一種毛細管基因擴增系統(tǒng)的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實用新型涉及DNA擴增技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種毛細管基因擴增系統(tǒng)。
【背景技術(shù)】
[0002]基因擴增的技術(shù)設(shè)備由三部分構(gòu)成:①模板DNA制備所需設(shè)備，主要為高速微量離心機或高速冷凍離心機PCR基因擴增儀DNA擴增結(jié)果判讀和測定設(shè)備，主要有水平低壓電泳儀、PCR核酸電泳槽以及紫外透射儀和DNA微量熒光計等?；驍U增儀的技術(shù)方案可歸結(jié)為兩大類:第一類方案即三容器機械手循環(huán)方案。該類設(shè)計根據(jù)恒溫器的排布可分為直線型和環(huán)型兩種。該方案設(shè)計的PCR儀設(shè)置三個精確控溫及溫度可調(diào)的恒溫器，并且固定不動，使樣品盤在微電腦控制的機械手作用下，根據(jù)PCR反應(yīng)所需的保溫時間，在恒溫器之間停留和循環(huán)。第二類方案即單容器溫度循環(huán)方案。該類方案在整個反應(yīng)過程中，樣品在樣品槽中位置不變，而通過控制樣品槽溫度的升降完成溫度的轉(zhuǎn)換、保持和循環(huán)。
[0003]總體說來，第一類方案的優(yōu)點是:溫度轉(zhuǎn)換快，耗時少，變溫速度可達10°C / S，因而溫度轉(zhuǎn)換率和DNA擴增效率均高于第二類方案。溫度均勻性更易保證，而且對樣品管的適應(yīng)能力很強，不僅能用離心管、薄壁管，而且可做最新發(fā)展的毛細管PCR以及采用載玻片的原位PCR。硬件方面，因省去了制冷器，設(shè)備比較簡單，降低了成本也容易控制和維修，提高了儀器的可靠性。由于PCR的退火溫度通常都在42°C，因而該方案無制冷器的缺點并不影響DNA擴增的效果和質(zhì)量。該方案的不足之處是由于溫度升降太快，可能影響聚合酶的活性。此外由于省去制冷器，使溫度下限受到環(huán)境溫度的限制，溫度程序的靈活性小，儀器體積較大。第二類方案的優(yōu)點是由于引進了制冷器而易于變溫，從而增加了溫度變換程序的靈活性，儀器體積也比較小。主要缺點是由于在一個容器中進行溫度循環(huán)，溫度轉(zhuǎn)換率將受到限制，且溫度均勻性和運行效率均不如第一方案。在硬件方面，如果采取壓縮機制冷將增加體積和成本；采用半導(dǎo)體制冷器(帕爾帖元件)，則由于熱應(yīng)力作用于帕爾帖元件焊接面，經(jīng)多次循環(huán)將導(dǎo)致焊接面開裂而損壞。新近發(fā)展的空氣浴、流體冷卻、毛細管快速PCR儀，由于采用毛細管作樣品管，利用高速氣流強制冷卻，在提高溫度轉(zhuǎn)換率和溫度均勻性方面提出了新的措施。
【實用新型內(nèi)容】
[0004]本實用新型旨在提供一種毛細管基因擴增系統(tǒng)，解決目前基因擴增儀中存在的聚合酶的活性差，溫度均勻性和運行效率差，儀器體積大，儀器內(nèi)設(shè)置較復(fù)雜，進而導(dǎo)致整個儀器制作成本高等問題。
[0005]為了解決上述問題，本實用新型提供了一種毛細管基因擴增系統(tǒng)，其特征在于:包括擴增混合液槽、蠕動泵、循環(huán)變溫槽、毛細管、激光誘導(dǎo)熒光檢測器，所述的擴增混合液槽通過管道與蠕動泵入口相連，蠕動泵出口與毛細管相連，所述的毛細管呈環(huán)形排布在循環(huán)變溫槽中，所述的循環(huán)變溫槽包括三個恒溫槽，所述的毛細管穿過循環(huán)變溫槽后與激光誘導(dǎo)熒光檢測器相連。
[0006]優(yōu)選的，所述的毛細管直徑為50-200 μ m。
[0007]優(yōu)選的，所述的毛細管依次穿過循環(huán)變溫槽中三個恒溫槽的順序為溫96°C恒溫槽、60°C恒溫槽、72°C恒溫槽，最后從72V恒溫槽出來。
[0008]本實用新型的有益效果在于:提供一種毛細管基因擴增系統(tǒng)，結(jié)構(gòu)簡單，使用方便，由于毛細管在不同的溫度箱中穿過，毛細管中的乳液在其中緩慢變溫，提高了聚合酶的活性，而且溫度均勻，運行效率高，儀器體積小，整個儀器制作成本低，維修方便。
【附圖說明】
