專利名稱：七葉皂苷四種單體組分的高效液相色譜分離方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于混合物的分離技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種七葉皂苷la、七葉皂苷lb、異七 葉皂苷Ia和異七葉皂苷Ib的高效液相色譜分離方法。
背景技術(shù)：
七葉皂苷是從七葉樹的干燥種子中提取得到的一組三萜皂苷類化合物的混合 物，由于其具有抗炎、抗水腫及靜脈保護作用，并且具有很好的耐受性，因而臨床上廣 泛用于慢性靜脈功能不全、痣和手術(shù)后水腫的治療。七葉皂苷中含有很多種皂苷化合 物，七葉皂苷la、七葉皂苷Ib和異七葉皂苷la、異七葉皂苷Ib是其中四種主要活性成 分。它們互為同分異構(gòu)體(見下圖)，七葉皂苷la、七葉皂苷Ib的主要區(qū)別在于C21位羥 基上成酯的有機酸的不同，分別為巴豆油酸和當(dāng)歸酸，異七葉皂苷la、異七葉皂苷Ib分 別是七葉皂苷la、七葉皂苷Ib的C22位乙?；D(zhuǎn)移到C28位羥基上的異構(gòu)體。這四種七 葉皂苷單體組分分別屬于兩種類型，七葉皂苷la、七葉皂苷Ib為β-七葉皂苷，異七葉 皂苷la、異七葉皂苷Ib為α-七葉皂苷，這兩種類型七葉皂苷的熔點、比旋度、溶血指
數(shù)和水溶解度均有明顯不同。
權(quán)利要求
1.一種七葉皂苷四種單體組分的高效液相色譜分離方法，所述的四種單體組分是七 葉皂苷la、七葉皂苷lb、異七葉皂苷Ia和異七葉皂苷Ib;分離過程是將配制原料注入定 量環(huán)，經(jīng)色譜柱進(jìn)行分離，由紫外檢測器在線檢測，按檢測的物質(zhì)峰分段收集四種單體 組分的分餾液；最后將分餾液分別進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)和干燥處理，得到固態(tài)產(chǎn)物；其特征在 于，所述的配制原料，是以七葉皂苷提取物或原料藥為原料，用甲醇和水混合溶劑溶 解，其中混合溶劑按體積比甲醇水=4 3；所述的流動相，是以甲醇和體積濃度為0.6%的乙酸水溶液相混合作流動相，其中按 體積比甲醇乙酸水溶液=29 31 19 21 ；流動相的pH = 2.0 3.0 ；所述的色譜柱，使用C18色譜柱，粒徑5μιη。
2.按照權(quán)利要求1所述的七葉皂苷四種單體組分的高效液相色譜分離方法，其特征在 于，所述的色譜柱，柱溫為室溫；所述的流動相，按體積比甲醇乙酸水溶液=3 2； 所述的在線檢測物質(zhì)峰，檢測波長為210nm。
3.按照權(quán)利要求1或2所述的七葉皂苷四種單體組分的高效液相色譜分離方法，其特 征在于，所述的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，是將收集到的四種單體組分的分餾液分別在減壓條件下旋轉(zhuǎn) 蒸發(fā)，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀水浴溫度為45°C，真空度為0.08 0.09MPa得到單體組分的濃縮液； 所述的干燥處理，是將旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)得到的濃縮液氮氣吹干或冷凍干燥。
4.按照權(quán)利要求1或2所述的七葉皂苷四種單體組分的高效液相色譜分離方法，其特 征在于，所述的配制原料，用0.45 μ m濾膜過濾制得配制原料。
5.—種七葉皂苷四種單體組分的高效液相色譜檢測方法，具體的液相條件是色譜 柱為C18柱，5μιη粒徑；流動相為乙腈和體積濃度0.04%的三氟乙酸水溶液，乙腈和 三氟乙酸水溶液的體積比為33 37 63 67，流動相pH = 2.0 3.0 ；檢測波長為 2IOnm ；進(jìn)樣流速為1.0mL/min，進(jìn)樣量為20 μ L。
全文摘要
本發(fā)明的七葉皂苷四種單體組分的高效液相色譜分離方法屬于混合物的分離技術(shù)領(lǐng)域。以七葉皂苷提取物或原料藥為原料，用甲醇和水混合溶劑溶解，采用反相高效液相色潽法，選擇流動相的兩相體系，可選用的兩相體系有甲醇-水、乙腈-水，水相的pH控制在2-3之間；然后選擇色譜柱，確定為C18柱；柱溫室溫；檢測波長210nm；最后經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)和干燥處理，得到固態(tài)的七葉皂苷Ia、七葉皂苷Ib、異七葉皂苷Ia和異七葉皂苷Ib。本發(fā)明在分離和后處理過程中都不會發(fā)生各單體之間的相互轉(zhuǎn)化，得到的四種產(chǎn)品的純度均大于99％；產(chǎn)物可以作為七葉皂苷標(biāo)準(zhǔn)品，并廣泛用于藥劑、藥物分析和藥理學(xué)等研究領(lǐng)域。
文檔編號G01N30/02GK102020691SQ20101050600
公開日2011年4月20日 申請日期2010年10月14日 優(yōu)先權(quán)日2010年10月14日
發(fā)明者吳秀君, 崔相勇, 張夢亮, 張超, 顧景凱, 高峰 申請人:吉林大學(xué)