專利名稱:色譜定量測(cè)定裝置及其制備方法
技術(shù)區(qū)域本發(fā)明涉及利用抗原抗體反應(yīng)定量測(cè)定被測(cè)物質(zhì)的色譜定量測(cè)定裝置及其制備方法,特別是具有不透液性片材的色譜定量測(cè)定裝置及其制備方法。
免疫色譜測(cè)定原理是利用抗原抗體反應(yīng)的特異性,鑒定抗原或抗體的測(cè)定方法。其操作是將液體試樣添加到免疫色譜試件上,由液體試樣溶解的標(biāo)記試劑向浸透方向展開,與液體試樣中的分析對(duì)象物能夠特異性結(jié)合的物質(zhì)被固定,在測(cè)定區(qū)域發(fā)生顯色。另外,免疫色譜的分析結(jié)果是通過顯色反應(yīng)進(jìn)行判斷,因此是通過目視檢測(cè)方式進(jìn)行記錄。也就是說,由于檢測(cè)結(jié)果的判斷非常容易,具有用途范圍廣的特色。
這種采用免疫色譜法的測(cè)定可以用于各種分析對(duì)象物的檢查。但是,對(duì)于分析對(duì)象物不僅需要定性檢測(cè),而且需要定量解答時(shí),有時(shí)雖然也可以采用這種測(cè)定方法,但只能得出半定量的結(jié)果。因此,期望提供一種能得到定量分析結(jié)果的手段。
為了改善這一問題,在特開平8-240591號(hào)報(bào)告中公開了免疫色譜試件。該免疫色譜試件的測(cè)定方法是添加試樣進(jìn)行反應(yīng)后,用檢測(cè)儀器測(cè)定顯色部分的吸收或反射等信號(hào),確定試件上檢測(cè)出的顯色程度。此外,特開平8-334511號(hào)公報(bào)公開的免疫色譜試件的測(cè)定方法是使用圖象傳感器給顯色的免疫色譜試件攝像,對(duì)圖象轉(zhuǎn)換出的色調(diào)圖象進(jìn)行解析處理,求出顯色程度進(jìn)行定量測(cè)定。
但是,使用免疫色譜試件進(jìn)行定量測(cè)定時(shí),如特開平8-240591號(hào)或特開平8-334511號(hào)列舉的實(shí)施例那樣,由于其顯色反應(yīng)伴有的顯色程度的強(qiáng)弱或濃淡,采用分別相應(yīng)的檢測(cè)儀器進(jìn)行定量測(cè)定。以前,一般的免疫色譜試件由于沒有機(jī)械控制,且不能人為控制,液體試樣的浸透速度會(huì)左右試件的浸透性。例如,由于液體試樣從試件的側(cè)面蒸發(fā),測(cè)定區(qū)域流出的分析對(duì)象物的量不均一。另外,每次測(cè)定使用的各個(gè)免疫色譜試件有時(shí)添加的液體試樣量和標(biāo)記試劑量并不是恒定的。因此,存在這些原因會(huì)導(dǎo)致一定時(shí)間后的定量測(cè)定值差異大的問題。
而且,免疫色譜試件是添加液體試樣后,經(jīng)過一定時(shí)間后進(jìn)行測(cè)定的,這種情況下有時(shí)浸透的標(biāo)記試劑一起溶出,作為背景殘留在反應(yīng)層上。如果該背景的值加在顯色程度上,則檢測(cè)儀器的測(cè)定包含了這種誤差。因此,免疫色譜試件難以在短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行定量測(cè)定,另外流到反應(yīng)層上的標(biāo)記試劑殘留量并不是恒定的,每次測(cè)定或者每個(gè)使用的試件不同,導(dǎo)致這時(shí)顯色程度的讀數(shù)誤差較大。
由于以上問題,采用免疫色譜法定量測(cè)定的性能根據(jù)試件的規(guī)格和添加的液體試樣量的差異,或背景帶來的誤差,只不過是半定量。因此,為了更準(zhǔn)確地進(jìn)行測(cè)定,強(qiáng)烈希望提高試件的性能。
另外,使用以前的免疫色譜試件,測(cè)定全血或細(xì)菌溶液等含有細(xì)胞成分的液體試樣時(shí),液體試樣的粘性、細(xì)胞成分的存在會(huì)使反應(yīng)層載體出現(xiàn)堵塞。結(jié)果導(dǎo)致測(cè)定時(shí)間長(zhǎng),其間出現(xiàn)液體試樣的干燥等,造成反應(yīng)的精度或定量性能差。因此,強(qiáng)烈需要即使在全血或細(xì)菌溶液等的測(cè)定中,也能簡(jiǎn)便而容易地測(cè)定的免疫色譜定量測(cè)定裝置。
本發(fā)明的目的在于解決上述問題,提供一種色譜定量測(cè)定裝置及其制備方法,測(cè)定精度不受添加的液體試樣的性質(zhì)影響,能夠準(zhǔn)確讀取作為分析對(duì)象物的液體試樣與標(biāo)記試劑反應(yīng)結(jié)果的顯色程度,而且不受背景帶來的標(biāo)記試劑殘留量的影響。
這種結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置可以防止水分的蒸發(fā),使液體試樣的浸透方向和浸透狀況均一,另外一定時(shí)間內(nèi)流過的液體試樣與標(biāo)記試劑以均一的濃度流出。
本發(fā)明(權(quán)利要求2)涉及的色譜定量測(cè)定裝置具有不能潤(rùn)濕的反應(yīng)層載體支持體、該支持體上部形成的1至任意數(shù)量的部件構(gòu)成的可以潤(rùn)濕的層,該可以潤(rùn)濕的層由添加液體試樣的部分、保持有一定量可以移動(dòng)的預(yù)先制備的分析對(duì)象物與標(biāo)記試劑形成的結(jié)合體試劑的部分、能夠與具有與液體試樣中的分析對(duì)象物特異性結(jié)合的物質(zhì)的上述結(jié)合體試劑與上述液體試樣中的分析對(duì)象物進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合反應(yīng)的部分以及吸收液體試樣的部分構(gòu)成,其特征在于在該色譜定量測(cè)定裝置中,在除添加液體試樣的部分之外的表面和側(cè)面上以密合狀態(tài)設(shè)置不透液性片材。
這種結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置可以防止水分的蒸發(fā),使液體試樣的浸透方向和浸透狀況均一,另外一定時(shí)間內(nèi)流過的液體試樣與標(biāo)記試劑以均一的濃度流出。
本發(fā)明(權(quán)利要求3)涉及的色譜定量測(cè)定裝置具有不能潤(rùn)濕的反應(yīng)層載體支持體、該支持體上部形成的1至任意數(shù)量的部件構(gòu)成的可以潤(rùn)濕的層,該可以潤(rùn)濕的層由添加了保持有破壞液體試樣中細(xì)胞成分的物質(zhì)的液體試樣的部分、保持有可以移動(dòng)的標(biāo)記試劑的部分、能夠與具有與液體試樣中的分析對(duì)象物特異性結(jié)合的物質(zhì)的標(biāo)記試劑進(jìn)行結(jié)合反應(yīng)的部分以及吸收液體試樣的部分構(gòu)成,其特征在于在該色譜定量測(cè)定裝置中,在除添加液體試樣的部分之外的表面和側(cè)面上以密合的狀態(tài)設(shè)置不透液性片材。
這種結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置可以防止水分的蒸發(fā),通過破壞液體試樣中的細(xì)胞成分,使液體試樣的浸透狀況均一,而且可以控制一定時(shí)間內(nèi)流過的試樣量與標(biāo)記試劑量。
本發(fā)明(權(quán)利要求4)涉及的色譜定量測(cè)定裝置具有不能潤(rùn)濕的反應(yīng)層載體支持體、該支持體上部形成的1至任意數(shù)量的部件構(gòu)成的可以潤(rùn)濕的層,該可以潤(rùn)濕的層由添加了保持有破壞液體試樣中細(xì)胞成分的物質(zhì)的液體試樣的部分、保持有一定量可以移動(dòng)的預(yù)先制備的分析對(duì)象物與標(biāo)記試劑形成的結(jié)合體試劑的部分、能夠與具有與液體試樣中的分析對(duì)象物特異性結(jié)合的物質(zhì)的上述結(jié)合體試劑和上述液體試樣中的分析對(duì)象物進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合反應(yīng)的部分以及吸收液體試樣的部分構(gòu)成,其特征在于在該色譜定量測(cè)定裝置中,在除添加液體試樣的部分之外的表面和側(cè)面上以密合的狀態(tài)設(shè)置不透液性片材。
