專利名稱：一種用于生物在體檢測(cè)的集成式微電極的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于電化學(xué)分析、電化學(xué)傳感器領(lǐng)域，具體涉及用于生物在體檢測(cè)的集成 式微電極及其制作方法。背景說明傳感檢測(cè)技術(shù)在生物分析領(lǐng)域中發(fā)揮了重要的作用。目前，利用電化學(xué)傳感器進(jìn) 行生物分子的離體檢測(cè)與分析已較為成熟，而將其用于生物活性物質(zhì)的在體檢測(cè)也引起了 越來越多的研究者關(guān)注。在已有的電化學(xué)在體檢測(cè)技術(shù)中，所用電極主要是碳纖維，如ChristopheDugast 等人[C.Dugast，et al. Journal ofNeurochemistry, 200282 529-537]利用碳纖維電極 在老鼠視丘細(xì)胞中檢測(cè)去甲腎上腺素，Christian Amatore等人[Christian Amatore, et al. ChemBioChem, 20081472-1480]用修飾有鉬微粒的碳纖維電極監(jiān)測(cè)巨噬細(xì)胞釋放的活性 氧，Jaroslav Katr11k[Jaros1av Katrlik,et al. Bioelectrochemistry,2002, 56 :73_76] 通過醋酸纖維素和Nafion修飾碳纖維制得一氧化氮傳感器，并在豬動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞中探測(cè) 到了一氧化氮。然而，由于碳纖維電極吸附性較強(qiáng)、延展性差，因此不適于進(jìn)行活體組織的 檢測(cè)。在我們前期工作中，我們?cè)绵彵蕉沸揎椃稚⒂秀f顆粒的鉬柱電極作為工作 電極插入植物的葉片，同時(shí)將鉬絲作為對(duì)電極、鍍有氯化銀的銀絲作為參比電極插入葉莖 部，成功的在體檢測(cè)到受菌核病感染的植物上活性氧的爆發(fā)[Qiao Xu, Yuan-Di Zhao, et al. Analytica Chimica Acta，200921-25]。然而，由于在實(shí)驗(yàn)中除鉬柱電極作為工作電極 插入植物的葉脈，同時(shí)還要將鉬絲對(duì)電極、鍍有氯化銀的銀絲作為參比電極插入葉莖，因此 操作較為不便，且對(duì)樣本的損傷程度較大。因此，如能將電極集成起來，將能有效克服這些 缺陷，更有利于進(jìn)行在體檢測(cè)。目前，已有一些研究者提出了各種集成式的電化學(xué)傳感器， 如將Ag/AgCl參比電極纏繞在鉬銥合金(Pt/Ir)工作電極上，工作電極與參比電極之間，但這種電極很難重復(fù)使用；還有將電極做成微陣列芯片[鄒紹芳，門洪，王平。傳 感器學(xué)報(bào)，2004第二期]，雖然這種集成化的微陣列電極使用方便、易攜帶，可批量化生產(chǎn)， 但是制作方法極為復(fù)雜，在常規(guī)實(shí)驗(yàn)室很難實(shí)現(xiàn)；在以公開的專利中，有人提出了一種測(cè)量 血鉛濃度的集成性一次性電化學(xué)傳感器(申請(qǐng)?zhí)?00720070729. 1)，這種芯片式傳感器將 工作電極、參比電極和輔助電極集成在一個(gè)平面上，無法重復(fù)使用并且制成不同物質(zhì)的傳 感器，而且由于體積較大，不適用于在體檢測(cè)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的任務(wù)是提供一種用于生物在體檢測(cè)的集成式微電極，使該電極具有微型 化、集成化的特點(diǎn)，能重復(fù)使用、且制作方法簡(jiǎn)單易操作、經(jīng)修飾后能作為微傳感器用于生 物活性物質(zhì)的在體檢測(cè)等特點(diǎn)。同時(shí)本發(fā)明還提供這種用于生物在體檢測(cè)的集成式微電極 的制備方法。
