專利名稱：一種促甲狀腺素診斷試紙條及其應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種促甲狀腺素檢測用品，更特別的，本發(fā)明涉及一種促甲狀腺素診斷試紙條。
背景技術：
甲狀腺是人體內最大的內分泌腺體，主要功能是合成與釋放甲狀腺激素(甲狀腺素(T4)和三碘甲狀腺原氨酸(T3))，對全身各器官、系統(tǒng)的功能均產生影響。甲狀腺及組織發(fā)生病變時，可引起甲亢、甲減、甲狀腺腫瘤(良性和惡性)、碘缺乏病等甲狀腺疾病。
甲減和甲亢均是較常見的內分泌疾病，近年來患病率不斷提高。二十世紀九十年代末北京城區(qū)和近郊兩個縣區(qū)整群抽樣調查，發(fā)現(xiàn)包括亞臨床甲減在內的甲減患病率為5.85％，而同時調查的甲亢患病率為5.90％，兩者幾乎相等。甲減起病隱襲，進展緩慢，多見于中年后婦女，許多癥狀如怕冷、體重增加、皮膚干粗、記憶力減退、聲音嘶啞、頭發(fā)干燥等均與衰老難以區(qū)分，疾病誤診和持續(xù)長久未能診治者相當多見，甚至有些已有明顯粘液性水腫和漿膜腔積液的病人誤診的情況也屢屢發(fā)生。而亞臨床甲減階段，垂體代償性分泌促甲狀腺素(TSH)以維持血中甲狀腺激素水平，無臨床表現(xiàn)，只在體檢時發(fā)現(xiàn)TSH增高。因此，必須提高對甲減診治的警惕，有必要定期對高危人群進行普查。
自身免疫性甲狀腺炎主要發(fā)生在30～50歲女性，男女之比為1∶4，是中年婦女也是男性及兒童甲減的重要原因。近年來發(fā)病有逐漸增多的趨勢，上海地區(qū)抽樣5237人調查，發(fā)生率為5.2％。本病進展更為緩慢，癥狀缺乏特異性，發(fā)現(xiàn)時往往或為甲狀腺腫大或已成為永久性甲減。如果能對本病提高警惕進行隨診，對早期發(fā)現(xiàn)和預防甲減十分必要。
甲狀腺腫大是臨床常見問題，美國Framinghan報道，即使在非缺碘地區(qū)甲狀腺腫在女性中也高達6.4％，男性為1.6％，每年新發(fā)生率達1.4％。英國東北部調查甲狀腺腫占人口6.9％，而包括視診陰性但可觸及的甲狀腺腫在內達人口的8.6％，女性是男性的4倍。應用超聲波檢查，50歲以后的婦女50％可發(fā)現(xiàn)甲狀腺腫及結節(jié)。其病因復雜，碘缺乏是有意義的因素，甲狀腺慢性腫大最常見的原因仍是自身免疫性甲狀腺炎。自身免疫性甲狀腺炎進行性持續(xù)進展發(fā)生甲減，自發(fā)緩解仍屬個別，但自身轉歸相差較大，明顯甲減發(fā)生率每年為5％～25％。
從甲狀腺疾病診治的監(jiān)測、甲狀腺激素替代治療的監(jiān)測及科學補碘等角度出發(fā)，均迫切要求臨床上除了相關激素高特異性和高敏感性檢測法外，還應有簡便、快速，適于篩選和自我監(jiān)測的測定法，以彌補現(xiàn)有常規(guī)測定法的不足。這也是本發(fā)明所要解決的技術問題。
實驗室檢查在甲狀腺疾病的診斷和治療中具有十分重要的作用和地位，有時甚至起確定性作用，甲狀腺功能直接和間接評估是正確和完整診斷的重要依據。
TSH是反映甲狀腺功能十分敏感的特異性指標，游離甲狀腺激素濃度的微小變化就會帶來TSH濃度向反方向的顯著調節(jié)，如輕度甲功異常，甲狀腺激素水平尚在統(tǒng)計學正常范圍之內時，TSH即已出現(xiàn)改變。因此，TSH測定是查清甲狀腺功能的初篩試驗，特別適合于早期檢測和排除下丘腦-垂體-甲狀腺反饋調節(jié)環(huán)路的功能紊亂。它可作為一個初始的基本檢查項目來確定有無甲狀腺功能異常并指導以后的檢查。
