專利名稱：用于分析液相和固相之間的生物反應的方法和裝置的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及(例如)在醫(yī)學實驗室診斷中用于進行免疫學分析、組織化學和細胞
化學分析、分子生物學分析、酶學分析、臨床化學分析和其他分析的專用方法和裝置，其中，
將結合于固相的反應配偶子(reaction partner)和溶解在液體中的反應物一起溫育。為此，將固相底物設置在目標物保持件(object holder)的長形的附著表面上，并且使該固相底物與試劑保持件的通道(其與所述附著表面準確地相對)中的液體接觸，特定的實施方案包括強制使溶解于所述液體中的反應配偶子實現(xiàn)紊流對流，以使反應物在溫育的過程中混合；與可通過現(xiàn)有技術獲得的效果相比，通過本發(fā)明，反應進行更加迅速，信號變得更強并且各個底物的反應性在整個表面上變得更加均勻。當彼此并排分析多個樣品時，所述設置方式防止了在溫育的過程中相鄰樣品液彼此混合。在溫育結束時，將目標物保持件與試劑保持件分開并評價結果。應用本發(fā)明的例子為通過間接免疫熒光法或免疫印跡法來測定懷疑患有自身免疫性或傳染性疾病和過敏癥的患者的血清中的抗體，以及借助于微陣列對患者樣品進行基因分型。
背景技術：
針對本發(fā)明的應用領域，通過醫(yī)學和免疫學實驗室診斷的例子——用于檢測患者血清中的抗體的"間接免疫熒光試驗"(參見圖1)來說明背景技術。使待分析的血清或其稀釋液與底物接觸并且溫育特定長的時間，所述底物與目標物保持件牢固相連，并且包括與待測定的抗體相對應的抗原。有用的底物包括下列物質(zhì)和諸如此類的物質(zhì)生物組織的薄切片、細菌涂片、細胞、或者以溶液形式、干燥形式、或偶聯(lián)形式施用的抗原滴(antigendrop)。在陽性樣品的情況下，患者血清的特異性抗體立即與底物的相應的抗原結合，例如與組織切片的細胞核中的DNA結合。特別是，在患有紅斑狼瘡病的患者中確定抗DNA抗體的存在。 在第一溫育步驟后，使用緩沖液將過量的未結合的抗體洗掉。立即將底物進行第二次溫育，這次是和熒光素標記的針對人免疫球蛋白的抗人抗體(例如，其是通過使用人免疫球蛋白免疫山羊來獲得的) 一起進行溫育。在陽性的情況下，在第二步驟中，標記的抗體與患者血清中的已經(jīng)結合的抗體結合。在進一步的洗滌步驟中，過量的未結合的抗體再次被除去。此后，滴加封固劑，加載蓋玻片，并且使用熒光顯微鏡檢查準備好的溫育過的底物。在陽性樣品的情況下，當在顯微鏡下使用波長為約488納米的(藍)光照射底物的細胞核時，它們發(fā)出綠色熒光。在陰性結果的情況下，細胞核保持黑暗。蓋玻片產(chǎn)生了平行于底物并且平坦地位于所述底物上的光滑表面，這對于產(chǎn)生完美的圖像而言是必需的，并且這還防止了顯微鏡透鏡接觸底物。封固劑填充底物和蓋玻片之間的空間，由此確保無散射的光路；封固劑含有這樣的物質(zhì)，該物質(zhì)用于削弱對熒光的漂白作用；封固劑的PH被設定為產(chǎn)生最大的熒光效率。 世界上每年為了分析數(shù)百萬患者血清中的自身抗體或傳染性抗體而在實驗室診斷中使用間接免疫熒光法。為了更好地管理試驗的數(shù)量，人們嘗試將各操作順序結合并使過程自動化。因此，根據(jù)常規(guī)的現(xiàn)有技術，診斷實驗室中采用具有多個反應區(qū)域的目標物保持件來對數(shù)位患者進行平行測試。如果處理不小心，則該合理化步驟蘊藏著下列風險彼此相鄰設置的血清混合，因而目標物保持件上的相鄰位置的血清的診斷結果被錯誤地發(fā)給某些患者。 1979年以前本應用領域中的分析技術的狀態(tài)在專利文獻EP 00184351中有所描述。該文獻還公開了一種用于間接免疫熒光的新的溫育方法，其中，患者血清和試劑不是像此前的常規(guī)方法那樣直接滴加到目標物保持件，而是滴加到平坦的試劑保持件的多個親水性反應區(qū)域，該親水性反應區(qū)域的周圍環(huán)境是疏水性的。目標物保持件在同樣的多個親水性反應區(qū)域上均含有底物，并且所述底物位于試劑保持件上方的規(guī)定的距離處，從而使得底物浸入與之相關的液滴中，這樣，一個目標物保持件的所有區(qū)域同時開始反應。每個目標物保持件可測試的血清稀釋液的數(shù)量對應于其反應區(qū)域的數(shù)量。這種技術的一個優(yōu)點是液滴不會再輕易地彼此混合。液滴的高度是固定不變的，在將目標物保持件置于預先移液的液滴上的同時，反應開始；結果，不同的測試所經(jīng)歷的反應之間具有更好的可比性。蒸發(fā)被延遲了，而且不利的非特異性有色沉積物在底物中的聚集水平大大降低了，原因在于它們在溫育過程是沿相反方向沉積的。 同時，通過特異性片段技術(specific fragmenting technique)，間接免疫熒光法已經(jīng)得到了進一步發(fā)展(參見專利文獻EP 0117262)2，在該專利文獻中，底物(例如冷凍切片、接種細胞或細胞涂片、偶聯(lián)分離的抗原等)并不是直接施加到目標物保持件，而是首先施加到厚度(例如)為O. 15mm的薄的載玻片。此后，這些載玻片和粘附于其上的底物一起被分為任意尺寸的片段(生物芯片)，并且僅僅將這些片段(例如)通過粘附結合而固定到目標物保持件上。與制備許多小的組織切片、然后直接將它們設置在目標物保持件上的方式相比，制備稍大一些的組織切片、然后將其分為小的生物芯片這種方式明顯更加容易也更快，因此片段技術特別適用于底物的大規(guī)模生產(chǎn)。對于細胞培養(yǎng)物底物或細胞涂片、或者對于覆蓋有規(guī)定的抗原的表面而言，生產(chǎn)率的提高甚至變得更加明顯。另外，可以從不同底物構成任意程度的嵌合體(mosaics)，從而使得使用同一滴血清稀釋液或試劑溶液就可以測試多種抗體譜3'4'5。目前世界上正在使用該方法?；旧献詣又圃爝@種目標物保持件的裝置和方法在歐洲專利申請PCT/EP/2005/000974(2005)6中有所描述。