本發(fā)明還提供這種用于生物在體檢測(cè)的集成式微電極由由玻璃毛細(xì)管(8)、以環(huán) 氧樹脂⑵固定在玻璃毛細(xì)管⑶內(nèi)的鉬絲工作電極⑴和與該鉬絲工作電極⑴的尾端 相連的銀絲工作電極導(dǎo)線(3)、以環(huán)氧樹脂固定在玻璃毛細(xì)管(8)內(nèi)的內(nèi)縮式Ag/AgCl參比 電極(6)和與該參比電極(6)的尾端相連的銀絲參比電極導(dǎo)線(11)、位于玻璃毛細(xì)管⑶ 外面的與銀絲工作電極導(dǎo)線(3)的尾端相連的第一銅絲導(dǎo)線(10)、位于玻璃毛細(xì)管(8)外 面的與銀絲參比電極導(dǎo)線(11)的尾端相連的第二銅絲導(dǎo)線(9)構(gòu)成，鉬絲工作電極(1)的 前部為電極敏感端，在鉬絲工作電極(1)的表面有電泳漆絕緣涂層(2)，在銀絲工作電極導(dǎo) 線(3)的表面有絕緣膠絕緣涂層(4)，鉬絲工作電極(1)與銀絲工作電極導(dǎo)線(3)由導(dǎo)電 膠(5)相連接；第一銅絲導(dǎo)線(10)與銀絲工作電極導(dǎo)線(3)由導(dǎo)電膠(5)相連接；第二銅 絲導(dǎo)線(9)與銀絲參比電極導(dǎo)線(11)由導(dǎo)電膠(5)相連接；內(nèi)縮式Ag/AgCl參比電極(6) 由位于電極前端端面的與位于玻璃毛細(xì)管(8)內(nèi)的以環(huán)氧樹脂(7)固定的銀絲參比電極導(dǎo) 線(11)相對(duì)應(yīng)位置上的一個(gè)向下凹陷的小孔洞(12)和位于該小孔洞(12)內(nèi)的銀絲參比 電極導(dǎo)線(11)前端端面上的氯化銀沉積層(13)構(gòu)成。本發(fā)明提供的用于生物在體檢測(cè)的集成式微電極的制作方法是將作為工作電極 的鉬絲與作為工作電極導(dǎo)線的銀絲鑄連在一起后，分別進(jìn)行絕緣處理，作為工作電極的鉬 絲表面以電泳漆為絕緣涂層，作為工作電極導(dǎo)線的銀絲表面以絕緣膠為絕緣涂層，用環(huán)氧 樹脂將經(jīng)過絕緣處理過的作為工作電極鉬絲和作為工作電極導(dǎo)線的銀絲，以及將作為參比 電極導(dǎo)線的銀絲固定在玻璃毛細(xì)管內(nèi)，待環(huán)氧樹脂干燥后，對(duì)電極敏感端即前端進(jìn)行拋光 打磨，直至露出鉬盤電極與銀盤電極，用硝酸腐蝕電極端的作為參比電極導(dǎo)線的銀絲，使電 極端的端面上形成一個(gè)孔洞，在孔洞內(nèi)的由作為參比電極導(dǎo)線的銀絲端面構(gòu)成的銀盤上電 沉積氯化銀形成氯化銀沉積層即制成內(nèi)縮式的Ag/AgCl參比電極；在作為工作電極導(dǎo)線的 銀絲的尾端以導(dǎo)電膠連接一根銅絲作為第一導(dǎo)線，在作為參比電極導(dǎo)線的銀絲的尾端以導(dǎo) 電膠連接一根銅絲作為第二導(dǎo)線，即制成本發(fā)明用于生物在體檢測(cè)的集成式微電極。以上述本發(fā)明提供的用于生物在體檢測(cè)的集成式微電極為基礎(chǔ)，利用電化學(xué)方法 在集成式微電極上電沉積鉬微粒，然后在沉積有鉬微粒的鉬盤電極上利用電化學(xué)的方法電 聚合鄰苯二胺，制作成過氧化氫傳感器。本發(fā)明涉及的內(nèi)縮式Ag/AgCl參比電極的制作以及集成微電極電化學(xué)性能的檢 驗(yàn)用硝酸腐蝕電極端的銀絲，使該電極端面上形成一個(gè)孔洞，在孔洞內(nèi)的銀盤上電沉積氯 化銀制成內(nèi)縮式的Ag/AgCl參比電極。將電極放入含有鐵氰化鉀的溶液中，利用循環(huán)伏安 法掃描得到較穩(wěn)定的循環(huán)伏安曲線，說明這種自制的集成式電極具有較好的電化學(xué)性能。