玉米秸稈基質(zhì)化的熟化菌劑及應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明提供一種玉米秸稈基質(zhì)化的熟化菌劑，其活性成分為熱纖梭菌(Clostridium thermocellum)、解纖維素木聚糖單胞菌(Xylanimonas cellulosilytica)、蠟樣芽孢桿菌(Bacillus cereus)和地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)，以上四種菌的集落形成單位數(shù)目之比分別為4?5:2?3:2?3:2?3，所述菌劑的有效活菌數(shù)為109個(gè)/mL以上。本發(fā)明還提供所述熟化菌劑在玉米秸稈基質(zhì)化的腐熟發(fā)酵中的應(yīng)用。本發(fā)明的熟化菌劑對(duì)玉米秸稈的降解率高，在進(jìn)行大規(guī)模熟化發(fā)酵時(shí)，20天內(nèi)可分解秸稈的40?70％，為玉米秸稈基質(zhì)化提供了重要技術(shù)手段，在有機(jī)栽培基質(zhì)生產(chǎn)領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。
【專利說(shuō)明】
玉米秸稈基質(zhì)化的熟化菌劑及應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)廢棄物的資源化利用領(lǐng)域，具體地說(shuō)，涉及玉米秸桿基質(zhì)化的熟 化菌劑及應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 近年來(lái)，隨著工廠化育苗技術(shù)和無(wú)土栽培技術(shù)的迅速發(fā)展，對(duì)于栽培基質(zhì)的需求 量日益激增，常見的育苗栽培基質(zhì)如草炭、蛭石等資源有限，且短時(shí)間不可再生，巖棉等使 用后較難處理，易對(duì)環(huán)境造成污染，迫切需要開發(fā)新型的替代栽培基質(zhì)。我國(guó)是農(nóng)業(yè)大國(guó)， 每年產(chǎn)生大量的農(nóng)作物秸桿，尤其玉米秸桿的產(chǎn)量巨大，如果將這些玉米秸桿進(jìn)行高溫熟 化發(fā)酵，實(shí)現(xiàn)無(wú)害化處理，可以生產(chǎn)大量的商品栽培基質(zhì)，真正實(shí)現(xiàn)農(nóng)業(yè)廢棄物的資源化利 用。
[0003] 玉米秸桿含有大量的木質(zhì)纖維素成分，分解難且速度慢;作為基質(zhì)物理性狀粗糙， 密度小，孔隙大;作為栽培基質(zhì)燒根嚴(yán)重，抑制農(nóng)作物生長(zhǎng)。利用玉米秸桿生產(chǎn)有機(jī)栽培基 質(zhì)必須進(jìn)行高溫熟化發(fā)酵，旨在分解大分子物質(zhì)(木質(zhì)纖維素、糖類、淀粉、脂肪、蛋白），降 低碳氮比，消滅雜草、病原菌，以適應(yīng)作物生長(zhǎng)。熟化發(fā)酵是在微生物的作用下，將可分解的 有機(jī)物全部分解，進(jìn)入安全使用狀態(tài)，部分元素礦化成植物養(yǎng)分的過(guò)程。在熟化過(guò)程中，首 先是糖類、淀粉、脂肪、蛋白等物質(zhì)易分解物分解產(chǎn)熱的升溫階段，伴隨纖維素、半纖維素分 解而持續(xù)產(chǎn)熱的高溫發(fā)酵階段。其中纖維素和半纖維素的分解快慢和分解程度決定著熟化 的程度。近年來(lái)，菌劑在發(fā)酵過(guò)程中的應(yīng)用研究較多，但是針對(duì)栽培基質(zhì)熟化的菌劑并不 多，尤其是玉米秸桿基質(zhì)化的快速熟化菌劑方面的報(bào)道更是鳳毛麟角。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是提供一種玉米秸桿基質(zhì)化的熟化菌劑。
[0005] 本發(fā)明的另一目的是提供所述熟化菌劑在玉米秸桿基質(zhì)化的腐熟發(fā)酵中的應(yīng)用。