TSH是一種調節(jié)甲狀腺功能的垂體前葉激素，分子量約為28000道爾頓，由兩個非共價鍵相連的α、β亞單位組成，分別含有89和112個氨基酸。β亞單位具有特異性，決定TSH的免疫學和生物學特性，可能還限制著TSH的合成速度。而α亞單位氨基酸序列與其他糖蛋白激素如卵泡刺激素(FSH)、黃體生成素(LH)和絨毛膜促性腺激素(HCG)的α亞單位幾乎是相同的。
近年，為提高測定的敏感性和特異性，TSH測定法不斷得到改進和完善。TSH單克隆抗體的研制和雙抗體夾心法的采用，使TSH測定的特異性和敏感性明顯提高。不僅能區(qū)分正常和異常(降低和升高)，而且還可以反映降低的程度。目前臨床上常用的TSH測定法有放射免疫法、免疫放射法、酶聯(lián)免疫吸附測定法和免疫化學發(fā)光測定法等，可以將升高、正常和降低的TSH都區(qū)分開來，不僅能診斷甲減還能診斷甲亢。但現(xiàn)有的TSH測定法也存在著某些不足之處，如試劑保存期短，有的方法含有放射性同位素等。尤其是操作需時長，要求標本量相對集中，測定需數小時至十幾小時，不適合急診檢驗及單份測定，也不適合篩查工作。

發(fā)明內容
本發(fā)明所要解決的技術問題在于提供一種促甲狀腺素診斷試紙條，包含1個測試區(qū)域、1個正常高限質控區(qū)域、1個正常低限質控區(qū)域，以及還包含1個免疫金復合物干片區(qū)域，所述的免疫金復合物干片區(qū)域可俘獲待測樣本中的促甲狀腺素(TSH)。
進一步的，本發(fā)明的試紙條的兩側分別設置有吸水材料，具體的，測試區(qū)域包被有特異性抗TSHβ抗體，質控區(qū)域包被有抗抗體，免疫金復合物干片內含特異性抗TSHβ抗體，所述的抗TSHβ抗體以硝酸纖維素膜為載體。根據具體免疫金復合物干片中的特異性抗體的種族來源的不同，質控區(qū)域的抗抗體可以是抗羊的抗體，也可以是抗其他動物(如兔、雞等)的抗體。
本發(fā)明所要解決的技術問題還在于提供促甲狀腺素診斷試紙條在測試甲狀腺功能異常(甲減和甲亢等)上的應用。
本發(fā)明測定TSH簡便、快速、單份測定可立等結果，除試劑外無需任何儀器，且試劑穩(wěn)定。本發(fā)明的促甲狀腺素診斷試紙條測定快速、簡便，應用范圍廣泛，是研究和判斷下丘腦-垂體-甲狀腺軸功能的常規(guī)檢查方法?？捎糜诤Y選甲減及甲亢等原發(fā)性甲狀腺功能異常、甲狀腺激素替代或抑制治療患者療效監(jiān)測、甲減及甲亢患者診治、補碘人群的甲狀腺功能監(jiān)測及非甲狀腺疾病患者甲狀腺功能異常的連續(xù)監(jiān)測等。


圖1顯示了TSH診斷試紙條的區(qū)域組成。其中，A和B分別為試紙條上端和下端，分別粘附吸水材料；D處粘貼免疫金復合物干片，內含特異性抗TSHβ抗體；T和C處為硝酸纖維素膜條上的反應區(qū)，T為測試區(qū)，包被有特異性抗TSHβ抗體；C1和C2為質控區(qū)，包被有抗抗體。
圖2顯示了不同甲狀腺功能異常患者的測試結果。其中，a為甲減患者的測試結果；b為甲狀腺功能正常的測試結果；c為甲亢患者的測試結果；d為無效的測試，表明測試失敗或試紙條損壞。
具體實施例方式
下面結合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明本發(fā)明的TSH診斷試紙條的區(qū)域組成見圖1，A和B分別為試紙條上端和下端，粘附吸水材料；D處粘貼免疫金復合物干片，內含特異性抗TSHβ抗體；T和C處為硝酸纖維素膜條上的反應區(qū)，T為測試區(qū)，包被有特異性抗TSHβ抗體，C1和C2為質控區(qū)，包被有抗抗體。