這種結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置可以防止水分的蒸發(fā),使液體試樣的浸透狀況均一,而且可以控制一定時(shí)間內(nèi)流過的試樣量與結(jié)合體試劑量。
本發(fā)明(權(quán)利要求5)是權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于除添加液體試樣的部分之外的表面,或者表面至反面均具備不透液性片材。
這種結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置可以防止水分的蒸發(fā),使液體試樣的浸透狀況均一。而且,標(biāo)記試劑也能夠以均一的濃度流出,可以將顯色部分加上的背景值的影響抑制到很低。
本發(fā)明(權(quán)利要求6)是權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于結(jié)構(gòu)中除去了上述反應(yīng)層載體支持體,除添加液體試樣的部分之外的周圍具備上述不透液性片材。
這種結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置可以減少材料的數(shù)量。而且,可以使液體試樣的浸透狀況均一,控制一定時(shí)間內(nèi)流過的試樣量和標(biāo)記試劑量。另外,液體試樣不會(huì)從間隙漏出,同時(shí)液體試樣不會(huì)由試樣添加部分以外的外部侵入。
本發(fā)明(權(quán)利要求7)是權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于相對(duì)于添加的液體試樣浸透的方向,上述不透液性片材的垂直側(cè)面開放。
這種結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置可以將液體浸透時(shí)空氣的排放僅限定于浸透方向,使液體試樣與標(biāo)記試劑以均一的濃度流出。
本發(fā)明(權(quán)利要求8)是權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于對(duì)于添加的液體試樣浸透的方向,上述不透液性片材的端部在上述色譜定量測(cè)定裝置端部的任意場(chǎng)所開放。
這種結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置可以將液體浸透時(shí)空氣的排放僅限定于浸透方向,使液體試樣與標(biāo)記試劑以均一的濃度流出。
本發(fā)明(權(quán)利要求9)是權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于上述不透液性片材通過任意粘著性物質(zhì)構(gòu)成的粘合劑附著。
這種結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置可以防止水分的蒸發(fā),使液體試樣的浸透方向和浸透狀況均一,另外,不僅使一定時(shí)間內(nèi)流過的液體試樣和標(biāo)記試劑以均一的濃度流出,而且不透液性片材不會(huì)由于液體試樣的浸透剝離。
本發(fā)明(權(quán)利要求10)是權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于上述不透液性片材通過任意粘著后固化的粘合劑附著。
這種結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置可以防止水分的蒸發(fā),使液體試樣的浸透方向和浸透狀況均一,另外,不僅能使一定時(shí)間內(nèi)流過的液體試樣和標(biāo)記試劑以均一的濃度流出,而且不透液性片材不會(huì)由于液體試樣的浸透而剝離。此外,由于粘合劑在粘著后固化,檢測(cè)器切割時(shí)不會(huì)有糊狀材料附著在切割器具上,不僅容易大量生產(chǎn),而且糊狀材料不會(huì)浸透反應(yīng)層,可以防止反應(yīng)層載體或特異性蛋白質(zhì)的變性,從而長(zhǎng)時(shí)間保持色譜定量測(cè)定裝置的性能。
本發(fā)明(權(quán)利要求11)是權(quán)利要求9所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于用于不透液性片材的粘合劑由熱塑性樹脂構(gòu)成。
這種結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置可以防止水分的蒸發(fā),使液體試樣的浸透方向和浸透狀況均一,另外,不僅使一定時(shí)間內(nèi)流過的液體試樣和標(biāo)記試劑以均一的濃度流出,而且不透液性片材不會(huì)由于液體試樣的浸透剝離。此外,由于粘合劑在粘著后通過冷卻固化,檢測(cè)器切割時(shí)不會(huì)有糊狀材料附著在切割器具上,不僅容易大量生產(chǎn),而且糊狀材料不會(huì)浸透反應(yīng)層,可以防止反應(yīng)層載體或特異性蛋白質(zhì)的變性,從而長(zhǎng)時(shí)間保持色譜定量測(cè)定裝置的性能。
另外,這里所說的熱塑性樹脂是指具有下述性質(zhì)的樹脂,即常溫時(shí)為固體,通過加熱可以使之軟化進(jìn)行加工,之后冷卻即可固化,也就是說通過反復(fù)冷卻和加熱,可逆地保持塑性的性質(zhì)。這種熱塑性樹脂有聚乙烯、聚丙烯、聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚偏二氯乙烯、氟樹脂、聚甲基丙烯酸甲酯、聚酰胺、聚酯、聚碳酸酯、聚苯醚、聚氨酯、聚縮醛等。
本發(fā)明(權(quán)利要求12)是權(quán)利要求9所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于用于不透液性片材的粘合劑由熱固性樹脂構(gòu)成。
這種結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置可以防止水分的蒸發(fā),使液體試樣的浸透方向和浸透狀況均一,另外,不僅使一定時(shí)間內(nèi)流過的液體試樣和標(biāo)記試劑以均一的濃度流出,而且不透液性片材不會(huì)由于液體試樣的浸透而剝離。此外,由于粘合劑在粘著后固化,檢測(cè)器切割時(shí)不會(huì)有糊狀材料附著在切割器具上,不僅容易大量生產(chǎn),而且糊狀材料不會(huì)浸透反應(yīng)層,可以防止反應(yīng)層載體或特異性蛋白質(zhì)的變性,從而長(zhǎng)時(shí)間保持色譜定量測(cè)定裝置的性能。
另外,這里所說的熱固化樹脂是指具有下述性質(zhì)的樹脂,即通過加熱可以使之軟化進(jìn)行加工,但是繼續(xù)加熱則固化,因而不能再次軟化,這種熱固性樹脂有尿素樹脂、三聚氰胺樹脂、酚醛樹脂等。
本發(fā)明(權(quán)利要求13)是權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于上述不透液性片材由透明或半透明的任意不透液性材料構(gòu)成。
這種結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置可以防止水分的蒸發(fā),使液體試樣的浸透方向和浸透狀況均一,另外,不僅使一定時(shí)間內(nèi)流過的液體試樣和標(biāo)記試劑以均一的濃度流出,而且從外部測(cè)定檢測(cè)區(qū)的結(jié)果時(shí),由于可以通過目視進(jìn)行檢測(cè),容易測(cè)量。
本發(fā)明(權(quán)利要求14)是權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于上述不透液性片材由半透明或不透明的任意不透液性材料構(gòu)成,在檢測(cè)區(qū)具備透明窗。