現(xiàn)有技術所具有的主要缺陷在于在溫育過程中無法確保在液相中實現(xiàn)有效持久的對流。樣品或試劑液直接與含有抗原的結構接觸。相應的抗體與目標抗原相結合，并且它們在緊鄰抗原的環(huán)境中的濃度降低，而在距離1毫米或2毫米遠的地方仍然存在高的抗體濃度。僅靠擴散作用無法消除測試過程中的梯度，因而，在此引用的專利文獻EP 0018435中提出的用于產(chǎn)生對流的方案(目標物保持件和試劑保持件之間的距離周期性地變化，以使保持于兩者之間的圓形液滴變形)無疑是十分有效的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是找到一種在(例如)用于醫(yī)學實驗室診斷的免疫學分析、組織化學分析、分子生物學分析、酶學分析、臨床化學分析和其他分析中將結合于固相的反應配偶子和溶解于液體中的反應物一起溫育的方式，其中，所述液體以這樣的方式被提供給所述固相使所述液體不能從側(cè)面流掉，并且使相鄰樣品在溫育過程或洗滌循環(huán)過程中不會彼
5此接觸，而且為了在溫育過程中使反應物混合或者為了有效地洗滌，能夠在液體中強制實現(xiàn)紊流對流或強對流。 所述目的通過根據(jù)權利要求1所述的裝置和根據(jù)權利要求12所述的方法來實現(xiàn)。優(yōu)選的實施方案形成各從屬權利要求的主題。 據(jù)設計，用于進行免疫學分析、組織化學和細胞化學分析、分子生物學分析、酶學分析、臨床化學分析和其他分析的裝置包括具有一個或多個長形的附著表面(例如為條帶形)的目標物保持件；和具有一個或多個長形的通道的試劑保持件。目標物保持件能夠與試劑保持件可拆卸式連接，使得每個所述的長形的附著表面分別面向一個所述的通道或者被設置成與一個所述的通道相對、并且平行或基本上平行于該通道延伸，并且，當與固相結合的反應配偶子被設置在長形的附著表面上、且溶解于液體中的反應物存在于通道中時，反應配偶子和反應物接觸。設置有用于防止所述液體由一個通道流到相鄰通道的機構。優(yōu)選的是，目標物保持件和試劑保持件具有這樣的機構，該機構可以使目標物保持件和試劑保持件在連接狀態(tài)下相對于對方處于規(guī)定的位置處，即，建立規(guī)定的橫向位置和/或規(guī)定的距離。例如，這種機構可以是凸起和凹陷、封閉或鎖定元件、和/或連接彼此的接合結構。此外，當目標物保持件和/或試劑保持件具有可以導致可拆卸式連接的機構時可能是有利的。 通過防止液體在分析過程中在通道之間穿行，可有利地在一個目標物保持件上同時分析位于不同通道中的彼此相鄰的數(shù)個樣品，而不會產(chǎn)生任何在溫育過程中相鄰的樣品液彼此混合的風險。 附著表面可以以這樣的方式被設置在目標物保持件的表面上使附著表面與目標物保持件的表面在同一平面，或者使附著表面與目標物保持件的表面齊平。可供選擇的是，可在相鄰的附著表面之間設置從附著表面縱向上的一端平行延伸至另一端的凹槽、長形的凹陷或臺階。這以有利的方式獲得了下列效果各附著表面彼此彌補(Offset)或形成對照，并且分別設置在專用的、分開的、長形的凸起上，即(例如)有效地突出設置在目標物保持件的表面上。 優(yōu)選的是，試劑保持件的通道沿設置于試劑保持件表面上的長形的凸起延伸，其中相鄰通道的凸起彼此分開。例如，可通過位于通道之間并且從通道縱向上的一端至另一端平行于通道延伸的凹陷、或者通過特定的臺階狀輪廓而使各凸起偏移或分開，由此使通道偏移或分開。 在優(yōu)選的構造中，通道的側(cè)面邊緣或邊界在頂部是漸縮的，或者設置有陡沿，這樣，在目標物保持件和試劑保持件連接的狀態(tài)下，能夠防止液體從通道的側(cè)面溢出。例如，借助于所述漸縮的邊緣或邊界，由于目標物保持件與附著表面間的距離較小，使得液體被保持在預期的位置，由此，可通過液體上面和下面的粘附力而防止液體自側(cè)面溢出。這實際上是一種"兩側(cè)具有狹縫的毛細管"，空氣可以從側(cè)面溢出而液體不會。 在優(yōu)選的實施方案中，通道的內(nèi)表面設置有用于在所述通道內(nèi)沿縱向引導或引領所述液體的圖案或輪廓。這種圖案或輪廓可包括(例如)沿縱向在通道的底部延伸的凹槽。
優(yōu)選的是，為了提高儲液功能并且出于防漏的目的，所述試劑保持件的所述通道在長度上延伸超出所述目標物保持件的所述附著表面的縱向上的端部。換句話說，通道比附著表面長，這樣，在目標物保持件和試劑保持件連接的狀態(tài)下，通道在附著表面的一端或優(yōu)選在兩端都超出該附著表面。就此而言，為了形成容納過量液體的杯形貯液器，在所述通道的這些延伸超出所述附著表面的部分中，使該通道的邊緣或邊界相對于該通道的剩余部分而向上延伸或提高可以是特別有利的。 為了可以更容易地將液體引入通道，試劑保持件的通道可有利地為親水化的。為此，優(yōu)選將不干擾后續(xù)反應的親水性物質(zhì)加入通道中。 在優(yōu)選的構造中，在所述目標物保持件的各個附著表面周圍設置環(huán)形邊沿，所述
環(huán)形邊沿相對于所述附著表面凸出。該邊沿可以是附著表面的一部分，并且形成附著表面
的邊沿，或者可以設置在附著表面的外側(cè)。以下情況是有利的邊沿所具有的尺寸使得該邊
