異構體的全分析
[0219] 氨基酸立體異構體的全分析使用與實施例1中說明的D、L-氨基酸同步高靈敏度分析系統(tǒng)同樣的系統(tǒng)，但不同點在于，輸送泵使用了不具有緩沖器（夕' >〃一）的MS，通過采用MPS和低用量脫氣器，可以大范圍地選擇第二維的流動相。
[0220] 1.2小鼠疾病模型
[0221] 本實施例中使用的小鼠疾病模型為擴張型心肌病模型小鼠、卵巢摘出后的更年期模型小鼠、肉瘤移植小鼠、阿爾茨海默病模型小鼠、DAO缺損小鼠和DDO缺損小鼠。以下對于各個小鼠詳細地說明。使用小鼠的實驗在九州大學大學院藥學研究院進行。
[0222] 1. 2. 1擴張型心肌病模型小鼠
[0223] 作為心血管障礙的模型小鼠，使用了作為心肌構成蛋白質的1種的MLP(muscle UM protein)缺損了的 MLP-KO 小鼠（Arber，S.等，Cell，88 :393(1997))。獲得擴張型心肌病模型小鼠（MLP-K0小鼠，以下，稱為"疾病"。）雄8周齡3只、與對照正常小鼠（以下，稱為"正常"。）雄8周齡4只的尿樣品，分析了其全部氨基酸光學異構體含量。
[0224] 1.2. 2更年期模型小鼠
[0225] 作為更年期模型小鼠，在麻醉下從HR-I小鼠9周齡雌摘出卵巢，縫合皮膚。也準備了對相同周齡的雌小鼠不進行卵巢摘出而僅進行了皮膚的切開和縫合的對照實驗的小鼠。測定施行手術前、和施行手術后第1周?第4周的體重。與對照小鼠進行比較，將確認了體重增大的個體作為更年期模型小鼠而供于尿中全部氨基酸光學異構體含量分析。
[0226] 1.2. 3肉瘤移植小鼠
[0227] 作為肉瘤移植小鼠，準備移植了 2X IO7個肉瘤細胞的ICR系雄6周齡小鼠。移植 3周后確認了外植的腫瘤的生長的個體供于尿中全部氨基酸光學異構體含量分析。作為肉瘤移植小鼠的對照實驗，在相同環(huán)境下飼養(yǎng)的ICR系雄9周齡小鼠個體供于尿中全部氨基酸光學異構體含量分析。
[0228] 1. 2. 4阿爾茨海默病模型小鼠
[0229] 作為阿爾茨海默病模型小鼠，淀粉樣β前體蛋白質高表達轉基因小鼠 Tg2576 (Hsiao, Κ.等，Science, 274 :99(1996))的半合子雄8周齡小鼠供于尿中全部氨基酸光學異構體含量分析。C57BL雄8周齡小鼠作為對照正常小鼠供于尿中全部氨基酸光學異構體含量分析。
[0230] I. 2. 5 D-氨基酸氧化酶（DAO)缺損小鼠
[0231] 作為D-氨基酸代謝相關酶活性變化模型之一，D-氨基酸氧化酶（DAO)缺損小鼠 (Konno，R.等，Genetics l〇3:277(l983)，ddY/DA〇-，以下，稱為"DA0-/-"。）雄8 周齡的個體供于尿中全部氨基酸光學異構體含量分析。D-氨基酸氧化酶（DAO)野生型小鼠雄8周齡的個體作為對照小鼠供于尿中全部氨基酸光學異構體含量分析。
[0232] 1. 2. 6 D-天冬氨酸氧化酶（DDO)缺損小鼠
[0233] 作為D-氨基酸代謝相關酶活性變化模型之一，D-天冬氨酸氧化酶（DDO)缺損小鼠（Huang，A.S.等，J.Neurosci.，2 :2814(2006)，以下，稱為"DD0-"。）雄8 周齡的個體供于尿中全部氨基酸光學異構體含量分析。D-天冬氨酸氧化酶（DDO)野生型（以下，稱為 "DDO+"。）雄8周齡個體作為對照小鼠供于尿中全部氨基酸光學異構體含量分析。
[0234] 1. 2. 7苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠
[0235] 作為氨基酸代謝障礙模型小鼠之一，苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠，Pah enu2/Pahenu2, Shedlovsky，A.等，Genetics 134 :1205(1993))在 SPF條件下飼養(yǎng)的25-35周齡的雄5只供于尿中全部氨基酸光學異構體含量分析。同一遺傳背景的野生型等位基因的純合子在SPF條件下飼養(yǎng)的25-35周齡的雄5只作為對照小鼠供于尿中全部氨基酸光學異構體含量分析。
[0236] 1. 2. 8楓糖尿癥疾病模型小鼠
[0237] 作為氨基酸代謝障礙模型小鼠之一，（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠， DbttnilGeh/DbttnilGeh，Homanics G.E.等，BMC Med Genet，7 :33(2006)在SPF條件下飼養(yǎng)的8-10 周齡的雄5只供于尿中全部氨基酸光學異構體含量分析。同一遺傳背景的野生型等位基因的純合子在SPF條件下飼養(yǎng)的8-10周齡的雄5只作為對照小鼠供于尿中全部氨基酸光學異構體含量分析。在一部分實驗中，+/Dbt tmlfch的雜合子在SPF條件下飼養(yǎng)的8-10周齡的雄5只作為中間型供于尿中全部氨基酸光學異構體含量分析。
[0238] 2.結果
[0239] 2. 1擴張型心肌病模型小鼠
[0240] 圖4-1為擴張型心肌病模型小鼠（MLP-K0小鼠，以下，稱為"疾病"。）3只、與對照正常小鼠（以下，稱為"正常"。）4只的尿中的D-絲氨酸濃度的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為D-絲氨酸濃度（納摩爾/mL)。圖4-2表示擴張型心肌病模型小鼠3只、與對照正常小鼠4只的尿中的L-絲氨酸濃度的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為L-絲氨酸濃度（納摩爾/mL)。圖4-3為擴張型心肌病模型小鼠3只、與對照正常小鼠4只的尿中的總絲氨酸濃度（D-絲氨酸濃度和L-絲氨酸濃度之和）的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為總絲氨酸濃度（納摩爾/mL)。圖4-4表示擴張型心肌病模型小鼠3只、與對照正常小鼠4 只的尿中的D-絲氨酸濃度相對于總絲氨酸濃度的百分率（％D)的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為％ D。關于正常與疾病的顯著性差異，在Student的t檢驗中P小于0.02。圖 4-5為擴張型心肌病模型小鼠3只、與對照正常小鼠4只的尿中的D-精氨酸濃度的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為D-精氨酸濃度（納摩爾/mL)。圖4-6為擴張型心肌病模型小鼠3只、與對照正常小鼠4只的尿中的L-精氨酸濃度的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為 L-精氨酸濃度（納摩爾/mL)。關于正常與疾病的顯著性差異，在Student的t檢驗中P小于0. 01。圖4-7為擴張型心肌病模型小鼠3只、與對照正常小鼠4只的尿中的總精氨酸濃度（D-精氨酸濃度和L-精氨酸濃度之和）的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為總精氨酸濃度（納摩爾/mL)。圖4-8為擴張型心肌病模型小鼠3只、與對照正常小鼠4只的尿中的 D-谷氨酸濃度的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為D-谷氨酸濃度（納摩爾/mL)。關于正常與疾病的顯著性差異，在Student的t檢驗中P小于0. 02。圖4-9為擴張型心肌病模型小鼠3只、與對照正常小鼠4只的尿中的L-谷氨酸濃度的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為L-谷氨酸濃度（納摩爾/mL)。圖4-10為擴張型心肌病模型小鼠3只、與對照正常小鼠 4只的尿中的總谷氨酸濃度（D-谷氨酸濃度和L-谷氨酸濃度之和）的平均值和標準誤差的棒圖。縱軸為總谷氨酸濃度（納摩爾/mL)。圖4-11為擴張型心肌病模型小鼠3只、與對照正常小鼠4只的尿中的D-脯氨酸濃度的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為D-脯氨酸濃度（納摩爾/mL)。關于正常與疾病的顯著性差異，在Student的t檢驗中P小于0. 01。圖 4-12為擴張型心肌病模型小鼠3只、與對照正常小鼠4只的尿中的L-脯氨酸濃度的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為L-脯氨酸濃度（納摩爾/mL)。圖4-13為擴張型心肌病模型小鼠3只、與對照正常小鼠4只的尿中的總脯氨酸濃度（D-脯氨酸濃度和L-脯氨酸濃度之和）的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為總脯氨酸濃度（納摩爾/mL)。圖4-14表示擴張型心肌病模型小鼠3只、與對照正常小鼠4只的尿中的D-賴氨酸濃度的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為D-賴氨酸濃度（納摩爾/mL)。關于正常與疾病的顯著性差異，在Student 的t檢驗中P小于0. 01。圖4-15表示擴張型心肌病模型小鼠3只、與對照正常小鼠4只的尿中的L-賴氨酸濃度的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為L-賴氨酸濃度（納摩爾/mL)。圖4-16為擴張型心肌病模型小鼠3只、與對照正常小鼠4只的尿中的總賴氨酸濃度（D-賴氨酸濃度和L-賴氨酸濃度之和）的平均值和標準誤差的棒圖。由這些結果可知，D-絲氨酸濃度有在疾病群中比正常群低的傾向，但未確認到顯著性差異。然而如果以％ D進行評價，則D-絲氨酸的％ D在疾病群中比正常群顯著地低。L-精氨酸濃度在疾病群中比正常群顯著地低。D-谷氨酸濃度在疾病群中比正常群顯著地高。D-脯氨酸濃度在疾病群中比正常群顯著地低。D-賴氨酸濃度在疾病群中比正常群顯著地低。
