專利名稱：一種檢測(cè)食品中違禁添加劑酸性橙Ⅱ的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種食品檢測(cè)領(lǐng)域的測(cè)試方法，具體涉及一種以膨脹石墨電極為工作電極，定量檢測(cè)食品中違禁添加劑酸性橙II的方法。
背景技術(shù)：
酸性橙II俗稱金黃粉，是一種常用的橙紅色工業(yè)染料，主要用于蠶絲、羊毛等紡織品及紙張、皮革等染色，是水溶性的偶氮系列人工合成染色劑。目前已知酸性橙II不僅對(duì)眼睛，皮膚，呼吸系統(tǒng)等有刺激性，而且還有潛在的致癌性和致病變性，甚至可能對(duì)生育造成影響，比如不孕癥或畸形兒?；谝陨衔：Γ嚓P(guān)部門規(guī)定，禁止將酸性橙II作為食品添加劑使用。同時(shí)酸性橙II也被納入國(guó)家衛(wèi)生部公布的第一批《食品中可能違法添加的非食用物質(zhì)和易濫用的食品添加劑名單》中。
盡管如此，由于酸性橙II色澤鮮艷，著色穩(wěn)定和價(jià)格低廉等特點(diǎn)，一些不法商販為了牟取暴利將其用于食品生產(chǎn)與加工，嚴(yán)重危害了消費(fèi)者身體健康。而對(duì)現(xiàn)有食品檢測(cè)技術(shù)的文獻(xiàn)檢索發(fā)現(xiàn)，目前酸性橙II的檢測(cè)方法主要有紙層析法，高效液相色譜法，液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法，熒光光譜法以及示波極譜法等。這些方法大都需要大型的實(shí)驗(yàn)儀器且實(shí)驗(yàn)操作條件苛刻，所以及時(shí)準(zhǔn)確判斷食品中是否存在該非食用色素，開發(fā)一套簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確的食品中非食用色素酸性橙II的檢測(cè)方法具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是針對(duì)現(xiàn)有食品中違禁添加劑酸性橙II的檢測(cè)方法大都需要大型的實(shí)驗(yàn)儀器且實(shí)驗(yàn)操作條件苛刻，成本高等缺點(diǎn)，提供一種簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確的食品中非食用色素酸性橙II的檢測(cè)方法。為解決上述技術(shù)問題本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是一種檢測(cè)食品中違禁添加劑酸性橙II的方法，該方法包括如下步驟(I)膨脹石墨電極的制備將化學(xué)氧化法制備的膨脹石墨與固體石蠟按質(zhì)量比99 1置于燒杯中，不斷攪拌使兩者混合均勻，微熱至石蠟全部熔解，冷卻至室溫后，將上述混合物填充至電極中，然后將膨脹石墨電極表面拋光，用去離子水沖洗備用；(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制將一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液分別取20mL置于燒杯中，插入步驟(I)得到的電極，開路富集9min后，插入?yún)⒈入姌O飽和甘汞電極和對(duì)電極鉬絲電極，接好伏安儀，設(shè)置方波伏安法實(shí)驗(yàn)參數(shù)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液進(jìn)行電化學(xué)測(cè)試，同一濃度的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液平行測(cè)試3飛次，記錄每一個(gè)濃度所對(duì)應(yīng)的峰電流值，所得數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計(jì)后，以相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的濃度為橫坐標(biāo)，峰電流平均值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)而獲得相應(yīng)的線性回歸方程；(3)樣品檢測(cè)取2. OmL處理后的待測(cè)樣品溶液，在pH為5. 5,0. Imol -Γ1的BR緩沖溶液做支持電解質(zhì)的體系中，按照與步驟(2)相同的電化學(xué)測(cè)試方法對(duì)待測(cè)樣品溶液進(jìn)行測(cè)試，以獲得電流值，所得電流值用步驟(2)所得標(biāo)準(zhǔn)曲線所對(duì)應(yīng)的線性回歸方程計(jì)算出待檢測(cè)樣品中酸性橙II的濃度。