沿凸出超過其上結合有反應配偶子的固相底物，其中所述反應配偶子針對的是溶解于通道
液體中并且將被固定到用于分析的附著表面上的反應物；優(yōu)選僅僅凸出較小的程度，使得
在稍后通過將蓋玻片置于目標物保持件上而進行評價的過程中，沒有直接的機械壓力施加
在固相底物上。而且，在任何情況下，所述邊沿都會防止封固劑不利的泄漏。目標物保持件和試劑保持件優(yōu)選被構造為使得在目標物保持件和試劑保持件連
接的狀態(tài)下，附著表面浸入通道中，并且其在接觸區(qū)域中位于通道邊緣或邊界的高度處，或
者位于通道邊緣或邊界以上，而且在與附著表面接觸前或接觸過程中，通道中的液體突出
于通道邊緣或邊界或者形成超出通道邊緣或邊界的圓頂。 為了可靠地在顯微鏡觀察中鑒定目標物保持件，并且為了在溫育開始時可靠地分配試劑保持件，目標物保持件和試劑保持件可有利地設置有機器可讀取的代碼。
在有利的構造中，在通道的表面或內(nèi)表面上設置阻礙物或障礙物。如下文所述，處于連接狀態(tài)的目標物保持件和試劑保持件在分析或溫育過程中優(yōu)選以這樣的方式移動使通道中的液體沿通道的縱向交替地來回移動。在所述液體這樣移動時，該液體會從阻礙物或障礙物上流過，在這些擾動處，液體中會形成旋渦或漩渦，這確保了液體更好地混合。
在分析過程中，結合有反應配偶子(其針對溶解于通道液體中的反應物)的固相底物或固相優(yōu)選被設置在附著表面上。這些固相底物可在制備目標物保持件的過程中設置，或者直到即將進行分析之前才設置。固相底物優(yōu)選包括選自下列物質(zhì)中的生物材料a)生物組織的薄切片；b)細胞培養(yǎng)物或聯(lián)合細胞結構(united cell structure)的細胞涂片；C)細菌涂片；d)病毒、原生動物和寄生蟲；e)以溶液形式、干燥形式、或偶聯(lián)形式施用的抗原滴；f)與表面偶聯(lián)的其他抗原；和/或g)任意的核苷酸序列。 這種裝置可有利地用在用于進行免疫學分析、組織化學和細胞化學分析、分子生物學分析、酶學分析、臨床化學分析和其他分析的方法中，其中目標物保持件與試劑保持件以上述方式連接，使得每個所述長形的附著表面分別面向一個通道或被設置成與一個通道相對，其中溶解有反應物的液體被引入所述通道，使得結合有反應配偶子并設置在所述附著表面上的固相底物接觸所述液體，并且使所述目標物保持件和所述試劑保持件一起移動，其移動的方式為使所述液體交替地沿所述通道的兩個縱向方向移動。在將反應配偶子和反應物以這種方式溫育后，隨后分析或評價它們之間是否發(fā)生了反應，如果反應，反應到何種程度。 優(yōu)選這樣進行移動、或者目標物保持件和試劑保持件優(yōu)選被構造為這樣使得在通道中，反應過程中的分析制劑液體和洗滌循環(huán)過程中的洗滌液沿切線方向通過或流過附著表面的下方。
在所述方法的優(yōu)選構造中，通過以下方式來實現(xiàn)上文所述的移動過程中所進行的各個單獨的分析制劑(即一個通道中的液體)的連續(xù)混合，所述方式為使試劑保持件和位于其上的目標物保持件一起周期性地轉(zhuǎn)動，使得通道的縱向方向充分離開水平面而達到使液體沿通道的縱向在(例如)通道的兩端之間來回流動的程度。 優(yōu)選的是，在上述移動中，借助于在每次從試劑保持件通道的縱向上的一端移動到另一端這樣的半個循環(huán)中所移動的液體的體積大于附著表面下的液體的體積，而實現(xiàn)各通道中的液體的混合——優(yōu)選連續(xù)和完全的混合。這樣，在各個通道的兩端處的液體都參與了混合或持久交換過程。 此外有利的是，通過限定通道深度來使通道的容積與具體的分析操作所需的體積相匹配或相適合。 在所述方法的情況中，可以以有利的方式針對每種分析制劑使用一種固相底物
(單獨測試)，或者針對每種分析制劑使用多種固相底物(嵌合體測試)。 所述方法可用于在自身免疫性或傳染性疾病、過敏癥和腫瘤的診斷中測定抗體，
所述抗體可優(yōu)選為a)自身抗體；b)針對傳染病原體(細菌、病毒、原生動物、酵母菌和寄
生蟲)的抗體；C)免疫球蛋白類IgE和IgG的過敏原_特異性抗體；d)針對腫瘤抗原的抗體。 所述抗體可有利地通過下列技術來檢測a)直接或間接免疫熒光技術；b)免疫印跡技術，包括使用基于印跡膜的微陣列；或c)發(fā)光技術。 另外，借助于微陣列，在使用本發(fā)明的條件下，所述方法可以以有利的方式用于對患者樣品或其他樣品進行基因分型。 所述方法可以優(yōu)選為自動或半自動地進行。在該情況下，優(yōu)選的是，a)將預定測試個數(shù)的試劑保持件置于回轉(zhuǎn)工作臺上的規(guī)定位置處，b)按照分析操作，根據(jù)溫育方案，將相應類型和數(shù)量的目標物保持件置于所述試劑保持件上，c)制備合適的樣品稀釋液并將其引入試劑保持件的預定通道中，d)根據(jù)所述的方案，實施一個或多個溫育步驟，在該過程中，回轉(zhuǎn)工作臺被設定為運轉(zhuǎn)狀態(tài)，從而使各個制劑產(chǎn)生有效的混合，e)在各個溫育步驟之間插入洗滌循環(huán)，在洗滌過程中，洗滌液被引入到通道的一側(cè)上并在另一側(cè)被吸出，在此過程中，無需從試劑保持件上移開目標物保持件，以及f)相應地評價特定試驗變量的結果。本發(fā)明的裝置優(yōu)選與自動或半自動用途相適應。


