專利名稱：以中草藥水提物為主要成分的痰液處理試劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種以中草藥水提物為主要成分的、在靜止條件下就可對(duì)痰液 進(jìn)行體外處理的試劑，適用于脫落細(xì)胞學(xué)診斷及大規(guī)模肺癌普査，屬醫(yī)療領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
利用氣管、支氣管分泌物(痰液)中的脫落細(xì)胞進(jìn)行涂片鏡檢的方法，一 直是對(duì)肺癌篩查的主要方法，此方法由于無(wú)損傷或損傷很小，故廣泛用于肺癌 普查工作。目前臨床的檢測(cè)方式是取得痰液樣本后，取其中一部分直接涂片鏡檢。由 于痰液樣本粘性物質(zhì)多、流動(dòng)性不好且細(xì)胞含量少，因而不可能將標(biāo)本細(xì)胞有 效收集于玻片上，而且涂片上存有大量粘液掩蓋細(xì)胞極易產(chǎn)生漏診或誤診。因 此，若能將痰液樣本進(jìn)行液化處理使其具有良好的流動(dòng)性，同時(shí)完好地保持細(xì) 胞形態(tài)，這樣就可以很容易地通過普通離心機(jī)進(jìn)行離心處理而將全部細(xì)胞收集 起來進(jìn)行涂片。這樣不僅可以增加鏡下的細(xì)胞視野密度，同時(shí)也排除了粘液干 擾，極大地提高了診斷率。我國(guó)幅員遼闊，在同一季節(jié)南北溫差很大，尤其在冬季溫差可達(dá)40匸以上， 這就需要痰液處理試劑本身具有較寬的使用溫度范圍和儲(chǔ)運(yùn)溫度范圍。同時(shí)， 廣大的臨床單位尤其是一線的臨床單位，所具有的硬件條件及資金投入能力往 往相差很大，這就要求痰液處理試劑本身不僅成本低廉易于大規(guī)模普及應(yīng)用， 而且對(duì)使用條件要沒有特殊要求且使用者無(wú)需培訓(xùn)即可使用?，F(xiàn)有的痰液體外處理方法多有缺陷，如1) 酶化法不僅因需要恒溫和攪拌等輔助條件而使得搡作麻煩，更因 為本身對(duì)溫度敏感而使儲(chǔ)運(yùn)的難度增加，同時(shí)，試劑成本較髙也使得難于進(jìn)行普查應(yīng)用；2) 強(qiáng)堿處理法、機(jī)械攪拌法等同樣存在需特定溫度條件或操作煩瑣 等不足；3) 中國(guó)專利公開號(hào)CN1168470A中，是將痰液收集于生理鹽水中而后 在4匸下、40000g離心處理此法不僅因?yàn)樵噭┲袩o(wú)直接處理痰液 的有效成分而使處理效率降低，而且能達(dá)40000g的離心機(jī)也不是 廣大臨床單位通常配備的，更何況還有41C的溫度要求，因此這種 方法不適合脫落細(xì)胞學(xué)診斷及大規(guī)模肺癌普查；4) 中國(guó)專利公開號(hào)CM694726A中，是應(yīng)用"天然硫氧還原蛋白"、"含 有還原態(tài)硫氧還原蛋白的蛋白或肽"或者"編碼硫氧還原蛋白的核 酸分子"來對(duì)痰液進(jìn)行處理此法所應(yīng)用的原料需用特定微生物或 植物中精提再制成成品，這必然會(huì)提高綜合成本并使生產(chǎn)工藝復(fù)雜 化，更重要的是，此法所應(yīng)用的原料對(duì)貯運(yùn)溫度及使用條件均有要 求。實(shí)際上，此法更適用于對(duì)患者進(jìn)行藥物治療，并不適合成為用 于脫落細(xì)胞學(xué)診斷及大規(guī)模肺癌普查的體外處理試劑。與之相似的 諸如半胱氨酸及其鹽酸鹽等成分也不適合成為用于脫落細(xì)胞學(xué)診 斷及大規(guī)模肺癌普查的體外處理試劑。發(fā)明內(nèi)容經(jīng)發(fā)明人大量實(shí)驗(yàn)及篩選，發(fā)現(xiàn)中草藥紫菀和竹茹按一定重量比且最佳重量比為等比例混合后的水提物在常溫下對(duì)痰液具有良好的體外處理能力，而且 原料易得、價(jià)格低廉、制備簡(jiǎn)單。如將制備好的水提液用諸如高效凹凸捧脫色吸附劑等進(jìn)行脫色，即成無(wú)色澄明液體。在此基礎(chǔ)上，為痰液樣本中的脫落細(xì)胞變形和破壞，本發(fā)明還配合以中性 福爾馬林磷酸鹽緩沖液或等滲磷酸鹽緩沖液對(duì)痰液樣本中的脫落細(xì)胞進(jìn)行固定 和保護(hù)。
具體實(shí)施方式
