專利名稱：旋光異構(gòu)體分離劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及旋光異構(gòu)體分離劑及其制造方法。
技術(shù)背景在硅膠上負(fù)載多糖衍生物的分離劑通常用作高效液相色譜法用的光學(xué) 分離劑，作為負(fù)載方式，可以是物理負(fù)載的方式(物理負(fù)載型的分離劑)和通過化學(xué)鍵負(fù)載的方式(化學(xué)負(fù)載型的分離劑)。參見JP - B 2751004或JP - A 8 - 5623。化學(xué)負(fù)載型的分離劑，即使在使用溶解多糖衍生物的有機(jī)溶劑的情況 下，與物理負(fù)載型的分離劑相比，來自多糖衍生物的洗脫物量也較少。然而， 即使是化學(xué)負(fù)載型的分離劑，也存在未反應(yīng)的多糖衍生物，因此在洗脫液中 含有來自多糖衍生物的洗脫物。在這樣的洗脫液中存在來自未反應(yīng)多糖衍生物等的洗脫物的情況下，才艮 據(jù)上述洗脫物量的多少，在用作高效液相色語法用的分離劑時，存在色譜的 基線穩(wěn)定性惡化，分離產(chǎn)品純度并不足夠地高這樣的問題。在物質(zhì)負(fù)載型的分離劑中，已經(jīng)進(jìn)行了減少洗脫物量的研究。JP-A7 -260762公開了洗脫物量較少的涂布類型的分離劑。發(fā)明內(nèi)容在這樣的物理負(fù)載型分離劑中，低分子量的多糖衍生物被洗脫。這是由 于所用多糖的分子量分布較寬。另一方面，在化學(xué)負(fù)載型的分離劑中，不僅會將如上述的低分子量多糖 衍生物洗脫，還會將未與載體化學(xué)鍵合的低分子量或高分子量的多糖衍生物 或來自具有能與多糖衍生物羥基反應(yīng)的基團(tuán)的化合物的雜質(zhì)洗脫。這樣的來 自化學(xué)負(fù)載型分離劑的洗脫物與來自物理負(fù)載型分離劑的洗脫物不同。如上所述，在目前的化學(xué)負(fù)載型分離劑用作高效液相色譜法用分離劑的 情況下，在色譜的基線穩(wěn)定性惡化的方面，在分離產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定的方面或分離產(chǎn)品的純度提高的方面，存在改善的余地本發(fā)明提供了在用作高效液相色譜法用分離劑的情況下，能提高分離性 能的旋光異構(gòu)體用分離劑及其制造方法。本發(fā)明提供了包含以化學(xué)鍵合負(fù)載在載體顆粒上的多糖衍生物的旋光準(zhǔn))為20ppm以下的旋光異構(gòu)體分離劑。 (通液試-瞼)(1) 通過淤漿法，在直徑lcm、長度25cm的柱內(nèi)填充旋光異構(gòu)體分離劑。(2) 作為溶劑，使用溫度設(shè)定在4(TC的能溶解多糖衍生物的有機(jī)溶劑， 以8ml/min的流速開始通液。(3) 在通液開始1小時后，開始釆集通液的有機(jī)溶劑，采集1小時的量 (480ml),稱量質(zhì)量(MO。(4) 濃縮干燥采集液，稱量殘?jiān)|(zhì)量(M2)，由下式M2/M!求出洗脫物濃度。本發(fā)明提供了上述旋光異構(gòu)體分離劑的制造方法，包括使用能溶解多糖 衍生物的有機(jī)溶劑對未洗凈的旋光異構(gòu)體分離劑 一次洗凈或分多次洗凈的 工序、和干燥的工序。本發(fā)明還提供了包括將上述旋光異構(gòu)體與旋光異構(gòu)體接觸的分離旋光 異構(gòu)體的方法，以及上述旋光異構(gòu)體分離劑的分離旋光異構(gòu)體用途。