下面將參照附圖對本發(fā)明的示例性實施方案進行詳細地說明。 圖1是根據(jù)現(xiàn)有技術的檢測患者血清中的抗體的"間接免疫熒光試驗"的示意圖。 圖2示出了根據(jù)本發(fā)明的目標物保持件和試劑保持件的示例性實施方案。 圖3示出了根據(jù)圖2的示例性實施方案的進一步的細節(jié)。 圖4示出了根據(jù)本發(fā)明的目標物保持件和試劑保持件的另外的示例性實施方案。 圖5示出了根據(jù)本發(fā)明的試劑保持件的另外的示例性實施方案。
具體實施例方式
本發(fā)明提供具有一個或多個長形的附著表面(2)的目標物保持件(1)，固相底物(3)被固定到所述目標物保持件。每個附著表面(1)可與目標物保持件的表面位于同一平面，或者在本發(fā)明的優(yōu)選方案中是凸出的，并且通過凹槽(4)與相鄰附著表面分開，所述凹槽(4)從附著表面縱向上的一端平行延伸至另一端，以將相鄰的反應制劑彼此區(qū)分開。為了溫育，將目標物保持件以附著表面面向下方的方式置于具有長形通道(6)的試劑保持件(5)上，并將它們臨時結合在一起而形成"組件"。通道在準確限定的位置處對著目標物保持件的附著表面，并在指定的時刻填充樣品液或液體試劑。它們向上凸起(在特定的實施方案中為臺階的形式)并且按特定的輪廓向兩側(cè)偏移。例如，除了通道以外，試劑保持件可具有凹陷(7)，所述凹陷(7)從縱向上的一端平行延伸至另一端，以將相鄰的反應制劑彼此區(qū)分開。通道中的液體向著目標物保持件的附著表面隆起，從而形成"兩側(cè)具有狹縫的毛細管"，空氣可從中溢出，但是液體由于其上面和下面的的粘附力而保留在預期的位置處。為了防止液體溢出到兩側(cè)，通道的邊緣或邊界可在頂部是漸縮的，或者可設置有陡沿。在特定的實施方案中，液體可從通道的突出部流到附著表面的縱向端部的毛細管中，或者使液體自該處流出。 可以在通道填充液體前，就將目標物保持件置于被設計用來進行溫育的位置處，或者可以在已經(jīng)將液體引入通道后，才將目標物保持件置于通道上；在這種情況下，當目標物保持件置于通道上時，所有的反應同時開始。各組件的幾何形狀是相適應的，從而使得固相底物與通道所容納的液體接觸。在一些實施方案中，為了該目的，將附著區(qū)域浸入通道中；在其他實施方案中，附著區(qū)域在通道邊界的高度處；此外在其他實施方案中，附著區(qū)域的位置更高，并且所述液體在通道邊界的上方形成圓頂。根據(jù)特定分析所需要的體積，制備具有不同通道深度的試劑保持件。同樣，可以使附著表面和通道的寬度適應所述要求。
這時，由目標物保持件和試劑保持件構成的組合結構(組件)可以以這樣的方式通過任意頻率的秋千或搖擺運動來有節(jié)奏地傾斜，所述方式為使液體從附著表面和通道的縱向上的一端流向另一端，然后再流回來。在溫育結束時，將目標物保持件與試劑保持件分開，并對反應進行評價。在間接免疫熒光試驗的情況下，使封固劑與附著表面上的抗原底物接觸，每個目標物保持件上放置一個蓋玻片，然后在顯微鏡下觀察。 各附著表面可具有沿周向延伸的邊沿(8)，其僅僅稍微突出超過底物，但是滿足三個重要的功能首先，所述邊沿有利于具有底物的玻璃片段(生物芯片)的定位，所述玻璃片段(例如)在粘附結合的過程中不會再輕易地滑動。其次，所述邊沿保護底物使最后放置的蓋玻片與組織切片或細胞保持較小的規(guī)定距離，因此可以使它們受損的程度更低，這種受損在蓋玻片直接與覆蓋有封固劑的生物材料鄰接的常規(guī)技術中是常見的情況。第三，封固劑牢固地保持在附著表面和蓋玻片之間，并且不能漏出底物不會變干(變干會使它們不能使用)，并且顯微鏡的機械臺不會受到污染。環(huán)形邊沿(8)僅使蓋玻片升高這樣的程度所述程度不會超過標準顯微鏡透鏡從前透鏡到組織切片或細胞所處平面之間的工作距離。目標物保持件的表面可設置有凹陷(凹陷的外邊緣9)，可以將蓋玻片固定在所述凹陷中，從而使其在顯微鏡觀察的過程中不會滑到側(cè)面。 與已經(jīng)引用的專利文獻EP 0018435(其中，為了將液體相對于固相底物進行定位，目標物保持件和試劑保持件都需要位于疏水性環(huán)境中的親水性區(qū)域)相比，本發(fā)明不需要目標物保持件或試劑保持件的親水性/疏水性涂層。然而，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，為了可以更容易地引入液體，使試劑保持件的通道親水化是有用的；例如，這可通過噴射施加親水性物質(zhì)(其不干擾稍后的反應)來實現(xiàn)，可任選的是，可以允許所述親水性物質(zhì)部分干燥。為了 在使用樣品液或試劑填充的過程中以及在秋千或搖擺操作的過程中有利地影響流動行為， 所述通道可裝配有合適的輪廓或圖案以引導液體，例如在通道的底部有一個或多個溝槽 (10)。為了促進對流并由此加速混合操作，在通道的表面中還可設置阻礙物或障礙物，當液 體從其上方流過時會形成阻礙物湍流或障礙物湍流。 所述通道優(yōu)選在縱向兩端具有用于液體的貯液器——例如它們被構造為比目標 物保持件的附著表面長的貯液器(11)。于是，在秋千或搖擺運動過程中，液體流動超出附 著表面的端部(12)，并且在整個溫育過程中所需要的樣品的混合甚至變得更加有效，特別 是當通道在凸出超過目標物保持件兩端的部分中的液體體積在每一側(cè)都被設計成大于在 附著表面的區(qū)域中的所述兩部分之間的體積時更是如此。通道的凸出部分還起到容納過量 液體的貯液器的作用，以保護系統(tǒng)免受由于移液不準而導致的故障。此外，在將目標物保持 件置于試劑保持件上的同時，在該位置處將樣品、試劑和洗滌液加入并吸出。因此，與整個 現(xiàn)有技術狀態(tài)相比，本發(fā)明特別適合于自動處理大的分析系列。特別是，其能夠在各個溫育 步驟后使制劑得到有效地洗滌，而不用移開目標物保持件在縱向上的一端加入洗滌液，同 時在另一端吸出。