[0006] 為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的，本發(fā)明的一種熟化菌劑，其活性成分為熱纖梭菌 (Clostridium thermocellum)、解纖維素木聚糖單胞菌(Xylanimonas cellulosilytica)、 錯(cuò)樣芽抱桿菌(Bacillus cereus)和地衣芽抱桿菌(Bacillus licheniformis)。以上四種 菌的CFU(集落形成單位數(shù)目）之比分別為4-5: 2-3: 2-3: 2-3(優(yōu)選4:2:2:2)，所述菌劑的有 效活菌數(shù)為1〇9個(gè)/mL以上。
[0007] 優(yōu)選地，其活性成分為保藏號(hào)DSM No. 1237的熱纖梭菌、保藏號(hào)DSM No. 15894的解 纖維素木聚糖單胞菌、保藏號(hào)ACCC No.03315的蠟樣芽孢桿菌和保藏號(hào)ACCC No.01958的地 衣牙抱桿囷。
[0008] 其中，所述的熱纖梭菌為厭氧細(xì)菌，具有纖維素酶活高、可快速分解農(nóng)業(yè)廢棄物中 的纖維素和半纖維素，該菌種保藏于德國(guó)微生物菌種保藏中心（DSMZ)，保藏號(hào)為DSM No. 1237;解纖維素木聚糖單胞菌為好養(yǎng)細(xì)菌，可分解纖維素和半纖維素成分，該菌種保藏 于德國(guó)微生物菌種保藏中心，保藏號(hào)為DSM No. 15894;蠟樣芽孢桿菌為好氧細(xì)菌，具有產(chǎn)生 纖維素酶的特性，該菌種保藏于中國(guó)農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心(ACCC)，保藏號(hào)為ACCC No. 03315;地衣芽孢桿菌為好氧細(xì)菌，具有纖維素分解功能，該菌種保藏于中國(guó)農(nóng)業(yè)微生物 菌種保藏管理中心，保藏號(hào)為ACCC No.01958。以上四種菌種可通過(guò)相應(yīng)的菌種保藏機(jī)構(gòu)購(gòu) 買獲得。
[0009]優(yōu)選地，本發(fā)明的熟化菌劑中還包括吸附載體，所述活性成份與吸附載體的比例 關(guān)系為1CFU: (1 X 10-6~1 X 10-5) g吸附載體，優(yōu)選1CFU: 5 X 10-6g吸附載體。
[0010]更優(yōu)選地，所述吸附載體由40-60目（優(yōu)選40目）的麥飯石和玉米秸桿粉按2-4:6-8 (優(yōu)選2:8)的重量比組成。
[0011]本發(fā)明還提供所述熟化菌劑的制備方法，包括以下步驟：
[0012] ⑴種子液的制備：
[0013] 將熱纖梭菌接種于蛋白胨纖維素改良培養(yǎng)基中，在50°C條件下靜止培養(yǎng)2d，收集 發(fā)酵液作為種子液；
[0014] 將解纖維素木聚糖單胞菌接種于蛋白胨纖維素改良培養(yǎng)基中，在50°C條件下靜止 培養(yǎng)2d，收集發(fā)酵液作為種子液；
[0015] 將蠟樣芽孢桿菌接種于蛋白胨纖維素改良培養(yǎng)基中，在50°C條件下靜止培養(yǎng)ld， 收集發(fā)酵液作為種子液；
[0016] 將地衣芽孢桿菌接種于蛋白胨纖維素改良培養(yǎng)基中，在50°C條件下靜止培養(yǎng)ld， 收集發(fā)酵液作為種子液；
[0017] (2)菌種的擴(kuò)大培養(yǎng)：
[0018] 將步驟（1)中所得各種子液分別接種于蛋白胨纖維素改良培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度 為50°C的發(fā)酵罐中靜止逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)，擴(kuò)大過(guò)程按5%~10%的體積比轉(zhuǎn)接，當(dāng)發(fā)酵液中的 有效活菌數(shù)達(dá)到1〇 9個(gè)/mL時(shí)終止培養(yǎng)；
[0019] ⑶熟化菌劑的制備：
[0020] 將步驟(2)中所得各發(fā)酵液按比例混合，然后向其中添加吸附載體混勻，即得熟化 菌劑。