本發(fā)明提供的這種集成式微電極經(jīng)過化學(xué)修飾后，可制成針對(duì)不同生物活性物質(zhì) 的微傳感器，用于生物在體檢測(cè)。在本發(fā)明實(shí)施例中，將該集成式微電極進(jìn)行化學(xué)修飾后， 制成過氧化氫微傳感器，對(duì)油菜受到致病因子侵染時(shí)所產(chǎn)生的過氧化氫進(jìn)行了在體檢測(cè)。本發(fā)明提供的用于生物在體檢測(cè)的集成式微電極將工作電極與參比電極集成在 一起，具有微型化、集成化的特點(diǎn)，能重復(fù)使用，并且制作方法簡(jiǎn)單易操作。這種集成式微電 極經(jīng)過修飾后，可制成針對(duì)不同物質(zhì)的微傳感器，用于生物的在體檢測(cè)。該集成式微傳感 器中Ag/AgCl參比電極是內(nèi)縮式的，因此每次可以對(duì)電極直接打磨拋光而不會(huì)破壞參比電 極，使其具有較好的重現(xiàn)性和電化學(xué)性能。這種集成式微電極的制作方法簡(jiǎn)單易操作，可以 重復(fù)使用。


圖1為本發(fā)明電極的結(jié)構(gòu)模式圖，圖中各標(biāo)識(shí)所指部分為1—鉬絲工作電極2—電泳漆絕緣涂層
3—銀絲工作電極導(dǎo)線
4—絕緣膠絕緣涂層
5—導(dǎo)電膠
6—內(nèi)縮式Ag/AgCl參比電極
7—環(huán)氧樹脂
8—玻璃毛細(xì)管
9—第二銅絲導(dǎo)線.
10--第一銅絲導(dǎo)線.
11--銀絲參比電極導(dǎo)線.
12--向下凹陷的小孔洞.
13--氯化銀沉積層.圖2為內(nèi)縮式Ag/AgCl參比電極結(jié)構(gòu)模式圖，圖中各標(biāo)識(shí)所指部分為7—環(huán)氧樹 脂；11-銀絲參比電極導(dǎo)線(11) ；12-向下凹陷的小孔洞(12) ；13-氯化銀沉積層(13)圖3為集成式微電極經(jīng)雙目體式顯微鏡放大45倍后的實(shí)物圖；圖4為集成式微電極在在含lmmol/L鐵氰化鉀的0. 5mol/L硝酸鉀溶液中的循環(huán) 伏安曲線，掃速為100mV/S ；圖5為利用循環(huán)伏安法在集成式微電極上電沉積鉬微粒，掃速為100mV/S ；圖6為在分散有鉬微粒的集成式微電極上電聚合鄰苯二胺；圖7集成式微傳感器在5mmol/L NaCl (a)及含有0. 5mmol/L H202 (b)時(shí)的循環(huán)伏 安圖，掃描速度100mV/S ；圖8為集成微傳感器對(duì)未受侵染的植物進(jìn)行循環(huán)伏安掃描曲線；圖9油菜受侵染(a)和未受侵染(b)時(shí)的時(shí)間電流曲線。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1本發(fā)明集成式微電極的制作，步驟如下(1)工作電極的制作與絕緣先將鉬絲(直徑100 u m,長(zhǎng)度2cm 4cm)洗凈，與銀絲(直徑0. 2mm,長(zhǎng)度3cm 5cm)利用導(dǎo)電膠連起來，銀絲得另一端與銅絲同樣利用導(dǎo)電膠連接。將電泳漆與水以體積 比為5 1的比例混合，并且充分?jǐn)嚢?8小時(shí)以上。利用線性掃描伏安法在-3V -0.5V 之間對(duì)上述的鉬絲段掃描(鉬絲為對(duì)電極，Ag/AgCl為參比電極)；然后采用恒電位法在 鉬絲上電沉積電泳漆，其中電位固定在-3V，時(shí)間為1000s，70 °C下烘干；之后將電位固定 在-3. 5V，再次利用恒電位法電沉積1000s，70°C烘干，重復(fù)一次該步驟；最后在-3. 5V電位 下，電沉積800s，在150°C干燥30min。冷卻待用。