在此過程中，液體沿切線方向流過固相底物，這是特別有效的，并且既縮 短了洗滌循環(huán)又節(jié)省了大量的洗滌液?？梢蚤g歇地進行洗滌，或以其他方式連續(xù)進行洗滌。 在連續(xù)工藝的洗滌過程中，由試劑保持件和目標物保持件構成的組件沿流動方向或與流動 方向相反的方向主要以斜角的方式傾斜。 迄今為止，在人工進行間接免疫熒光試驗的情況中，通常使用大股的洗滌液將樣 品或試劑從目標物保持件上沖洗掉，然后在各情況下依次將目標物保持件置于兩個或三個 裝有新鮮洗滌液的試管中，之后將它們?nèi)〕霾⒎磻獏^(qū)域周圍和背部干燥，最后手工滴加 試劑或封固劑。本發(fā)明的目標物保持件不再需要整體洗滌，其僅在附著表面的區(qū)域中與具 有潛在傳染性的液體接觸。最后蓋玻片被放置在附著表面上，從而使得在顯微鏡觀察的過 程中很少有受到目標物保持件傳染的風險。 如果試劑保持件的通道凸出超過目標物保持件(11)，則其邊界可向上延伸以形成 所謂的"杯"(13)，以提高端部的貯液功能并防止液體溢出以及甚至可能流到相鄰的反應制 劑上。作為具有相同目的的預防措施，也可在目標物保持件的邊界處的附著表面之間設置 凹口 (14)。另外，也可在目標物保持件上的附著表面區(qū)域的外部設置與試劑保持件上的各 配對物(16)相對應的凹槽或凸起(15)。這能夠確保目標物保持件以正確的取向和排列方 式放置。可以在目標物保持件的端部的上端或下端設置編碼，以在開始溫育時或在使用顯 微鏡觀察的過程中，在目標物保持件定位于試劑保持件中時用于可靠地鑒別。在目標物保 持件的底側(cè)上可以設置平坦的薄條，即使曾經(jīng)受到油或封固劑的污染，該目標物保持件在 顯微鏡觀察的過程中仍會在所述薄條上滑動，而不會像以往的技術中那樣，目標物保持件 保持粘附在機械臺上。目標物保持件在底側(cè)上的端部位置處可傾斜成一定的角度當使用 手指從上面施加較小的壓力時，目標物保持件可以傾斜，從而從顯微鏡的實驗臺或機械臺 稍微抬起。 已發(fā)現(xiàn)，使用根據(jù)本發(fā)明溫育的組織切片或細胞底物，間接免疫熒光的反應具有 明顯的重現(xiàn)性，這與常規(guī)技術完全相反在常規(guī)目標物保持件的情況下，或多或少的圓形液 滴位于底物(例如組織切片)的頂部。在區(qū)域的中間，液滴通常比外側(cè)高，在這種情況下由于在中間處存在更多的抗體，因此在此處觀察到更強的反應。然而，有時發(fā)現(xiàn)相反的情 況如果液滴凸出超過組織切片的邊緣，則另外的反應配偶子可用于外部的抗原。經(jīng)?？梢?觀察到進一步嚴重的效果由于在液滴邊緣處表面的曲率更大，所以液體在該處比中間處 明顯更快地蒸發(fā)；液體連續(xù)向外流動，從而使抗體產(chǎn)生相當大的濃度梯度——在該情況下， 組織切片的邊緣較中間明顯反應更加強烈，由此，在一些情況下模擬出抗體濃度高達10倍 (這種現(xiàn)象也可以在日常生活中在任何時刻觀察到在光滑表面上，咖啡液滴的干燥物產(chǎn) 生污點，該污點在內(nèi)部非常淺，但是在邊緣處幾乎是黑色的)。在根據(jù)本發(fā)明溫育的組織切 片的情況下，制劑的各個點處的組織結構表明了相同強度的反應。這種進步是通過在溫育 的過程中使液體中的反應物持久有效地混合而獲得的——這是本發(fā)明的特別的優(yōu)點，并且 是進行標準化的免疫熒光診斷的一個先決條件。 由于溶解的反應配偶子的強制對流和各種分析制劑的連續(xù)完全的混合，所以相對
于靜止的體系，本發(fā)明還獲得了明顯更強的信號，這是因為與固相底物相鄰的一直是存在
于液體中的最大濃度的反應物，即使是由于距離過長而在溫育的過程中不可能僅僅通過擴
散而接觸的那些液體中的反應物，也會與固相底物的反應配偶子相接觸。最后，相對于現(xiàn)有
技術，在根據(jù)本發(fā)明溫育的情況下能夠更加迅速地達到反應的飽和限度，因此例如用于間
接熒光免疫法時，溫育的時間可以縮短三分之一。 實施例 新發(fā)明的一個重要的應用是在實驗室醫(yī)學中通過間接熒光免疫法來對抗體進行 血清學診斷。然而，新的方法和對應的裝置(例如)在醫(yī)學實驗室診斷中對于進行許多其他 的免疫學分析、組織化學和細胞化學分析、分子生物學分析、酶學分析、臨床化學分析和其 他分析也是合適的，其中將結合于固相的反應配偶子和溶解于液體中的反應物一起溫育。 相同的情況適用于直接免疫熒光法。 實施例1 :在韋格納肉芽腫病的診斷中通過間接熒光免疫法來檢測針對粒細胞的 自身抗體 為了單獨分析，目標物保持件的各附著表面均設置有一個底物。為此，在該情況 下，將分離的粒細胞在蓋玻片上劃線，并且室溫下在96%的乙醇中固定10分鐘。此后，使用 金剛石玻璃刀將蓋玻片分為lxl毫米級的片段。這些片段中的每一個分別與目標物保持件 的IO個附著表面中的一個粘附結合(粘合劑存在于附著表面和生物芯片的底側(cè)之間；粒細 胞暴露在表面處)。以生物芯片面向下方的方式將目標物保持件放置在具有IO個通道的試 劑保持件上，所述通道被設置成與附著表面相對。目標物保持件的寬度為26毫米，附著表 面的長度為24毫米。通道在附著表面的兩個縱向末端處均突出IO毫米。
