專利名稱：CdTe-他莫昔芬熒光探針的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于半導(dǎo)體和生物標(biāo)記技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及熒光探針的制備方法。
背景技術(shù)：
由于生物體系的特殊性和復(fù)雜性，為了能測(cè)定更多的生物活性物質(zhì)，對(duì)激光激發(fā)生物 熒光探針有很高的要求。目前，應(yīng)用最為普遍的熒光探針是有機(jī)染料，但是，它們的激發(fā) 光譜都較窄，所以很難同時(shí)激發(fā)多種組分；而其熒光發(fā)射光譜又較寬，并且分布不對(duì)稱， 因此要同時(shí)檢測(cè)多種組分較為困難。有機(jī)染料最嚴(yán)重的缺陷還有光化學(xué)穩(wěn)定性差，光漂白 與光解使每個(gè)染料探針能夠發(fā)出的熒光光子平均數(shù)量不可能太多，光解產(chǎn)物又往往會(huì)對(duì)生 物體產(chǎn)生殺傷作用。利用半導(dǎo)體量子點(diǎn)作為生物熒光探針就能較好的解決這些問題。首先 與傳統(tǒng)的有機(jī)染料熒光探針相比，量子點(diǎn)的激發(fā)光譜寬，且連續(xù)分布，這使得單個(gè)波長(zhǎng)的 光可同時(shí)激發(fā)所有的量子點(diǎn)。在生物材料熒光標(biāo)記領(lǐng)域中的主要優(yōu)點(diǎn)是可以使用同一激發(fā) 光源同時(shí)進(jìn)行多通道的檢測(cè)。其次，量子點(diǎn)的發(fā)射波長(zhǎng)可通過控制它的大小和組成來"調(diào) 諧"，因而可獲得多種可分辨的顏色。如紫外一藍(lán)光(ZnS, ZnSe);可見光(CdS, CdSe,CdTe); 近紅外光(CdS/HgS/CdS，InP，InAs)。第三，量子點(diǎn)發(fā)射光譜呈對(duì)稱分布且寬度窄，半高峰 寬(Full Widths Half Max，F(xiàn)WHM)常常只有40nm或更小。這樣就允許同時(shí)使用不同光譜 特征的量子點(diǎn)，而發(fā)射光譜不出現(xiàn)交疊，或只出現(xiàn)很少交疊，使所標(biāo)記的生物分子的熒光 光譜易于區(qū)分和識(shí)別。第四，與有機(jī)熒光染料相比，量子點(diǎn)具有較好的光穩(wěn)定性，不易被 光解或漂白，熒光光譜幾乎不受周圍環(huán)境(如溶劑、pH值、溫度等)的影響，它可以經(jīng) 受反復(fù)多次激發(fā)，而不像有機(jī)熒光分子那樣容易發(fā)生熒光漂白，量子點(diǎn)的發(fā)光壽命比普通 熒光標(biāo)記染料的壽命長(zhǎng)l-2個(gè)數(shù)量級(jí)，量子點(diǎn)的熒光強(qiáng)度是羅丹明6G (R6G)的20倍， 穩(wěn)定性是它的100倍，光譜線寬只有其三分之一。最后，量子點(diǎn)具有很好的生物相容性， 而有機(jī)熒光染料則不具有這種優(yōu)越性。量子點(diǎn)優(yōu)良的熒光性質(zhì)使得它在生物熒光探針標(biāo)記、 熒光能量轉(zhuǎn)移等許多生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用前景。但是目前研究主要致力于生 物標(biāo)記上，具有雙功能作用(標(biāo)記和治療)量子點(diǎn)熒光探針還未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
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本發(fā)明的目的是提供一種CdTe-他莫昔芬熒光探針的制備方法。 本發(fā)明的具體步驟如下
1. 原料的制備
將0.06g的碲粉、0.06gNaBH4和0.5 mL去離子蒸餾水加入氮?dú)怙柡土说姆磻?yīng)瓶里， 用磁子攪拌器進(jìn)行攪拌。約過30分鐘，溶液為白色絮狀，用去離子蒸餾水將其稀釋至50mL， 得到O.Olmol* L"NaHTe溶液。
另取0.03gCdCl2 . 2.5H20， 21pLTGA， 100mL去離子蒸餾水置于三角燒瓶中，用稀 的NaOH溶液將其pH值調(diào)至9.0，然后邊攪拌邊通入N2 (約0.5h)，用注射器注入2.5mL 己經(jīng)制備好的NaHTe溶液，在IO(TC的條件下回流lh和12h。
用異丙醇純化CdTe原溶液，再離心、分離，再稀釋到所需濃度。
2. 所需設(shè)備
三頸圓底燒瓶，電熱套，氮?dú)?br> 3. 合成步驟
取0.0018g-0.0141g他莫昔芬溶于10.0-20. 0 mL 二次蒸餾水中，以CdTe/他莫昔芬摩爾 比為4/1-1/2，與純化后的綠色CdTe溶液混合，調(diào)節(jié)體系的pH值為中性，在氮?dú)獾谋Ｗo(hù)下， 將反應(yīng)體系加熱到40-100°C，冷凝回流60-180min，即得CdTe-他莫昔芬探針。以上原料 配比可按比例放大