這種結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置可以防止水分的蒸發(fā),使液體試樣的浸透方向和浸透狀況均一,另外,不僅使一定時(shí)間內(nèi)流過的液體試樣和標(biāo)記試劑以均一的濃度流出,而且從外部測(cè)定檢測(cè)區(qū)的結(jié)果時(shí),由于可以通過目視進(jìn)行檢測(cè),容易測(cè)量。
本發(fā)明(權(quán)利要求15)是權(quán)利要求3或4所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于上述添加液體試樣的部分所保持的破壞細(xì)胞成分的物質(zhì)為表面活性劑。
這種結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置可以防止水分的蒸發(fā),使液體試樣的浸透方向和浸透狀況均一,另外,不僅使一定時(shí)間內(nèi)流過的液體試樣和標(biāo)記試劑以均一的濃度流出,而且可以避免全血或細(xì)菌溶液等液體試樣發(fā)生的細(xì)胞成分堵塞,使浸透狀況均一,可以在短時(shí)間內(nèi)更準(zhǔn)確地定量測(cè)定。
本發(fā)明(權(quán)利要求16)是權(quán)利要求3或4所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于上述添加液體試樣的部分保持的破壞細(xì)胞成分的物質(zhì)由氯化鈉或氯化鉀等氯化物構(gòu)成。
這種結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置可以防止水分的蒸發(fā),使液體試樣的浸透方向和浸透狀況均一,另外,不僅使一定時(shí)間內(nèi)流過的液體試樣和標(biāo)記試劑以均一的濃度流出,而且可以避免全血或細(xì)菌溶液等液體試樣發(fā)生的細(xì)胞成分堵塞,使浸透狀況均一,不抑制結(jié)合反應(yīng),能夠在短時(shí)間內(nèi)更準(zhǔn)確地定量測(cè)定。
本發(fā)明(權(quán)利要求17)是權(quán)利要求3或4所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于上述添加液體試樣的部分保持的破壞細(xì)胞成分的物質(zhì)是皂甙類。
這種結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置可以防止水分的蒸發(fā),使液體試樣的浸透方向和浸透狀況均一,另外,不僅使一定時(shí)間內(nèi)流過的液體試樣和標(biāo)記試劑以均一的濃度流出,而且可以避免全血或細(xì)菌溶液等液體試樣發(fā)生的細(xì)胞成分堵塞,使浸透狀況均一,能夠在短時(shí)間內(nèi)更準(zhǔn)確地定量測(cè)定。
本發(fā)明(權(quán)利要求18)是權(quán)利要求3或4所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于上述添加液體試樣的部分保持的破壞細(xì)胞成分的物質(zhì)是溶菌酶等具有溶菌效果的物質(zhì)。
這種結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置可以防止水分的蒸發(fā),使液體試樣的浸透方向和浸透狀況均一,另外,不僅使一定時(shí)間內(nèi)流過的液體試樣和標(biāo)記試劑以均一的濃度流出,而且可以避免細(xì)菌溶液等液體試樣發(fā)生的細(xì)胞成分堵塞,使浸透狀況均一,能夠在短時(shí)間內(nèi)更準(zhǔn)確地定量測(cè)定。
本發(fā)明(權(quán)利要求19)是權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的色譜定量測(cè)定裝置的制備方法,其特征在于預(yù)先將上述不透液性片材在任意溫度下熟化后,使之密合在色譜定量測(cè)定裝置的表面和側(cè)面。
這種結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置可以防止水分的蒸發(fā),使液體試樣的浸透方向和浸透狀況均一,另外,不僅使一定時(shí)間內(nèi)流過的液體試樣和標(biāo)記試劑以均一的濃度流出,而且通過熟化可以促進(jìn)不透液性片材的粘合劑等含有的對(duì)蛋白質(zhì)或反應(yīng)層有不良影響的有機(jī)溶劑的揮發(fā),可以更長(zhǎng)時(shí)間的穩(wěn)定保存。
另外,這里所說的熟化是指在任意的一定環(huán)境下,將不透液性片材放置任意的時(shí)間。
本發(fā)明(權(quán)利要求20)是權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的色譜定量測(cè)定裝置的制備方法,其特征在于配置上述不透液性片材,在任意的溫度和壓力下將不透液性片材密合在色譜定量測(cè)定裝置的表面和側(cè)面。
這種結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置可以防止水分的蒸發(fā),使液體試樣的浸透方向和浸透狀況均一,另外,不僅使一定時(shí)間內(nèi)流過的液體試樣和標(biāo)記試劑以均一的濃度流出,而且可以使不透液性片材更牢固的結(jié)合在色譜測(cè)定裝置的表面和側(cè)面。
另外,這里所說的不透液性片材例如熱封型粘合片材,通過熱壓膠合等中常見的層壓加工可以使片材粘合。
本發(fā)明(權(quán)利要求21)是權(quán)利要求19或20所述的色譜定量測(cè)定裝置的制備方法,其特征在于將用于上述不透液性片材的粘合劑在高于常溫的溫度下熔融,達(dá)到帶有粘性的性狀,粘著后固化使之附著。
這種結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置可以防止水分的蒸發(fā),使液體試樣的浸透方向和浸透狀況均一,另外,不僅使一定時(shí)間內(nèi)流過的液體試樣和標(biāo)記試劑以均一的濃度流出,而且不透液性片材不會(huì)由于液體試樣的浸透而剝離。此外,由于粘合劑在粘著后固化,檢測(cè)器切割時(shí)不會(huì)有糊狀材料附著在切割器具上,不僅容易大量生產(chǎn),而且可以防止反應(yīng)層載體或特異性蛋白質(zhì)的變性,從而提供能夠長(zhǎng)時(shí)間保持色譜定量測(cè)定裝置性能的試件的制備方法。
另外,這里所說的粘合劑是通過加熱使糊狀材料軟化,粘合后冷卻則固化的物質(zhì),優(yōu)選在常溫下不軟化,在更低溫度下可以熔融的低熔點(diǎn)粘合劑。
本發(fā)明(權(quán)利要求22)是權(quán)利要求21所述的色譜定量測(cè)定裝置的制備方法,其特征在于用于不透液性片材的粘合劑由熱塑性樹脂構(gòu)成。
這種結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置可以防止水分的蒸發(fā),使液體試樣的浸透方向和浸透狀況均一,另外,不僅使一定時(shí)間內(nèi)流過的液體試樣和標(biāo)記試劑以均一的濃度流出,而且不透液性片材不會(huì)由于液體試樣的浸透而剝離。此外,由于粘合劑在粘著后通過冷卻固化,檢測(cè)器切割時(shí)不會(huì)有糊狀材料附著在切割器具上,不僅容易大量生產(chǎn),而且糊狀材料不會(huì)浸透反應(yīng)層,可以防止反應(yīng)層載體或特異性蛋白質(zhì)的變性,從而長(zhǎng)時(shí)間保持色譜定量測(cè)定裝置的性能。
本發(fā)明(權(quán)利要求23)是權(quán)利要求21所述的色譜定量測(cè)定裝置的制備方法,其特征在于用于不透液性片材的粘合劑由熱固性樹脂構(gòu)成。