發(fā)明詳述另外，未洗凈的旋光異構(gòu)體分離劑是指不滿足在上述條件下進(jìn)行通液試 驗(yàn)時的洗脫物濃度(質(zhì)量基準(zhǔn))為20ppm以下這一條件下的分離劑。本發(fā)明的旋光異構(gòu)體分離劑分離性能良好，可以提高分離的旋光異構(gòu)體 的純度。適合用于高效液相色譜法。<旋光異構(gòu)體分離劑>本發(fā)明的旋光異構(gòu)體分離劑通過下述通液試驗(yàn)求出的洗脫物濃度(質(zhì)量 基準(zhǔn))為20ppm以下，優(yōu)選為15ppm以下，更優(yōu)選為10ppm以下。(通液試驗(yàn)) (1) 通過淤漿法，在直徑lcm、長度25cm的柱內(nèi)填充旋光異構(gòu)體分離劑。(2) 作為溶劑，使用溫度設(shè)定在40。C的能溶解多糖衍生物的有機(jī)溶劑， 以8ml/min的流速開始通液。(3) 在通液開始1小時后，開始采集通液的有機(jī)溶劑，采集1小時的量 (480ml),稱量各級分的質(zhì)量(MO。(4) 濃縮干燥采集液，稱量殘?jiān)|(zhì)量(M2),由下式M2/M,求出洗脫物濃度。<旋光異構(gòu)體分離劑的制造方法>首先，在載體上化學(xué)鍵合多糖衍生物，從而制造化學(xué)負(fù)載型的分離劑。 本發(fā)明中使用的多糖衍生物是公知的，可以采用在JP - A 2004 - 3935的實(shí)施例1~5、 JP-A7-260762的合成例1中記載的方法、JP-B 2751004的第43段的制法3中記載的方法制備。在本發(fā)明中使用的載體上負(fù)載多糖衍生物的旋光異構(gòu)體分離劑(未洗凈的旋光異構(gòu)體分離劑)是公知的，可以采用JP-B 2751004的實(shí)施例1中記載的方法等制備。作為載體，可以使用多孔有機(jī)載體或多孔無機(jī)載體，優(yōu)選多孔無機(jī)載體。 作為多孔有機(jī)載體適當(dāng)?shù)奈镔|(zhì)包括聚苯乙烯、聚丙烯酰胺、聚丙烯酸酯等的 高分子物質(zhì)，作為多孔無機(jī)載體適當(dāng)?shù)奈镔|(zhì)是二氧化硅、氧化鋁、氧化鎂、 玻璃、高嶺土、氧化鈦、硅酸鹽、羥基磷灰石等，特別優(yōu)選硅膠。另外，在使用硅膠的情況下，由于能排除硅膠表面上殘存的硅烷醇的影 響，提高與光學(xué)活性高分子化合物的親和性，因此期望通過硅烷化處理(使 用氨基烷基硅烷的硅烷化處理)、等離子體處理等，對硅膠進(jìn)行表面處理， 完全不進(jìn)行表面處理也沒有問題。多孔載體，尤其是石圭月交的粒徑優(yōu)選為1 ~ 300 |u m,更優(yōu)選為15 ~ 100 |u m，進(jìn)一步優(yōu)選為20~50|im，平均細(xì)孔徑優(yōu)選為200~8000A，更優(yōu)選為 200-4000 A，進(jìn)一步優(yōu)選為300-2000 A。另外，多孔載體的粒徑實(shí)質(zhì)上是 分離劑的粒徑。如果多孔載體的平均細(xì)孔徑在上述范圍內(nèi)，則光學(xué)活性高分子化合物溶 液能在細(xì)孔內(nèi)充分浸透，光學(xué)活性高分子化合物能容易地均勻地附著在細(xì)孔 內(nèi)，因此是優(yōu)選的。此外，由于不會阻塞細(xì)孔，因此能將分離劑的壓力損失 維持得較低。作為衍生出多糖衍生物的多糖，無論是合成多糖、天然多糖和天然物改 性多糖的哪一種，只要是光學(xué)活性的即可，期望優(yōu)選為結(jié)合方式的規(guī)則性高 的多糖。