本發(fā)明采用表面修飾技術(shù)，得到新型量子點(diǎn)探針，在紫外燈照射下可得到很強(qiáng)的熒光， 通過光譜分析，發(fā)現(xiàn)CdTe-他莫昔芬探針具有良好的熒光特性。研究發(fā)現(xiàn)，采用本發(fā)明制 備的CdTe-他莫昔芬與多肽存在著較強(qiáng)的相互作用，并己經(jīng)成功地用于肝癌細(xì)胞的標(biāo)記。
本發(fā)明具有材料合成方法簡(jiǎn)單，組成易于控制，成本相對(duì)低廉，得到的量子點(diǎn)探針熒 光特性好等優(yōu)點(diǎn)。


圖1為CdTe-CdTe-他莫昔芬探針的熒光光譜圖； 圖2為CdTe-他莫昔芬探針標(biāo)記肝癌細(xì)胞照片。
具體實(shí)施方式
合成實(shí)例1:
取0.0018g的他莫昔芬溶于10mL 二次水中，加入10mL用NaHTe還原CdCl2制備得 到并經(jīng)異丙醇純化后的CdTe溶液，調(diào)節(jié)pH為中性。在氮?dú)獾谋Ｗo(hù)下，將反應(yīng)體系加熱到 40°C，冷凝回流60min，即得CdTe-CdTe-他莫昔芬熒光探針。 合成實(shí)例2:
取O.OMlg的他莫昔芬溶于20mL 二次水中，加入10mL按上述實(shí)例1方法制得的CdTe 溶液，調(diào)節(jié)pH為中性。在氮?dú)獾谋Ｗo(hù)下，將反應(yīng)體系加熱到IO(TC，冷凝回流180min，即 得CdTe-他莫昔芬熒光探針。 合成實(shí)例3: -
取0.0141g的他莫昔芬溶于15mL 二次水中，加入lOmL按上述實(shí)例1方法制得的CdTe 溶液，調(diào)節(jié)pH為中性。在氮?dú)獾谋Ｗo(hù)下，將反應(yīng)體系加熱到6(TC，冷凝回流100min，即得 CdTe-他莫昔芬熒光探針。 合成實(shí)例4:
取0.0141g的他莫昔芬溶于10mL 二次水中，加入5mL按上述實(shí)例1方法制得的CdTe 溶液，調(diào)節(jié)pH為中性。在氮?dú)獾谋Ｗo(hù)下，將反應(yīng)體系加熱到8(TC，冷凝回流120min，即得 CdTe-他莫昔芬熒光探針。 合成實(shí)例5:
取0.0035g的他莫昔芬溶于20mL 二次水中，加入5mL按上述實(shí)例1方法制得的CdTe 溶液，調(diào)節(jié)pH為中性。在氮?dú)獾谋Ｗo(hù)下，將反應(yīng)體系加熱到6(TC,冷凝回流120min,即得 CdTe-他莫昔芬熒光探針。 合成實(shí)例6:
取0.0035g的他莫昔芬溶于20mL 二次水中，加入5mL按上述實(shí)例1方法制得的CdTe 溶液，調(diào)節(jié)pH為中性。在氮?dú)獾谋Ｗo(hù)下，將反應(yīng)體系加熱到8(TC，冷凝回流100min,即得 CdTe-他莫昔芬熒光探針。
權(quán)利要求
1、CdTe-他莫昔芬熒光探針的制備方法，其特征是具體步驟如下取0.0018g-0.0141g他莫昔芬溶于10.0-20.0mL二次蒸餾水中，以CdTe/他莫昔芬摩爾比為4/1-1/2，與純化后的綠色CdTe溶液混合，調(diào)節(jié)體系的pH值為中性，在氮?dú)獾谋Ｗo(hù)下，將反應(yīng)體系加熱到40-100℃，冷凝回流60-180min，即得CdTe-他莫昔芬探針。
全文摘要
本發(fā)明屬于半導(dǎo)體和生物標(biāo)記技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及熒光探針的制備方法。本發(fā)明采用表面修飾技術(shù)，以他莫昔芬與純化后的綠色CdTe溶液混合，調(diào)節(jié)體系的pH值，在氮?dú)獾谋Ｗo(hù)下，加熱、冷凝回流制得CdTe-他莫昔芬探針。該探針在紫外燈照射下可得到很強(qiáng)的熒光，通過光譜分析，發(fā)現(xiàn)具有良好的熒光特性。研究發(fā)現(xiàn)，CdTe-他莫昔芬與多肽存在著較強(qiáng)的相互作用，并已經(jīng)成功地用于肝癌細(xì)胞的標(biāo)記。本發(fā)明具有材料合成方法簡(jiǎn)單，組成易于控制，成本相對(duì)低廉，得到的量子點(diǎn)探針熒光特性好等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)G01N21/64GK101634633SQ20091006743
公開日2010年1月27日 申請(qǐng)日期2009年8月21日 優(yōu)先權(quán)日2009年8月21日
發(fā)明者馮雪嬌, 劉俊余, 劉紅劍, 單桂曄, 尚慶坤, 張維靜 申請(qǐng)人:東北師范大學(xué)