這種結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置可以防止水分的蒸發(fā),使液體試樣的浸透方向和浸透狀況均一,另外,不僅使一定時(shí)間內(nèi)流過的液體試樣和標(biāo)記試劑以均一的濃度流出,而且不透液性片材不會(huì)由于液體試樣的浸透而剝離。此外,由于粘合劑在粘著后固化不熔融,檢測(cè)器切割時(shí)不會(huì)有糊狀材料附著在切割器具上,不僅容易大量生產(chǎn),而且糊狀材料不會(huì)浸透反應(yīng)層,可以防止反應(yīng)層載體或特異性蛋白質(zhì)的變性,從而長(zhǎng)時(shí)間保持色譜定量測(cè)定裝置的性能。
圖2是除去本發(fā)明實(shí)施方式中色譜定量測(cè)定裝置的不透液性片材后的免疫色譜試件。
圖3表示本發(fā)明實(shí)施方式5中色譜定量測(cè)定裝置的結(jié)構(gòu)。
圖4表示同一色譜定量測(cè)定裝置中,從垂直于浸透方向的側(cè)面見到的剖面圖。
圖5表示本發(fā)明實(shí)施方式6的色譜定量測(cè)定裝置中,不透液性片材同時(shí)構(gòu)成反應(yīng)層載體支持體的結(jié)構(gòu)。
圖6表示同一色譜定量測(cè)定裝置中,從垂直于浸透方向的側(cè)面可見的剖面圖。
圖7表示試驗(yàn)例中用不透液性片材粘合被覆在反應(yīng)層載體上的場(chǎng)合(a)以及沒有不透液性片材的場(chǎng)合(b)的定量性能。發(fā)明的發(fā)明最佳實(shí)施方式(實(shí)施方式1)以下參照
圖1和圖2說明本發(fā)明權(quán)利要求1記載的發(fā)明的實(shí)施方式1。
圖1表示本發(fā)明實(shí)施方式中色譜定量測(cè)定裝置的結(jié)構(gòu),圖2是構(gòu)成圖1的色譜定量測(cè)定裝置的不透液性片材后的免疫色譜試件。
圖2中,1是支持色譜材料的由塑料等構(gòu)成的反應(yīng)層載體支持體。2是由吸收性大的無紡布等構(gòu)成的用于添加或涂敷液體試樣的試樣添加部,3是在無紡布等上面保持有可以溶解的標(biāo)記試劑的標(biāo)記物保持部位,4是硝化纖維素等形成的反應(yīng)層,5是反應(yīng)層4的區(qū)域上固定有特異性蛋白質(zhì)的抗體固定部位,6是最終吸收液體試樣的吸水部位。以上2~6的各部位均在反應(yīng)層載體支持體1的上部形成。另外,圖1中,7是被覆在圖2的試件表面上由塑料帶等構(gòu)成的不透液性片材。
以下,對(duì)于這種結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置,說明其測(cè)定方法。
開始測(cè)定時(shí),由于液體試樣添加部2的一部分沒有被不透液性片材7覆蓋,將液體試樣添加到該沒有覆蓋的部位。添加到試樣添加部2的液體試樣到達(dá)標(biāo)記物保持部位3的區(qū)域,標(biāo)記物保持部位3的區(qū)域保持的標(biāo)記試劑被液體試樣浸透溶解,浸透到反應(yīng)層4的區(qū)域。在反應(yīng)層4的區(qū)域上具有固定有特異性蛋白質(zhì)的抗體固定部位5,與從標(biāo)記物保持部位3的區(qū)域溶出的標(biāo)記試劑進(jìn)行結(jié)合反應(yīng)。這時(shí),液體試樣中如果存在分析對(duì)象物,在抗體固定部5的區(qū)域可見某些顯色反應(yīng)。最終,液體試樣被吸水部6吸收,結(jié)束反應(yīng)。這里,抗體固定部5出現(xiàn)的顯色反應(yīng)可以通過任意的檢測(cè)儀器測(cè)量,進(jìn)行定量測(cè)定。
另外,抗體固定部位5的區(qū)域不一定必須是一個(gè),可以在反應(yīng)層4的區(qū)域上存在任意多個(gè)特異性蛋白質(zhì)區(qū)域。另外,反應(yīng)層載體支持體1例如是由塑料等構(gòu)成的,但也可以是任意的不透液性材料。而且,試樣添加部2、標(biāo)記物保持部位3、反應(yīng)層4、吸水部6例如是由無紡布或硝化纖維素構(gòu)成,但即使由任意的多孔性載體構(gòu)成也沒有問題。
這樣,采用本實(shí)施方式1的色譜定量測(cè)定裝置,除添加液體試樣的部分之外,不透液性片材7以密合的狀態(tài)覆蓋在色譜定量測(cè)定裝置的表面或側(cè)面,因此可以防止水分的蒸發(fā),使液體試樣的浸透均一。也就是說,一定時(shí)間內(nèi)流過的液體試樣與標(biāo)記試劑能夠以均一的濃度流出。另外,在以前的方法中,由于標(biāo)記試劑集中在浸透的液體試樣的前端,高濃度的標(biāo)記試劑一次流出,產(chǎn)生未反應(yīng)的標(biāo)記試劑,而在本實(shí)施方式1中,可以抑制未反應(yīng)標(biāo)記試劑的殘留量,降低由殘留標(biāo)記試劑產(chǎn)生測(cè)定誤差的背景值的影響。因此,由于也降低了加在顯色部分上的背景值的影響,可以在短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行測(cè)定,實(shí)現(xiàn)更高靈敏度、更高性能的色譜定量測(cè)定。(實(shí)施方式2)以下參照實(shí)施方式1說明的圖1和圖2,對(duì)本發(fā)明權(quán)利要求2記載的發(fā)明實(shí)施方式2進(jìn)行說明。
圖2中的3是無紡布等保持有一定量可以溶解的預(yù)先制備的分析對(duì)象物與標(biāo)記試劑形成的結(jié)合體試劑的標(biāo)記物結(jié)合體試劑保持部位。另外,圖1和圖2中與上述實(shí)施方式1相同的結(jié)構(gòu)使用同樣的符號(hào),在此省略說明。
以下,對(duì)于這種結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置,說明其測(cè)定方法。
開始測(cè)定時(shí),由于液體試樣添加部2的一部分沒有被不透液性片材7覆蓋,將液體試樣添加到該沒有覆蓋的部位。添加到試樣添加部2的液體試樣到達(dá)標(biāo)記物結(jié)合體試劑保持部位3的區(qū)域,分析對(duì)象物和標(biāo)記物結(jié)合體試劑保持部位3的區(qū)域保持的結(jié)合體試劑被液體試樣浸透溶解,浸透到反應(yīng)層4的區(qū)域。在反應(yīng)層4的區(qū)域上具有固定有特異性蛋白質(zhì)的抗體固定部5,從標(biāo)記物結(jié)合體試劑保持部位3的區(qū)域溶出的結(jié)合體試劑和液體試樣中的分析對(duì)象物進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合反應(yīng)。這時(shí),液體試樣中如果不存在分析對(duì)象物,在抗體固定部位5的區(qū)域可見顯色反應(yīng)。另外,如果存在分析對(duì)象物,在抗體固定部位5的區(qū)域與液體試樣中分析對(duì)象物的濃度成比例可見顯色反應(yīng)。最終,液體試樣被吸水部位6吸收,結(jié)束反應(yīng)。這里,抗體固定部位5出現(xiàn)的顯色反應(yīng)可以通過任意的檢測(cè)儀器測(cè)量,進(jìn)行定量測(cè)定。
另外,抗體固定部位5的區(qū)域不一定必須是一個(gè),可以在反應(yīng)層4的區(qū)域上存在任意多個(gè)特異性蛋白質(zhì)區(qū)域。另外,反應(yīng)層載體支持體1例如是由塑料構(gòu)成的,但也可以是任意的不透液性材料。而且,試樣添加部位2、標(biāo)記物結(jié)合體試劑保持部位3、反應(yīng)層4、吸水部6例如是由無紡布或硝化纖維素構(gòu)成的,但即使由任意的多孔性載體構(gòu)成也沒有問題。