作為多糖，可以列舉P - 1,4-葡聚糖(纖維素)、a-1,4-葡聚糖(直鏈 淀粉、支鏈淀粉)、a - 1,6 -葡聚糖(右旋糖苷)、(3 - 1,6 -葡聚糖(:T、X 7 ， >)、[3 - 1，3-葡聚糖(例如熱凝膠(力一K，"、裂褶多糖Oy、:7 4 a - 1,3 -葡聚糖、P - 1,2 -葡聚糖(冠癭(Crown Gall)多糖)、(3 - 1，4 -半乳 聚糖、|3-1，4-甘露聚糖、a-1,6-甘露聚糖、(3 - 1，2-果聚糖(7，夕夕 乂)(菊粉)、(3 - 2，6-果聚糖(果聚糖)、(3-1，4-木聚糖、1,3-木聚糖、 e - 1，4-殼聚糖、a _ 1,4-N-乙酰基殼聚糖(幾丁質(zhì))、支鏈淀粉(7。/P，/)、 瓊脂糖、藻酸等，還包含含有直鏈淀粉的淀粉。在這些物質(zhì)中，優(yōu)選能容易獲得高純度多糖的纖維素、直鏈淀粉、P -1，4-木聚糖、P-l,4-殼聚糖、幾丁質(zhì)、卩-1,4-甘露聚糖、菊粉、熱凝 膠等，特別優(yōu)選纖維素、直鏈淀粉。多糖的數(shù)均聚合度(l分子中所含的吡喃糖或呋喃糖環(huán)的平均數(shù))優(yōu)選為 5以上，更優(yōu)選為IO以上，對上限沒有特別限制，在操作性的觀點(diǎn)上，優(yōu)選 為1000以下，進(jìn)一步優(yōu)選為5 ~ 1000,更優(yōu)選為10- 1000,特別優(yōu)選為10 ~ 500。多糖衍生物可以使用通過上述多糖的羥基的 一部分或全部與具有能與 羥基反應(yīng)的官能團(tuán)的化合物形成酯鍵、尿烷鍵、醚鍵等而獲得的物質(zhì)。作為具有能與羥基反應(yīng)的官能團(tuán)的化合物，只要是異氰酸衍生物、羧酸、 酯、酰卣化物、酰胺化合物、卣素化合物、醛、醇或具有其它脫離基團(tuán)的化 合物即可，還可以使用這些物質(zhì)的脂肪族、脂環(huán)族、芳香族、雜芳香族化合 物。作為特別優(yōu)選的多糖衍生物，可以列舉多糖酯衍生物和多糖氨基甲酸酯 衍生物。本發(fā)明中所謂的洗脫物是例如來自具有能與羥基反應(yīng)的官能團(tuán)的化合 物的異氰酸衍生物或羧酸衍生物等反應(yīng)副產(chǎn)物、或沒有與載體化學(xué)鍵合的多 糖衍生物等。然后，用能溶解多糖衍生物的有機(jī)溶劑洗凈在載體上化學(xué)鍵合多糖衍生
物的旋光異構(gòu)體分離^(未洗凈的旋光異構(gòu)體分離劑)。洗凈可以進(jìn)行1次或 分為多次(例如2 ~ 10次左右)進(jìn)行。洗凈方法只要是能充分接觸未洗凈的分離劑和有機(jī)溶劑即可，可以采用 柱方式、間歇方式、在過濾后的殘?jiān)凶⑷胗袡C(jī)溶劑而洗凈的方法、力口熱回 流方法等。作為在洗凈中使用的有機(jī)溶劑，可以使用選自四氫呋喃(THF)、丙酮、 乙酸乙酯、氯仿、二氯曱烷、二曱基乙酰胺、二曱基曱酰胺(DMF)、甲醇等的溶劑。有機(jī)溶劑的使用量相對于未洗凈的分離劑中的多糖衍生物lg，優(yōu)選總計(jì) 為5 ~ 100ml,進(jìn)一步優(yōu)選為10 ~ 70ml，更優(yōu)選為20 ~ 40ml。有機(jī)溶劑的溫度才艮據(jù)洗凈方法而有所不同，可以選擇不到沸點(diǎn)的溫度或 沸點(diǎn)以上的溫度，優(yōu)選為50~150°C，進(jìn)一步優(yōu)選為60~120°C，更優(yōu)選為 70 ~ IO(TC。洗凈時間只要是用于使洗脫物量為規(guī)定量以下的必要時間即可，通常為 1~100小時，優(yōu)選為1 50小時左右。洗凈后的填充劑可以通過例如過濾等回收。該過濾溫度通常為10~150 。