這時，手工使用移液管將100微升來自IO個不同患者的血清(其以PBS(使用磷 酸鹽將PH緩沖至7. 4的生理鹽水水溶液)按照1 : 10的比例稀釋)分別加入10個通道 中的一個。通道的尺寸為使得液體立即與粒細胞接觸。然后將試劑保持件和位于其上的目 標物保持件共同以通道的縱向與水平方向成30°角的方式周期性地傾斜，使得液體從一端 至另一端來回流動，每個循環(huán)的循環(huán)時間為15秒。在每種情況下，附著表面區(qū)域中的體積 為20微升；將每半個循環(huán)中移動的體積設計成明顯更大，此處為30微升，結果在各試驗試 劑通道的兩端處的液體都處于持久交換中，并且每種樣品的全部制劑都發(fā)生了劇烈和快速 的持久混合。在溫育的過程中，為了使液體不過快蒸發(fā)以及使分析試劑不干燥，將由試劑保持件和目標物保持件構成的組件蓋上罩。 在30分鐘后，從通道的一端吸出血清稀釋液，并且從另一端(優(yōu)選但不是排他性 的)吸入PBS以進行洗滌——在5分鐘內(nèi)每個通道總共用10毫升。然后將通道吸干，加入 100微升合適的來自山羊的熒光素標記的抗人免疫球蛋白的稀釋液(此處不僅可以想象到 還有許多其他的抗體源或抗體類反應物，而且還可想象到許多其他的標記物質(zhì))。在該過程 中，試劑再次與附著表面和固定在附著表面上的抗原底物接觸。使試劑保持件和目標物保 持件所構成的組件另外進行半小時的秋千或搖擺運動，然后按照相同的方式再次洗滌。最 后，再次將通道吸干，將目標物保持件從試劑保持件上移開，向各附著表面滴加15微升封 固劑(使用PBS將1 : 10甘油的pH緩沖至8.4，添加有0. 1%疊氮化鈉和2%的1，4-二疊 氮雙環(huán)[2. 2. 2]辛烷作為抗漂白劑)，然后放置蓋玻片，所述蓋玻片固定在目標物保持件的 邊沿處的相應凹陷中。在熒光顯微鏡下評價反應。 實施例2 :在多種風濕性疾病的診斷中通過間接熒光免疫法來檢測針對細胞核、 線粒體和平滑肌的自身抗體 將使用下列底物按照與第一實施例類似的方式涂覆的玻璃片段(生物芯片)分別 與根據(jù)本發(fā)明的目標物保持件(例如標準尺寸76x26毫米)的10個附著表面中的每一個粘 附結合，不同之處在于此處為"嵌合體"，所述底物為丙酮固定的來自細胞培養(yǎng)物的人上皮 細胞；乙醇固定的血鞭毛蟲屬短膜蟲綠蠅(haemoflagellate Crithidialuciliae)涂片； 下列小鼠器官的未固定的冷凍切片肝臟、腎臟、胃；以及使用下列單一一種抗原在整個表 面或在特定點涂覆的生物芯片(根據(jù)Proost等人.7):雙鏈DNA、組蛋白H1、另外的細胞核 抗原Sm、 RNP、 SS-A、 SS_B、 Scl_70和核小體；以及細胞質(zhì)抗原Jo_l——每個附著表面總共 有15種不同的抗原底物。按照與實施例1相同的方式對10個患者的目標物保持件進行平 行溫育和評價。在試驗結束時，由光譜確定在各患者的血清中是否存在至少15種不同的自 身抗體中的一種或多種。底物在附著表面上的布置以及和試劑保持件的通道共同進行的溫 育允許對IO個患者平行進行多個參數(shù)的操作；在一個單獨的目標物保持件上進行150個單 獨分析！由于液體不能在相鄰樣品之間流動，所以事實上排除了無意進行的彼此交叉反應 以及相應的誤診。 每個尖端的醫(yī)學實驗室都對能夠測試自身抗體譜感興趣。存在許多臨床問題，針 對這些問題就不同的診斷而言可取的是一方面，在一些臨床綜合征的情況下，可能分別有 數(shù)種自身免疫性疾病(在腎炎(腎臟炎癥)的情況下，例如有古德帕斯丘綜合征、韋格內(nèi)氏 肉芽腫癥、系統(tǒng)性紅斑狼瘡或急進型腎小球腎炎)；另一方面，一些自身抗體可能與特定的 自身免疫性疾病相關(例如對于原發(fā)性膽汁性肝硬化而言，相關的是針對線粒體或核點、 gp210和PML的抗體；對于系統(tǒng)性紅斑狼瘡而言，相關的是針對nDNA、 Sm、組蛋白、核糖體P 蛋白、擴展細胞的核抗原、心磷脂、P-2-糖蛋白等抗體；對于自身免疫性甲狀腺炎而言，相 關的是針對甲狀腺過氧化物酶、甲狀腺球蛋白、TSH受體和胃壁細胞的抗體)。本發(fā)明特別 適用于生成抗體譜。這不限于自身免疫性診斷；還存在許多其他應用領域，包括對融合上清 液中的單克隆抗體(例如針對與腫瘤有關的抗原的抗體)進行篩選8，或者與下列示出的類 似的例子一樣用于傳染性血清學。 實施例3 :通過間接熒光免疫法來平行溫育50個目標物保持件(其具有10個附 著表面)以分別檢測針對細菌、病毒、原生動物、酵母菌和寄生蟲的人抗體——每個患者40
12個參數(shù) 按照與實施例2類似的方式制備具有固相底物的目標物保持件，不同之處在于此 處使用具有下列傳染性抗原底物的玻璃片段感染有麻疹、腮腺炎、風疹和任意其他病毒的 細胞培養(yǎng)物；各種類型的細菌或真菌的涂片；棘球絳蟲幼蟲的冷凍切片、剛地弓形蟲涂片， 各玻璃片段的表面同樣地具有所指明的抗原，有些是用生物化學的方式分離的純凈程度或 高或低的抗原，有些是用重組技術制備的抗原。使用機器來進行溫育，其中所述機器稀釋患 者血清，在規(guī)定的時刻將血清稀釋液和試劑加入試劑保持件的通道，以及借助于梳狀的10 通道移液管和吸管來平行進行洗滌操作。 在溫育的過程中以及在某些情況下還在洗滌的過程中，使試劑保持件和它們相應 的目標物保持件所構成的所有組件從"分裂的毛細管"的縱向上的一端至另一端有節(jié)奏地 來回傾斜，以確保所需的對流。(僅僅)對那些正在進行移液或洗滌操作的組件，可任選地 使之停止傾斜運動。這確?；旌喜僮髟谡麄€操作中不需要被經(jīng)常打斷。同樣可以想象到， 將包括移液系統(tǒng)在內(nèi)的整個裝置設置在大的傾斜臺上，使得即使其中正在進行移液和洗滌 操作的那些組件也不需要間斷進行秋千或搖擺運動。人工進行封固(目前仍是這樣)，通過 顯微鏡目視觀察(目前仍是這樣)。 實施例4 :在過敏癥診斷中使用基于印跡膜的微陣列來測試特異性IgE或IgG抗 體 在免疫印跡技術中，將蛋白或其他抗原固定在硝化纖維素膜、尼龍膜、或其他膜