[0241] 2. 2更年期模型小鼠
[0242] 圖5-1為表示從9周齡HR-I小鼠摘出卵巢后的更年期模型小鼠（以下，稱為 "0VX"。）12只、與對相同周齡的雌小鼠不進行卵巢摘出而僅進行了皮膚的切開和縫合的對照小鼠（以下，稱為"sham"。）6只的體重的平均值和標準偏差的變化的圖?？v軸表示小鼠的體重（克）。涂黑和斜線影線的棒圖分別表示施行手術前的9周齡小鼠、與施行手術后第1周（10周齡）、第2周（11周齡）、第3周（12周齡）、第4周（13周齡）的更年期模型小鼠（OVX)和對照小鼠（sham)的體重的平均值和標準偏差。關于更年期模型小鼠（OVX) 和對照小鼠（sham)的體重的顯著性差異，在Student的t檢驗中P小于0. 05( * )或小于 0. 01 ( * * )。對于摘出卵巢后的更年期模型小鼠，從術后第2周起體重與對照小鼠相比顯著地增加，顯示出更年期模型小鼠制作成功了。
[0243] 圖5-2、5_3和5-4為分別表示更年期模型小鼠（0VX)3只中的第1只（0VX-3)、第2 只（0VX-4)和第3只（0VX-5)的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的表。甘氨酸由于不存在光學異構體，因此記載于L體的欄中。氨基酸全部通過NBD-F而被熒光衍生物化，使用本發(fā)明的全部氨基酸光學異構體含量分析裝置進行了解析。色氨酸由于NBD衍生物的靈敏度低，因此在這次解析中設為nd。關于半胱氨酸，由于通過空氣氧化而生成胱氨酸，因此作為半胱氨酸的含量極其低。因此在這次解析中設為nd。圖5-5、5-6、5-7和5-8為分別表不對照小鼠（sham) 4只中的第1只（Sham-16)、第2只（Sham-17)、第3只（Sham-19)和第 4只（Sham-20)的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的表。圖5-9為將更年期模型小鼠（〇VX)3只和對照小鼠（sham)4只的尿中的D-氨基酸含量進行比較的表。關于D-天冬氨酸，與更年期模型小鼠（OVX)相比對照小鼠（sham)低，關于顯著性差異，在Student的t 檢驗中P為0. 015。圖5-10為將年期模型小鼠（0VX)3只和對照小鼠（sham)4只的尿中的 L-氨基酸含量進行比較的表。關于L-組氨酸和L-苯基丙氨酸，與對照小鼠（sham)相比更年期模型小鼠（OVX)低，關于顯著性差異，在Student的t檢驗中P分別為0. 017和0. 037。圖5-11為將更年期模型小鼠（0VX)3只和對照小鼠（sham)4只的尿中的各氨基酸的D-體濃度相對于D-體濃度和L-體的濃度之和的百分率（％D)進行比較的表。關于蘇氨酸和異亮氨酸，生物體內的D-體成為別體，因此％ D作為D-別體濃度相對于D-別體濃度和L-體濃度之和的百分率進行評價。關于D-天冬氨酸，與對照小鼠（sham)相比更年期模型小鼠 (OVX)低，關于顯著性差異，在Student的t檢驗中P為0. 002。圖5-12為將更年期模型小鼠（OVX) 3只和對照小鼠（sham) 4只的尿中的各D-氨基酸濃度相對于總L-氨基酸的濃度之和的百分率D/總L)進行比較的表。關于D-天冬氨酸，與對照小鼠（sham)相比更年期模型小鼠（OVX)低，關于顯著性差異，在Student的t檢驗中P為0. 005。圖5-13為將更年期模型小鼠（〇VX)3只和對照小鼠（sham)4只的尿中的各D-氨基酸濃度相對于全部 D-氨基酸的濃度之和的百分率（％D/總D)進行比較的表。關于D-天冬氨酸，與對照小鼠 (sham)相比更年期模型小鼠（OVX)低，關于顯著性差異，在Student的t檢驗中P為0. 017。圖5-14為將更年期模型小鼠（0VX)3只和對照小鼠（sham)4只的尿中的各D-氨基酸濃度相對于D-谷氨酸濃度的百分率（％D/D-Glu)進行比較的表。D-天冬氨酸為酸性D-氨基酸，因此以被認為是經(jīng)受同樣的代謝的D-谷氨酸濃度進行校正后評價。即使是％ D/D-Glu，關于D-天冬氨酸，與對照小鼠（sham)相比更年期模型小鼠（OVX)也低，關于顯著性差異，在Student的t檢驗中P為0. 006。
[0244] 2. 3肉瘤移植小鼠
[0245] 圖6-1、6_2和6-3分別為表示移植了 2X IO7個肉瘤細胞的ICR系雄6周齡小鼠，且移植3周后確認了外植的腫瘤的生長的個體3只中的第1只（S3)、第2只（S4)和第3 只（S5)的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的表。甘氨酸由于不存在光學異構體，因此記載于L體的欄中。氨基酸全部通過NBD-F而被熒光衍生物化，使用本發(fā)明的全部氨基酸光學異構體含量分析裝置進行了解析。色氨酸由于NBD衍生物的靈敏度低，因此在這次解析中設為nd。關于半胱氨酸，由于通過空氣氧化而生成胱氨酸，因此作為半胱氨酸的含量極其低。因此在這次解析中設為nd。圖6-4、6-5和6-6分別表示作為肉瘤移植小鼠的對照實驗而在相同環(huán)境下飼養(yǎng)的ICR系雄9周齡小鼠個體3只中的第1只（C3)、第2只 (C4)和第3只（C5)的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的表。圖6-7為將肉瘤移植小鼠3只（S3、S4和S5)和對照小鼠（C3、C4和C5) 3只的尿中的D-氨基酸含量進行比較的表。圖6-8為將肉瘤移植小鼠3只（S3、S4和S5)和對照小鼠（C3、C4和C5) 3只的尿中的L-氨基酸含量進行比較的表。圖6-9為將肉瘤移植小鼠3只（S3、S4和S5)和對照小鼠 (C3、C4和C5) 3只的尿中的各氨基酸的D-體濃度相對于D-體濃度和L-體的濃度之和的百分率D)進行比較的表。肉瘤移植小鼠的絲氨酸的％ D比對照小鼠低，關于顯著性差異，在Student的t檢驗中P為0.016。圖6-10為將肉瘤移植小鼠3只（S3、S4和S5)和對照小鼠（C3、C4和C5) 3只的尿中的各D-氨基酸濃度相對于全部L-氨基酸的濃度之和的百分率D/總L)進行比較的表。圖6-11為將肉瘤移植小鼠3只（S3、S4和S5)和對照小鼠（C3、C4和C5) 3只的尿中的各D-氨基酸濃度相對于全部D-氨基酸的濃度之和的百分率 (% D/總D)進行比較的表。關于D-天冬酰胺和D-精氨酸，有與對照小鼠相比肉瘤移植小鼠高的傾向，關于D-精氨酸的顯著性差異，在Student的t檢驗中P為0. 035。圖6-12為將肉瘤移植小鼠3只（S3、S4和S5)和對照小鼠（C3、C4和C5) 3只的尿中的各D-氨基酸濃度相對于D-天冬酰胺濃度的百分率（％D/D-Asn)進行比較的表。D-天冬酰胺較高濃度地存在于哺乳類尿中，以及相對于總D-氨基酸濃度的比率最穩(wěn)定，因此作為尿中濃度的校正的指標使用。關于D-精氨酸，有與對照小鼠相比肉瘤移植小鼠高的傾向，關于顯著性差異，在Student的t檢驗中P為0· 016。
[0246] 2. 4阿爾茨海默病模型小鼠
[0247] 圖7-1為阿爾茨海默病模型小鼠（淀粉樣β前體蛋白質高表達轉基因小鼠 Tg2576半合子雄8周齡小鼠，以下，稱為"hemi"。）3只、與對照正常小鼠（C57BL，以下，稱為"Wild"。）3只的尿中的D-絲氨酸濃度（D-Ser)、L-絲氨酸濃度（L-Ser)和兩者合計 (Ser)的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為濃度（納摩爾/mL)。圖7-2為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi) 3只、與對照正常小鼠（Wild) 3只的尿中的D-絲氨酸濃度相對于總絲氨酸濃度的百分率（％D)的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為％ D。圖7-3為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi)3只、與對照正常小鼠（Wild)3只的尿中的D-絲氨酸相對于D-別蘇氨酸濃度的相對比（D-Ser/D-allo-Thr)或尿中的D-絲氨酸相對于D-別異亮氨酸濃度的相對比 (D-Ser/D-allo-Ile)的圖。關于尿中的D-絲氨酸相對于D-別蘇氨酸濃度的相對比、尿中的D-絲氨酸相對于D-別異亮氨酸濃度的相對比，都是阿爾茨海默病模型小鼠比對照小鼠高，關于顯著性差異，在Student的t檢驗中P都小于0. 01。圖7-4為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi) 3只、與對照正常小鼠（Wild) 3只的尿中的D-丙氨酸濃度（D-Ala)、L-丙氨酸濃度（L-Ala)和兩者合計（Ala)的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為濃度（納摩爾/mL)。