[0009]圖1為本實用新型的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0010]其中:1.擴增混合液槽；2.蠕動泵；3.循環(huán)變溫槽；4.毛細管；5.激光誘導(dǎo)熒光檢測器；31.96°C恒溫槽；32.60°C恒溫槽；33.72°C恒溫槽。
【具體實施方式】
[0011]下面結(jié)合附圖對本實用新型做進一步的說明。
[0012]如圖1所示:本實用新型提供了一種毛細管基因擴增系統(tǒng)，其特征在于:包括擴增混合液槽1、蠕動泵2、循環(huán)變溫槽3、毛細管4、激光誘導(dǎo)熒光檢測器5，所述的擴增混合液槽I通過管道與蠕動泵2入口相連，蠕動泵2出口與毛細管4相連，所述的毛細管4呈環(huán)形排布在循環(huán)變溫槽3中，所述的循環(huán)變溫槽3包括三個恒溫槽，即96°C恒溫槽31，60°C恒溫槽32，72°C恒溫槽33，所述的毛細管4穿過循環(huán)變溫槽3后與激光誘導(dǎo)熒光檢測器5相連。
[0013]優(yōu)選的，所述的毛細管3直徑為50-200 μ m。
[0014]優(yōu)選的，所述的毛細管3依次穿過循環(huán)變溫槽中三個恒溫槽的順序為溫96°C恒溫槽31、60°C恒溫槽32、72°C恒溫槽33，最后從72°C恒溫槽33出來。
[0015]本實用新型的工作原理為:擴增混合液槽I中儲存處理好的樣品乳液，蠕動泵2將擴增混合液槽I中處理好的樣品乳液泵到毛細管4中，乳液在蠕動泵2的驅(qū)動下，進入到循環(huán)變溫槽3，DNA模板在960C時解聚，60°C引物退火復(fù)性，72°C在DNA聚合酶作用下的引物延伸，完成PRC擴增。由于毛細管本身直徑的限制，樣品在毛細管4中以小液滴的形式存在，每個液滴內(nèi)最多只存在一條DNA鏈，保證了擴增的完整性，毛細管4在循環(huán)變溫槽3循環(huán)30-50個循環(huán)，完成了 DNA鏈擴增，然后經(jīng)過激光誘導(dǎo)熒光檢測器5的檢測，完成基因診斷，指導(dǎo)醫(yī)師用藥，提供醫(yī)療建議。
[0016]本實用新型的有益效果在于:提供一種毛細管基因擴增系統(tǒng)，結(jié)構(gòu)簡單，使用方便，由于毛細管在不同的溫度箱中穿過，毛細管中的乳液在其中緩慢變溫，提高了聚合酶的活性，而且溫度均勻，運行效率高，儀器體積小，整個儀器制作成本低，維修方便，一個檢測周期只需要30-40分鐘。
【主權(quán)項】
1.一種毛細管基因擴增系統(tǒng)，其特征在于:包括擴增混合液槽、蠕動泵、循環(huán)變溫槽、毛細管、激光誘導(dǎo)熒光檢測器，所述的擴增混合液槽通過管道與蠕動泵入口相連，蠕動泵出口與毛細管相連，所述的毛細管呈環(huán)形排布在循環(huán)變溫槽中，所述的循環(huán)變溫槽包括三個恒溫槽，所述的毛細管穿過循環(huán)變溫槽后與激光誘導(dǎo)熒光檢測器相連。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種毛細管基因擴增系統(tǒng)，其特征在于:所述的毛細管直徑為 50-200 μ m。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種毛細管基因擴增系統(tǒng)，其特征在于:所述的毛細管依次穿過循環(huán)變溫槽中三個恒溫槽的順序為溫96 V恒溫槽、60 V恒溫槽、72 °C恒溫槽，最后從72 °C恒溫槽出來。
【專利摘要】一種毛細管基因擴增系統(tǒng)，其特征在于：包括擴增混合液槽、蠕動泵、循環(huán)變溫槽、毛細管、激光誘導(dǎo)熒光檢測器，所述的擴增混合液槽通過管道與蠕動泵入口相連，蠕動泵出口與毛細管相連，所述的毛細管呈環(huán)形排布在循環(huán)變溫槽中，所述的循環(huán)變溫槽包括三個恒溫槽，所述的毛細管穿過循環(huán)變溫槽后與激光誘導(dǎo)熒光檢測器相連。本實用新型的有益效果在于：提供一種毛細管基因擴增系統(tǒng)，結(jié)構(gòu)簡單，使用方便，由于毛細管在不同的溫度箱中穿過，毛細管中的乳液在其中緩慢變溫，提高了聚合酶的活性，而且溫度均勻，運行效率高，儀器體積小，整個儀器制作成本低，維修方便，一個檢測周期只需要30-40分鐘。
【IPC分類】C12M1-00, C12M1-34
【公開號】CN204369865
【申請?zhí)枴緾N201420809974
【發(fā)明人】孫喜元
【申請人】蘇州承美生物科技有限公司
【公開日】2015年6月3日
【申請日】2014年12月20日