上，然后依次與患者樣品、或其他樣品、酶標記的抗體、和著色劑一起溫育。在膜條上陽性反
應表現(xiàn)為有色的沉淀，這可目視評價或使用掃描儀或照相機系統(tǒng)自動評價9'1。。 將3x26平方的膜芯片(邊緣長度為1毫米)與根據(jù)本發(fā)明的目標物保持件的10
個附著表面中的每一個粘附結合成平行的三行。每個膜芯片含有規(guī)定的膜偶聯(lián)的過敏原
(樺樹花粉、胡蜂毒液等)。按照與上述例子中類似的方式進行溫育，但是，在第二溫育步驟
中，使用酶標記的抗人IgE抗體，其中第二溫育步驟之后進行洗滌步驟和指示劑反應。在陽
性情況下，在膜芯片上形成染色沉淀。 在76cmx26cm的單一一個目標物保持件上，針對10個患者中的每一個都獲得了一 個具有78個參數(shù)的過敏癥譜。根據(jù)本發(fā)明的膜芯片的應用并不僅限于過敏癥診斷。
實施例5 :借助于微陣列對患者樣品進行基因分型 數(shù)個具有特定的核苷酸序列的微陣列，例如5個微陣列(其分別具有50個不同的
寡核苷酸位點)"'、均固定到根據(jù)本發(fā)明的目標物保持件的附著表面上。從10個患者的白
血細胞中提取DNA。通過多重PCR，由此擴增預定的目標序列，并以基因類型特異性的方式
進行標記。為了進行雜化，將它們加入根據(jù)本發(fā)明的試劑保持件的通道中，并接觸目標物保
持件的附著表面上的微陣列。最后，使用專用的微陣列掃描儀來評價反應。 為了分子生物學的目的而使用微陣列來特異性地檢測非常少量的核酸，這需要反
應是清楚、可重現(xiàn)且非常敏感的，這一點尤其是通過反應液在溫育的過程中產(chǎn)生持久有效
的混合(主要是由于強制對流)而得以保證的。在此，就較短的溫育時間而言，診斷也受益
于本發(fā)明。 本發(fā)明的自動化 迄今為止，實驗室操作中的間接熒光免疫法屬于單獨人工處理和視覺評價的領域。在該領域中分析技術的現(xiàn)狀不能提供具有高的樣品處理量的自動化方案，例如用于臨 床化學的方案。這種兩難的情況可通過市場上可獲得的兩種系統(tǒng)來進行說明DAS srl公 司(羅馬，意大利)提供一種自動溫育器(AP16IF Plus)，同樣Menarini srl公司(佛羅倫 薩，意大利)也提供一種溫育器(Zenit SP Plus)。這兩種系統(tǒng)都直接移取溫育液到目標物 保持件的區(qū)域上。相鄰區(qū)域中的這些液滴的合并或一起流動可導致誤診，在第一洗滌步驟 后當目標物保持件的表面在反應區(qū)域外部被弄濕時尤其是如此——在本發(fā)明中，相反，相 鄰樣品可靠地彼此分開。相對于現(xiàn)有的系統(tǒng)(其中由于容易產(chǎn)生錯誤，因而必須經(jīng)常觀察 移液和洗滌操作)，本發(fā)明提供了用于自動化的更好的先決條件。 另外，在這兩種設備中，直接將液體移取到目標物保持件的區(qū)域上；在調(diào)節(jié)不佳的 情況下，可能會由于插管而對底物造成損害——在本發(fā)明中，這點被排除，原因在于固相底 物不能與插管接觸液體被加入目標物保持件以外的通道中，另外通道是對著底物的。
"AP 16IF Plus"使用雙插管系統(tǒng)來分開洗滌各區(qū)域。 一個插管分配規(guī)定體積的 洗滌液(其為液滴形式)到待洗滌的區(qū)域上，另一個插管此后又直接吸取該液滴。重復該 操作數(shù)次?？晒┻x擇的是，還提供連續(xù)洗滌，即在規(guī)定的時間同時分配和吸取。這兩種變體 方式都蘊藏著插管和底物接觸的風險。另外，該系統(tǒng)使用不必要的大量的洗滌緩沖液，因為 大部分沖洗液只流過底物并且無論如何都不與它們接觸——本發(fā)明與之相反，全部洗滌液 不可避免地被引導通過狹窄的縫隙而直接穿過底物。在各洗滌步驟后，在"AP16IF Plus" 中，在底物上殘留大量殘余體積的洗滌緩沖液，一個原因是吸管不得不與底物保持安全的 距離。結果，試液以不可預測的方式被稀釋，有時稀釋多有時稀釋少，這對精確分析具有不 利的影響。 "Zenit SP Plus"的洗滌方法有意地接受了交叉污染各目標物保持件都存在于 盤的隔室中。首先，在進行洗滌之前，使用多個插管(插管條)同時從各目標物保持件的反 應區(qū)域中吸走樣品液或試劑。隨后，使用洗滌緩沖液填充全部隔室，使得在類似于試管中洗 滌的方式下進行洗滌(該過程是危險的一些高滴度和反應性的抗體無法被第一洗滌填充 液所充分稀釋，并且在這些情況下可在相鄰反應區(qū)域中引起假陽性反應)。最后，又使用插 管將隔室吸空。此處，也存在插管對組織切片造成損害的風險。由于目標物保持件的全部 表面都接觸洗滌液，因此更多殘余的水分殘留在目標物保持件上，這以無法控制的方式促 進了相鄰反應區(qū)域中的液滴流到一起，其中所述液滴是在隨后的溫育步驟中施加的(在與 由血清蛋白構成的溶液接觸后，目標物保持件涂層的親水性喪失)。此處，第二步驟中施加 的試劑溶液也被殘余洗滌液過度地稀釋了 。 相反，本發(fā)明能夠高效率高質(zhì)量地進行節(jié)省液體的自動洗滌操作，并且還避免了 上述兩種設備中所存在的風險。固相底物的設置方法及其在試劑保持件的通道中進行溫育 的方法能夠在彼此嚴格分開的條件下平行洗滌多個區(qū)域。當通過試劑保持件的通道加入洗 滌液并將其吸走時，插管不與組織切片接觸。另外，在洗滌過程中只有目標物保持件的附著 表面被潤濕，而目標物保持件的剩余表面區(qū)域并沒有被潤濕，這附加地降低了相鄰區(qū)域中 的液體流到一起的風險。由于所述的通道形式，在吸取后洗滌緩沖液的殘余體積可以降至 最小，結果試液不會不必要地被稀釋并且多個樣品不會被稀釋至不同程度，而這些問題存 在于現(xiàn)有技術的兩種機器中。
