采用微量脂肪酸鑒別植物源性地溝油的方法
【專利摘要】本發(fā)明采用微量脂肪酸鑒別植物源性地溝油的新方法，通過對照加熱前后食用油中微量脂肪酸的變化，同時結合典型地溝油樣品中微量脂肪酸的含量，確立了植物源性地溝油鑒別的特征性指示物，并制定了與該特征性指示物相關的判定指標。依據建立的判定指標，可實現(xiàn)對植物源性地溝油的有效甄別。該發(fā)明具有操作簡單、準確率高、特異性強、易于推廣的優(yōu)點，為地溝油檢測提供了有力的方法補充，提高了地溝油檢測的準確度。
【專利說明】采用微量脂肪酸鑒別植物源性地溝油的方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種用于鑒別植物源性地溝油的新方法，該方法提出了用于區(qū)分植物源性地溝油的特征性指示物，并制定了相應的判斷依據。該方法的建立將有助于改善我國在地溝油鑒定方面的現(xiàn)狀，彌補現(xiàn)有地溝油鑒定方法的不足。將該方法與動物源性地溝油鑒定方法相結合，將有效提高鑒別方法的準確性和特異性。
【背景技術】
[0002]地溝油是一個泛指概念，是對各類劣質油的統(tǒng)稱，一般包括潲水油、煎炸廢油、食品及相關企業(yè)產生的廢棄油脂等。這些地溝油經過脫色、水洗、除臭后經不法商販銷售流入市場，可以獲取巨額的利潤。但是食用地溝油對人體的身體健康存在較多危害，例如消化不良、腹脹、腹瀉，甚至引發(fā)各種癌癥。因此，不僅需要加大執(zhí)法、監(jiān)管力度進一步規(guī)范食用油市場，還需要開發(fā)一種準確、可靠地鑒別地溝油的方法，這是我國現(xiàn)階段迫切需要解決的問題。
[0003]目前，用于地溝油鑒定的指標主要包括:膽固醇(陳紅等.超高效液相色譜三重四極桿質譜法測定火鍋油、潲水油及地溝油中膽固醇含量.中國食品衛(wèi)生雜志，2011，23(5):429-32;郭濤等.高效液相色譜法測膽固醇含量鑒別地溝油.食品科學，2009，30(22):286-9;張蕊等.測定膽固醇含量鑒別地溝油的研究.中國油脂，2006, 31 (5):65-7 ;周永生等.固相萃取_氣相色譜_質譜聯(lián)用檢測地溝油中膽固醇.色譜，2012，30 (2):207-10)、電導率(王飛艷等.基于電導率的地溝油快速定性與半定量分析.食品科學，2011，32(18):304-7;周智慧等.電導率法快速鑒別食用油品質.中國油脂，2011，36 (10):64-6 ;朱銳，王督，楊小京，何東平.電導率測定在鑒別食用植物油摻偽應用研究.糧食與油脂，2008，8:42-3)、特定基因、多環(huán)芳烴等。然而，現(xiàn)有的這些鑒定指標在實際應用時存在較多的缺陷，其中特異性差、靈敏度低是主要的問題。為此，我們首先確立了動物源性地溝油的特征性指示物，并制定了相應的判定依據。然而從地溝油來源可以看出，一般地溝油大致分為兩類,一類為動物源性地溝油，一類為植物源性地溝油。如果僅從動物源性地溝油鑒定方法出發(fā)，有可能出現(xiàn)漏判的現(xiàn)象。為了進一步擴大地溝油檢測的范圍，提高地溝油檢測的準確性，減小在判定過程中存在的漏判問題，需要進一步對植物源性地溝油進行有效檢測和表征。因此，確立一種準確、可靠、特異性的指示物，制定該指示物的準確指標限值，并建立用于植物源性地溝油鑒定的特異性方法，對于我國進一步完善新技術標準、開展有效地抽樣檢測、健全監(jiān)管政策具有十分重要的意義。只有將動物源性地溝油和植物源性地溝油檢測、鑒定方法相結合，才能進一步完善地溝油鑒定方法。

【發(fā)明內容】