本發(fā)明采用金免疫雙抗體夾心技術(兩個抗TSHβ的特異性抗體均為美國Santa Cruz Biotechnology.Inc產品，工作濃度約為0.398μg/cm2)，以硝酸纖維素膜(Sandeliss.Ldt產品)為載體，利用微孔膜的毛細管作用，液體由試紙條一端(B)慢慢向另一端(A)滲移。試驗所用試劑全部為干試劑，多個試劑被組合在塑料板條上(如圖1)，成為單一試劑條。試劑條中包含三個反應區(qū)域，測試區(qū)(T)和質控區(qū)C1(正常高限)及C2(正常低限)。若待測標本中有待測特異抗原，則試紙條將迅速地逐步發(fā)生反應，5分鐘內在膜上顯出紅色反應線條(T)；反之，陰性標本則無反應線條，而僅顯示紅色質控線條(C1和C2)。
圖2是不同甲狀腺功能標本測試結果的示意圖。甲減(圖中為a)出現(xiàn)三條紅色反應線，當測試區(qū)線條比質控區(qū)C1線條顏色濃或相當時，表明TSH水平升高；正常(圖中為b)出現(xiàn)三條紅色反應線，測試區(qū)線條顏色深于質控區(qū)C2線條顏色但淺于質控區(qū)C1線條顏色，表明TSH水平在正常范圍內；甲亢(圖中為c)出現(xiàn)兩條或三條紅色反應線，測試區(qū)線條顏色比質控區(qū)C2線條顏色淡或只有質控區(qū)有線條，表明TSH水平低于正常；無效(圖中為d)質控區(qū)無線條或僅出現(xiàn)一條，表明測試失敗或試紙條損壞。
本發(fā)明在試劑形式和操作步驟上較現(xiàn)有的幾種常規(guī)測定法都更為簡化，只用一個試劑，只有一步操作，結果立等可取。盡管本試驗不能準確定量，但有利于甲狀腺疾病的早期篩查和監(jiān)測療效，有利于臨床對危重患者及可疑病人作出快速判定，為患者搶救及篩選可疑病人提供寶貴時間。
權利要求
1.一種促甲狀腺素診斷試紙條，其特征在于，包含1個測試區(qū)域、1個正常高限質控區(qū)域、1個正常低限質控區(qū)域，以及1個免疫金復合物干片區(qū)域。
2.根據權利要求1所述的促甲狀腺素診斷試紙條，其特征在于，該試紙條的兩側分別設置有吸水材料。
3.根據權利要求1或2所述的促甲狀腺素診斷試紙條，其特征在于，測試區(qū)域包被有特異性抗TSHβ抗體，質控區(qū)域包被有抗抗體，免疫金復合物干片內含特異性抗TSHβ抗體。
4.根據權利要求3所述的促甲狀腺素診斷試紙條，其特征在于，所述的抗TSHβ抗體以硝酸纖維素膜為載體。
5.促甲狀腺素診斷試紙條在測試甲狀腺功能異常上的應用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種促甲狀腺素診斷試紙條，包含1個測試區(qū)域、1個正常高限質控區(qū)域、1個正常低限質控區(qū)域，以及1個免疫金復合物干片區(qū)域。本發(fā)明還公開了所述的促甲狀腺素診斷試紙條在測試甲狀腺疾病上的應用。本發(fā)明進行測定除試劑外無需任何儀器，且試劑穩(wěn)定。本發(fā)明的促甲狀腺素診斷試紙條測定快速、簡便，應用范圍廣泛，是研究和判斷下丘腦－垂體－甲狀腺軸功能的常規(guī)檢查方法。本發(fā)明還可用于篩選甲狀腺功能減退(甲減)和甲狀腺功能亢進(甲亢)等原發(fā)性甲狀腺功能異常、甲狀腺激素替代或抑制治療療效監(jiān)測、甲減及甲亢患者診治、補碘人群的甲狀腺功能監(jiān)測及非甲狀腺疾病患者甲狀腺功能異常的連續(xù)監(jiān)測等。
文檔編號G01N33/78GK1566955SQ03129419
公開日2005年1月19日 申請日期2003年6月20日 優(yōu)先權日2003年6月20日
發(fā)明者黃勤, 步世忠, 郭志勇, 閔紅波 申請人:黃勤, 步世忠