這樣,采用本實(shí)施方式2的色譜定量測(cè)定裝置,除添加液體試樣的部分之外,不透液性片材7以密合的狀態(tài)覆蓋在色譜定量測(cè)定裝置的表面或側(cè)面,因此可以防止水分的蒸發(fā),使液體試樣的浸透均一。也就是說,一定時(shí)間內(nèi)流出的液體試樣與結(jié)合體試劑能夠以均一的濃度流出。另外,在以前的方法中,由于結(jié)合體試劑集中在浸透的液體試樣的前端,高濃度的結(jié)合體試劑一次流出,產(chǎn)生未反應(yīng)的結(jié)合體試劑,而在本實(shí)施方式2中,可以抑制未反應(yīng)結(jié)合體試劑的殘留量,降低由殘留結(jié)合體試劑產(chǎn)生測(cè)定誤差的背景值與空白值的影響。因此,由于也降低了加在顯色部分上的背景值與空白值的影響,可以在短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行測(cè)定,實(shí)現(xiàn)更高靈敏度、更高性能的競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合型色譜定量測(cè)定。(實(shí)施方式3)以下參照實(shí)施方式1說明的圖1和圖2,對(duì)本發(fā)明權(quán)利要求3記載的發(fā)明實(shí)施方式3進(jìn)行說明。
圖2中的2是保持有破壞細(xì)胞成分的物質(zhì)由吸收性大的無紡布等構(gòu)成的添加或涂敷液體試樣的試樣添加部位。3是無紡布等保持有可以溶解的標(biāo)記試劑的標(biāo)記物保持部位。另外,圖1和圖2中與上述實(shí)施方式1相同的結(jié)構(gòu)使用同樣的符號(hào),在此省略說明。
以下,對(duì)于這種結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置,說明其測(cè)定方法。
開始測(cè)定時(shí),由于液體試樣添加部位2的一部分沒有被不透液性片材7覆蓋,將液體試樣添加到該沒有覆蓋的部位。添加到試樣添加部位2的液體試樣通過試樣添加部位2所含有的細(xì)胞成分破壞物質(zhì)的作用,液體試樣中的細(xì)胞成分被破壞。這種細(xì)胞成分被破壞了的液體試樣到達(dá)標(biāo)記物保持部位3的區(qū)域,標(biāo)記物保持部位3的區(qū)域保持的標(biāo)記試劑被液體試樣浸透溶解,浸透到反應(yīng)層4的區(qū)域。在反應(yīng)層4的區(qū)域上具有固定有特異性蛋白質(zhì)的抗體固定部5,與標(biāo)記物保持部位3的區(qū)域溶出的標(biāo)記試劑進(jìn)行結(jié)合反應(yīng)。這時(shí),液體試樣中如果存在分析對(duì)象物,在抗體固定部5的區(qū)域可見顯色反應(yīng)。最終,液體試樣被吸水部6吸收,結(jié)束反應(yīng)。這里,抗體固定部5出現(xiàn)的顯色反應(yīng)可以通過任意的檢測(cè)儀器測(cè)量,進(jìn)行定量測(cè)定。
另外,抗體固定部5的區(qū)域不一定必須是一個(gè),可以在反應(yīng)層4的區(qū)域上存在任意多個(gè)特異性蛋白質(zhì)區(qū)域。另外,反應(yīng)層載體支持體1例如是由塑料構(gòu)成的,但也可以是任意的不透液性材料。而且,試樣添加部2、標(biāo)記物保持部位3、反應(yīng)層4、吸水部6例如是由無紡布或硝化纖維素構(gòu)成的,但即使由任意的多孔性載體構(gòu)成也沒有問題。
這樣,采用本實(shí)施方式3的色譜定量測(cè)定裝置,由于在試樣添加部位2上設(shè)有保持破壞細(xì)胞成分的物質(zhì)的部分,液體試樣中的細(xì)胞成分被破壞,在反應(yīng)層載體上的浸透可以順利進(jìn)行。另外,除添加液體試樣的一部分之外,不透液性片材7以密合的狀態(tài)覆蓋在色譜定量測(cè)定裝置的表面或側(cè)面,因此可以防止水分的蒸發(fā),使液體試樣的浸透均一。也就是說,一定時(shí)間內(nèi)流過的液體試樣與結(jié)合體試劑能夠以均一的濃度流出。另外,在以前的方法中,液體試樣中的細(xì)胞成分增高了液體試樣的粘度,在浸透反應(yīng)層載體的過程中細(xì)胞成分引起堵塞,浸透速度顯著惡化。另外,標(biāo)記試劑集中在浸透的液體試樣的前端,高濃度的標(biāo)記試劑一次流出,產(chǎn)生未反應(yīng)的標(biāo)記試劑,而在本實(shí)施方式3中,可以破壞液體試樣中的細(xì)胞成分,防止反應(yīng)層載體堵塞,保持一定的浸透速度。另外,可以抑制未反應(yīng)標(biāo)記試劑的殘留量,降低由殘留標(biāo)記試劑產(chǎn)生測(cè)定誤差的背景值的影響。因此,由于可以防止細(xì)胞成分的堵塞,也降低了加在顯色部分上的背景值的影響,使用含有細(xì)胞成分的液體試樣時(shí)使測(cè)定時(shí)間變短,實(shí)現(xiàn)更高靈敏度、更高性能的色譜定量測(cè)定。(實(shí)施方式4)以下參照實(shí)施方式1說明的圖1和圖2,對(duì)本發(fā)明權(quán)利要求4記載的發(fā)明實(shí)施方式4進(jìn)行說明。
圖2中,2是保持有破壞細(xì)胞成分的物質(zhì)的由吸收性大的無紡布等構(gòu)成的添加或涂敷液體試樣的試樣添加部。3是無紡布等保持有一定量可以溶解的預(yù)先制備的由分析對(duì)象物與標(biāo)記試劑形成的結(jié)合體試劑的標(biāo)記物結(jié)合體試劑保持部位。另外,圖1和圖2中與上述實(shí)施方式1相同的結(jié)構(gòu)使用同樣的符號(hào),在此省略說明。
以下,對(duì)于裝置結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置,說明其測(cè)定方法。
開始測(cè)定時(shí),由于液體試樣添加部位2的一部分沒有被不透液性片材7覆蓋,將液體試樣添加到該沒有覆蓋的部位。添加到試樣添加部位2的液體試樣通過試樣添加部位2所含有的細(xì)胞成分破壞物質(zhì)的作用,液體試樣中的細(xì)胞成分被破壞。這種細(xì)胞成分被破壞了的液體試樣到達(dá)標(biāo)記物保持部位3的區(qū)域,分析對(duì)象物和標(biāo)記物結(jié)合體試劑保持部位3的區(qū)域保持的結(jié)合體試劑被液體試樣浸透溶解,浸透到反應(yīng)層4的區(qū)域。在反應(yīng)層4的區(qū)域上具有固定有特異性蛋白質(zhì)的抗體固定部5,標(biāo)記物結(jié)合體試劑保持部位3的區(qū)域溶出的結(jié)合體試劑和液體試樣中的分析對(duì)象物進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合反應(yīng)。這時(shí),液體試樣中如果不存在分析對(duì)象物,在抗體固定部5的區(qū)域可見顯色反應(yīng)。另外,如果存在分析對(duì)象物,在抗體固定部5的區(qū)域與液體試樣中分析對(duì)象物的濃度成比例地可見顯色反應(yīng)。最終,液體試樣被吸水部6吸收,結(jié)束反應(yīng)。這里,抗體固定部5出現(xiàn)的顯色反應(yīng)可以通過任意的檢測(cè)儀器測(cè)量,進(jìn)行定量測(cè)定。
另外,抗體固定部位5的區(qū)域不一定必須是一個(gè),可以在反應(yīng)層4的區(qū)域上存在任意多個(gè)特異性蛋白質(zhì)區(qū)域。另外,反應(yīng)層載體支持體1例如是由塑料構(gòu)成的,但也可以是任意的不透液性材料。而且,試樣添加部2、標(biāo)記物保持部位3、反應(yīng)層4、吸水部6例如是由無紡布或硝化纖維素構(gòu)成的,但即使由任意的多孔性載體構(gòu)成也沒有問題。