另取一根銀絲，將其與銅絲利用導(dǎo)電膠連接起來，作為參比電極的導(dǎo)線。(2)工作電極與參比電極的集成固定環(huán)氧樹脂與乙二胺以質(zhì)量比為100 6.5的比例混合，并進(jìn)行超聲消泡處理。將 已經(jīng)絕緣的工作電極導(dǎo)線鉬絲段和銀絲段與參比電極導(dǎo)線銀絲同時(shí)插入毛細(xì)管，然后將已 經(jīng)過消泡處理的環(huán)氧樹脂充入毛細(xì)管中(內(nèi)徑0. 9mm 1. 1mm)，30°C干燥。(3)內(nèi)縮式參比電極的制作方法將封裝好的集成電極端打磨拋光直至露出銀盤和鉬盤。將集成電極的電極端浸 入濃度約30%硝酸，將銀絲腐蝕，直至在樹脂橫截面上形成約深0. 5mm的孔洞。最后，以孔 洞內(nèi)的銀盤為工作電極，鉬絲為對(duì)電極，Ag/AgCl為參比電極，在濃度為lmol/L的鹽酸溶液 中，利用計(jì)時(shí)電壓法在孔洞內(nèi)的銀上電沉積氯化銀制成內(nèi)縮式的Ag/AgCl參比電極。這種自制的集成式微電極經(jīng)過雙目體式顯微鏡45倍放大后，對(duì)其進(jìn)行觀察?？梢?清晰的看到密封在毛細(xì)玻璃管中的鉬電極與Ag/AgCl參比電極，見圖3?？梢娿y絲的最前端 被硝酸腐蝕，在環(huán)氧樹脂中形成了一個(gè)孔洞，其Ag截面前端有一層黑色的氯化銀鍍層作為 內(nèi)縮式的Ag/AgCl參比電極(4)集成式微電極的電化學(xué)性能的檢驗(yàn)將自制的集成式微電極依次用丙酮和超純水洗凈后，在含有鐵氰化鉀的硝酸鉀溶 液中的進(jìn)行循環(huán)伏安掃描；得到穩(wěn)定的循環(huán)伏安曲線，說明該自制的集成式微電極具有較 好的電化學(xué)性能。我們以鐵氰化鉀為探針考察了該集成電極的重現(xiàn)性，其循環(huán)伏安圖見圖4，可見在 0. 18V和0. 03V出現(xiàn)了一對(duì)較為可逆的氧化還原峰，其式電勢(shì)為0. 11V，氧化峰電流和還原 峰電流分別為29. 2nA和34. 2nA。重復(fù)八次實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見表1，其式電位的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為 0. 0032，說明這種自制的集成電極具有較好的重現(xiàn)性，可重復(fù)使用。表1 檢驗(yàn)集成電極的重現(xiàn)性。
表1為檢驗(yàn)集成電極的重現(xiàn)性，重復(fù)打磨電極，然后在含有l(wèi)mmol/L鐵氰化鉀的 0. 5mol/L硝酸鉀進(jìn)行循環(huán)伏安掃描；重復(fù)該過程八次，得到氧化還原電流與式電位的標(biāo)準(zhǔn)
偏差；(5)集成式微電極在生物在體檢測(cè)中的應(yīng)用對(duì)集成電極進(jìn)行修飾，制成針對(duì)不同物質(zhì)的微傳感器，用于生物的在體檢測(cè)。例如 利用鄰苯二胺修飾分散有鉬微粒的鉬盤電極，制成過氧化氫傳感器，檢測(cè)植物體內(nèi)受到致 病因子侵染后產(chǎn)生的過氧化氫；利用依次利用導(dǎo)電聚合物(poly-TTCA)和細(xì)胞色素C修飾 鉬電極，能在體檢測(cè)小鼠腦內(nèi)的NO含量等。本發(fā)明中，利用鄰苯二胺修飾分散有鉬微粒的鉬盤電極，制成過氧化氫傳感器。對(duì) 油菜(中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院油料作物研究所培育的中雙9號(hào)品種)受到草酸致病因子侵染時(shí)， 所產(chǎn)生的過氧化氫進(jìn)行生物在體檢測(cè)。實(shí)施例2利用本發(fā)明集成式微傳感器在體檢測(cè)植物受到草酸致病因子侵染后所產(chǎn)生的過 氧化氫為例，對(duì)本發(fā)明的應(yīng)用作進(jìn)一步詳細(xì)說明。(1)我們用此自制的集成式微電極在含有2mmol/L氯鉬酸鉀(K2PtCl6)0. 