作為對(duì)上述方案的限定，步驟(2)中的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液是按下述方法制備的I :標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液A的配制準(zhǔn)確稱取O. 0175g的酸性橙II置于500ml燒杯中，用去離子水溶解后定容至500mL，此溶液為標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液A，其酸性橙II的濃度為I. O X 10 4mol · L 1II :標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的配制將標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液A與O. 5mol · L4BR緩沖溶液(由醋酸30. 0g、磷酸45. 0g、硼酸32. 0g，加入適量氫氧化鈉至混合液澄清，定容至IOOOmL后得到)混合，按比例稀釋至所需濃度，用O. Imol · L4NaOH調(diào)節(jié)pH值至5. 5，定容至IOOmL,使溶液的最終組成為0. Imol · L-1BR+酸性橙II，其酸性橙II的濃度分別為1.0X10^8mol · L-1，4.0X10 8mo I · L 1, 7. O X IO 8mo I · L 1, I · O X IO 7mo I · L ^ 3.0X10 7mo I · L 1,7.0X10 7mo I · L 1, I · 0 X 10 6mo I · L ^3. OX 10 6mo I · L 1, 4. 0 X 10 6mo I · L 1,5. 0 X 10 6mol · L S 7. 0 X 10 6mol · L \ 9. 0 X 10 6mol · L 1 和 I. 0 X 10 5mol · L、作為對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步限定，步驟(2)中所述的方波伏安法實(shí)驗(yàn)參數(shù)為掃描區(qū)間0. 3V I. OV ;電位增量E :0. 002V ;振幅A :0. 025V ;頻率F :15Hz ;靜止時(shí)間T 30S ;靈敏度S :1X 10_3A/V ;所述的峰電流為氧化峰電流。作為對(duì)本發(fā)明的再一步限定，步驟(3)中所述的待測(cè)樣品溶液是按以下方法處理的I :稱取市售丑腐皮樣品5. Og于IOOmL燒杯中，加入5OmL乙醇溶液,室溫下超聲提取30min, 5000rpm離心IOmin,收集上清液,用乙醇溶液定容至IOOmL備用；II :移取10. OmL飲料食品于IOOmL燒杯中，經(jīng)0. 45 μ m濾膜過濾,5000rpm離心IOmin,收集上清液,用去離子水定容至100mL。采用了上述的技術(shù)方案后，在以0. Imol · L4BR緩沖溶液為電解質(zhì)支持液的測(cè)量體系中，掃描電壓為0. 66V處出現(xiàn)了一明顯的氧化峰(見說明書附1)，氧化峰強(qiáng)度和酸性橙II的濃度呈良好的線性關(guān)系，所得標(biāo)準(zhǔn)曲線為分段曲線(見說明書附2)，濃度范圍在 I. 0Xl(T8mol *L_1 7. 0Xl(T7mol *L_1 時(shí)，其線性回歸方程為 ip=3. 8158+1. 4737 X IO8C,線性相關(guān)系數(shù)為R=O. 9987 ;濃度范圍在7. OX l(T7mol · Γ1 I. OX l(T5mol · Γ1時(shí)，其線性回歸方程為ip=95. 0911+1. 2996X IO7C,線性相關(guān)系數(shù)為R=O. 9877。檢測(cè)限為7. OX 10_9mol · L'其中C為所檢測(cè)樣品中酸性橙II的濃度，ip為峰電流值。該線性標(biāo)準(zhǔn)曲線，線性良好，可用于測(cè)定樣品中酸性橙II的含量。本發(fā)明無需復(fù)雜設(shè)備，檢測(cè)成本低， 操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)限低，靈敏度高，克服了現(xiàn)有技術(shù)中的不足，可以廣泛應(yīng)用于食品檢測(cè)領(lǐng)域。


下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步說明。圖I是酸性橙II在膨脹石墨電極上的方波伏安曲線圖(氧化峰)；圖2是酸性橙II的氧化峰電流與其濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
具體實(shí)施方式
