一種從黑果枸杞中制備矮牽牛素的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于植物的有效成分的分離提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種從黑果枸杞中制備矮牽牛素的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]黑果枸t己(Lycium ruthenicum Murr.)系前科枸紀(jì)屬植物，是西北干旱地區(qū)一種特有的多年生灌木野生植物。其耐干旱，生長于鹽堿土荒地、沙地或路旁，可作為水土保持的灌木植物。其果實(shí)味甘、性平、清心熱，據(jù)《四部醫(yī)典》中記載，藏醫(yī)將其用于治療心熱病、心臟病、月經(jīng)不調(diào)、停經(jīng)等病癥；民間用作滋補(bǔ)強(qiáng)壯、明目及降壓藥?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明黑果枸杞中的多糖具有抗疲勞、降血糖等藥理活性；黃酮類化合物具有抗氧化及其他營養(yǎng)保健作用等；原花青素具有抗氧化、抑制腫瘤等功能；花色苷具有抗氧化、抗突變、抑制流感病毒和皰疹病毒等活性。
[0003]黑果枸杞色素中主要為?；腻\葵色素-3，5_ 二葡萄糖苷。經(jīng)紫外分光光度法、質(zhì)譜和文獻(xiàn)報(bào)道綜合分析鑒定出黑果枸杞中含有8種花色苷，分別是:飛燕草素-3-0-葡萄糖苷、芍藥素-3-0-葡萄糖苷、矮牽牛素-5-0-葡萄糖苷、矮牽牛素-3-0-(
6-0-對香豆酰)蕓香糖苷-5-0-葡萄糖苷、錦葵色素-3-0-( 6-0-對香豆酰-3-0-乙酰)-5-0-二葡萄糖苷、飛燕草素-3-0-( 6-0-乙酰)葡萄糖苷、錦葵色素-3-0-( 6-0-對香豆酰)葡萄糖苷和錦葵色素_3，5- 二葡萄糖苷，其含量依次為0.86%、1.17%、2.38%、11.79%、68.35%、0.63%、5.24%、9.58%?；ㄉ帐呛诠坭街兄匾慕M成成分。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種從黑果枸杞中制備矮牽牛素的方法，為黑果枸杞矮牽牛素的進(jìn)一步深化應(yīng)用，提供了一條有效制備途徑。
[0005]為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)解決方案為一種從黑果枸杞中制備矮牽牛素的方法，其中包括以下步驟:
(1)將干燥后的黑枸杞粉碎60?80目粉末，用丙酮減壓加熱回流提取至少兩次，然后濃縮得浸膏；每次提取時(shí)間至少90min，所述的丙酮用量至少是原料的4?8倍，提取時(shí)，真空度0.7?0.1MPa,溫度50?80°C。濃縮條件:真空度范圍0.7?0.1MPa,溫度不高于75 °C，濃縮至比重為1.0 ;
(2)將濃縮浸膏用酸水解或者酶水解，水解完畢后，傾倒上清液，收集沉淀膏；酸法水解工藝條件為:鹽酸濃度1-5 mol/L，水解溫度70-95°C，水解時(shí)間120-240 min ；
酶法水解工藝條件為:pH 5.5-6.5，酶解溫度35-55°C，酶解時(shí)間90 min，加酶量為濃縮浸膏重量的1_3%，酶為具有水解糖苷鍵功能的纖維素酶；
(3)將沉淀用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯和沉淀的體積比為1.5-3: 1，萃取1-4次；
(4)將乙酸乙酯萃取液濃縮得到的浸膏，置于超臨界萃取儀的萃取釜中使用超臨界CO2作為溶劑，用無水乙醇作為夾帶劑，得到矮牽牛素高純度萃取物。萃取壓力控制在30?60MPa，溫度控制在30?50°C，COf流量控制在10?20L/h，萃取時(shí)間控制在80?lOOmin。
[0006]本發(fā)明方法的工藝路線合理，產(chǎn)品收率高，提供了一條可行的能產(chǎn)生經(jīng)濟(jì)效益的途徑。
【具體實(shí)施方式】
[0007]下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明，但這些實(shí)施例僅限于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0008]實(shí)施例1
本發(fā)明含一種從黑果枸杞中制備矮牽牛素的方法實(shí)施例，其制備步驟為:
(1)取干燥的黑枸杞原料200g，破碎至60目后投入提取罐中；加入丙酮800ml，減壓，加熱至75°C，回流提取兩次，每次60min，合并兩次提取液濃縮得浸膏；
(2)將濃縮浸膏用酸水解，水解完畢后，傾倒上清液，收集沉淀；酸法水解工藝條件為:鹽酸濃度2 mol/L，水解溫度85°C，水解時(shí)間180 min ；
(3)將沉淀用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯和濃縮液的體積比為2.5: 1，萃取2次；
(4)將乙酸乙酯萃取液濃縮得到的浸膏，置于超臨界萃取儀的萃取釜中使用超臨界CO2作為溶劑，用無水乙醇作為夾帶劑，得到矮牽牛素高純度萃取物。萃取壓力控制在35MPa，溫度控制在40°C，C(V流量控制在10L/h，萃取時(shí)間控制在lOOmin。真空干燥，得到矮牽牛素提取物25.72mgo