C，優(yōu)選為20~ IO(TC。然后，干燥洗凈后的分離劑。對干燥方法沒有特別的限制，可以考慮處 理時間和處理成本適當(dāng)選擇，優(yōu)選在減壓狀態(tài)下，在室溫~ 100。C下干燥處 理2~24小時。通過本發(fā)明制造方法獲得的旋光異構(gòu)體分離劑在上述通液試驗(yàn)中的洗 脫物濃度為規(guī)定值以下。因此，在將本發(fā)明的旋光異構(gòu)體分離劑用作高效液 相色譜法用填充劑，分離旋光異構(gòu)體的情況下，基本沒有未反應(yīng)多糖衍生物 的洗脫，因此分離時色譜的基線穩(wěn)定，還能提高分離品的純度。因此，可以 穩(wěn)定供應(yīng)高品質(zhì)的光學(xué)離析體。實(shí)施例 實(shí)施例1(i)直鏈淀粉鍵合硅膠的合成在氮?dú)夥諊?，?0。C下，在380ml DMSO中分散以末端具有氨基的 硅烷處理劑進(jìn)行了表面處理的硅膠100g和直鏈淀粉20g,添加曱硼烷吡啶(求，y t。!J絡(luò)合物和乙酸，攪拌20小時。過濾攪拌混合物，依次用 曱醇、DMSO、曱醇洗凈殘?jiān)螅婵崭稍铽@得直鏈淀粉4定合硅膠。(ii) 直鏈淀粉的羥基被3,5 - 二曱基苯基氨基曱酸酯化的旋光異構(gòu)體分離 劑的合成在氮?dú)夥諊?，分散直鏈淀粉鍵合硅膠100g、 4-二甲基氨基吡啶3g、 DMF 300ml、 3,5 - 二曱基苯基異氰酸酯45g,在75°C下攪拌24小時。在2.4L(相對于lg直鏈淀粉衍生物為24ml)75。C的DMF中洗凈所得直鏈 淀粉衍生物鍵合二氧化硅，從而獲得目標(biāo)旋光異構(gòu)體分離劑。(iii) 使用本發(fā)明的旋光異構(gòu)體分離劑，使用乙酸乙酯作為溶劑，進(jìn)行規(guī) 定的通液試驗(yàn)，求出洗脫物濃度(ppm)。結(jié)果，M!為416.08g， M2為1.2mg， M2/ Mj = 3ppm。實(shí)施例2將通過已知方法(JP-B 2669554的實(shí)施例1)制造的纖維素三(3,5 - 二曱 基苯基氨基曱酸酯)，物理吸附至以末端具有氨基的硅烷處理劑進(jìn)行了表面 處理的硅膠上，從而將其負(fù)載。將1S0g所得分離劑(聚合物負(fù)載率20重量％)混懸在3L水/乙腈混合 溶劑中，攪拌。通過特表平11-510193號公報(bào)的實(shí)施例12中記載的方法， 對懸濁液進(jìn)行UV照射220分鐘，從而交聯(lián)而鍵合后，過濾固體，用四氳呋 喃加熱回流洗凈4次，真空干燥，獲得目標(biāo)旋光異構(gòu)體分離劑。使用本發(fā)明的旋光異構(gòu)體分離劑，使用四氬呋喃作為溶劑，進(jìn)行規(guī)定的 通液試驗(yàn)，求出洗脫物濃度(ppm)。結(jié)果，Mi為416.18g, M2為2.7mg， M2/ = 6.5ppm。比專交例1與實(shí)施例1同樣獲得未洗凈的化學(xué)負(fù)載型旋光異構(gòu)體分離劑。使用通常 的洗凈方法將100g所得分離劑洗凈。即，在室溫下，通過玻璃過濾器過濾， 用2.4L甲醇洗凈。使用所得旋光異構(gòu)體分離劑，使用乙酸乙酯作為溶劑，進(jìn)行本發(fā)明的通 液試驗(yàn)，求出洗脫物濃度。結(jié)果，M！為416.15g， M2為85mg， M2/ M！ = 204ppm。比專交例2與實(shí)施例2同樣獲得未洗凈的化學(xué)負(fù)載型旋光異構(gòu)體分離劑。使用通常的洗凈方法將100g所得分離劑洗凈。即，在室溫下，通過玻璃過濾器過濾， 用2.4L曱醇洗凈。使用所得旋光異構(gòu)體分離劑，使用THF作為溶劑，進(jìn)行本發(fā)明的通液 試驗(yàn)，求出洗脫物濃度。結(jié)果，M！為416.23g， M2為203mg, M2/ M, = 488ppm。
