專利名稱：一種凝膠電泳譜帶快速染色方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物化學(xué)實驗中蛋白質(zhì)染色技術(shù)，特別是蛋白質(zhì)凝膠電泳測定過程中的蛋白質(zhì)譜帶快速染色技術(shù)。
背景技術(shù)：
在生物化學(xué)實驗中，對蛋白質(zhì)、核酸、多糖等的分析通常采用凝膠電泳技術(shù)手段將分析對象進行分離，電泳分離后得到載有蛋白質(zhì)譜帶的凝膠膠板經(jīng)染色后方可進行鑒定。蛋白質(zhì)染色方法有多種，目前通常采用的有考瑪斯亮蘭染色和銀染色等，但無論哪種染色方法，其染色時間都需要數(shù)小時，甚至一天，時間較長。盡管采用了加溫、震蕩等手段，但仍難于達到蛋白質(zhì)快速染色的目的。
為解決上述傳統(tǒng)蛋白質(zhì)染色過程費時的問題，本發(fā)明提出一種快速蛋白質(zhì)染色方法，即在原有蛋白質(zhì)染色技術(shù)的基礎(chǔ)上，用特殊裝置按照一定程序?qū)θ旧珮悠愤M行一定劑量的微波輻照，從而使染色速度大大提高，時間縮短至數(shù)分鐘。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提出的快速蛋白質(zhì)染色方法的基本原理是，電泳后得到的載有蛋白質(zhì)的凝膠膠片在染色過程中，即在用染料和生物大分子結(jié)合形成有色復(fù)合物時，對其加以特定的微波輻照，使該染色環(huán)境中的極性分子在電磁波的作用下高速振動，并伴隨升溫。在極性分子振動和適宜溫度雙重作用下，使染料和凝膠膠片上被分離的微量蛋白質(zhì)分子(或其殘片)相互作用迅速結(jié)合形成有色復(fù)合物。
本發(fā)明提出的快速染色方法過程描述如下1.將分析樣品經(jīng)一系列處理及電泳分離后得到載有蛋白質(zhì)譜帶的凝膠膠片備用。
2.配制考瑪斯亮蘭染色溶液。
3.將上述膠片放入盛有染色液的非金屬器皿中，一并置于微波輻照器中，在一定強度下照射數(shù)分鐘，溫度保持在25℃--60℃。
4.將已染色的凝膠膠片轉(zhuǎn)移至脫色液中，進行背景脫色。
上述染色方法，染色過程僅需2-10分鐘，檢測靈敏度為0.1μg。


附圖為本發(fā)明原理示意圖，圖中1——微波反射腔體2——開孔旋轉(zhuǎn)板3——電機4——微波波導(dǎo)5——磁控管6——非金屬染色槽7——染色液8——電泳凝膠板9——托網(wǎng)10——循環(huán)泵11——冷卻器12——染色液循環(huán)管具體實施方案結(jié)合

本發(fā)明的具體實施實例1.非金屬染色槽(6)置于微波處理裝置的微波反射腔體中，染色液循環(huán)管(12)連接在非金屬染色槽(6)的進、出口上。
2.將配制好的蛋白質(zhì)染色液注入非金屬染色槽(6)，液面略高于出口。
3.將電泳完成后載有蛋白質(zhì)譜帶的凝膠膠板(8)水平置于非金屬染色槽(6)內(nèi)的托網(wǎng)(9)上。
4.調(diào)節(jié)微波染色裝置的功率到適當強度，開機幅照2～10分鐘，同時染色液循環(huán)系統(tǒng)的循環(huán)泵(10)和冷卻器(11)使非金屬染色槽(6)內(nèi)的染色液(7)循環(huán)流動并保持溫度在25～60℃之間。
5.將染色后的電泳凝膠板取出，放入清水中進行背景脫色即完成染色。
凝膠電泳過程中，蛋白質(zhì)譜帶染色是實現(xiàn)快速測定的關(guān)鍵環(huán)節(jié)和瓶頸。本發(fā)明提出的快速蛋白質(zhì)染色方法與傳統(tǒng)技術(shù)相比，使用特定的微波設(shè)備施以輻照，同時起到加速分子振動和升溫的作用，染色時間大大縮短，為實現(xiàn)蛋白質(zhì)快速測定提供強有力的支持。
權(quán)利要求
1.一種凝膠電泳譜帶快速染色方法，其特征是，將經(jīng)電泳分離后得到的載有蛋白質(zhì)譜帶的凝膠膠板置于盛有染色液的非金屬槽內(nèi)，施以微波輻照2-10分鐘。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，微波輻照的功率在100瓦-1200瓦范圍內(nèi)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，非金屬槽連接循環(huán)冷卻系統(tǒng)，以使染色液處于流動狀態(tài)，并使溫度保持在25-60℃之間。
全文摘要
一種凝膠電泳譜帶快速染色方法，通過如下步驟實現(xiàn)將電泳后得到的凝膠膠板置于盛有染色液的非金屬槽內(nèi)，施以微波輻照2－10分鐘，同時使染色液保持流動，溫度控制在25－60℃之間。本發(fā)明在染色過程施以微波輻照，同時起到分子振動和升溫作用，使染色時間大大縮短。
文檔編號G01N33/558GK1609608SQ20031011011
公開日2005年4月27日 申請日期2003年10月20日 優(yōu)先權(quán)日2003年10月20日
發(fā)明者崔學(xué)晨, 張利群, 徐獻軍, 孫憲光, 崔實, 魏杰, 崔立晨 申請人:崔學(xué)晨, 張利群, 徐獻軍