[0021] 步驟（1)和(2)中所用的蛋白胨纖維素改良培養(yǎng)基的配制方法如下：將蛋白胨5g、 酵母提取物18、恥(：158、1(2冊(cè)〇4 18、]\%3〇4.7!1200.358和〇3〇)338溶解在比水中，滅菌即得。
[0022] 本發(fā)明還提供所述熟化菌劑在纖維素及半纖維素分解中的應(yīng)用。
[0023] 本發(fā)明還提供所述熟化菌劑在玉米秸桿基質(zhì)化的腐熟發(fā)酵中的應(yīng)用。
[0024]本發(fā)明還提供一種栽培基質(zhì)的制備方法，將玉米秸桿、尿素、碳酸鈣和水混合，添 加適量所述熟化菌劑，混勻后堆制進(jìn)行腐熟發(fā)酵，發(fā)酵周期為15-25天(優(yōu)選20天），所得發(fā) 酵產(chǎn)物即作為栽培基質(zhì)。
[0025]前述的方法，將玉米秸桿、尿素和碳酸鈣按98:1:0.1的質(zhì)量比混合，向其中添加玉 米秸桿、尿素和碳酸鈣總重55-60% (優(yōu)選60%)的水，所得熟化發(fā)酵原料與熟化菌劑按100: 0.5-1(優(yōu)選100:0.5)的質(zhì)量比混勻，堆成寬1-3111、高1-2111、長(zhǎng)2-100111(優(yōu)選寬3111、高1.3111、長(zhǎng) 5m)的長(zhǎng)方體進(jìn)行腐熟發(fā)酵，發(fā)酵周期為20天，發(fā)酵過(guò)程中當(dāng)堆體溫度超過(guò)50°C時(shí)，每天翻 堆一次，直至發(fā)酵完成。
[0026] 本發(fā)明還提供由上述方法制備的栽培基質(zhì)。
[0027] 本發(fā)明進(jìn)一步提供所述栽培基質(zhì)在植物無(wú)土栽培中的應(yīng)用。所述植物包括水稻。
[0028] 本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)：
[0029] ( - )本發(fā)明提供的玉米秸桿基質(zhì)化的熟化菌劑，纖維素和半纖維素酶活高，可在 玉米秸桿熟化發(fā)酵的初期有效分解纖維素和半纖維素成分，從而快速破壞堅(jiān)硬的木質(zhì)纖維 素結(jié)構(gòu)，達(dá)到松散秸桿結(jié)構(gòu)的作用，之后進(jìn)入纖維素、半纖維素的同步高效熟化階段。
[0030] (二)本發(fā)明的熟化菌劑為細(xì)菌微好氧復(fù)合菌系，可在微好氧的熟化發(fā)酵過(guò)程中， 相對(duì)好氧的菌株解纖維素木聚糖單胞菌、蠟樣芽孢桿菌及地衣芽孢桿菌先行分解纖維素和 半纖維素的同時(shí)消耗局部氧氣，創(chuàng)造局部厭氧，為厭氧纖維素分解菌-熱纖梭菌創(chuàng)造分解環(huán) 境，進(jìn)一步加快纖維素和半纖維素的分解，促進(jìn)原料整體的熟化進(jìn)度。
[0031] (三)本發(fā)明的熟化菌劑對(duì)玉米秸桿的降解率高，在進(jìn)行大規(guī)模熟化發(fā)酵時(shí)，20天 內(nèi)可分解猜桿的40-70 %。
[0032] (四）本發(fā)明的熟化菌劑突破了由純化菌及其分解酶無(wú)法高效分解天然纖維素的 局限，為玉米秸桿基質(zhì)化提供了重要技術(shù)手段，在有機(jī)栽培基質(zhì)生產(chǎn)領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用 前景。
【具體實(shí)施方式】
[0033]以下實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明，但不用來(lái)限制本發(fā)明的范圍。若未特別指明，實(shí)施例 中所用的技術(shù)手段為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的常規(guī)手段，所用原料均為市售商品。
[0034]以下實(shí)施例中所用蛋白胨纖維素(PCS)改良培養(yǎng)基的配制方法如下:將蛋白胨5g、 酵母提取物18、恥(：158、1(2冊(cè)〇4 18、]\%3〇4*7!1200.358和〇3〇)338溶解在比水中。121°(：蒸汽 滅菌15分鐘。