現(xiàn)在結(jié)合附圖和以下實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說明，但應(yīng)了解的是，這些實(shí)施例僅為例示說明之用，而不應(yīng)被解釋為本發(fā)明實(shí)施的限制。實(shí)施例I(I)膨脹石墨電極的制備將化學(xué)氧化法制備的膨脹石墨與固體石蠟按質(zhì)量比99 1置于燒杯中，不斷攪拌使兩者混合均勻，微熱至石蠟全部熔解，冷卻至室溫后，將上述混合物填充至電極中，然后將膨脹石墨電極表面拋光，用去離子水沖洗備用；(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制將濃度為l.OXlOSmol^L^^i.OXlOSmol ^L1,7.0X10 8mol ^L1,1. 0X10 7mo I · L 1, 3. 0 X 10 7mo I · L 1,1. OX 10 7mo I · L 1, I · 0 X 10 6mo I · L 1，3.0X10 6mo I · L 1, 4. 0 X 10 6mo I · L 1, 5· 0 X 10 6mo I · L 1, 7. 0 X 10 6mo I · L 1,9. OX 10_6mol · L-1和I. 0X 10_5mol · L-1的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液分別取20mL置于燒杯中，插入步驟(I)得到的電極，開路富集9min后，插入?yún)⒈入姌O飽和甘汞電極和對(duì)電極鉬絲電極，接好伏安儀，設(shè)置方波伏安法實(shí)驗(yàn)參數(shù)(掃描區(qū)間0. 3疒I. OV ；電位增量E :0. 002V ;振幅A
0.025V ;頻率F :15Hz ;靜止時(shí)間T 30S ;靈敏度S : I X 10_3A/V)對(duì)上述標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液進(jìn)行電化學(xué)測(cè)試，同一濃度的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液平行測(cè)試3飛次，記錄每一個(gè)濃度所對(duì)應(yīng)的氧化峰電流值，所得數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計(jì)后，以相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的濃度為橫坐標(biāo)，峰電流平均值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)而獲得相應(yīng)的線性回歸方程；當(dāng)濃度范圍在I. 0X10_8mol -T1 7. 0X10_7mol -T1時(shí)，其線性回歸方程為ip=3. 8158+1. 4737 X 108C，線性相關(guān)系數(shù)為R=O. 9987 ;當(dāng)濃度范圍在7. 0Xl(T7mol · L-1 I. 0Xl(T5mol · L-1 時(shí)，其線性回歸方程為 ip=95. 0911+1. 2996X IO7C,線性相關(guān)系數(shù)為R=O. 9877。(3)樣品檢測(cè)樣品來源某品牌齒汁 腐皮稱取齒汁丑腐皮樣品5. Og于IOOmL燒杯中，加入5OmL乙醇溶液,室溫下超聲提取30min。5000rpm離心lOmin，收集上清液，用乙醇溶液定容至100ml。取2. OmL提取后的待測(cè)樣品溶液，在PH5. 5的0. Imol · PBR緩沖溶液支持電解質(zhì)中，按照實(shí)施例I的方法及步驟進(jìn)行電化學(xué)測(cè)試，根據(jù)掃描所得的電流值和標(biāo)準(zhǔn)曲線所對(duì)應(yīng)的線性回歸方程，計(jì)算出所測(cè)樣品中酸性橙II的濃度。測(cè)定結(jié)果表明測(cè)得的氧化峰電流值為零，即所測(cè)樣品中不含有違禁食品添加劑酸性橙II。在上述待測(cè)樣品溶液中，分別加入I. OmL和7. OmL的
1.0Xl(T4mol · I/1的酸性橙II標(biāo)準(zhǔn)溶液，使得樣品溶液中所加的酸性橙II的濃度分別為
I.OX 1(Γ6ι οI · L-1 (0. 350mg · L-1)和 7. OX l(T6mol · L-1 (2. 452mg · Γ1)。在相同測(cè)試條件下檢測(cè)，測(cè)其方法加標(biāo)回收率，其結(jié)果如表I所示。表I某品牌鹵汁豆腐皮加標(biāo)回收率測(cè)定結(jié)果(η=3)
權(quán)利要求
1.一種檢測(cè)食品中違禁添加劑酸性橙II的方法，其特征在于該方法包括如下步驟 (1)膨脹石墨電極的制備 將化學(xué)氧化法制備的膨脹石墨與固體石蠟按質(zhì)量比99 1置于燒杯中，不斷攪拌使兩者混合均勻，微熱至石蠟全部熔解，冷卻至室溫后，將上述混合物填充至電極中，然后將膨脹石墨電極表面拋光，用去離子水沖洗備用； (2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 將一系列不同濃度的酸性橙II標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液分別取20mL置于燒杯中，插入步驟(I)得到的電極，開路富集9min后，在燒杯中插入?yún)⒈入姌O飽和甘汞電極和對(duì)電極鉬絲電極，接好伏安儀，設(shè)置方波伏安法實(shí)驗(yàn)參數(shù)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液進(jìn)行電化學(xué)測(cè)試，同一濃度的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液平行測(cè)試3 