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權利要求
一種用于進行免疫學分析、組織化學和細胞化學分析、分子生物學分析、酶學分析、臨床化學分析和其他分析的裝置，其中所述裝置包括目標物保持件，其具有一個或多個長形的附著表面；和試劑保持件，其具有一個或多個通道；其中，所述目標物保持件能夠以使得每個所述長形的附著表面面向相應的一個所述通道的方式，與所述試劑保持件可拆卸地連接，并且，當與固相結合的反應配偶子被設置在所述長形的附著表面上、且溶解于液體中的反應物存在于所述通道中時，所述反應配偶子和所述反應物接觸，其中設置有用以防止所述液體從一個通道流到相鄰通道的機構。
2. 根據(jù)權利要求l所述的裝置，其中在相鄰附著表面之間設置有凹槽(4)或臺階，該凹槽或臺階從所述附著表面的縱向上的一端平行延伸至縱向上的另一端。
3. 根據(jù)前述權利要求中任意一項所述的裝置，其中所述試劑保持件的所述通道沿設置于所述試劑保持件的所述表面上的長形的凸起延伸，其中相鄰通道的所述凸起彼此分開。
4. 根據(jù)前述權利要求中任意一項所述的裝置，其中所述通道的側(cè)面邊緣在頂部是漸縮的，并且在所述目標物保持件和所述試劑保持件連接的狀態(tài)下防止所述液體從所述通道的側(cè)面流出。
5. 根據(jù)前述權利要求中任意一項所述的裝置，其中所述通道的內(nèi)表面設置有圖案，該圖案用于在所述通道內(nèi)沿縱向引導所述的液體。
6. 根據(jù)前述權利要求中任意一項所述的裝置，其中為了提高儲存所述液體的功能和防止泄漏的目的，所述試劑保持件的所述通道在長度上延伸超出所述目標物保持件的所述附著表面的縱向上的端部(10)。
7. 根據(jù)權利要求6所述的裝置，其中為了形成容納過量液體的杯形貯液器(13)，在所述通道延伸超出所述附著表面的部分中，該通道的邊緣向上延伸。
8. 根據(jù)前述權利要求中任意一項所述的裝置，其中在所述目標物保持件的各個附著表面周圍設置沿周向延伸的邊沿(8)，該邊沿相對于所述附著表面突出。
9. 根據(jù)前述權利要求中任意一項所述的裝置，其中在所述通道的表面中設置障礙物，當液體在所述障礙物上流過時，在所述障礙物的位置處形成障礙物湍流。
10. 根據(jù)前述權利要求中任意一項所述的裝置，其中結合有反應配偶子的固相底物與所述附著表面附接。
11. 根據(jù)權利要求io所述的裝置，其中所述固相底物包括選自下列物質(zhì)中的生物材料a) 生物組織的薄切片，b) 細胞培養(yǎng)物或聯(lián)合細胞結構的細胞涂片，c) 細菌涂片，d) 病毒、原生動物和寄生蟲，e) 以溶液形式、干燥形式、或偶聯(lián)形式施用的抗原滴，f) 與表面偶聯(lián)的其他抗原，和/或g) 任意的核苷酸序列。
12. —種利用根據(jù)權利要求1至11中任意一項所述的裝置來進行免疫學分析、組織化學和細胞化學分析、分子生物學分析、酶學分析、臨床化學分析和其他分析的方法，其中將所述目標物保持件以每個所述長形的附著表面分別面向一個所述通道的方式與所述試劑 保持件連接，將其中溶解有反應物的液體引入所述通道，使得結合有反應配偶子并設置在 所述附著表面上的固相底物接觸所述液體，并且使所述目標物保持件和所述試劑保持件一 起移動，所述移動使得所述液體交替地沿所述通道的兩個縱向方向移動。
13. 根據(jù)權利要求12所述的方法，其中各個單獨的分析制劑通過以下方式實現(xiàn)連續(xù)的混合使所述試劑保持件和位于其上的所述目標物保持件一起周期性地轉(zhuǎn)動，使得所述通 道的縱向方向離開水平面而達到使所述液體在所述通道的兩端之間來回流動的程度。
14. 根據(jù)權利要求12或13所述的方法，其中通過使所述液體在每半個循環(huán)中移動的體 積大于在所述附著表面下的所述液體的體積，而實現(xiàn)各通道中的所述液體的混合，由此使 得各個通道的兩端的所述液體也參與混合，其中半個循環(huán)是所述液體從所述試劑保持件的 所述通道的縱向上的一端移動至縱向上的另一端。
15. 根據(jù)權利要求12至14中任意一項所述的方法，其特征在于反應過程中的分析制劑 液和洗滌循環(huán)過程中的洗滌液均沿切線方向通過所述附著表面的下方。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于分析液相和固相之間的生物反應的方法和裝置。該裝置包括具有一個或多個長形的附著表面的目標物保持件和具有一個或多個通道的試劑保持件；其中，所述目標物保持件能夠與所述試劑保持件可拆卸式連接，使得每個所述長形的附著表面分別面向一個所述通道，并且，當與固相結合的反應配偶子被設置在所述長形的附著表面上、且溶解于液體中的反應物存在于所述通道中時，所述反應配偶子和所述反應物接觸，其中設置有用以防止所述液體從一個通道流到相鄰通道的機構。通過本發(fā)明，反應進行更加迅速，信號變得更強并且各個底物的反應性在整個表面上變得更加均勻，本發(fā)明還能夠防止在溫育的過程中相鄰樣品液彼此混合。
文檔編號G01N33/50GK101738465SQ200910222938
公開日2010年6月16日 申請日期2009年11月19日 優(yōu)先權日2008年11月19日
發(fā)明者拉斯穆斯·貝林, 比安卡·馬爾察恩, 溫弗里德·施托克爾, 馬丁·拉泰克 申請人:歐蒙醫(yī)學診斷技術有限公司