[0035]實(shí)施例1-3玉米秸桿基質(zhì)化的熟化菌劑的制備
[0036] 實(shí)施例1-3中制備的熟化菌劑，其活性成分為熱纖梭菌（Clostridium thermocellum)保藏號(hào)DSM No . 1237、解纖維素木聚糖單胞菌（Xylanimonas cellulosilytica)保藏號(hào)DSM No · 15894、錯(cuò)樣芽抱桿菌（Bacillus cereus)保藏號(hào)ACCC Ν〇·03315和地衣芽抱桿菌(Bacillus licheniformis)保藏號(hào)ACCC Ν〇·01958。
[0037] 1、種子液的制備：
[0038]將熱纖梭菌保藏號(hào)DSM No. 1237接種于蛋白胨纖維素(PCS)改良培養(yǎng)基中，在50°C 條件下靜止培養(yǎng)2d，收集發(fā)酵液作為種子液；
[0039]將解纖維素木聚糖單胞菌保藏號(hào)DSM No. 15894接種于蛋白胨纖維素改良培養(yǎng)基 中，在50°C條件下靜止培養(yǎng)2d，收集發(fā)酵液作為種子液；
[0040]將蠟樣芽孢桿菌保藏號(hào)ACCC No.03315接種于蛋白胨纖維素改良培養(yǎng)基中，在50 °c條件下靜止培養(yǎng)Id，收集發(fā)酵液作為種子液；
[0041 ]將地衣芽孢桿菌保藏號(hào)ACCC No.01958接種于蛋白胨纖維素改良培養(yǎng)基中，在50 °(：條件下靜止培養(yǎng)ld，收集發(fā)酵液作為種子液。
[0042] 2、菌種的擴(kuò)大培養(yǎng)：
[0043] 將步驟1中所得各種子液分別接種于蛋白胨纖維素改良培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為 50 °C的發(fā)酵罐中靜止逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)，擴(kuò)大過(guò)程按5%~10%的體積比轉(zhuǎn)接，當(dāng)發(fā)酵液中的有 效活菌數(shù)達(dá)到1〇9個(gè)/mL時(shí)終止培養(yǎng)。
[0044] 3、熟化菌劑的制備：
[0045] 將步驟2中所得的熱纖梭菌發(fā)酵液、解纖維素木聚糖單胞菌發(fā)酵液、蠟樣芽孢桿菌 發(fā)酵液和地衣芽孢桿菌發(fā)酵液按CFU之比4:2:2:2 (實(shí)施例1，實(shí)施例2中四種菌的CFU之比為 5: 2: 3: 2，實(shí)施例3中四種菌的CFU之比為4:3: 2:3)混合，然后向其中添加吸附載體混勻，即 得熟化菌劑。其中，活性成份與吸附載體的比例關(guān)系為lCFU:5Xl(T6g吸附載體。所述吸附載 體由40目的麥飯石和玉米秸桿粉按2:8的重量比組成。
[0046] 實(shí)施例4熟化菌劑在玉米秸桿基質(zhì)化的腐熟發(fā)酵中的應(yīng)用
[0047]實(shí)驗(yàn)組1-實(shí)驗(yàn)組3:將玉米秸桿、尿素和碳酸鈣按98:1:0.1的質(zhì)量比混合，向其中 添加玉米秸桿、尿素和碳酸鈣總重60%的水，所得熟化發(fā)酵原料分別與實(shí)施例1-3(實(shí)施例 1、實(shí)施例2和實(shí)施例3分別對(duì)應(yīng)于實(shí)驗(yàn)組1、實(shí)驗(yàn)組2和實(shí)驗(yàn)組3)制備的熟化菌劑按100:0.5 的質(zhì)量比混勻，堆成寬3m、高1.3m、長(zhǎng)5m的長(zhǎng)方體進(jìn)行腐熟發(fā)酵，發(fā)酵周期為20天，發(fā)酵過(guò)程 中當(dāng)堆體溫度超過(guò)50 °C時(shí)，每天翻堆一次，直至發(fā)酵完成。
[0048]對(duì)照組：不添加實(shí)施例1-3制備的熟化菌劑，直接將熟化發(fā)酵原料堆成寬3m、高 1.3m、長(zhǎng)5m的長(zhǎng)方體進(jìn)行腐熟發(fā)酵。發(fā)酵條件同上。