6次，記錄每一個(gè)濃度所對(duì)應(yīng)的峰電流值，所得數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計(jì)后，以相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的濃度為橫坐標(biāo)，峰電流平均值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)而獲得相應(yīng)的線性回歸方程； (3)樣品檢測(cè): 取2. OmL處理后的待測(cè)樣品溶液，在pH為5. 5,0. Imol -L^1的BR緩沖溶液做支持電解質(zhì)的體系中，按照與步驟(2)相同的電化學(xué)測(cè)試方法對(duì)待測(cè)樣品溶液進(jìn)行測(cè)試，以獲得氧化峰電流值，所得電流值用步驟(2)所得標(biāo)準(zhǔn)曲線所對(duì)應(yīng)的線性回歸方程計(jì)算出待檢測(cè)樣品中酸性橙II的濃度。
2.如權(quán)利要求I所述的一種檢測(cè)食品中違禁添加劑酸性橙II的方法，其特征是步驟(2)中所述的一系列不同濃度的酸性橙II標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備的濃度分別為1.0X10_8mol .L'4.0X10 8mo I L 1, 7 0 X 10 8mo I L 1, I 0 X 10 7mo I L ^ 3.0X10 7mo I L 1,7.0X10 7mo I L 1, I 0 X 10 6mo I L ^3. OX 10 6mo I L 1, 4. 0 X 10 6mo I L 1,5.0 X 10 6mol L S 7. 0 X 10 6mol L \ 9. 0 X 10 6mol L 1 和 I. 0 X 10 5mol L、
3.如權(quán)利要求I所述的一種檢測(cè)食品中違禁添加劑酸性橙II的方法，其特征是步驟(2)中所述的方波伏安法實(shí)驗(yàn)參數(shù)為掃描區(qū)間0. 3V I. OV ;電位增量E :0. 002V ;振幅A 0.025V ;頻率 F :15Hz ;靜止時(shí)間 T 30S ;靈敏度 S :1X1(T3A/V。
4.如權(quán)利要求I所述的一種檢測(cè)食品中違禁添加劑酸性橙II的方法，其特征是步驟(2)中所述的峰電流為氧化峰電流。
5.如權(quán)利要求I所述的一種檢測(cè)食品中違禁添加劑酸性橙II的方法，其特征是步驟(3)中所述的待測(cè)樣品溶液是按以下方法處理的 I:稱取市售豆腐皮樣品5. Og于IOOmL燒杯中，加入5OmL乙醇溶液,室溫下超聲提取30min, 5000rpm離心IOmin,收集上清液,用乙醇溶液定容至IOOmL備用； II:移取10. OmL飲料食品于IOOmL燒杯中，經(jīng)0. 45 y m濾膜過濾,5000rpm離心IOmin,收集上清液，用去離子水定容至IOOmL備用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種檢測(cè)食品中違禁添加劑酸性橙Ⅱ的方法，首先配制一系列不同濃度的酸性橙II標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，然后采用方波伏安法對(duì)其進(jìn)行電化學(xué)檢測(cè)，獲得氧化峰電流值，以標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的濃度為橫坐標(biāo)，氧化峰平均電流值為縱坐標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)而得到相應(yīng)的線性回歸方程，然后針對(duì)不同待測(cè)樣品，采用超聲萃取、離心分離等操作對(duì)其進(jìn)行前處理，所得電流值用標(biāo)準(zhǔn)曲線所對(duì)應(yīng)的線性回歸方程計(jì)算出待檢測(cè)樣品中酸性橙Ⅱ的含量，本發(fā)明檢測(cè)限低，無需復(fù)雜設(shè)備，檢測(cè)成本低，操作簡(jiǎn)單，靈敏度高，克服了現(xiàn)有技術(shù)中的不足，可以廣泛的應(yīng)用于食品檢測(cè)領(lǐng)域。
文檔編號(hào)G01N27/30GK102818825SQ20121023442
公開日2012年12月12日 申請(qǐng)日期2012年7月6日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月6日
發(fā)明者陳智棟, 姜?dú)g, 張靜, 王文昌 申請(qǐng)人:常州大學(xué), 常州江工闊智電子技術(shù)有限公司