專利名稱：小孔徑過(guò)濾裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種小孔徑過(guò)濾裝置，用于膜片過(guò)濾富集樣品。
背景技術(shù)：
某些膜片本身對(duì)某些物質(zhì)具有較強(qiáng)的吸附能力，或?qū)⒛てM(jìn)行處理也可增強(qiáng)或增加對(duì)某些物質(zhì)的吸附能力。因此采用膜片吸附原理已經(jīng)建立了很多檢測(cè)方法。很多“試紙檢測(cè)”多利用此原理，如采用試紙進(jìn)行酶聯(lián)吸附免疫檢測(cè)等。為了進(jìn)一步提高膜片法檢測(cè)某些物質(zhì)的靈敏度，目前采用的常見方式有三1)將某些稀薄的樣品進(jìn)行濃縮后再點(diǎn)樣檢測(cè)；2)在膜上同一位置反復(fù)點(diǎn)樣，使樣品得到富集后再檢測(cè)；3)將整張膜片浸泡在樣品溶液中，進(jìn)行樣品富集后再檢測(cè)。以上第一種方法需要一定的濃縮設(shè)備和濃縮操作，如冷凍干燥機(jī)等，增加了操作難度和操作時(shí)間，不利于不穩(wěn)定物質(zhì)的檢測(cè)；第二種方法由于在膜片的同一位置反復(fù)點(diǎn)樣， 需要對(duì)樣品進(jìn)行著色處理，否則同一位置不好確定，加入著色劑本身就是對(duì)樣品的一種污染，同時(shí)經(jīng)驗(yàn)表明，在同一位置反復(fù)點(diǎn)樣或出現(xiàn)滲透現(xiàn)象，導(dǎo)致檢測(cè)斑點(diǎn)不均一，不利于結(jié)果觀察；第三種方法將整張膜片浸泡在樣品溶液中，為了達(dá)到富集效果，吸附平衡需要的時(shí)間長(zhǎng)，常需要過(guò)夜，同時(shí)由于整張膜片均吸附了樣品，導(dǎo)致整張膜片均顯色，信號(hào)對(duì)比差，常需另設(shè)陰性對(duì)照，不利于檢測(cè)結(jié)果判斷。對(duì)于采用膜片吸附或富集原理進(jìn)行的物質(zhì)檢測(cè)，為了提高檢測(cè)的靈敏度和檢測(cè)限，克服以上不足，特發(fā)明一種小孔徑過(guò)濾裝置。
發(fā)明內(nèi)容本實(shí)用新型發(fā)明一種小孔徑過(guò)濾裝置，特別適用于將樣品富集到某些膜片上。本實(shí)用新型解決其技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是本裝置由帶小孔的上下兩塊光滑平整的蓋板和固定夾構(gòu)成。上蓋板通過(guò)過(guò)濾小孔連接一盛液斗，下蓋板通過(guò)過(guò)濾小孔連接下蓋板小孔乳頭進(jìn)而連接負(fù)壓導(dǎo)管，為了方便上蓋板過(guò)濾小孔和下蓋板過(guò)濾小孔的對(duì)接，上下蓋板之間有相互匹配的固定孔和固定栓。為了控制過(guò)濾膜片的斑點(diǎn)大小，兩塊光滑平整的蓋板上的小孔直徑為l_5mm，較佳孔徑為2mm。本實(shí)用新型的效果是，由于采用過(guò)濾接觸方式，樣品溶液與吸附膜片的小塊圓形區(qū)域接觸，增加了吸附效率，能夠?qū)⑤^多體積樣品的特定成分富集在膜片的特定小塊圓形區(qū)域中，起到高濃度樣品點(diǎn)樣的效果。本裝置能顯著增加膜片吸附檢測(cè)方法的靈敏度。
以下結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)一步說(shuō)明。

圖1是本實(shí)用新型的示意圖；圖2是本實(shí)用新型的使用方法示意圖。[0014]以上圖中1.盛液斗，2.固定夾，3.上蓋板，4.固定孔，5.上蓋板過(guò)濾小孔，6.下蓋板過(guò)濾小孔，7.固定栓，8.下蓋板，9.下蓋板小孔乳頭，10.負(fù)壓導(dǎo)管，11.膜片，12.真空泵。
具體實(shí)施方式
參見圖2。使用時(shí)，先將負(fù)壓導(dǎo)管(10)連接到下蓋板(8)上的下蓋板小孔乳頭(9) 上，隨后將與盛液斗(1)連接的上蓋板C3)與下蓋板(8)重疊，在兩塊蓋板之間放入一張膜片(11)，確保上蓋板過(guò)濾小孔(5)和下蓋板過(guò)濾小孔(6)對(duì)準(zhǔn)并將膜片(11)夾住。對(duì)準(zhǔn)上蓋板上的兩個(gè)固定孔(4)和下蓋板上的固定栓(7)有助于兩塊蓋板過(guò)濾小孔的對(duì)準(zhǔn)。兩塊蓋板和膜片擺放好后，用兩個(gè)固定夾( 將兩塊蓋板夾緊固定。隨后將液體樣品加入到盛液斗(1)中，啟動(dòng)與負(fù)壓導(dǎo)管(10)相連的真空泵(12)，由于負(fù)壓作用，盛液斗(1)中的液體樣品慢慢通過(guò)小孔透過(guò)膜片(11)，液體樣品中某些物質(zhì)會(huì)在膜片(11)的小孔區(qū)域上發(fā)生富集(吸附富集作用由膜片的特性決定)，由于上蓋板(3)和下蓋板(8)光滑平整，與膜片 (11)接觸好，因表面張力作用不易發(fā)生側(cè)滲，因此膜片(11)的非小孔區(qū)域則無(wú)樣品吸附或很少有品吸附。