[0049] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果，施用菌劑后7天，玉米秸桿的纖維素分解率達(dá)到10.5%，半纖維素分解 率達(dá)到13.0%，結(jié)構(gòu)有松散跡象，之后進(jìn)入纖維素和半纖維素的旺盛分解階段。施用20天 后，玉米秸桿的分解率達(dá)40 %以上。
[0050] 發(fā)酵20天后，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組發(fā)酵產(chǎn)物主要參數(shù)比較結(jié)果見表1。
[0051]表1發(fā)酵產(chǎn)物主要參數(shù)比較結(jié)果
[0052]
[0053]實(shí)施例5無(wú)土栽培基質(zhì)在水稻育苗中的應(yīng)用
[0054]將實(shí)施例4中獲得的發(fā)酵產(chǎn)物作為無(wú)土栽培基質(zhì)，用于水稻育苗。
[0055] 實(shí)驗(yàn)組1-3:將實(shí)施例4中獲得的實(shí)驗(yàn)組的基質(zhì)，取總干重約300g，均勻鋪于長(zhǎng)寬高 60 X 30 X 4cm的專用薄塑料盤中，基質(zhì)厚度約3cm，輕度鎮(zhèn)壓后饒透pH5.5的硫酸水，每盤播 種l〇〇g(干重計(jì))發(fā)芽水稻種子，覆表土 0.5cm厚，溫室育苗30天，溫度模擬東北春季條件，白 天25°C，夜間10-15Γ。實(shí)驗(yàn)設(shè)置3個(gè)重復(fù)，并于30天后測(cè)定水稻秧苗的生長(zhǎng)狀況。
[0056] 對(duì)照組:參照上述實(shí)驗(yàn)組的操作方法，僅將基質(zhì)替換成實(shí)施例4對(duì)照組中獲得的基 質(zhì)。
[0057]實(shí)驗(yàn)組1-3和對(duì)照組水稻秧苗的生長(zhǎng)狀況見表2。
[0058]表2水稻秧苗的生長(zhǎng)狀況
[0059]

[0060]雖然，上文中已經(jīng)用一般性說(shuō)明及具體實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明作了詳盡的描述，但在 本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對(duì)之作一些修改或改進(jìn)，這對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。因 此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進(jìn)，均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1 · 一種熟化菌劑，其特征在于，其活性成分為熱纖梭菌(Clostridium thermocellum)、 解纖維素木聚糖單胞菌（Xylanimonas cellulosilytica)、錯(cuò)樣芽孢桿菌（Baci 1 lus cereus)和地衣芽抱桿菌(Bacillus licheniformis)，以上四種菌的CFU之比分別為4-5:2-3:2-3:2-3，所述菌劑的有效活菌數(shù)為109個(gè)/mL以上。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的熟化菌劑，其特征在于，其活性成分為保藏號(hào)DSM No. 1237的 熱纖梭菌、保藏號(hào)DSM No. 15894的解纖維素木聚糖單胞菌、保藏號(hào)ACCC No.03315的蠟樣芽 孢桿菌和保藏號(hào)ACCC No.01958的地衣芽孢桿菌，優(yōu)選以上四種菌的CFU之比分別為4:2:2: 2〇3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的熟化菌劑，其特征在于，所述菌劑中還包括吸附載體，所述 活性成份與吸附載體的比例關(guān)系為1CFU: (1 X 10-6~1 X l(T5)g吸附載體，優(yōu)選1CFU:5 X 10一 6g吸附載體。