專利名稱：連續(xù)電壓梯度電泳裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實用新型是一種生物工程中使用的蛋白分離、制備裝置。
目前生物工程制備、分離蛋白質(zhì)多用凝膠電泳。通常常用于分離蛋白的技術(shù)有連續(xù)與不連續(xù)體系凝膠電泳二種。不連續(xù)體系是由二種濃度不同的基質(zhì)組成，凝膠系統(tǒng)基質(zhì)的下層是分離膠，基質(zhì)孔徑較小，含有一類特定的離子，作用是將不同分子量的分子分離；上層是濃縮膠，凝膠基質(zhì)孔徑較大，含有另一類特定的離子，作用是將樣品濃縮，并使樣品能同時進(jìn)入分離膠，以期達(dá)到最佳分離效果。連續(xù)體系則只有分離膠而無濃縮膠。無論是連續(xù)或不連續(xù)體系的分析型電泳裝置通常在內(nèi)徑為0.5－1cm，長度為10－15cm的玻璃管中進(jìn)行，制備型電泳則將管子的內(nèi)徑放大，并在中心置一冷卻裝置，目的是防止膠過熱時產(chǎn)生大量氣泡及防止蛋白分子變性。但是這些傳統(tǒng)的制備型電泳只是放大了分析型裝置，未根本改變分析型裝置作為制備型裝置的量小、純度不夠高的缺點。
本實用新型的目的是對現(xiàn)有的蛋白電泳儀作簡單的結(jié)構(gòu)改進(jìn)，從而制得一種分辯率高的制備、分析兩用型蛋白電泳槽和DNA電泳分離裝置。
本發(fā)明的凝膠蛋白分離裝置是在現(xiàn)有裝置上改進(jìn)而成，該裝置原來是園柱型，本發(fā)明將其置放分離膠的下層制作成園錐臺型，置放濃縮膠的上層仍為園柱形，園錐臺形底邊與斜邊夾角為45°～80°，電泳儀中心有一冷卻裝置，一般為園柱形冷卻管，濃縮膠在電泳槽的上層，分離膠在電泳槽的下層，電泳槽上層入口端有陰極緩沖液組成陰極，下層出口端為陽極。因此上層是園柱形，下層是園錐臺形，中間為一園柱形冷卻管組成的電泳槽電泳槽的上層是2－4cm長的園柱形，園柱形體內(nèi)灌注入濃縮膠，膠的陰極板上有陰極緩沖液，下層園錐臺形體內(nèi)灌注入分離膠，然后陽極板浸沒在陽極電解液中。也可以將陽極置于上面，陰極在下面。一般情況園錐臺形底邊直徑2～8cm，冷卻管內(nèi)徑0.5～2cm，整個裝置長可在10～16cm范圍內(nèi)。
該園錐臺形電泳槽梯度大，分辨率高，但是為防止凝膠過熱和防止蛋白分子變性，采用適中的梯度為佳。
該電泳槽可用玻璃、有機玻璃等不導(dǎo)電材料制成。
該裝置也可以制成園錐臺面，即呈梯形平面狀，用于DNA電泳分離，梯形板底邊與斜邊的夾角為45°～80°之間，梯形平面面積可根據(jù)分離要求來定。該裝置作DNA電泳分離可提高分辨效率，工作時可與現(xiàn)有DNA電泳分離方法類似，將電泳板置于電極緩沖液中，由于現(xiàn)有電泳板是長方形，而本實用新型是梯形電泳板，工作時梯形電泳板有一電場梯度，提高了DNA的分離效率。
由于傳統(tǒng)的園柱形制備型電泳并未對電泳分離原理再行改進(jìn)而只是放大了原分析裝置，因而從理論上來講分離效率并未提高只是增加了樣品量而已。本設(shè)計制備型錐臺型電泳槽是從改革器具入手，因此，有所創(chuàng)新。它的原理是由于槽是錐臺型的，上大下小，所以電泳時錐臺型槽的每個橫截面所受的電場強度是不同的，越是上面電場強度越小，越下則越大，這樣就產(chǎn)生了一個連續(xù)的梯度電場效應(yīng)一越是前面的分子電泳遷移速度越快，越是后面的分子遷移越慢，這種效應(yīng)能使分子拉開距離。用這樣的裝置進(jìn)行電泳可使蛋白分子的分離在原來僅依靠分子量不同而分離的基礎(chǔ)上再加上由梯度電場引起的分離，使分離效率大大提高。制備型錐臺型電泳的另一優(yōu)點是可使分離物得到濃縮。柱型電泳分離裝置直徑相同，不可能有濃縮功能，而錐臺型電泳裝置則會隨著遷移分子的下行到達(dá)直徑較小的區(qū)域而造成濃縮效應(yīng)。這就使電泳后能得到純度較高且濃度較大的蛋白分子，為以后的檢測、收集等工作提供了很大的方便。圖中1是電泳槽，2是冷卻裝置，3是分離膠，4是濃縮膠，5是陰極緩沖液，6是陰極，7是陽極，8是陽極緩沖液。


圖1是蛋白電泳槽的正視圖圖2是蛋白電泳槽的俯視圖圖3是DNA電泳分離裝置示意圖實施例取一直徑6cm，長15cm玻璃管，制成3cm長是園柱形，其余為75°園錐臺形的電泳槽，此時電泳槽園錐臺形部分高為12cm，電泳槽中間置一直徑為1.5cm的通冷卻水的玻璃管，電泳槽上層園柱形部分注入濃縮膠，下層園錐形部分注入分離膠，上層入口一端由陰極緩沖液組成陰極，下層為陽極，工作時，接上電流，注入待測或待制備蛋白樣品，制備完畢或分析完畢的樣品從下層出口處收集。
權(quán)利要求1.一種凝膠蛋白分離裝置，該裝置由電泳槽、冷卻裝置及凝膠組成，其特征在于電泳槽(1)中放置分離膠(3)的下層呈園錐臺形，放置濃縮膠(4)的上層呈園柱形，園錐臺底邊與斜邊夾角為45°～80°之間，電泳槽中心有一冷卻裝置(2)，電泳槽樣品入口處有陰極緩沖液(5)組成陰極(6)，樣品出口處為陽極(7)，陽極浸沒在陽極緩沖液(8)中。
2.一種DNA電泳分離裝置，該裝置是平面板狀，其特征在于該平面板狀呈梯形，梯形板底邊與斜邊夾角為45°～80°之間，梯形板面積大小可根據(jù)需要而定。
專利摘要一種凝膠蛋白分離裝置?，F(xiàn)有的蛋白凝膠分離裝置無論是分析型還是制備型都為圓柱形玻璃管制成，它的缺點是分離效率不夠高，若是制備型裝置則使分離物得不到濃縮。本實用新型將該裝置改制成上層為圓柱形，注入濃縮膠，下層為圓錐臺形，注入分離膠，也可以制成錐臺形平面即梯形板狀，作為DNA電泳分離。這樣的錐臺形電泳裝置上大下小，電泳時錐臺形橫截面電場強度不同，具有梯度電場效應(yīng)，大大提高分離效率和制備效率。
文檔編號B01D57/02GK2211317SQ94238789
公開日1995年11月1日 申請日期1994年5月24日 優(yōu)先權(quán)日1994年5月24日
發(fā)明者盛小禹 申請人:復(fù)旦大學(xué)