5mol/L硫 酸(H2SO4)的溶液中利用循環(huán)伏安法在工作電極中的敏感區(qū)域鉬盤上電沉積鉬微顆粒，用 儀器CHI660記錄到電化學(xué)方法電沉積鉬微粒，見圖5?？梢婋S著循環(huán)掃描次數(shù)的增加，氧化 還原電流不斷增大，說明了由于鉬微粒在基體鉬盤電極上的不斷沉積，工作電極的有效表 面積逐漸增大。將已修飾鉬微粒的電極置于50mmol/L鄰苯二胺(0PD)0. 5mol/L的H2S04溶 液中聚合鄰苯二胺，見圖6，最終獲得由鄰苯二胺修飾的分散有鉬微粒的工作電極(Pt/Pt/ P0PD)。該微電極可作為活性氧的微傳感器使用。(2)我們又檢測(cè)此集成式微傳感器對(duì)H202的電化學(xué)響應(yīng)，結(jié)果如圖7所示，可以看 出，當(dāng)加入過氧化氫后(見圖7曲線b)與加入之前(見圖7曲線a)相比，在-0. IV處有明 顯的還原峰出現(xiàn)(見圖7曲線b)，因此可認(rèn)為本發(fā)明制備的集成式過氧化氫傳感器對(duì)H202 有明顯的還原作用。在-0.5V的電位出現(xiàn)了另一個(gè)較大還原峰，此處是02的還原峰。因此 在下面植物在體檢測(cè)時(shí)，利用固定電位-0. IV檢測(cè)植物所產(chǎn)生的活性氧(過氧化氫是其主 要成分之一)。(3)首先我們將制成的集成式微傳感器插入植物的葉脈中，先進(jìn)行循環(huán)伏安掃描， 見圖8?？梢钥闯?，在植物未被草酸侵染時(shí)，利用循環(huán)伏安掃描未發(fā)現(xiàn)過氧化氫，同時(shí)也說明 了植物組織間的液體也能作為電化學(xué)反應(yīng)的支持溶液，可以利用電流法來檢測(cè)植物中的活 性成分。在距離電極前端1cm處把葉片上的蠟質(zhì)層輕輕擦掉，作為滴加草酸的位點(diǎn)，利用 固定電位法在體監(jiān)測(cè)植物的氧爆發(fā)過程，見圖9。結(jié)果表明，在沒有受到草酸侵染時(shí)，未檢測(cè) 到活性氧的產(chǎn)生，見圖9曲線b。而當(dāng)有草酸侵染油菜葉片時(shí)，可以明顯的看到有氧爆發(fā)的產(chǎn)生，見圖9曲線a。在葉片的侵染位點(diǎn)上滴加草酸后6h時(shí)，監(jiān)測(cè)到氧爆發(fā)到達(dá)最大值，見圖 9曲線a。當(dāng)植物受到致病因子的侵染時(shí)，發(fā)生了超敏反應(yīng)和細(xì)胞程序性死亡(programmed celldeath, P⑶)，同時(shí)會(huì)產(chǎn)生大量的活性氧物質(zhì)。能發(fā)生超敏反應(yīng)的寄主植物一般會(huì)產(chǎn)生 兩次活性氧的爆發(fā)，其中第二次爆發(fā)的時(shí)間和強(qiáng)度都要大于第一次[傅愛根，羅廣華，王愛 國(guó)。熱帶亞熱帶植物學(xué)報(bào)，20008(1) :63-69]。在本實(shí)驗(yàn)中我們監(jiān)測(cè)到了第二次氧爆發(fā)的過 程，可能是由于第一次氧爆發(fā)所產(chǎn)生的活性氧的濃度極低，很難探測(cè)到，產(chǎn)生的電流信號(hào)被 噪聲所淹沒所致。
權(quán)利要求
一種用于生物在體檢測(cè)的集成式微電極，其特征在于，由玻璃毛細(xì)管(8)、以環(huán)氧樹脂(7)固定在玻璃毛細(xì)管(8)內(nèi)的鉑絲工作電極(1)和與該鉑絲工作電極(1)的尾端相連的銀絲工作電極導(dǎo)線(3)、以環(huán)氧樹脂固定在玻璃毛細(xì)管(8)內(nèi)的內(nèi)縮式Ag/AgCl參比電極(6)和與該參比電極(6)的尾端相連的銀絲參比電極導(dǎo)線(11)、位于玻璃毛細(xì)管(8)外面的與銀絲工作電極導(dǎo)線(3)的尾端相連的第一銅絲導(dǎo)線(10)、位于玻