關于尿中的D-丙氨酸濃度，阿爾茨海默病模型小鼠比對照正常小鼠高，關于顯著性差異，在 Student的t檢驗中P小于0. 01。圖7-5為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi) 3只、與對照正常小鼠（Wild)3只的尿中的D-丙氨酸濃度相對于總丙氨酸濃度的百分率（％D)的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為％ D。關于尿中的D-丙氨酸濃度相對于總丙氨酸濃度的百分率 (% D)，阿爾茨海默病模型小鼠比對照正常小鼠高，關于顯著性差異，在Student的t檢驗中 P小于0. 01。圖7-6為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi)3只、與對照正常小鼠（Wild)3只的尿中的D-蛋氨酸濃度（D-Met)、L_蛋氨酸濃度（L-Met)和兩者合計（Met)的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為濃度（納摩爾/mL)。關于尿中的D-Met濃度，有阿爾茨海默病模型小鼠比對照正常小鼠高的傾向。圖7-7為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi)3只、與對照正常小鼠（Wild) 3只的尿中的D-蛋氨酸濃度相對于總絲氨酸濃度的百分率（％D)的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為％D。圖7-8為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi)3只、與對照正常小鼠 (Wild) 3只的尿中的D-蛋氨酸相對于D-別蘇氨酸濃度的相對比（D-Met/D-alIo-Thr)或尿中的D-蛋氨酸相對于D-別異亮氨酸濃度的相對比（D-Met/D-allo-Ile)的圖。關于尿中的 D-蛋氨酸相對于D-別蘇氨酸濃度的相對比、尿中的D-蛋氨酸相對于D-別異亮氨酸濃度的相對比，都是阿爾茨海默病模型小鼠比對照小鼠高，關于顯著性差異，在Student的t檢驗中P都小于0. 05。圖7-9為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi)3只、與對照正常小鼠（Wild)3 只的尿中的D-亮氨酸濃度（D-Leu)、L-亮氨酸濃度（L-Leu)和兩者合計（Leu)的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為濃度（納摩爾/mL)。圖7-10為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi)3 只、與對照正常小鼠（Wild) 3只的尿中的D-亮氨酸濃度相對于總絲氨酸濃度的百分率 D)的平均值和標準誤差的棒圖。圖7-11為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi)3只、與對照正常小鼠（Wild) 3只的尿中的D-亮氨酸相對于D-別蘇氨酸濃度的相對比（D-Leu/D-alIo-Thr) 或尿中的D-亮氨酸相對于D-別異亮氨酸濃度的相對比（D-Leu/D-allo-Ile)的圖。關于尿中的D-亮氨酸相對于D-別蘇氨酸濃度的相對比、尿中的D-亮氨酸相對于D-別異亮氨酸濃度的相對比，都是阿爾茨海默病模型小鼠比對照小鼠高，關于顯著性差異，在Student 的t檢驗中P分別小于0. 05和小于0. 01。圖7-12為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi) 3只、與對照正常小鼠（Wild) 3只的尿中的D-天冬氨酸濃度（D-Asp)、L-天冬氨酸濃度（L-Asp) 和兩者合計（Asp)的平均值和標準誤差的棒圖。縱軸為濃度（納摩爾/mL)。關于尿中的 D-天冬氨酸濃度，阿爾茨海默病模型小鼠比對照正常小鼠低，關于顯著性差異，在Student 的t檢驗中P小于0. 05。圖7-13為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi)3只、與對照正常小鼠 (Wild)3只的尿中的D-天冬氨酸濃度相對于總天冬氨酸濃度的百分率（％D)的平均值和標準誤差的棒圖?？v軸為％ D。圖7-14為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi)3只、與對照正常小鼠（Wild) 3只的尿中的D-苯基丙氨酸濃度（D-Phe)、L-苯基丙氨酸濃度（L-Phe)和兩者合計（Phe)的平均值和標準誤差的棒圖。縱軸為濃度（納摩爾/mL)。圖7-15為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi)3只、與對照正常小鼠（Wild)3只的尿中的D-苯基丙氨酸濃度相對于總苯基丙氨酸濃度的百分率D)的平均值和標準誤差的棒圖。圖7-16為阿爾茨海默病模型小鼠（hemi)3只、與對照正常小鼠（Wild)3只的尿中的D-苯基丙氨酸相對于D-別蘇氨酸濃度的相對比（D-Phe/D-allo-Thr)或尿中的D-苯基丙氨酸相對于D-別異亮氨酸濃度的相對比（D-Phe/D-allo-Ile)的圖。關于尿中的D-苯基丙氨酸相對于D-別異亮氨酸濃度的相對比，阿爾茨海默病模型小鼠比對照小鼠高，關于顯著性差異，在Student的t檢驗中P小于0. 05。
[0248] 2. 5 D-氨基酸氧化酶（DAO)缺損小鼠
[0249] 圖8-1、8_2和8-3分別為表示D-氨基酸氧化酶（DAO)野生型小鼠（ddY/DAO+，以下，稱為"DAO+/+"。）個體3只中的第1只（DAO+/+ 1)、第2只（DAO+/+ 2)和第3只 (DA0+/+ 3)的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的表。甘氨酸由于不存在光學異構體，因此記載于L體的欄中。氨基酸全部通過NBD-F而被熒光衍生物化，使用本發(fā)明的全部氨基酸光學異構體含量分析裝置進行了解析。色氨酸由于NBD衍生物的靈敏度低，因此在這次解析中設為nd。關于半胱氨酸，由于通過空氣氧化而生成胱氨酸，因此作為半胱氨酸的含量極其低。因此在這次解析中設為nd。圖8-4、8-5和8-6分別為表示D-氨基酸氧化酶 (DAO)缺損小鼠（ddY/DA〇-，以下，稱為"DA0-/-"。）個體3只中的第1只（DAO-/- 1)、第2 只（DA0-/- 2)和第3只（DA0-/- 3)的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的表。甘氨酸由于不存在光學異構體，因此記載于L體的欄中。氨基酸全部通過NBD-F而被突光衍生物化，使用本發(fā)明的全部氨基酸光學異構體含量分析裝置進行了解析。色氨酸由于NBD 衍生物的靈敏度低，因此在這次解析中設為nd。關于半胱氨酸，由于通過空氣氧化而生成胱氨酸，因此作為半胱氨酸的含量極其低。因此在這次解析中設為nd。圖8-7為將D-氨基酸氧化酶（DAO)野生型小鼠3只（DA0+/+ 1、DAO+/+ 2和DAO+/+ 3)、與D-氨基酸氧化酶（DAO)缺損小鼠3只（DAO-/- UDAO-/- 2和DAO-/- 3)的尿中的D-氨基酸含量進行比較的表。關于D-絲氨酸、D-別蘇氨酸、D-丙氨酸、D-脯氨酸、D-亮氨酸和D-苯基丙氨酸，與D-氨基酸氧化酶（DAO)野生型小鼠相比DAO酶缺損小鼠顯著地高。圖8-8為將D-氨基酸氧化酶（DAO)野生型小鼠3只（DA0+/+ 1、DAO+/+ 2和DAO+/+ 3)、與D-氨基酸氧化酶 (DAO)缺損小鼠3只（DAO-/- UDAO-/- 2和DAO-/- 3)的尿中的L-氨基酸含量進行比較的表。關于D-絲氨酸、D-別蘇氨酸、D-丙氨酸、D-脯氨酸、D-亮氨酸和D-苯基丙氨酸，與D-氨基酸氧化酶（DAO)野生型小鼠相比DAO酶缺損小鼠顯著地高。圖8-9為將D-氨基酸氧化酶（DAO)野生型小鼠3只（DAO+/+ 1、DAO+/+ 2和DAO+/+ 3)、與D-氨基酸氧化酶 (DAO)缺損小鼠3只（DAO-/- UDAO-/- 2和DAO-/- 3)的尿中的各氨基酸的D-體濃度相對于D-體濃度和L-體的濃度之和的百分率D)進行比較的表。關于D-絲氨酸、D-別蘇氨酸、D-丙氨酸、D-脯氨酸、D-亮氨酸和D-苯基丙氨酸，與D-氨基酸氧化酶（DAO)野生型小鼠相比DAO酶缺損小鼠顯著地高。圖8-10為將D-氨基酸氧化酶（DAO)野生型小鼠 3只（DAO+/+ UDAO+/+ 2和DAO+/+ 3)、與D-氨基酸氧化酶（DAO)缺損小鼠3只（DA0-/-UDAO-/- 2和DAO-/- 3)的尿中的各D-氨基酸濃度相對于全部L-氨基酸的濃度之和的百分率（％D/總L)進行比較的表。關于D-絲氨酸、D-別蘇氨酸、D-丙氨酸、D-亮氨酸和 D-苯基丙氨酸，與D-氨基酸氧化酶（DAO)野生型小鼠相比DAO酶缺損小鼠顯著地高。圖 8-11為將D-氨基酸氧化酶（DAO)野生型小鼠3只（DA0+/+ 1、DAO+/+ 2和DAO+/+ 3)、與 D-氨基酸氧化酶（DAO)缺損小鼠3只（DAO-/- UDAO-/- 2和DAO-/- 3)的尿中的各D-氨基酸濃度相對于全部D-氨基酸的濃度之和的百分率D/總D)進行比較的表。圖8-12 為將D-氨基酸氧化酶（DAO)野生型小鼠3只（DAO+/+ UDAO+/+ 2和DAO+/+ 3)、與D-氨基酸氧化酶（DAO)缺損小鼠3只（DAO-/- UDAO-/- 2和DAO-/- 3)的尿中的各D-氨基酸濃度相對于D-天冬酰胺濃度的百分率（％D/D-Asn)進行比較的表。關于D-絲氨酸、D-別蘇氨酸、D-丙氨酸、D-脯氨酸、D-亮氨酸和D-苯基丙氨酸，與D-氨基酸氧化酶（DAO)野生型小鼠相比DAO酶缺損小鼠顯著地高。