這樣,采用本實(shí)施方式4的色譜定量測(cè)定裝置,由于設(shè)有保持破壞細(xì)胞成分的物質(zhì)的部分,液體試樣中的細(xì)胞成分被破壞,在反應(yīng)層載體上的浸透可以順利進(jìn)行。另外,除添加液體試樣的部分之外,不透液性片材7以密合的狀態(tài)覆蓋在色譜定量測(cè)定裝置的表面或側(cè)面,因此可以防止水分的蒸發(fā),使液體試樣的浸透均一。也就是說,一定時(shí)間內(nèi)流過的液體試樣與結(jié)合體試劑能夠以均一的濃度流出。另外,在以前的方法中,由于液體試樣中的細(xì)胞成分增高了液體試樣的粘性,在浸透反應(yīng)層載體的過程中細(xì)胞成分引起堵塞,浸透速度顯著惡化。另外,標(biāo)記試劑集中在浸透的液體試樣的前端,高濃度的標(biāo)記試劑一次流出,產(chǎn)生未反應(yīng)的標(biāo)記試劑,而在本實(shí)施方式4中,液體試樣中的細(xì)胞成分被破壞,可以防止反應(yīng)層載體的堵塞,保持一定的浸透速度。另外,可以抑制未反應(yīng)標(biāo)記試劑的殘留量,降低由殘留標(biāo)記試劑產(chǎn)生測(cè)定誤差的背景值的影響。因此,由于可以防止細(xì)胞成分的堵塞,也降低了加在顯色部分上的背景值的影響,使用含有細(xì)胞成分的液體試樣時(shí)可以在短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行測(cè)定,實(shí)現(xiàn)更高靈敏度、更高性能的競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合型色譜定量測(cè)定。(實(shí)施方式5)以下參照?qǐng)D3和圖4,對(duì)本發(fā)明權(quán)利要求5記載的發(fā)明實(shí)施方式5進(jìn)行說明。
圖3表示本發(fā)明實(shí)施方式5的色譜定量測(cè)定裝置的結(jié)構(gòu),圖4是圖3的色譜定量測(cè)定裝置從垂直于浸透方向的側(cè)面見到的剖面圖。另外,圖4中,反應(yīng)層支持體1與不透液性片材7之間夾著試樣添加部2,從另一垂直側(cè)面看的場(chǎng)合,該試樣添加部2成為吸水部6。
圖3和圖4中,不透液性片材7相對(duì)于液體試樣的浸透方向密合在反應(yīng)層載體的表面、平行側(cè)面和反面。這時(shí),色譜定量測(cè)定裝置由于液體試樣添加部位2的一部分沒有被不透液性片材7覆蓋,從沒有覆蓋的部分添加液體試樣進(jìn)行測(cè)定。另外,圖3和圖4中與上述實(shí)施方式1相同的結(jié)構(gòu)使用同樣的符號(hào),在此省略說明。
這樣,采用本實(shí)施方式5的色譜定量測(cè)定裝置,除添加液體試樣的部分之外,不透液性片材7以密合的狀態(tài)覆蓋在色譜定量測(cè)定裝置的表面或表面乃至反面,因此可以防止水分的蒸發(fā),使液體試樣的浸透均一,一定時(shí)間內(nèi)流過的液體試樣與結(jié)合體試劑能夠以均一的濃度流出。而且,由于可以將加在顯色部分上的背景值的影響抑制到很低,可以在短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行測(cè)定,實(shí)現(xiàn)更高靈敏度、更高性能的色譜定量測(cè)定。另外,液體試樣不會(huì)從間隙漏出,而且液體試樣也不會(huì)從試樣添加部2以外的外部侵入。(實(shí)施方式6)以下參照?qǐng)D5和圖6,對(duì)本發(fā)明權(quán)利要求6記載的發(fā)明實(shí)施方式6進(jìn)行說明。
圖5表示本發(fā)明實(shí)施方式6的色譜定量測(cè)定裝置的結(jié)構(gòu),圖6表示圖5的色譜定量測(cè)定裝置從垂直于浸透方向的側(cè)面見到的剖面圖。另外,圖6中,不透液性片材7之間夾著試樣添加部2,從另一垂直側(cè)面看的場(chǎng)合,該試樣添加部2成為吸水部6。
圖5和圖6中,色譜定量測(cè)定裝置除去了支持的反應(yīng)層載體支持體1(參照?qǐng)D1),不透液性片材7相對(duì)于液體試樣的浸透方向密合在反應(yīng)層載體的周圍。也就是說,不透液性片材7同時(shí)構(gòu)成了反應(yīng)層載體支持體1。這時(shí),色譜定量測(cè)定裝置由于液體試樣添加部位2的一部分沒有被不透液性片材7覆蓋,從沒有覆蓋的部分添加液體試樣進(jìn)行測(cè)定。另外,與上述實(shí)施方式1相同的結(jié)構(gòu)使用同樣的符號(hào),在此省略說明。
這樣,采用本實(shí)施方式6的色譜定量測(cè)定裝置,由于不透液性片材7同時(shí)構(gòu)成了反應(yīng)層載體支持體,可以削減色譜定量測(cè)定裝置的材料數(shù)。另外,不透液性片材7以密合的狀態(tài)覆蓋在色譜定量測(cè)定裝置的周圍,可以防止水分的蒸發(fā),在液體浸透時(shí)將空氣的排放僅限定于浸透方向,使液體試樣的浸透均一,一定時(shí)間內(nèi)流過的液體試樣與結(jié)合體試劑能夠以均一的濃度流出。而且,由于可以將加在顯色部分上的背景值的影響抑制到很低,可以在短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行測(cè)定,實(shí)現(xiàn)更高靈敏度、更高性能的色譜定量測(cè)定。另外,液體試樣不會(huì)從間隙漏出,而且液體試樣也不會(huì)從試樣添加部位2以外的外部侵入。(實(shí)施方式7)以下參照實(shí)施方式1說明的圖1,對(duì)本發(fā)明權(quán)利要求7和8記載的發(fā)明的實(shí)施方式7進(jìn)行說明。
圖1表示本發(fā)明實(shí)施方式7的色譜定量測(cè)定裝置的結(jié)構(gòu)。另外,圖1中與上述實(shí)施方式1相同的結(jié)構(gòu)使用同樣的符號(hào),在此省略說明。
圖1中,不透液性片材7相對(duì)于色譜定量測(cè)定裝置中液體試樣浸透的方向,在垂直側(cè)面或端部的任意場(chǎng)所開放。
這樣,采用本實(shí)施方式7的色譜定量測(cè)定裝置,由于色譜定量測(cè)定裝置被不透液性片材7覆蓋時(shí),其兩端部開放,可以將液體浸透時(shí)空氣的排放僅限定于浸透方向,使液體試樣與標(biāo)記試劑以均一的濃度流出。(實(shí)施方式8)以下對(duì)本發(fā)明權(quán)利要求9記載的發(fā)明的實(shí)施方式8進(jìn)行說明。
本實(shí)施方式8中,不透液性片材密合在色譜定量測(cè)定裝置上時(shí),通過丙烯酸樹脂等粘著性物質(zhì)構(gòu)成的粘合劑使之粘著。
這樣,采用本實(shí)施方式8的色譜定量測(cè)定裝置,由于不透液性片材通過任意的粘合劑密合在色譜定量測(cè)定裝置上,液體試樣浸透時(shí),片材不會(huì)從密合的面上剝離,可以增加粘著強(qiáng)度。(實(shí)施方式9)以下,對(duì)本發(fā)明權(quán)利要求10~12記載的發(fā)明的實(shí)施方式9進(jìn)行說明。
本實(shí)施方式9中,不透液性片材密合在色譜定量測(cè)定裝置上時(shí),通過粘著后固化的粘合劑附著。
這樣,采用本實(shí)施方式9的色譜定量測(cè)定裝置,由于不透液性片材通過粘著后固化的粘合劑密合在色譜定量測(cè)定裝置上,粘著后糊狀材料不會(huì)向反應(yīng)層載體轉(zhuǎn)移,可以防止反應(yīng)層的變色或變性、固定的特異性蛋白質(zhì)變性或失活。(實(shí)施方式10)以下,對(duì)本發(fā)明權(quán)利要求13記載的發(fā)明的實(shí)施方式10進(jìn)行說明。
本實(shí)施方式10中,不透液性片材的材料不僅可以使用塑料,也可以使用乙烯膠帶(vinyl tape)或PET(PolyethyleneTerephthalate)等任意的不透液性材料。
這樣,采用本實(shí)施方式10的色譜定量測(cè)定裝置,由于不透液性片材是透明或半透明材料制成的,從外部測(cè)定檢測(cè)區(qū)的結(jié)果時(shí),由于可以通過目視進(jìn)行檢測(cè),容易測(cè)量。(實(shí)施方式11)以下,對(duì)本發(fā)明權(quán)利要求14記載的發(fā)明的實(shí)施方式11進(jìn)行說明。
本發(fā)明的實(shí)施方式11中,不透液性片材使用的材料為半透明或不透明的任意不透液性材料,為了容易從外部測(cè)定反應(yīng)結(jié)果,在成為測(cè)定部位的抗體固定部5(參照?qǐng)D1)的區(qū)域上設(shè)置透明窗。另外,該窗部分的材料可以使用塑料、乙烯膠帶或PET等任意的不透液性材料。