[0004]本發(fā)明的目的在于探索用于區(qū)分植物源性地溝油的特征性指示物，制定相應的判定指標，并開發(fā)一種操作簡單、準確、可靠、特異性強的鑒別方法，從而對植物源性地溝油進行有效鑒定。該方法與動物源性地溝油鑒定方法的結合，將有效減小地溝油鑒定過程中存在的漏判問題。
[0005]為解決上述技術問題，本發(fā)明所采用的技術方案是:
[0006]a)樣品前處理:取0.02-0.15g待測食用油，加入50-200 μ L l_5mol/L衍生化試劑，然后再向其中加入0.1-1.0mL正己烷，并進行充分震蕩。待靜置分層后，使用飽和食鹽水對正己烷相進行洗滌。
[0007]衍生化試劑為強堿(如氫氧化鉀)或者強酸(如濃硫酸)的醇溶液；強堿為氫氧化鉀、氫氧化鈉或甲醇鈉；強酸為濃硫酸；醇為甲醇或乙醇。
[0008]b)儀器分析:取正己烷相溶液進行分析，以氣相色譜與多維氣相色譜的結合、或氣相色譜與氣相色譜串聯(lián)質譜的結合作為分析手段，選擇其中一種相對穩(wěn)定、含量適中的脂肪酸衍生化產物作為參考物，并確定用于動物源性地溝油鑒別的特征性指示物。設定儀器分析條件，分別對特征性指示物和參考物進行檢測分析。
[0009]特征性指示物是指在天然動、植物油中含量差別較大、能夠表征反復使用過的植物油特點的特征性脂肪酸，如正構十一碳脂肪酸；參考物可以為飽和直鏈十五碳脂肪酸、十七碳脂肪酸等的甲酯化或乙酯化產物。
[0010]c)數據統(tǒng)計:
[0011]先由氣相色譜面積歸一化法計算參考物的相對含量；再借助多維氣相色譜或氣相色譜串聯(lián)質譜，記錄特征性指示物衍生化產物和參考物的峰面積或者峰高，計算其峰面積或者峰高的比值。然后結合參考物的相對含量，計算特征指示物衍生化產物的相對含量。
[0012]d)結果判斷:依據確立的特征性指示物衍生化產物的判定指標，對植物源性地溝油進行判定。該判據指標是根據特征指示物的衍生化產物在天然植物油、加熱植物油以及地溝油中的相對含量進行制定的。植物油為玉米油、大豆油、花生油、芝麻油、菜籽油、葵花油、橄欖油、稻米油、紅花油、芥花籽油、堅果油、小麥胚芽油中的一種或二種以上混合；動物油為牛油、羊油、豬油。
[0013]正構十一碳脂肪酸甲酯的指標為1.1ppm,當該特征性指示物衍生化產物的含量超過判定指標時，即判定該食用油中摻雜了植物源性地溝油。反之，則未摻雜植物源性地溝油。
[0014]本發(fā)明具有如下優(yōu)點:
[0015](I)操作簡單:前處理過程僅需要簡單的衍生化處理
[0016](2)準確率高:可以準確地區(qū)分動物源性地溝油
[0017](3)特異性強:特征性指示物的衍生化產物作為植物源性地溝油的特異性指標，在甄別該類地溝油時具有特異性的識別作用。
[0018](4)便于推廣:分析儀器比較普遍，常規(guī)分析實驗室具備該條件。
【具體實施方式】
[0019]表1為本發(fā)明中判定指標的確定依據
[0020]表2為采用本發(fā)明方法，鑒別植物源性地溝油的結果。
[0021]表3為將動、植物源性地溝油鑒定方法相結合，對待測油樣的判斷結果。
[0022]實施例1:
[0023]分別取0.06g豆油、玉米油、花生油等天然植物油以及前三種天然植物油的加熱樣品置于一次性聚四氟乙烯管中，然后分別向其中加入150 μ L2mol/L氫氧化鉀的甲醇溶液，再分別加入ImL正己烷，充分震蕩后，靜置分層。分別取上層清夜I μ L進氣相色譜和多維氣相色譜進行分析。儀器分析完畢，采用歸一化法對數據進行處理，記錄氣相色譜上飽和直鏈十五碳脂肪酸酸甲酯的相對含量(MO)。然后結合多維氣相色譜儀中異構十五碳脂肪酸甲酯和飽和直鏈十五碳脂肪酸甲酯的峰面積比值(Al / Α0)，計算出不同動物油中異構十五碳脂肪酸甲酯的相對含量(Ml)，Ml=Al / Α0ΧΜ0。