[0250] 2. 6 D-天冬氨酸氧化酶（DDO)缺損小鼠
[0251] 圖9-1、9_2、9_3和9-4分別為表不D-天冬氛酸氧化酶（DDO)野生型小鼠（DD0+) 個體4只中的第1只、第2只、第3只和第43只的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的波形圖。圖9-5、9-6、9-7和9-8分別為表示D-天冬氨酸氧化酶（DDO)缺損小鼠（DD0-) 個體4只中的第1只、第2只、第3只和第4只的尿中全部氨基酸光學異構體含量分析結果的波形圖。顯示在DDO缺損小鼠的尿中，與野生型小鼠的尿中相比D-天冬酰胺濃度高， D-天冬氨酸和D-精氨酸的濃度也高。作為DDO酶的良好底物的D-谷氨酸在DDO缺損小鼠的尿中幾乎未確認到。
[0252] 由以上的2. 5和2. 6的結果可知，由于作為D-氨基酸代謝酶的DAO和DDO的缺損，特異性的D-氨基酸的濃度分別發(fā)生變化。即可以認為，通過控制它們的酶活性，可以控制特異性的D-氨基酸的濃度。
[0253] 2. 7苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠
[0254] 圖10-1為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠， PahenuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的D-纈氨酸濃度（納摩爾/mL) 和標準誤差的棒圖。圖10-2為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH) 突變小鼠，Pah enuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的D-別異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。圖10-3為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠，Pah enuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的 D-異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。圖10-4為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠，Pah enuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各 5只的血漿中的D-亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。圖10-5為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠，Pah enuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的D-苯基丙氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于 D-苯基丙氨酸濃度，與對照小鼠相比苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠高，關于顯著性差異，P小于0.01。圖10-6為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠， PahenuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的L-纈氨酸濃度（納摩爾/mL) 和標準誤差的棒圖。圖10-7為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH) 突變小鼠，Pah enuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的L-別異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。圖10-8為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠，Pah enuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的 L-異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。圖10-9為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠，Pah enuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各 5只的血漿中的L-亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。圖10-10為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠，Pah enuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的L-苯基丙氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于 L-苯基丙氨酸的濃度，與對照小鼠相比苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠高，關于顯著性差異，P 小于0.01。
[0255] 圖10-11為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠，Pah enuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的D-纈氨酸濃度（納摩爾/ mL)和標準誤差的棒圖。圖10-12為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶 (PAH)突變小鼠，Pahenu2/Pah enu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的D-別異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。圖10-13為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠，Pah enuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的 D-異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。圖10-14為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠，Pah enuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各 5只的尿中的D-亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。圖10-15為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠，Pah enuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠 (涂白）各5只的尿中的D-苯基丙氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。圖10-16 為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠，Pah enuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的L-纈氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。圖10-17為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠，Pah mu2/ Pahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的L-別異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。