這樣,采用本實(shí)施方式11的色譜定量測(cè)定裝置,由于不透液性片材使用半透明或不透明的材料,在檢測(cè)區(qū)的任意部位設(shè)置透明窗,從外部測(cè)定檢測(cè)區(qū)的結(jié)果時(shí),由于可以通過目視進(jìn)行檢測(cè),容易測(cè)量。(實(shí)施方式12)以下,對(duì)本發(fā)明權(quán)利要求15~18記載的發(fā)明的實(shí)施方式12進(jìn)行說明。
本實(shí)施方式12中,使用的細(xì)胞成分破壞物質(zhì)為表面活性劑、氯化鈉、氯化鉀這種任意的氯化物、皂甙、溶菌酶等任意具有溶菌效果的物質(zhì)。
這樣,采用本實(shí)施方式12的色譜定量測(cè)定裝置,由于試樣添加部位保持有上述細(xì)胞成分破壞物質(zhì),即使添加全血或細(xì)菌溶液等含有細(xì)胞成分的液體試樣時(shí),也不會(huì)由于細(xì)胞成分堵塞導(dǎo)致浸透惡化,可以在短時(shí)間內(nèi)定量測(cè)定。(實(shí)施方式13)以下,對(duì)于本發(fā)明權(quán)利要求19記載的發(fā)明的實(shí)施方式13進(jìn)行說明。
本實(shí)施方式13中,色譜定量測(cè)定裝置是將預(yù)先在任意溫度下熟化的不透液性片材密合在色譜定量測(cè)定裝置的表面和側(cè)面得到的。
這樣,采用本實(shí)施方式13的色譜定量測(cè)定裝置的制備方法,由于預(yù)先將不透液性片材在任意溫度下熟化,可以促進(jìn)對(duì)蛋白質(zhì)或反應(yīng)層有不良影響的有機(jī)溶劑揮發(fā),因此可以更長(zhǎng)時(shí)間地穩(wěn)定保存測(cè)定裝置。(實(shí)施方式14)以下,對(duì)本權(quán)利要求20記載的發(fā)明的實(shí)施方式14進(jìn)行說明。
本實(shí)施方式14中,色譜定量測(cè)定裝置是使預(yù)先配置在色譜定量測(cè)定裝置上的不透液性片材,在任意的溫度和壓力下密合在色譜定量測(cè)定裝置的表面和側(cè)面。
這樣,采用本實(shí)施方式14的色譜定量測(cè)定裝置的制備方法,由于同時(shí)加溫加壓使不透液性片材密合在色譜定量測(cè)定裝置的表面和側(cè)面,可以使不透液性片材更牢固的結(jié)合在色譜測(cè)定裝置上。(實(shí)施方式15)以下,對(duì)本發(fā)明權(quán)利要求21~23記載的發(fā)明的實(shí)施方式15進(jìn)行說明。
本實(shí)施方式15中,色譜定量測(cè)定裝置是使用具有下述性質(zhì)的粘合劑使不透液性片材附著得到的,所使用的粘合劑通過加熱熔融,具有帶粘性的性狀,粘著后固化。
這樣,采用本實(shí)施方式15的色譜定量測(cè)定裝置的制備方法,由于用于不透液性片材的粘合劑通過加熱熔融,成為帶有粘性的性狀,不透液性片材粘著后固化,通過這種粘合劑將不透液性片材附著在色譜定量測(cè)定裝置表面,在保存期中糊狀材料不會(huì)向色譜定量測(cè)定裝置浸透,能夠以長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定的狀態(tài)保持色譜定量測(cè)定裝置的性能。
(實(shí)施例)結(jié)合實(shí)施例更具體地說明本發(fā)明。另外,本發(fā)明不受下述實(shí)施例的任何制約。(尿中hCG的定量)制備硝化纖維素膜中含有抗hCG-β抗體固定線、以及抗hCG-α抗體與金膠體復(fù)合體的寬帶的免疫色譜試件。該試件如圖2所示。圖中,試件包括抗體固定部5、處于其前部的含有抗hCG-α與金膠體復(fù)合體的區(qū)域——標(biāo)記物保持部位3、試樣添加部2。這些試件如下所述進(jìn)行制備。
金膠體通過在回流中向0.01%氯金酸的100℃溶液中加入1%檸檬酸溶液配制。接著,繼續(xù)回流30分鐘后,冷卻。通過0.2M的碳酸鉀溶液將金膠體溶液調(diào)節(jié)為pH9,向其中加入抗hCG-α抗體,攪拌數(shù)分鐘后,加入10%BSA(牛血清白蛋白)溶液pH9,最終達(dá)到1%,通過攪拌,配制抗體金膠體復(fù)合體(標(biāo)記抗體)。4℃下以20000G將該標(biāo)記抗體溶液離心分離50分鐘,分離出標(biāo)記抗體,將其懸濁于洗滌緩沖液(1%BSA·磷酸緩沖液)中后,進(jìn)行離心分離,洗滌并分離標(biāo)記抗體。用洗滌緩沖液懸濁該標(biāo)記抗體,用0.8μm的濾器過濾后,調(diào)制成最初金膠體溶液量的10分之1,在4℃下貯藏。
將標(biāo)記抗體溶液裝在溶液排出裝置中,在固定有抗hCG-β抗體的干燥膜上離開抗體固定位置的位置涂敷后,將膜干燥。這樣,在固定化膜上就形成了標(biāo)記抗體保持部位。
將這樣制得的帶有標(biāo)記抗體保持部位的抗體固定膜貼付在反應(yīng)層載體支持體上,貼付無紡布作為試樣添加部,貼付玻璃纖維濾紙作為吸水部后,切割成0.5cm寬的細(xì)片,制作除去一半試樣添加部之外該試件的整個(gè)表面均貼有透明帶的試件。
圖7(a)表示不透液性片材密合在色譜定量測(cè)定裝置上時(shí)的定量性能,圖7(b)表示沒有不透液性片材時(shí)的定量性能。
圖7中表示在色譜定量測(cè)定裝置上添加液體試樣,基于3分鐘后顯色程度的測(cè)定值,換算分析對(duì)象物濃度的結(jié)果。首先,有片材時(shí)(圖7(a)),CV值(變動(dòng)系數(shù))為0~10%,與此相對(duì)沒有片材時(shí)(圖7(b)),CV值為27~42%,顯示出較大的差異,定量性能差。以上結(jié)果可以理解為用不透液性片材覆蓋色譜定量測(cè)定裝置與提高定量性能有很大關(guān)系。
另外,作為本發(fā)明實(shí)施方式中的色譜定量測(cè)定裝置,使用硝化纖維素或玻璃纖維濾紙等任意的多孔性載體構(gòu)成的色譜材料形成的試件。這些材料形成的試件例如利用抗原抗體反應(yīng)等任意的測(cè)定原理,分析檢測(cè)某種特定物質(zhì),具有定量功能。另外,作為測(cè)定的液體試樣,例如有水、水溶液、尿、血液、體液、溶解有固體以及粉體或氣體的溶液等,作為其用途,例如有尿檢查、妊娠檢查、水質(zhì)檢查、便檢查、土壤分析、食品分析等。
采用這種結(jié)構(gòu),可以簡(jiǎn)單而且準(zhǔn)確地在短時(shí)間內(nèi)定量測(cè)定任意被檢溶液的液體試樣中存在的分析對(duì)象物。
工業(yè)實(shí)用性如上所述,本發(fā)明涉及的色譜定量測(cè)定裝置及其制備方法在將液體試樣添加到試件上開始測(cè)定時(shí),可以防止液體試樣的蒸發(fā),在液體試樣浸透時(shí)可以將空氣的排放僅限定于浸透方向,使液體試樣的浸透均一。也就是說,可以使一定時(shí)間內(nèi)流出的液體試樣與標(biāo)記試劑以均一的濃度流出。而且,由于可以將加在顯色部分上的背景值的影響抑制到很低,能夠在短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行測(cè)定,可以實(shí)現(xiàn)更高靈敏度、更高性能的色譜定量測(cè)定裝置。
權(quán)利要求
1.色譜定量測(cè)定裝置,具有不能潤(rùn)濕的反應(yīng)層載體支持體、該支持體上部形成的1至任意數(shù)量的部件構(gòu)成的可以潤(rùn)濕的層,該可以潤(rùn)濕的層由添加液體試樣的部分、保持有可以移動(dòng)的標(biāo)記試劑的部分、能夠與具有與液體試樣中的分析對(duì)象物特異性結(jié)合的物質(zhì)的標(biāo)記試劑進(jìn)行結(jié)合反應(yīng)的部分以及吸收液體試樣的部分構(gòu)成,其特征在于在該色譜定量測(cè)定裝置中,在除添加液體試樣的部分之外的在表面和側(cè)面上以密合的狀態(tài)設(shè)置不透液性片材。