權(quán)利要求
1、旋光異構(gòu)體分離劑，其包含以化學(xué)鍵合負(fù)載在載體顆粒上的多糖衍生物，所述旋光異構(gòu)體分離劑在下述條件下通過通液試驗(yàn)求出的洗脫物濃度(質(zhì)量基準(zhǔn))為20ppm以下(通液試驗(yàn))(1)通過淤漿法，在直徑1cm、長度25cm的柱內(nèi)填充旋光異構(gòu)體分離劑；(2)作為溶劑，使用溫度設(shè)定在40℃的能溶解多糖衍生物的有機(jī)溶劑，以8ml/min的流速開始通液；(3)在通液開始1小時后，開始采集通液的有機(jī)溶劑，采集1小時的量(480ml)，稱量質(zhì)量(M1)；(4)濃縮干燥采集液，稱量殘?jiān)|(zhì)量(M2)，由式M2/M1求出洗脫物濃度。
2、 如權(quán)利要求1所述的旋光異構(gòu)體分離劑，其中，多糖衍生物是纖維 素衍生物或直鏈淀粉衍生物，載體是硅膠。
3、 一種旋光異構(gòu)體分離劑的制造方法，其是權(quán)利要求1或2所述旋光 異構(gòu)體分離劑的制造方法，包括使用能溶解多糖衍生物的有才幾溶劑對未洗凈 的旋光異構(gòu)體分離劑一次洗凈或分多次洗凈的工序、和干燥的工序。
4、 如權(quán)利要求3所述的旋光異構(gòu)體分離劑的制造方法，其中，有機(jī)溶 劑的使用量相對于旋光異構(gòu)體分離劑中的多糖衍生物lg,總計(jì)為5~100ml 的量。
5、 如權(quán)利要求3或4所述的旋光異構(gòu)體分離劑的制造方法，其中，在 洗凈中使用的有機(jī)溶劑選自四氫呋喃、丙酮、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、 二曱基乙酰胺、二曱基曱酰胺。
6、 一種分離旋光異構(gòu)體的方法，包括將權(quán)利要求1或2所述的旋光異 構(gòu)體分離劑與旋光異構(gòu)體接觸。
7、 如權(quán)利要求6所述的方法，其中由高效液相色譜法進(jìn)行分離。
8、 權(quán)利要求1或2所述的旋光異構(gòu)體分離劑的旋光異構(gòu)體分離用途。
9、 如權(quán)利要求8所述的用途，其在高效液相色譜法中使用。
全文摘要
本發(fā)明提供包含以化學(xué)鍵合負(fù)載在載體顆粒上的多糖衍生物的旋光異構(gòu)體分離劑，其為在下述條件下通過通液試驗(yàn)求出的洗脫物濃度(質(zhì)量基準(zhǔn))為20ppm以下的旋光異構(gòu)體分離劑。(通液試驗(yàn))(1)通過淤漿法，在直徑1cm、長度25cm的柱內(nèi)填充旋光異構(gòu)體分離劑。(2)作為溶劑，使用溫度設(shè)定在40℃的能溶解多糖衍生物的有機(jī)溶劑，以8ml/min的流速開始通液。(3)在通液開始1小時后，開始采集通液的有機(jī)溶劑，采集1小時的量(480ml)，稱量質(zhì)量(M₁)。(4)濃縮干燥采集液，稱量殘?jiān)|(zhì)量(M₂)，由下式M₂/M₁求出洗脫物濃度。
文檔編號G01N30/88GK101151529SQ20068001015
公開日2008年3月26日 申請日期2006年3月30日 優(yōu)先權(quán)日2005年3月31日
發(fā)明者鏡原泰廣 申請人:大賽璐化學(xué)工業(yè)株式會社