[0009]經(jīng)檢測，Waters高效液相色譜儀，色譜柱C18(4.6mmX 250mm，5um)，流動(dòng)相為0.2%甲酸溶液:乙腈=98:2 ;檢測波長為525nm。矮牽牛素含量為72.2%。
[0010]實(shí)施例2
本發(fā)明含一種從黑果枸杞中制備矮牽牛素的方法實(shí)施例，其制備步驟為:
(1)取干燥的黑枸杞原料200g，破碎至60目后投入提取罐中；加入丙酮800ml，減壓，加熱至75°C，回流提取兩次，每次60min，合并兩次提取液濃縮得浸膏；
(2)將濃縮浸膏用酶水解，水解完畢后，傾倒上清液，收集沉淀；酶法水解工藝條件為:pH 6，酶解溫度50°C，酶解時(shí)間90 min，加酶量為濃縮浸膏重量的3%，酶為具有水解糖苷鍵功能的纖維素酶，選用寧夏夏盛實(shí)業(yè)集團(tuán)有限公司生產(chǎn)的纖維素酶。
[0011](3)將沉淀用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯和沉淀膏的體積比為2.5: 1，萃取2次；
(4)將乙酸乙酯萃取液濃縮得到的浸膏，置于超臨界萃取儀的萃取釜中使用超臨界CO2
作為溶劑，用無水乙醇作為夾帶劑，得到矮牽牛素高純度萃取物。萃取壓力控制在35MPa，溫度控制在40°C，C(V流量控制在10L/h，萃取時(shí)間控制在lOOmin。真空干燥，得到矮牽牛素21.32mg0
[0012]經(jīng)檢測，矮牽牛素含量為73.6%。
[0013]以上所述實(shí)施例僅僅是對本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式進(jìn)行描述，并非對本發(fā)明的范圍進(jìn)行限定，在不脫離本發(fā)明設(shè)計(jì)精神的前提下，本領(lǐng)域普通工程技術(shù)人員對本發(fā)明的技術(shù)方案作出的各種變形和改進(jìn)，均應(yīng)落入本發(fā)明的權(quán)利要求書確定的保護(hù)范圍內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種從黑果枸杞中制備矮牽牛素的方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)將干燥后的黑果枸杞粉碎，用丙酮減壓加熱回流提取至少兩次，然后濃縮得浸膏； (2)將濃縮浸膏用酸水解或者酶水解，水解完畢后，傾倒上清液，收集沉淀； (3)將沉淀用乙酸乙酯萃??； (4)將乙酸乙酯萃取液濃縮得到的浸膏，置于超臨界萃取儀的萃取釜中使用超臨界CO2作為溶劑，用無水乙醇作為夾帶劑，得到矮牽牛素高純度萃取物。2.如權(quán)利要求1所述的一種從黑果枸杞中制備矮牽牛素的方法，其特征在于，所述步驟(I)中將黑果枸杞粉碎為60?80目粉末。3.如權(quán)利要求1所述的一種從黑果枸杞中制備矮牽牛素的方法，其特征在于，所述步驟(I)中每次提取時(shí)間至少90min，所述的丙酮用量至少是原料的4?8倍，提取時(shí)，真空度0.7 ?0.1MPa,溫度 50 ?80Γ。4.如權(quán)利要求1所述的一種從黑果枸杞中制備矮牽牛素的方法，其特征在于，所述步驟(I)中的濃縮條件:真空度范圍0.7?0.1MPa，溫度不高于75°C，濃縮至比重為1.0。5.如權(quán)利要求1所述的一種從黑果枸杞中制備矮牽牛素的方法，其特征在于，所述步驟(2)酸法水解工藝條件為:鹽酸濃度1-5 mol/L，水解溫度70_95°C，水解時(shí)間120-240min ； 酶法水解工藝條件為:pH 5.5-6.5，酶解溫度35-55°C，酶解時(shí)間90 min，加酶量為濃縮浸膏重量的1_3%，酶為具有水解糖苷鍵功能的纖維素酶。6.如權(quán)利要求1所述的一種從黑果枸杞中制備矮牽牛素的方法，其特征在于，所述步驟(3)用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯和沉淀的體積比為1.5-3: 1，萃取1-4次。7.如權(quán)利要求1所述的一種從黑果枸杞中制備矮牽牛素的方法，其特征在于，所述步驟(4)超臨界萃取，萃取壓力控制在30?60MPa，溫度控制在30?50°C，COf流量控制在10?20L/h，萃取時(shí)間控制在80?lOOmin。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種從黑果枸杞中制備矮牽牛素的方法，得到矮牽牛素含量高于70%的黑果枸杞萃取物，屬于植物的有效成分提取分離技術(shù)領(lǐng)域。其特征在于，包括以下步驟：（1）將干燥后的黑果枸杞粉碎，用丙酮減壓加熱回流提取至少兩次，然后濃縮得浸膏；（2）將濃縮浸膏用酸水解或者酶水解，水解完畢后，傾倒上清液，收集沉淀；（3）將沉淀用乙酸乙酯萃?。唬?）將乙酸乙酯萃取液濃縮得到的浸膏，置于超臨界萃取儀的萃取釜中使用超臨界CO2作為溶劑，用無水乙醇作為夾帶劑，得到矮牽牛素高純度萃取物。本發(fā)明提取所得率高，工藝簡單，適合工業(yè)化應(yīng)用。
【IPC分類】C07D311/62
【公開號】CN105198852
【申請?zhí)枴緾N201510645900
【發(fā)明人】陳寶華
【申請人】青海泰柏特生物科技有限公司
【公開日】2015年12月30日
【申請日】2015年10月9日