2.色譜定量測(cè)定裝置,具有不能潤(rùn)濕的反應(yīng)層載體支持體、該支持體上部形成的1至任意數(shù)量的部件構(gòu)成的可以潤(rùn)濕的層,該可以潤(rùn)濕的層由添加液體試樣的部分、保持有一定量可以移動(dòng)的預(yù)先制備的分析對(duì)象物與標(biāo)記試劑形成的結(jié)合體試劑的部分、能夠與具有與液體試樣中的分析對(duì)象物特異性結(jié)合的物質(zhì)的上述結(jié)合體試劑和上述液體試樣中的分析對(duì)象物進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合反應(yīng)的部分以及吸收液體試樣的部分構(gòu)成,其特征在于在該色譜定量測(cè)定裝置中,在除添加液體試樣的部分之外的表面和側(cè)面上以密合狀態(tài)設(shè)置不透液性片材。
3.色譜定量測(cè)定裝置,具有不能潤(rùn)濕的反應(yīng)層載體支持體、該支持體上部形成的1至任意數(shù)量的部件構(gòu)成的可以潤(rùn)濕的層,該可以潤(rùn)濕的層由添加了保持有破壞液體試樣中細(xì)胞成分的物質(zhì)的液體試樣的部分、保持有可以移動(dòng)的標(biāo)記試劑的部分、能夠與具有與液體試樣中的分析對(duì)象物特異性結(jié)合的物質(zhì)的標(biāo)記試劑進(jìn)行結(jié)合反應(yīng)的部分以及吸收液體試樣的部分構(gòu)成,其特征在于在該色譜定量測(cè)定裝置中,在除添加液體試樣的部分之外的表面和側(cè)面上以密合的狀態(tài)設(shè)置不透液性片材。
4.色譜定量測(cè)定裝置,具有不能潤(rùn)濕的反應(yīng)層載體支持體、該支持體上部形成的1至任意數(shù)量的部件構(gòu)成的可以潤(rùn)濕的層,該可以潤(rùn)濕的層由添加了保持有破壞液體試樣中細(xì)胞成分的物質(zhì)的液體試樣的部分、保持有一定量可以移動(dòng)的預(yù)先制備的分析對(duì)象物與標(biāo)記試劑形成的結(jié)合體試劑的部分、能夠與具有與液體試樣中的分析對(duì)象物特異性結(jié)合的物質(zhì)的上述結(jié)合體試劑和上述液體試樣中的分析對(duì)象物進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合反應(yīng)的部分以及吸收液體試樣的部分構(gòu)成,其特征在于在該色譜定量測(cè)定裝置中,在除添加液體試樣的部分之外的表面和側(cè)面上以密合狀態(tài)設(shè)置不透液性片材。
5.如權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于在除添加液體試樣的部分之外的表面,或者表面至反面均具備不透液性片材。
6.如權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于結(jié)構(gòu)中除去了上述反應(yīng)層載體支持體,在除添加液體試樣的部分之外的周圍具備上述不透液性片材。
7.如權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于相對(duì)于添加的液體試樣浸透的方向,上述不透液性片材的垂直側(cè)面開放。
8.如權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于對(duì)于添加的液體試樣浸透的方向,上述不透液性片材的端部在上述色譜定量測(cè)定裝置端部的任意場(chǎng)所開放。
9.如權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于上述不透液性片材通過任意粘著性物質(zhì)構(gòu)成的粘合劑附著。
10.如權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于上述不透液性片材通過任意粘著后固化的粘合劑附著。
11.如權(quán)利要求9所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于用于不透液性片材的粘合劑由熱塑性樹脂構(gòu)成。
12.如權(quán)利要求9所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于用于不透液性片材的粘合劑由熱固性樹脂構(gòu)成。
13.如權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于上述不透液性片材由透明或半透明的任意不透液性材料構(gòu)成。
14.如權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于上述不透液性片材由半透明或不透明的任意不透液性材料構(gòu)成,在檢測(cè)區(qū)具備透明窗。
15.如權(quán)利要求3或4所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于上述添加液體試樣的部分所保持的破壞細(xì)胞成分的物質(zhì)為表面活性劑。
16.如權(quán)利要求3或4所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于上述添加液體試樣的部分保持的破壞細(xì)胞成分的物質(zhì)由氯化鈉或氯化鉀等氯化物構(gòu)成。
17.如權(quán)利要求3或4所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于上述添加液體試樣的部分保持的破壞細(xì)胞成分的物質(zhì)是皂甙類。
18.如權(quán)利要求3或4所述的色譜定量測(cè)定裝置,其特征在于上述添加液體試樣的部分保持的破壞細(xì)胞成分的物質(zhì)是溶菌酶等具有溶菌效果的物質(zhì)。
19.如權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的色譜定量測(cè)定裝置的制備方法,其特征在于預(yù)先將上述不透液性片材在任意溫度下熟化后,使之密合在色譜定量測(cè)定裝置的表面和側(cè)面。
20.如權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的色譜定量測(cè)定裝置的制備方法,其特征在于配置上述不透液性片材,在任意的溫度和壓力下將不透液性片材密合在色譜定量測(cè)定裝置的表面和側(cè)面。
21.如權(quán)利要求19或20所述的色譜定量測(cè)定裝置的制備方法,其特征在于將用于上述不透液性片材的粘合劑在高于常溫的溫度下熔融,成為帶有粘性的性狀,粘著后固化使之附著。
22.如權(quán)利要求21所述的色譜定量測(cè)定裝置的制備方法,其特征在于用于不透液性片材的粘合劑由熱塑性樹脂構(gòu)成。
23.如權(quán)利要求21所述的色譜定量測(cè)定裝置的制備方法,其特征在于用于不透液性片材的粘合劑由熱固性樹脂構(gòu)成。
全文摘要
本發(fā)明涉及的色譜定量測(cè)定裝置及其制備方法,如圖1所示,由不能潤(rùn)濕的反應(yīng)層載體支持體1、將液體試樣添加到其上部的試樣添加部分2、保持有標(biāo)記試劑的標(biāo)記試劑保持部分3、反應(yīng)層4的區(qū)域中固定有特異性蛋白質(zhì)的抗體固定部5和吸收液體試樣的吸水部分6構(gòu)成,上述反應(yīng)層載體除添加液體試樣的一部分之外,被不透液性片材7密合。另外,片材7為了提高密合性能也可以使用粘合劑,另外不透液性片材7的材料使用不透液性材料,其材質(zhì)是半透明或不透明時(shí),在檢測(cè)區(qū)也可以設(shè)置窗口。這種結(jié)構(gòu)的色譜定量測(cè)定裝置及其制備方法可以縮短定量檢測(cè)液體試樣中分析對(duì)象物的測(cè)定時(shí)間,提高測(cè)定性能。
文檔編號(hào)G01N33/558GK1318150SQ00801474
公開日2001年10月17日 申請(qǐng)日期2000年6月21日 優(yōu)先權(quán)日1999年6月21日
發(fā)明者高橋三枝, 灘岡正剛, 田中宏橋 申請(qǐng)人:松下電器產(chǎn)業(yè)株式會(huì)社