圖10-18為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠，Pah enuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的L-異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。圖10-19為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠（苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠，Pah enuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的L-亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。圖10-20為表示苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠 (苯基丙氨酸羥化酶（PAH)突變小鼠，Pah enuVPahenu2,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的L-苯基丙氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于L-苯基丙氨酸濃度，與對照小鼠相比苯丙酮酸尿癥疾病模型小鼠高，關于顯著性差異，P小于〇. 01。
[0256] 2. 8楓糖尿癥疾病模型小鼠
[0257] 圖11-1為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，Dbttmieeh/ Dbttml'涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的D-纈氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。圖11-2為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠， DbttmiedVDbttmieeh,涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的D-別異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。圖11_3為表不楓糖尿癥小鼠（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH) 突變小鼠，DbttmlGeh/DbttmlGeh，涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的D-異亮氨酸濃度 (納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于血漿中的D-異亮氨酸濃度，楓糖尿癥小鼠比對照小鼠高，關于顯著性差異，P小于〇. 05。圖11-4為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α -酮酸脫氫酶 (BCKDH)突變小鼠，DbttmlMVDbttmK：eh，涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的D-亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。圖11-5為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，DbttmiedVDbttm1'涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的 D-苯基丙氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。圖11-6為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈 α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，DbttmiedVDbttmieeh，涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的L-纈氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于血漿中的L-纈氨酸濃度，楓糖尿癥小鼠比對照小鼠商，關于顯著性差異，P小于〇.〇1。圖11 _7為表不楓糖尿癥小鼠 (支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，DbttmiedVDbt tm1'涂黑）和對照小鼠（涂白）各 5只的血漿中的L-別異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于血漿中的L-別異亮氨酸濃度，楓糖尿癥小鼠比對照小鼠高，關于顯著性差異，P小于〇. 01。圖11-8為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，DbttmiedVDbt tmlfeh，涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的L-異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于血漿中的L-異亮氨酸濃度，楓糖尿癥小鼠比對照小鼠高，關于顯著性差異，P小于0. 01。圖11-9為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，DbttmiedVDbt tm1' 涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的L-亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于血漿中的L-亮氨酸濃度，楓糖尿癥小鼠比對照小鼠高，關于顯著性差異，p小于 0.05。圖11-10為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，Dbt tmiedV DbttmlGeh，涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的L-苯基丙氨酸濃度（納摩爾/mL) 和標準誤差的棒圖。圖Il -Il為表不楓糖尿癥小鼠中間型（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH) 突變小鼠，+/Dbt tmlfch，涂灰）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的D-異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于血漿中的D-異亮氨酸濃度，楓糖尿癥小鼠比對照小鼠高，關于顯著性差異，P小于0.01。圖11-12為表示楓糖尿癥小鼠中間型（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，+/Dbt tmieeh，涂灰）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的L-纈氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。圖11-13為表示楓糖尿癥小鼠中間型（支鏈 α-酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，+/Dbttml&h，涂灰）和對照小鼠（涂白）各5只的血漿中的L-別異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。圖11-14為表示楓糖尿癥小鼠中間型（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，+/Dbt tmlfeh，涂灰）和對照小鼠（涂白）各 5只的血漿中的L-異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。圖11-15為表示楓糖尿癥小鼠中間型（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，+/Dbt tml&h，涂灰）和對照小鼠 (涂白）各5只的血漿中的L-亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。