璃毛細(xì)管(8)外面的與銀絲參比電極導(dǎo)線(11)的尾端相連的第二銅絲導(dǎo)線(9)構(gòu)成，鉑絲工作電極(1)的前部為經(jīng)打磨后所形成的鉑盤電極，在鉑絲工作電極(1)的表面有電泳漆絕緣涂層(2)，在銀絲工作電極導(dǎo)線(3)的表面有絕緣膠絕緣涂層(4)，鉑絲工作電極(1)與銀絲工作電極導(dǎo)線(3)由導(dǎo)電膠(5)相連接；第一銅絲導(dǎo)線(10)與銀絲工作電極導(dǎo)線(3)由導(dǎo)電膠(5)相連接；第二銅絲導(dǎo)線(9)與銀絲參比電極導(dǎo)線(11)由導(dǎo)電膠(5)相連接；內(nèi)縮式Ag/AgCl參比電極(6)由位于電極前端端面的與位于玻璃毛細(xì)管(8)內(nèi)的以環(huán)氧樹脂(7)固定的銀絲參比電極導(dǎo)線(11)相對(duì)應(yīng)位置上的一個(gè)向下凹陷的小孔洞(12)和位于該小孔洞(12)內(nèi)的銀絲參比電極導(dǎo)線(11)前端端面上的氯化銀沉積層(13)構(gòu)成。
2.一種用于生物在體檢測(cè)的集成式微電極的制作方法，其特征在于，將作為工作電極 的鉬絲與作為工作電極導(dǎo)線的銀絲鑄連在一起后，分別進(jìn)行絕緣處理，作為工作電極的鉬 絲表面以電泳漆為絕緣涂層，作為工作電極導(dǎo)線的銀絲表面以絕緣膠為絕緣涂層，用環(huán)氧 樹脂將經(jīng)過絕緣處理過的作為工作電極鉬絲和作為工作電極導(dǎo)線的銀絲，以及將作為參比 電極導(dǎo)線的銀絲固定在玻璃毛細(xì)管內(nèi)，待環(huán)氧樹脂干燥后，對(duì)電極敏感端即前端進(jìn)行拋光 打磨，直至露出鉬盤電極與銀盤電極，用硝酸腐蝕電極端的作為參比電極導(dǎo)線的銀絲，使電 極端的端面上形成一個(gè)孔洞，在孔洞內(nèi)的由作為參比電極導(dǎo)線的銀絲端面構(gòu)成的銀盤上電 沉積氯化銀形成氯化銀沉積層即制成內(nèi)縮式的Ag/AgCl參比電極；在作為工作電極導(dǎo)線的 銀絲的尾端以導(dǎo)電膠連接一根銅絲作為第一導(dǎo)線，在作為參比電極導(dǎo)線的銀絲的尾端以導(dǎo) 電膠連接一根銅絲作為第二導(dǎo)線。
3.—種過氧化氫傳感器，其特征在于，它是以權(quán)利要求1所述的用于生物在體檢測(cè)的 集成式微電極為基礎(chǔ)，利用電化學(xué)方法在權(quán)利要求1所述的生物在體檢測(cè)的集成式微電極 的鉬盤上電沉積鉬微粒，然后在沉積有鉬微粒的鉬盤電極上利用電化學(xué)的方法電聚合鄰苯 二胺得到的氧化氫傳感器。
全文摘要
本發(fā)明為生物在體檢測(cè)提供了一種新型集成式微傳感器，將鉑絲與銀絲連接后，用環(huán)氧樹脂將已絕緣的工作電極鉑絲和銀絲固定在玻璃毛細(xì)管內(nèi)，然后拋光處理；利用硝酸將腐蝕銀絲，在電極端面上形成一個(gè)孔洞，在孔洞內(nèi)的銀上電沉積氯化銀制成內(nèi)縮式的Ag/AgCl參比電極。這種集成式微電極經(jīng)過修飾后，可制成針對(duì)不同物質(zhì)的微傳感器，用于生物的在體檢測(cè)。該集成式微傳感器中Ag/AgCl參比電極是內(nèi)縮式的，因此每次可以對(duì)電極直接打磨拋光而不會(huì)破壞參比電極，使其具有較好的重現(xiàn)性和電化學(xué)性能。這種集成式微電極的制作方法簡(jiǎn)單易操作，可以重復(fù)使用。
文檔編號(hào)G01N27/327GK101852760SQ20101017326
公開日2010年10月6日 申請(qǐng)日期2010年5月12日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月12日
發(fā)明者楊琴, 董緒燕, 趙元弟, 陳洪, 魏芳 申請(qǐng)人:華中科技大學(xué)