專(zhuān)利名稱(chēng)：一種快速分析粉末大豆磷脂成分的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及產(chǎn)品分析檢測(cè)領(lǐng)域，尤其涉及對(duì)現(xiàn)有粉末大豆磷脂成分的分析方法進(jìn)行改進(jìn)和創(chuàng)新，達(dá)到快速、簡(jiǎn)便、低成本地分析粉末大豆磷脂成分的目的。
背景技術(shù)：
常規(guī)定磷法只能分析粉末大豆磷脂樣品中總磷脂含量，不能確定粉末大豆磷脂樣品中各磷脂成分(卵磷脂、腦磷脂、肌醇磷脂)及其含量。
國(guó)外通常采用高效液相色譜或核磁共振31P-NMR法對(duì)粉末大豆磷脂成分進(jìn)行分析，但這兩種儀器價(jià)格昂貴，普通實(shí)驗(yàn)室不具備。所以對(duì)粉末大豆磷脂成分進(jìn)行分析，一直是困擾生產(chǎn)廠家的難題。
普通實(shí)驗(yàn)室通常采用薄層層析法對(duì)粉末大豆磷脂成分進(jìn)行分析。其方法是采用20cm×20cm的薄層層析板，將粉末大豆磷脂用溶劑溶解，然后與各磷脂標(biāo)準(zhǔn)品溶液在同一直線處點(diǎn)樣、展開(kāi)(各點(diǎn)相距2～3cm)。用碘蒸汽顯色。將粉末大豆磷脂各磷脂成分的斑點(diǎn)與各標(biāo)準(zhǔn)品斑點(diǎn)進(jìn)行比較，從而確定粉末大豆磷脂的成分，進(jìn)而確定其含量。該方法需要用到純的標(biāo)準(zhǔn)品，而這些用于分析檢測(cè)的純標(biāo)準(zhǔn)品價(jià)格極貴，也很不穩(wěn)定，難以保存，幾乎是一次性使用。其次，20cm×20cm的薄層層析板用于分析需要耗費(fèi)很長(zhǎng)時(shí)間，而且展開(kāi)劑的用量太大，造成很大的浪費(fèi)和環(huán)境污染。

發(fā)明內(nèi)容
根據(jù)現(xiàn)有粉末大豆磷脂成分分析方法所存在的上述缺點(diǎn)，本發(fā)明所要解決的粉末大豆磷脂成分分析方案是要提供一種高效展開(kāi)劑，使粉末大豆磷脂各磷脂成分在很小的薄層層析板上得到快速分離。其次，采用顯色劑組合顯色法確定各磷脂成分，不用價(jià)格昂貴的標(biāo)準(zhǔn)品。
為此，本發(fā)明的技術(shù)方案是采用2.5cm×7.5cm的載玻片制成的硅膠板作為薄層層析板，點(diǎn)樣后用高效展開(kāi)劑展開(kāi)，采用幾種顯色劑進(jìn)行組合顯色。具體方法是稱(chēng)取適量粉末大豆磷脂，用溶劑溶解配制成一定濃度。在距薄板下端0.5～1cm處點(diǎn)樣。將已點(diǎn)樣的薄層層析板放入到裝有展開(kāi)劑的層析缸中，當(dāng)展開(kāi)劑上升到薄層層析板高度的4/5處，取出薄層層析板。將上述薄層層析板在室溫下放置幾分鐘，待溶劑揮發(fā)后，用顯色劑1噴在薄板上，卵磷脂斑點(diǎn)會(huì)顯示橙色，而其它磷脂斑點(diǎn)不顯色。用顯色劑2噴在薄板上，在烘箱中加熱幾分鐘，腦磷脂斑點(diǎn)會(huì)顯示粉紅色。對(duì)上述兩種顯色劑不顯色，而對(duì)碘蒸氣顯色的斑點(diǎn)即為肌醇磷脂。若要進(jìn)行定量分析，可采用定磷分析法計(jì)算各磷脂的含量。
采用本發(fā)明方法對(duì)粉末大豆磷脂成分進(jìn)行分析，所需時(shí)間僅為20cm×20cm大薄層層析板的1/5，展開(kāi)劑用量減少了80％。進(jìn)行定量分析時(shí)其結(jié)果與用20cm×20cm的大薄層層析板分析結(jié)果相同。
本發(fā)明所用展開(kāi)劑如下展開(kāi)劑為氯仿、甲醇、乙酸乙酯和水的混合物。其中氯仿含量為20～30％，甲醇含量為50～70％，乙酸乙酯含量為5～10％，水的含量為5～15％，(重量比)。調(diào)節(jié)pH至2～5。