[0258] 圖12-1為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，Dbttmieeh/ Dbttml'涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的D-纈氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。圖12-2為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠， DbttmlMVDbttmlfeh，涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的D-別異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。圖12_3為表不楓糖尿癥小鼠（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH) 突變小鼠，Dbt tmlMVDbttmlfeh，涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的D-異亮氨酸濃度 (納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于尿中的D-異亮氨酸濃度，與對照小鼠相比楓糖尿癥小鼠高，關于顯著性差異，P小于0.05。圖12-4為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，Dbt tmlGeh/DbttmK：eh，涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的D-亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。圖12-5為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，DbttmlMVDbttmlMl，涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的 D-苯基丙氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。圖12-6為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，DbttmiedVDbttmieeh，涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的L-纈氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于尿中的L-纈氨酸濃度，與對照小鼠相比楓糖尿癥小鼠商，關于顯著性差異，P小于〇. 01。圖12-7為表不楓糖尿癥小鼠（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，DbttmlGeh/Dbt tml(：eh，涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的L-別異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于尿中的L-別異亮氨酸濃度，與對照小鼠相比楓糖尿癥小鼠高，關于顯著性差異，P小于0.01。圖12-8為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，Dbt tmlMVDbttml&h，涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的L-異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于尿中的L-異亮氨酸濃度，與對照小鼠相比楓糖尿癥小鼠高，關于顯著性差異，p小于0.05。圖12-9為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，Dbt tmiedVDbttm1' 涂黑）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的L-亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于尿中的L-亮氨酸濃度，與對照小鼠相比楓糖尿癥小鼠高，關于顯著性差異，P小于 0. 01。圖12-11為表示楓糖尿癥小鼠中間型（支鏈α -酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，+/ Dbttml'涂灰）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的D-異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。關于尿中的D-異亮氨酸濃度，與對照小鼠相比楓糖尿癥小鼠中間型高，關于顯著性差異，P小于0.05。圖12-12為表不楓糖尿癥小鼠（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH) 突變小鼠，+/Dbt tml'涂灰）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的L-纈氨酸濃度（納摩爾 /mL)和標準誤差的棒圖。圖12-13為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH)突變小鼠，+/Dbt tml'涂灰）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的L-別異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。圖12-14為表不楓糖尿癥小鼠（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH) 突變小鼠，+/Dbt tmlfch，涂灰）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的L-異亮氨酸濃度（納摩爾/mL)和標準誤差的棒圖。圖12-15為表示楓糖尿癥小鼠（支鏈α-酮酸脫氫酶（BCKDH) 突變小鼠，+/Dbt tmlfch，涂灰）和對照小鼠（涂白）各5只的尿中的L-亮氨酸濃度（納摩爾 /mL)和標準誤差的棒圖。
[0259] 實施例3
[0260] 各種疾病患者來源的樣品的氨基酸立體異構體的全分析（2)
[0261] 1.材料和方法
[0262] (1)樣品
[0263] 與實施例1同樣地，各種疾病來源的血清樣品由美國八< 才寸一 7''社（BioServe Biotechnologies,Ltd,美國，馬里蘭州，Beltsville)獲得。上述樣品由被當前 /S'^才寸一 7''社收購的GenomicCollaborative Inc.社采集。采血在患者的醫(yī)師的管理下進行，根據(jù) 美國的醫(yī)療保險的互通性和說明責任相關的法律（HIPAA)的文件中規(guī)定的采血者的同意已經(jīng)確認。類風濕性關節(jié)炎樣品來源于稍微可動的疾病狀態(tài)的49歲的白人男性。腎臟癌樣品來源于I期的47歲的越南人男性。肺癌樣品來源于I期的65歲的越南人男性。心血管疾病樣品來源于43歲的白人男性。多發(fā)性硬化癥樣品來源于復發(fā)緩解型的33歲的白人男性。急性骨髓性白血病樣品來源于16歲男性。淋巴瘤樣品來源于49歲越南人女性。銀屑病樣品來源于40歲的白人男性。糖尿病樣品來源于50歲白人男性。系統(tǒng)性紅斑狼瘡樣品來源于38歲白人女性。
[0264] (2)氨基酸立體異構體的全分析
[0265] 上述樣品的氨基酸立體異構體的全分析與實施例1同樣地實施。
[0266] 2.結果
[0267] 實施例3的疾病樣品的解析結果中，關于L-氨基酸，在圖13-1中歸納分析結果，關于D-氨基酸，在圖13-2中歸納分析結果。與實施例1同樣地，表的各行表示樣品提供者的疾病名，各列表示被分析的D-氨基酸的種類。表中，ND表示檢測限度以下。向上箭頭表示該樣品與第1行的健常男性的樣品相比氨基酸量高，向下箭頭表示與第1行的健常男性的樣品相比該樣品的氨基酸量低。細的右上斜影線表示這些樣品的氨基酸量相對于上述健常男性的樣品的氨基酸量的比例為2倍以上（向上箭頭）或1/2以下（向下箭頭）。粗的左上斜影線表示這些樣品的氨基酸量相對于上述健常男性的樣品的氨基酸量的比例小于2 倍（向上箭頭）或小于1/2 (向下箭頭）。對于類風濕性關節(jié)炎而言，與對照的健常男性樣品相比，L-谷氨酸的血清濃度上升，但L-谷氨酰胺和L-半胱氨酸下降。對于腎臟癌而言，與健常男性樣品相比，D-絲氨酸的血清濃度上升，但D-丙氨酸的血清濃度下降。對于肺癌而言，與健常男性樣品相比，D-丙氨酸的血清濃度下降。對于心血管疾病而言，與健常男性樣品相比，L-精氨酸的血清濃度下降，但L-谷氨酸上升。對于多發(fā)性硬化癥而言，與健常男性樣品相比，D-絲氨酸的血清濃度上升，L-半胱氨酸的血清濃度下降。對于急性骨髓性白血病而言，與健常男性樣品相比，L-半胱氨酸的血清濃度下降。對于淋巴瘤而言，與健常男性樣品相比，L-半胱氨酸的血清濃度下降。對于急性淋巴性白血病而言，與健常男性樣品相比，L-谷氨酸的血清濃度上升，但L-半胱氨酸濃度下降。對于銀屑病而言，與健常男性樣品相比，L-精氨酸和L-半胱氨酸的血清濃度下降。對于糖尿病而言，與健常男性樣品相比，D-丙氨酸和L-半胱氨酸的血清濃度下降，但L-谷氨酸的血清濃度上升。另外，對于系統(tǒng)性紅斑狼瘡而言，未確認到變化。