[0024]從表1中可以看出，對于不同的食用油而言，其中含有的正構十一碳脂肪酸甲酯的相對含量較小，低于1.lppm。而當食用油加熱后，其含有的正構十一碳脂肪酸甲酯含量明顯增大O 1.5ppm)，異構十五碳脂肪酸甲酯含量基本不變。由此可見，植物源性地溝油經歷過反復加熱后，必將導致其正構十一碳脂肪酸甲酯含量增大，而僅從異構十五碳脂肪酸甲酯的含量則無法對植物源性地溝油進行識別。因此本發(fā)明所建立的特征性指示物可以將植物源性地溝油和食用油區(qū)分開來。
[0025]表1食用油中正構十一碳脂肪酸甲酯的含量
[0026]
【權利要求】
1.采用微量脂肪酸鑒別植物源性地溝油的方法，其特征在于: 油脂樣品經過簡單的前處理、儀器分析和系統(tǒng)的數據統(tǒng)計，然后再依據該方法中針對特征性指示物衍生化產物制定的判定指標，對待測油樣中是否含有植物源性地溝油進行判定。具體流程如下: a)樣品前處理:選擇衍生化試劑對待測食用油樣進行衍生，然后向其中加入正己烷，并進行充分震蕩。待靜置分層后，用飽和食鹽水對正己烷相進行洗滌； 所述食用油為食用植物油； b)儀器分析:將氣相色譜與多維氣相色譜或氣相色譜串聯(lián)質譜技術聯(lián)合使用作為分析手段，實現(xiàn)脂肪酸衍生化產物之間的有效分離； 其中，選擇一種相對穩(wěn)定、含量適中的脂肪酸衍生化產物作為參考物，并確定用于動物源性地溝油鑒別的特征性指示物； 設定儀器分析條件，分別對特征性指示物和參考物進行檢測分析； c)數據統(tǒng)計: 先由氣相色譜面積歸一化法計算參考物的相對含量； 再借助多維氣相色譜或氣相色譜串聯(lián)質譜，記錄特征性指示物衍生化產物和參考物的峰面積或者峰高，并計算出特征性指示物衍生化產物和參考物峰面積或者峰高的比值；然后結合參考物的相對含量，計算特征指示物衍生化產物的相對含量； d)結果判斷:依據確立的特征指示物衍生化產物的判定指標，對待測油樣中是否含有植物源性地溝油進行判定。當該特征指示物衍生化產物的含量超過判定指標時，即判定待測油樣中含有植物源性地溝油。
2.按照權利要求1所述的方法，其特征在于:步驟a中取0.02-0.15g待測油樣，加入50-200 μ L l-5mol / L衍生化試劑，然后再向其中加入0.1_1.0mL正己烷，并進行充分震蕩。
3.按照權利要求2所述的方法，其特征在于:衍生化試劑是指強堿或者強酸的醇溶液；其中強堿為氫氧化鉀、氫氧化鈉或甲醇鈉；強酸為濃硫酸；醇為甲醇或乙醇。
4.按照權利要求1所述的方法，其特征在于:步驟b中特征指示物是指在天然動、植物油中含量差別較大、能夠表征反復使用過的植物油特點的特征性脂肪酸，如正構十一碳脂肪酸；參考物可以為飽和直鏈十五碳脂肪酸或十七碳脂肪酸等的甲酯化或乙酯化產物。
5.按照權利要求1所述的方法，其特征在于:步驟d中的判據指標是根據特征指示物的衍生化產物在天然植物油、加熱植物油以及典型地溝油中的相對含量進行制定的。
6.按照權利要求1所述的方法，其特征在于:步驟d中正構十一碳脂肪酸甲酯的判定指標為1.lppm。
7.按照權利要求1或5所述的方法，其特征在于:植物油為玉米油、大豆油、花生油、芝麻油、菜籽油、葵花油、橄欖油、稻米油、紅花油、芥花籽油、堅果油、小麥胚芽油中的一種或二種以上混合。
【文檔編號】G01N30/06GK103512990SQ201210224647
【公開日】2014年1月15日 申請日期:2012年6月30日 優(yōu)先權日:2012年6月30日
【發(fā)明者】陳吉平, 金靜, 田玉增, 王龍星, 鄒黎黎, 王淑秋 申請人:中國科學院大連化學物理研究所