4. 根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的熟化菌劑，其特征在于，所述吸附載體由40-60目麥 飯石和玉米猜桿粉按2_4:6_8的重量比組成。5. 權(quán)利要求3或4所述熟化菌劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： (1) 種子液的制備： 將熱纖梭菌接種于蛋白胨纖維素改良培養(yǎng)基中，在50°C條件下靜止培養(yǎng)2d，收集發(fā)酵 液作為種子液； 將解纖維素木聚糖單胞菌接種于蛋白胨纖維素改良培養(yǎng)基中，在50°C條件下靜止培養(yǎng) 2d，收集發(fā)酵液作為種子液； 將蠟樣芽孢桿菌接種于蛋白胨纖維素改良培養(yǎng)基中，在50°C條件下靜止培養(yǎng)ld，收集 發(fā)酵液作為種子液； 將地衣芽孢桿菌接種于蛋白胨纖維素改良培養(yǎng)基中，在50°C條件下靜止培養(yǎng)ld，收集 發(fā)酵液作為種子液； (2) 菌種的擴(kuò)大培養(yǎng)： 將步驟（1)中所得各種子液分別接種于蛋白胨纖維素改良培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為50 °(：的發(fā)酵罐中靜止逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)，擴(kuò)大過(guò)程按5%~10%的體積比轉(zhuǎn)接，當(dāng)發(fā)酵液中的有效 活菌數(shù)達(dá)到1〇9個(gè)/mL時(shí)終止培養(yǎng)； (3) 熟化菌劑的制備： 將步驟（2)中所得各發(fā)酵液按比例混合，然后向其中添加吸附載體混勻，即得熟化菌 劑； 步驟（1)和（2)中所用的蛋白胨纖維素改良培養(yǎng)基的配制方法如下：將蛋白胨5g、酵母 提取物lg、NaCl 5g、K2HP〇4 lg、MgS〇4.7H20 0.35g和CaC03 3g溶解在 1L水中，滅菌即得。6. 權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述熟化菌劑在纖維素及半纖維素分解中的應(yīng)用。7. 權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述熟化菌劑在玉米秸桿基質(zhì)化的腐熟發(fā)酵中的應(yīng)用。8. -種栽培基質(zhì)的制備方法，其特征在于，將玉米秸桿、尿素、碳酸鈣和水混合，添加適 量權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述熟化菌劑，混勻后堆制進(jìn)行腐熟發(fā)酵，發(fā)酵周期為15-25天，所得 發(fā)酵產(chǎn)物即作為栽培基質(zhì)。9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，將玉米秸桿、尿素和碳酸鈣按98:1:0.1的 質(zhì)量比混合，向其中添加玉米秸桿、尿素和碳酸鈣總重55-60%的水，所得熟化發(fā)酵原料與 熟化菌劑按100:0.5-1的質(zhì)量比混勻，堆成寬1-3111、高1-2111、長(zhǎng)2-100111的長(zhǎng)方體進(jìn)行腐熟發(fā) 酵，發(fā)酵周期為20天，發(fā)酵過(guò)程中當(dāng)堆體溫度超過(guò)50°C時(shí)，每天翻堆一次，直至發(fā)酵完成。10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述方法制備的栽培基質(zhì)。
【文檔編號(hào)】C12N1/20GK106085909SQ201610437451
【公開日】2016年11月9日
【申請(qǐng)日】2016年6月17日
【發(fā)明人】方春光
【申請(qǐng)人】大慶市春田綠土農(nóng)業(yè)科技有限公司