[0268] 以往的氨基酸定量分析中，不能區(qū)分立體異構體，因此各氨基酸以其全部的立體異構體之和的方式被定量。然而，本發(fā)明的診斷方法中，可以將立體異構體分別區(qū)分為不同物質來定量。如圖3-1?圖3-3所示，如果將D-體的量以D-體和L-體的量之和的百分率 (% D)來表示，則與大腸癌患者的D-絲氨酸量（圖2-1)相比，大腸癌患者的絲氨酸的％ D(圖3-1)的偏差變少。同樣地，與腎臟病患者的D-丙氨酸量（圖2-5)相比，腎臟病患者的丙氨酸的％ D (圖3-3)的偏差變少?？梢哉J為其理由在于，D-氨基酸量與疾病相關，并且通過外消旋化可能與L-體量相關，因此通過用D-體和L-體之和進行標準化，從而可以排除L-體量的變化的影響。這樣，有時與疾病有相關性的D-氨基酸的量與其它物質的量也確認到相關性。這里，在該其它物質的量本身與上述疾病沒有相關性的情況下，通過作成將上述D-氨基酸的量以上述其它物質的量進行標準化的參數(shù)（例如％ D)，從而可以提高診斷特性。
[0269] 對于今后多數(shù)的疾病，與D-氨基酸量的相互關系的研究大規(guī)模地展開。由此進一步期待在大量疾病中開發(fā)基于D-氨基酸量的診斷技術。
【權利要求】
1. 一種疾病樣品分析裝置，其特征在于，包括下述機構：將被檢者的生物材料中的氨基酸立體異構體進行分離、定量的機構；將該氨基酸立體異構體的量代入判別式進行計算，獲得病態(tài)指標值的機構；和基于所述病態(tài)指標值輸出所述患者的病態(tài)信息的機構。
2. 根據(jù)權利要求1所述的疾病樣品分析裝置，其特征在于，所述判別式為：病態(tài)指標值=(所述被檢者的生物材料中的測定值中與所述疾病相關的氨基酸立體異構體的測定值V (健常者的生物材料中的與所述疾病相關的氨基酸立體異構體的基準值），或者病態(tài)指標值=[(所述被檢者的生物材料中的測定值中與所述疾病相關的氨基酸立體異構體的測定值）/{(所述被檢者的生物材料中的測定值中與所述疾病相關的氨基酸立體異構體的測定值）+ (所述被檢者的生物材料中的測定值中與所述疾病相關的氨基酸立體異構體的對映異構體的測定值）}] + [(健常者的基準值中與所述疾病相關的氨基酸立體異構體的基準值）/{(所述健常者的基準值中與所述疾病相關的氨基酸立體異構體的基準值）+ (所述健常者的基準值中與所述疾病相關的氨基酸立體異構體的對映異構體的基準值）}]。
3. 根據(jù)權利要求2所述的疾病樣品分析裝置，其特征在于，基于所述病態(tài)指標值輸出所述被檢者的病態(tài)信息的機構是，當所述病態(tài)指標值為2. 0或2. 0以上時，輸出所述被檢者罹患所述疾病的所述被檢者的病態(tài)信息的機構。
4. 根據(jù)權利要求2或3所述的疾病樣品分析裝置，其特征在于，在所述疾病為腎臟病時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為選自D-絲氨酸、D-蘇氨酸、D-丙氨酸、D-天冬酰胺、D-別蘇氨酸、D-谷氨酰胺、D-脯氨酸和D-苯基丙氨酸中的1種或2種以上的氨基酸，在所述疾病為前列腺癌時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-組氨酸和/或 D-天冬酰胺，在所述疾病為骨質疏松癥時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-天冬酰胺，在所述疾病為擴張型心肌病時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-絲氨酸、 L-精氨酸、D-谷氨酸和D-脯氨酸，在所述疾病為更年期障礙時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-組氨酸、L-苯基丙氨酸和D-天冬氨酸，在所述疾病為肉瘤時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-精氨酸，在所述疾病為阿爾茨海默病時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-別異亮氨酸、D-絲氨酸、D-丙氨酸、D-蛋氨酸、D-亮氨酸、D-天冬氨酸、D-苯基丙氨酸和L-苯基丙氨酸，在所述疾病為DAO缺損時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-絲氨酸、D-別蘇氨酸、D-丙氨酸、D-脯氨酸、D-亮氨酸和D-苯基丙氨酸，在所述疾病為DDO缺損時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-天冬酰胺、D-天冬氨酸和D-精氨酸，在所述疾病為苯丙酮酸尿癥時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-苯基丙氨酸，在所述疾病為楓糖尿癥時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-纈氨酸、L-別異亮氨酸、D-異亮氨酸、L-異亮氨酸和L-亮氨酸，在所述疾病為類風濕性關節(jié) 炎時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-谷氨酸、L-谷氨酰胺和L-半胱氨酸，在所述疾病為腎臟癌時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-絲氨酸和D-丙氨酸，在所述疾病為肺癌時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-丙氨酸，在所述疾病為心血管疾病時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-精氨酸和L-谷氨酸，在所述疾病為多發(fā)性硬化癥時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-絲氨酸和L-半胱氨酸，在所述疾病為急性骨髓性白血病時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-半胱氨酸，在所述疾病為淋巴瘤時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-半胱氨酸，在所述疾病為急性淋巴性白血病時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-谷氨酸和L-半胱氨酸，在所述疾病為銀屑病時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-精氨酸和L-半胱氨酸，在所述疾病為糖尿病時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-丙氨酸、L-半胱氨酸和L-谷氨酸。
5. -種疾病樣品分析系統(tǒng)，其特征在于，包括：將被檢者的生物材料中的氨基酸立體異構體進行分離、定量的定量分析部；將該氨基酸立體異構體的量代入判別式進行計算，獲得病態(tài)指標值的病態(tài)指標值演算部；和基于所述病態(tài)指標值輸出所述患者的病態(tài)信息的病態(tài)信息輸出部。
6. 根據(jù)權利要求5所述的疾病樣品分析系統(tǒng)，其特征在于，所述判別式為：病態(tài)指標值=(所述被檢者的生物材料中的測定值中與所述疾病相關的氨基酸立體異構體的測定值V(健常者的生物材料中的與所述疾病相關的氨基酸立體異構體的基準值），或者病態(tài)指標值=[(所述被檢者的生物材料中的測定值中與所述疾病相關的氨基酸立體異構體的測定值）/{(所述被檢者的生物材料中的測定值中與所述疾病相關的氨基酸立體異構體的測定值）+ (所述被檢者的生物材料中的測定值中與所述疾病相關的氨基酸立體異構體的對映異構體的測定值）}] + [(健常者的基準值中與所述疾病相關的氨基酸立體異構體的基準值）/{(所述健常者的基準值中與所述疾病相關的氨基酸立體異構體的基準值）+ (所述健常者的基準值中與所述疾病相關的氨基酸立體異構體的對映異構體的基準值）}]。
7. 根據(jù)權利要求6所述的疾病樣品分析系統(tǒng)，其特征在于，所述病態(tài)信息輸出部是，當所述病態(tài)指標值為2. 0或2. 0以上時，輸出所述被檢者罹患所述疾病的所述被檢者的病態(tài) 信息。