實(shí)施示例PVDF膜對(duì)蛋白質(zhì)有很強(qiáng)的親和力，現(xiàn)比較PVDF膜點(diǎn)樣法、浸泡法和采用本過(guò)濾裝置過(guò)濾截留法對(duì)蛋白質(zhì)(牛血清白蛋白BSA)的檢查限。點(diǎn)樣法將PVDF膜用甲醇濕潤(rùn)，在PVDF膜上點(diǎn)樣1 μ 1蛋白質(zhì)(BSA)溶液，用 0. 25%考馬斯亮藍(lán)染色液染色5min，在轉(zhuǎn)移脫色搖床上用脫色液(甲醇-水-冰醋酸= 4.5 4.5 DlOml洗脫3次，每次5min，脫去背景色，可見第6個(gè)斑點(diǎn)，樣品中蛋白質(zhì)的檢查限量約為12μ g/ml。(點(diǎn)樣方法從左至右蛋白質(zhì)(牛血清白蛋白)濃度依次均為9mg/ ml、3mg/ml、lmg/ml、0. 33mg/ml、0. lmg/ml>37 μ g/ml、12 μ g/ml、4μ g/ml、1· 3 μ g/ml、0μ g/ ml，點(diǎn)樣量為1 μ 1。)浸泡法將PVDF膜裁成9mm2大小的膜片，用甲醇濕潤(rùn)后浸泡在Iml蛋白質(zhì)(BSA) 樣品溶液中，于轉(zhuǎn)移脫色搖床上振搖(30rpm，20-25°C)過(guò)夜(15小時(shí))。隨后將PVDF膜片取出，用0.25%考馬斯亮藍(lán)染色液(用脫色液配制)染色5min。再用脫色液(甲醇-水-冰醋酸=4.5 4.5 1)在轉(zhuǎn)移脫色搖床上脫色3-5次，每次5min，脫去背景色，以陰性對(duì)照膜片基本無(wú)色為度。結(jié)果表明PVDF膜浸泡法對(duì)微量蛋白質(zhì)的檢查限量為1.4yg/ml。采用本發(fā)明裝置過(guò)濾截留法將PVDF膜用甲醇濕潤(rùn)后安裝在濾過(guò)孔徑為2mm的小孔徑過(guò)濾裝置上，連接真空泵。隨后將蛋白質(zhì)(BSA)樣品溶液0.5ml加到濾器上，啟動(dòng)真空泵，樣品溶液從濾孔穿過(guò)PVDF膜。之后用0. 25%考馬斯亮藍(lán)染色液染色5分鐘，在轉(zhuǎn)移脫色搖床上用脫色液(甲醇-水-冰醋酸=4. 5 4.5 DlOml洗脫3次，每次5分鐘，脫去背景色，結(jié)果表明，當(dāng)過(guò)濾體積為0. 5ml時(shí)，本法的蛋白質(zhì)檢測(cè)限量為(點(diǎn)7)137ng/ml。以上結(jié)果表明，在本發(fā)明裝置的幫助下，PVDF膜檢查蛋白質(zhì)的靈敏度顯著提高，約是點(diǎn)樣法的100倍，浸泡法的10倍，且檢測(cè)過(guò)程中不需要將樣品進(jìn)行濃縮處理，濾過(guò)所耗時(shí)間短，具有簡(jiǎn)單快捷的特點(diǎn)。
權(quán)利要求1.一種小孔徑過(guò)濾裝置，由帶小孔的上下兩塊光滑平整的蓋板和固定夾構(gòu)成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的小孔徑過(guò)濾裝置，其特征是兩塊光滑平整的蓋板上的小孔直徑為l-5mm。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的小孔徑過(guò)濾裝置，其特征是上蓋板連有盛液斗。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的小孔徑過(guò)濾裝置，其特征是下蓋板通過(guò)過(guò)濾小孔連接下蓋板小孔乳頭進(jìn)而連接負(fù)壓導(dǎo)管。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的小孔徑過(guò)濾裝置，其特征是上下蓋板之間有相互匹配的固定孔和固定栓。
專利摘要一種操作簡(jiǎn)便的小孔徑過(guò)濾裝置。它由帶小孔的上下兩塊光滑平整的蓋板和固定夾構(gòu)成，上蓋板通過(guò)過(guò)濾小孔連接一盛液斗，下蓋板通過(guò)過(guò)濾小孔連接下蓋板小孔乳頭進(jìn)而連接負(fù)壓導(dǎo)管，為了方便上蓋板過(guò)濾小孔和下蓋板過(guò)濾小孔對(duì)接，在上下蓋板分別設(shè)有固定孔和固定栓。兩塊光滑平整的蓋板上的小孔直徑為1-5mm。將特異吸附膜片夾在上下蓋板的小孔中間進(jìn)行抽濾，樣品中某些物質(zhì)被膜片吸附富集，能顯著增加采用膜片吸附檢測(cè)方法的靈敏度。
文檔編號(hào)G01N1/40GK202177540SQ201120097448
公開日2012年3月28日 申請(qǐng)日期2011年4月6日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月6日
發(fā)明者云宇, 段為鋼 申請(qǐng)人:云宇