本發(fā)明所用顯色劑如下1.顯色劑1將醋酸、硝酸鉍、碘化鉀溶于水中，其中醋酸含量控制在0.5～5％。硝酸鉍的含量控制在1～10％，碘化鉀的含量控制在3～10％(重量比)。
2.顯色劑2將茚三酮溶于醇中配成0.1～1％的溶液。在此溶液中加入濃度為5～15％醋酸水溶液。醋酸水溶液的加入量控制在3～15％(重量比)。
具體實(shí)施例方式
1粉末大豆磷脂成分的定性分析用毛細(xì)管蘸取粉末大豆磷脂的氯仿濃溶液，在距薄層層析板底部約0.5～1cm處點(diǎn)樣。將點(diǎn)樣后的薄層層析板放入裝有展開(kāi)劑的燒杯中。燒杯上部用塑料薄膜封口，使溶劑不能揮發(fā)出來(lái)。待展開(kāi)劑上升到薄層層析板高度的4/5處時(shí)，取出薄層層析板。將此薄層層析板在室溫下放置幾分鐘，待溶劑揮發(fā)后，用顯色劑1噴在薄板上，卵磷脂斑點(diǎn)會(huì)顯示橙色，而其它磷脂斑點(diǎn)不顯色。然后用顯色劑2噴在薄板上，在烘箱中加熱幾分鐘，腦磷脂斑點(diǎn)會(huì)顯示粉紅色。對(duì)上述兩種顯色劑不顯色，而對(duì)碘蒸汽顯棕色的斑點(diǎn)即為肌醇磷脂。
具體實(shí)施例方式
2粉末大豆磷脂成分的定量分析準(zhǔn)確稱(chēng)取30mg粉末大豆磷脂，用氯仿溶解，制成1％的粉末大豆磷脂氯仿溶液。用微量注射器吸取10μl此溶液，在距薄層層析板底部約0.5～1cm處點(diǎn)樣。將點(diǎn)樣后的薄層層析板放入裝有展開(kāi)劑的燒杯中，燒杯上部用塑料薄膜封口，使溶劑不能揮發(fā)出來(lái)。待展開(kāi)劑上升到薄層層析板高度的4/5處時(shí)，取出薄層層析板。將上述薄層層析板在室溫下放置幾分鐘，待溶劑揮發(fā)后，用顯色劑進(jìn)行組合顯色，采用定磷分析法計(jì)算各磷脂的含量。
權(quán)利要求
1.一種快速分析粉末大豆磷脂成分的方法。其特征是用一種高效展開(kāi)劑，使粉末大豆磷脂成分在2.5cm×7.5cm的載玻片制成的硅膠薄層層析板上得到快速完全展開(kāi)和分離，然后用顯色劑1和顯色劑2進(jìn)行組合顯色，以確定粉末大豆磷脂中含有何種磷脂成分。整個(gè)分析過(guò)程不需用標(biāo)準(zhǔn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速分析粉末大豆磷脂成分的方法，其特征是高效展開(kāi)劑是氯仿、甲醇、乙酸乙酯和水的混合物。其中氯仿含量為20～30％，甲醇含量為50～70％，乙酸乙酯含量為5～10％，水的含量為5～15％，(重量比)。調(diào)節(jié)pH至2～5。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速分析粉末大豆磷脂成分的方法，其特征是顯色劑1是醋酸、硝酸鉍、碘化鉀混合水溶液，其中醋酸含量為0.5～5％，硝酸鉍的含量為1～10％，碘化鉀的含量為3～10％(重量比)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速分析粉末大豆磷脂成分的方法，其特征是顯色劑2是0.1～1％的茚三酮醇溶液中加入濃度為5～15％醋酸水溶液。醋酸水溶液的加入量為3～15％(重量比)。
全文摘要
一種快速分析粉末大豆磷脂成分的方法。是采用2.5cm×7.5cm的載玻片制成的硅膠板作為薄層層析板，用一種高效展開(kāi)劑，使粉末大豆磷脂成分在2.5cm×7.5cm的載玻片薄層層析板上得到快速展開(kāi)和分離。然后用幾種顯色劑進(jìn)行組合顯色，不需要用價(jià)格昂貴的標(biāo)準(zhǔn)品，即可確定粉末大豆磷脂成分及含量。所需時(shí)間僅為20cm×20cm薄層層析板的1/5，展開(kāi)劑用量?jī)H為5～10ml。
文檔編號(hào)G01N30/95GK1611937SQ200310111969
公開(kāi)日2005年5月4日 申請(qǐng)日期2003年10月31日 優(yōu)先權(quán)日2003年10月31日
發(fā)明者李衛(wèi) 申請(qǐng)人:李衛(wèi)