8. 根據(jù)權利要求6或7所述的疾病樣品分析系統(tǒng)，其特征在于，在所述疾病為腎臟病時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為選自D-絲氨酸、D-蘇氨酸、D-丙氨酸、D-天冬酰胺、D-別蘇氨酸、D-谷氨酰胺、D-脯氨酸和D-苯基丙氨酸中的1種或2種以上的氨基酸，在所述疾病為前列腺癌時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-組氨酸和/或 D-天冬酰胺，在所述疾病為骨質疏松癥時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-天冬酰胺，在所述疾病為擴張型心肌病時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-絲氨酸、 L-精氨酸、D-谷氨酸和D-脯氨酸，在所述疾病為更年期障礙時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-組氨酸、L-苯基丙氨酸和D-天冬氨酸，在所述疾病為肉瘤時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-精氨酸，在所述疾病為阿爾茨海默病時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-別異亮氨酸、D-絲氨酸、D-丙氨酸、D-蛋氨酸、D-亮氨酸、D-天冬氨酸、D-苯基丙氨酸和L-苯基丙氨酸，在所述疾病為DAO缺損時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-絲氨酸、D-別蘇氨酸、D-丙氨酸、D-脯氨酸、D-亮氨酸和D-苯基丙氨酸，在所述疾病為DDO缺損時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-天冬酰胺、D-天冬氨酸和D-精氨酸，在所述疾病為苯丙酮酸尿癥時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-苯基丙氨酸，在所述疾病為楓糖尿癥時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-纈氨酸、L-別異亮氨酸、D-異亮氨酸、L-異亮氨酸和L-亮氨酸，在所述疾病為類風濕性關節(jié) 炎時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-谷氨酸、L-谷氨酰胺和L-半胱氨酸，在所述疾病為腎臟癌時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-絲氨酸和D-丙氨酸，在所述疾病為肺癌時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-丙氨酸，在所述疾病為心血管疾病時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-精氨酸和L-谷氨酸，在所述疾病為多發(fā)性硬化癥時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-絲氨酸和L-半胱氨酸，在所述疾病為急性骨髓性白血病時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-半胱氨酸，在所述疾病為淋巴瘤時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-半胱氨酸，在所述疾病為急性淋巴性白血病時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-谷氨酸和L-半胱氨酸，在所述疾病為銀屑病時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-精氨酸和L-半胱氨酸，在所述疾病為糖尿病時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-丙氨酸、L-半胱氨酸和L-谷氨酸。
9. 一種疾病樣品分析方法，其特征在于，包括下述步驟：測定被檢者的生物材料中的氨基酸立體異構體的量的步驟；將該氨基酸立體異構體的量代入判別式進行計算，獲得病態(tài)指標值的機構；和基于所述病態(tài)指標值輸出所述患者的病態(tài)信息的步驟。
10. 根據(jù)權利要求9所述的疾病樣品分析方法，其特征在于，所述判別式為：病態(tài)指標值=(所述被檢者的生物材料中的測定值中與所述疾病相關的氨基酸立體異構體的測定值V(健常者的生物材料中的與所述疾病相關的氨基酸立體異構體的基準值），或者病態(tài)指標值=[(所述被檢者的生物材料中的測定值中與所述疾病相關的氨基酸立體異構體的測定值）/{(所述被檢者的生物材料中的測定值中與所述疾病相關的氨基酸立體異構體的測定值）+ (所述被檢者的生物材料中的測定值中與所述疾病相關的氨基酸立體異構體的對映異構體的測定值）}] + [(健常者的基準值中與所述疾病相關的氨基酸立體異構體的基準值）/{(所述健常者的基準值中與所述疾病相關的氨基酸立體異構體的基準值）+ (所述健常者的基準值中與所述疾病相關的氨基酸立體異構體的對映異構體的基準值）}]。
11. 根據(jù)權利要求10所述的疾病樣品分析方法，其特征在于，基于所述病態(tài)指標值輸出所述被檢者的病態(tài)信息的步驟是，當所述病態(tài)指標值為2. 0或2. 0以上時，輸出所述被檢者罹患所述疾病的所述被檢者的病態(tài)信息的步驟。
12. 根據(jù)權利要求10或11所述的疾病樣品分析方法，其特征在于，在所述疾病為腎臟病時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為選自D-絲氨酸、D-蘇氨酸、D-丙氨酸、D-天冬酰胺、D-別蘇氨酸、D-谷氨酰胺、D-脯氨酸和D-苯基丙氨酸中的1種或2種以上的氨基酸，在所述疾病為前列腺癌時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-組氨酸和/或 D-天冬酰胺，在所述疾病為骨質疏松癥時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-天冬酰胺，在所述疾病為擴張型心肌病時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-絲氨酸、 L-精氨酸、D-谷氨酸和D-脯氨酸，在所述疾病為更年期障礙時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-組氨酸、L-苯基丙氨酸和D-天冬氨酸，在所述疾病為肉瘤時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-精氨酸，在所述疾病為阿爾茨海默病時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-別異亮氨酸、D-絲氨酸、D-丙氨酸、D-蛋氨酸、D-亮氨酸、D-天冬氨酸、D-苯基丙氨酸和L-苯基丙氨酸，在所述疾病為DAO缺損時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-絲氨酸、D-別蘇氨酸、D-丙氨酸、D-脯氨酸、D-亮氨酸和D-苯基丙氨酸，在所述疾病為DD0缺損時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-天冬酰胺、D-天冬氨酸和D-精氨酸，在所述疾病為苯丙酮酸尿癥時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-苯基丙氨酸，在所述疾病為楓糖尿癥時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-纈氨酸、L-別異亮氨酸、D-異亮氨酸、L-異亮氨酸和L-亮氨酸，在所述疾病為類風濕性關節(jié) 炎時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-谷氨酸、L-谷氨酰胺和L-半胱氨酸，在所述疾病為腎臟癌時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-絲氨酸和D-丙氨酸，在所述疾病為肺癌時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-丙氨酸，在所述疾病為心血管疾病時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-精氨酸和L-谷氨酸，在所述疾病為多發(fā)性硬化癥時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-絲氨酸和L-半胱氨酸，在所述疾病為急性骨髓性白血病時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-半胱氨酸，在所述疾病為淋巴瘤時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-半胱氨酸，在所述疾病為急性淋巴性白血病時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-谷氨酸和L-半胱氨酸，在所述疾病為銀屑病時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為L-精氨酸和L-半胱氨酸，在所述疾病為糖尿病時，與所述疾病相關的氨基酸立體異構體為D-丙氨酸、L-半胱氨酸和L-谷氨酸。
【文檔編號】G01N33/68GK104246497SQ201380019921
【公開日】2014年12月24日申請日期:2013年3月18日優(yōu)先權日:2012年3月18日
【發(fā)明者】健司浜瀨, 洋介東條, 真史三田, 智惠子水本申請人:國立大學法人九州大學, 株式會社資生堂

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