專利名稱：一種應(yīng)用于微量明膠顆粒凝集hiv-1近期感染檢測法的血清或血漿樣品稀釋液的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其是一種檢測HIV - I近期感染中應(yīng)用的試劑。
背景技術(shù)：
艾滋病是一種傳染病，檢測艾滋病毒(HIV)是發(fā)現(xiàn)感染者的重要方法。為了掌握其流行趨勢，評價預(yù)防控制的效果，世界各國都想應(yīng)用HIV新發(fā)感染率來評價，而新發(fā)感染率的計算則需要有HIV近期感染數(shù)據(jù)來進行。HIV近期感染數(shù)據(jù)，可以通過多種實驗室檢測HIV近期感染方法來獲得。實驗室檢測HIV近期感染方法可根據(jù)使用的標本是否是血清轉(zhuǎn)陽前或是血清轉(zhuǎn)陽后來分類。血清轉(zhuǎn)陽前的標本采用的方法是檢測標本中HIV-I的P24抗原或HIV-I RNA ;血清轉(zhuǎn)陽后的標本采用的方法有3A11-LS、BED-CEIA等方法，它們同屬于血清學檢測近期HIV-I血清轉(zhuǎn)陽方法的一類(STARHS)。除上述的方法外，到現(xiàn)在為止所建立起來的實驗室檢測方法已近20種。微量明膠顆粒凝集HIV-I近期感染檢測法，即ML-PA法(以前用的名稱為PA-LS)是由目前世界上公認的一種簡單、方便的初篩HIV明膠顆粒凝集方法(PA)改良而成的。PA方法是用日本 Fujirebio公司生產(chǎn)的HIV艾滋病診斷試劑來進行的，它通過將HIV-I抗原(HIV_l/gp41 和HIV-1/P24)包被在人工載體明膠粒子上，致敏離子和血中的HIV-I抗體進行反應(yīng)發(fā)生凝集,產(chǎn)生粒子凝集反應(yīng)，由此可檢測出血清和血漿中的HIV-I抗體。微量明膠顆粒凝集HIV-I近期感染檢測法與目前國際上應(yīng)用較為廣泛的BED HIV-I近期感染檢測方法比較，具有更為簡單、便宜、不需要儀器設(shè)備和非常易于推廣的特點。它的價格僅為BED方法的二十分之一至三十分之一。但由于該方法中使用的血清或血衆(zhòng)樣品的稀釋液是BioMerieux (Raleigh, NC)公司生產(chǎn)的Vironostika HIV抗體專用檢測試劑的Dilsim 11稀釋液，因此價格昂貴，有效保存期很短，一般情況下不能單獨提供，在中國是無法購買得到的。因而，極大的限制了該方法在我國的廣泛應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的就是提供一種血清或血漿樣品的稀釋液，為微量明膠顆粒凝集HIV-I近期感染檢測法(ML-PA)能在我國廣泛應(yīng)用的問題。該稀釋液可以替代ML-PA檢測方法中使用的Dilsim 11稀釋液，且不影響該方法的實驗和檢測結(jié)果。本發(fā)明的應(yīng)用于微量明膠顆粒凝集HIV-I近期感染檢測法的血清或血漿樣品稀釋液，其特征在于該稀釋液由緩沖液、30 % Triton X 100、NaN3和牛血清白蛋白按比例混合制備得，其中，緩沖液由Na2HPO4，Na2HPO4和NaCl溶于去離子水中制備得，每1000毫升去離子水中分別加入I. 27克Na2HPO4, O. 3克Na2HPO4和O. 85克NaCl ;該稀釋液按重量緩沖液NaN3 :牛血清白蛋白=1002. 42 0. 2 :10，按體積30% Triton X 10 :去離子水=1:100。其中，緩沖液有助于保持恒定的pH值，以利于抗原抗體的充分反應(yīng)。30% Triton100為一種比較溫和的去垢劑，表面活性劑或稱界面活性劑，常作為添加劑使蛋白保持穩(wěn)定，使血清或血漿樣品中的蛋白保持穩(wěn)定。NaN3作為血清血漿樣品防腐劑。牛血清白蛋白作為血清血漿樣品抗體的保護劑。PA·
本發(fā)明的血清或血漿樣品稀釋液，用于微量明膠顆粒凝集HIV-I近期感染檢測方法中，稀釋液可以實現(xiàn)自主生產(chǎn)，能夠在國內(nèi)普遍而廣泛的使用，能夠成為我國制定有效的政策、開展有效的應(yīng)對艾滋病行動，甚至為各國決策者制定相關(guān)政策和規(guī)劃提供有效的技術(shù)支持。本發(fā)明的稀釋液應(yīng)用于微量明膠顆粒凝集Hiv-I近期感染檢測方法(ML-PA)與采用BioMerieux (Raleigh, NC)公司專用血清或血衆(zhòng)樣品Dilsim 11稀釋液的PA-LS方法相比較具有以下的區(qū)別和優(yōu)越性
權(quán)利要求
1.一種應(yīng)用于微量明膠顆粒凝集HIV-I近期感染檢測法的血清或血漿樣品稀釋液，其特征在于該稀釋液由緩沖液、30 % Triton X 100、NaN3和牛血清白蛋白按比例混合制備得， 其中，緩沖液由Na2HPO4，Na2HPO4和NaCl溶于去離子水中制備得，每1000毫升去離子水中分別加入I. 27克Na2HPO4, O. 3克Na2HPO4和O. 85克NaCl ;該稀釋液按重量緩沖液NaN3 牛血清白蛋白=1002. 42 :0. 2 :10，按體積30% Triton X 10 :去離子水=1:100。
全文摘要
一種應(yīng)用于微量明膠顆粒凝集檢測HIV-1近期感染法的血清或血漿樣品稀釋液，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其是一種檢測HIV－1近期感染中應(yīng)用的試劑。本發(fā)明的稀釋液由緩沖液、30％TritonX100、NaN3和牛血清白蛋白按比例混合制備得。本發(fā)明的稀釋液完全可以替代DilsimTMll稀釋液用于微量明膠顆粒凝集HIV-1近期感染的檢測法。
文檔編號G01N33/569GK102608312SQ201210046148
公開日2012年7月25日 申請日期2012年2月28日 優(yōu)先權(quán)日2012年2月28日
發(fā)明者李洪 申請人:李洪