本發(fā)明的具體實(shí)施例如下(配制100ml處理液)1) 取中草藥紫菀和竹茹各lg放于燒杯中，加入200ml蒸餾水，煮沸 20分鐘，冷卻后加入粒度規(guī)格為200目的高效凹凸棒脫色吸附劑 2g，攪拌，待水提液的顏色脫凈后，將其用濾紙過濾，制成無(wú)色 澄明液體備用；2 )將步驟1)中制備的水提液加熱濃縮至20ml;3) 方法①取磷酸氫二鈉 0.65g，磷酸二氫鈉 0. 4g，溶于50ml 蒸餾水中，再取40%福爾馬林10ml和步驟2)中的濃縮水提液10ml 加入溶液中，混句，再用蒸餾水滴定至100ml即可；方法②取磷酸氫二鈉0. 166g ，磷酸二氫鈉 0.757g ，氯化鈉 0. 2g溶于50ml蒸餾水中，再取步驟2)中的濃縮水提液10ml加 入溶液中，混勻，再用蒸餾水滴定至100ml即可。使用方法將痰液樣本收集至容器內(nèi)，加入樣本體積二倍量的本處理試劑，手搖震蕩 10—15下，在4C至45'C的溫度范圍內(nèi)靜放2—IO小時(shí)(放置時(shí)間依痰液樣本 的粘稠度而大致確定，粘稠度越低則放置時(shí)間越短)，用普通離心機(jī)以450g(約 1500轉(zhuǎn)/分)離心IO分鐘，傾掉上部液體，容器底部即為收集好的干凈細(xì)胞團(tuán)。最后用常規(guī)的黏附液如甘油蛋白液等涂片。實(shí)際使用表明，使用本處理液后，鏡下無(wú)粘液殘留，細(xì)胞的視野密度大， 細(xì)胞形態(tài)完好，完全去除了粘液的干擾，同時(shí)最大程度地減少了細(xì)胞損失，使 讀片者降低了讀片困難度與疲穸度，直接提高了診斷率。而且，還可以通過黏 附液的加入量來準(zhǔn)確控制鏡下的細(xì)胞視野密度，以便于更好地適應(yīng)不同讀片者 的讀片習(xí)慣。技術(shù)優(yōu)勢(shì)本發(fā)明開創(chuàng)性地使用中草藥的天然成分作為痰液體外處理的主要成分，創(chuàng) 造性地拓展了紫菀和竹茹這兩味中草藥的用途。本發(fā)明不僅可在4 c至45 x:的較寬的溫度范圍內(nèi)即可對(duì)痰液樣本進(jìn)行分解、 液化和處理，更可以在-18'C至50'C的溫度范圍進(jìn)行儲(chǔ)運(yùn)，且痰液的處理過程 無(wú)需任何輔助手段(如加熱、攪拌等)，在靜止的條件下即可進(jìn)行，同時(shí)本發(fā)明 還可以在處理痰液樣本過程中使細(xì)胞保持完好形態(tài)。本發(fā)明成本低廉，制備極簡(jiǎn)單，使用時(shí)對(duì)輔助器材無(wú)任何特殊要求，使用 者無(wú)需特殊培訓(xùn)即可使用，完全可以應(yīng)用于脫落細(xì)胞學(xué)診斷及大規(guī)模肺癌普查。
權(quán)利要求
1. 一種以中草藥水提物為主要成分的痰液處理試劑，其特征在于它是以中草藥紫菀和竹茹按一定重量比且最佳重量比為等比例混合后的水提物為處理痰液的主要成分；
2、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的痰液處理試劑，其特征在于試劑本身可在靜止?fàn)顟B(tài)下 處理痰液，而無(wú)需其他任何輔助條件如加熱或攪拌等；
3、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的痰液處理試劑，其特征在于，可在4x:至45x:的溫度 范圍內(nèi)進(jìn)行使用；
4、 根據(jù)權(quán)利要求i所述的痰液處理試劑，其特征在于試劑本身的儲(chǔ)運(yùn)溫度可在 -i8t:至50X:的范圍內(nèi)。
全文摘要
本發(fā)明屬醫(yī)療領(lǐng)域，開創(chuàng)性地使用中草藥的天然成分作為痰液體外處理試劑的主要成分，具體是將紫菀和竹茹按一定重量比混合后進(jìn)行水提，將水提液作為主要成分對(duì)痰液進(jìn)行體外處理，還可配合中性福爾馬林磷酸鹽緩沖溶液或等滲磷酸鹽緩沖液對(duì)痰液樣本中的脫落細(xì)胞進(jìn)行固定和保護(hù)。本試劑無(wú)需任何諸如加熱、攪拌等輔助手段，在靜止的條件下即可對(duì)痰液處理，輔助器材為普通離心機(jī)，使用者無(wú)需特殊培訓(xùn)。本發(fā)明可在4℃至45℃的較寬的溫度范圍內(nèi)使用，更可以在-18℃至50℃的溫度范圍進(jìn)行儲(chǔ)運(yùn)，且成本低廉，可以應(yīng)用于大規(guī)模肺癌普查。
文檔編號(hào)G01N1/28GK101275888SQ20071003845
公開日2008年10月1日 申請(qǐng)日期2007年3月26日 優(yōu)先權(quán)日2007年3月26日
發(fā)明者顧蘇蘭, 馬雪松 申請(qǐng)人:上海藍(lán)盎電子科技發(fā)展有限公司