專利名稱:黑曲霉的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及微生物技術(shù)領(lǐng)域：
，特別是涉及一種能夠轉(zhuǎn)化云南黃山藥中有效成分種類和含量的微生物菌株。
背景技術(shù)：
云南黃山藥(Dioscorea panthaica Yunnanensis)系薯蕷科、薯蕷屬植物。其有效成分為甾體皂苷類物質(zhì)，化學(xué)成分包括Progenin(A)、Dioscin、Gracillin和pesudoproto-dioscin等，而薯蕷皂苷(dioscin)是云南黃山藥中藥材的主要成分。中醫(yī)認(rèn)為黃山藥根狀莖具有活血化淤，行氣止痛之功效。現(xiàn)代藥理學(xué)研究，表明其根狀莖化學(xué)成分薯蕷皂苷(dioscin)能夠擴(kuò)張冠脈血管，改善心肌缺血，具有治療心肌缺血疾病，以及抗血小板凝聚和降血脂的作用，臨床醫(yī)學(xué)用于治療高血脂癥、心絞痛等心腦血管疾病。同時(shí)，從黃山藥根狀莖獲得的薯蕷皂苷元也是合成激素藥物的重要先導(dǎo)化合物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種分離自中國(guó)西雙版納自然保護(hù)區(qū)土壤、能夠促使云南黃山藥有效成分甾體皂苷一類物質(zhì)種類及含量發(fā)生重要變化的微生物——黑曲霉。
本發(fā)明所述的黑曲霉命名為黑曲霉Aspergillus niger YM33182，現(xiàn)保藏在國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局指定的保藏單位，保藏編號(hào)為CCTCC NO206113。
本發(fā)明所述的黑曲霉系從中國(guó)云南省西雙版納自然保護(hù)區(qū)土壤中分離獲得的?，F(xiàn)保藏在國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局專利局保藏單位保藏，保藏單位名稱中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏單位地址中國(guó)，武漢大學(xué)，郵政編碼430072。保藏日期為2006年10月31日，保藏編號(hào)為206113。
經(jīng)形態(tài)觀察、培養(yǎng)特征以及分子生物學(xué)18SrDNA基因序列分析，確定其分類學(xué)地位應(yīng)歸于半知菌類(Deuteromycotina)曲霉屬(Aspergillus link)黑曲霉群(Aspergillus niger)中的黑曲霉(Aspergillus niger V.Tiegh)。
黑曲霉YM33182在PDA培養(yǎng)基上，菌落生長(zhǎng)較快，28℃培養(yǎng)3-4天菌落直徑便可超過20mm，菌落外緣整齊，表面呈黑色，似顆粒狀，中間菌絲致密稍微凸起，反面中心呈黃色，四周呈淡黑色。其典型形態(tài)特征是分生孢子梗由足細(xì)胞發(fā)育形成，與同種典型菌株明顯區(qū)別。
以18SrDNA基因序列同源性為基礎(chǔ)構(gòu)建形成包括菌株YM34161在內(nèi)的10株相關(guān)真菌的系統(tǒng)發(fā)育樹，結(jié)果看出，黑曲霉YM33182堿基序列相似性為100％，與本屬菌種Aspergillus niger D63697無差異。參見圖5。
菌株YM33182的培養(yǎng)基培養(yǎng)特征(見圖1)①麥芽汁平板上28℃培養(yǎng)4天后，菌落直徑可達(dá)到36-40mm，7天后菌落直徑可達(dá)44-50mm。菌落外緣整齊，呈白色絨狀，中間菌絲呈深綠色、稍凸起，氣生菌絲較發(fā)達(dá)。
②PDA平板上28℃培養(yǎng)4天后，菌落直徑可達(dá)18-22mm，7天后菌落直徑可達(dá)33-38mm。菌落外緣整齊，菌絲呈黑色，細(xì)粉狀，中間菌絲致密稍微凸起，反面中心呈黃色，四周呈淡黑色。
③察氏培養(yǎng)基上28℃培養(yǎng)菌落生長(zhǎng)緩慢，培養(yǎng)4天后菌落直徑為12-16mm，7天后菌落直徑達(dá)到20-22mm。整個(gè)菌落凸起，邊緣綠色，中間內(nèi)生菌絲呈白色，氣生菌絲呈黑色，反面有褶皺，呈淺黃色。
YM33182菌株的形態(tài)特征(見圖2、3、4)①無性世代 菌絲有隔，無色，分生孢子梗由特化的厚壁膨大菌絲細(xì)胞(足細(xì)胞)生出，分生孢子梗外壁光滑，分生孢子梗兩層，頂囊球形或亞球形。分生孢子穗著生于球形頂囊，呈黑色，邊緣裂開，形成放射狀排列的圓柱體。分生孢子串生，呈球狀或圓形，光滑，暗色，分生孢子直徑約2.6-2.8μm。
②有性世代未發(fā)現(xiàn)。
YM33182菌株的分子生物學(xué)特征采用分子生物學(xué)PCR技術(shù)，DNA測(cè)序儀分析，該菌18SrDNA基因組由1861個(gè)堿基(bp)組成。同時(shí)以18SrDNA序列同源性為基礎(chǔ)，構(gòu)建的包括菌株YM33182在內(nèi)的10株相關(guān)真菌的系統(tǒng)發(fā)育樹(見圖5)。
YM33182菌株菌株發(fā)酵培養(yǎng)特征①培養(yǎng)基云南黃山藥50(％)，鮮豆渣50(％)，按重量(w/w)計(jì)，PH自然。
②培養(yǎng)溫度28℃±5℃。
③發(fā)酵時(shí)間12-15天。
④發(fā)酵培養(yǎng)特征培養(yǎng)第1天，有零星的白色菌絲點(diǎn)生長(zhǎng)。培養(yǎng)第2天，可見白色菌絲，菌絲短，發(fā)酵物結(jié)塊。培養(yǎng)第4天，菌絲呈灰白色，發(fā)酵物表面長(zhǎng)滿灰白色菌絲，但稍顯稀疏。培養(yǎng)第5天，發(fā)酵物表面呈灰白色。培養(yǎng)第6天，發(fā)酵物表面長(zhǎng)滿灰褐色菌絲，發(fā)酵物致密。培養(yǎng)第7天，發(fā)酵物緊密，布滿灰褐色菌絲。培養(yǎng)第8天，發(fā)酵物表面長(zhǎng)滿黑色菌絲，發(fā)酵物上五分之四左右部分呈黃褐色，下五分之一左右部分呈灰黑色。培養(yǎng)第9天，發(fā)酵物呈灰黑色，表面零星出現(xiàn)黃綠色孢子，發(fā)酵物致密。培養(yǎng)第10天，發(fā)酵物呈灰黑色，發(fā)酵物致密，表面長(zhǎng)滿黑色孢子。培養(yǎng)第11天，發(fā)酵物同第10天。培養(yǎng)第12天后，布滿黑色菌絲，表面大量灰黃黑色孢子，發(fā)酵物緊密。
云南黃山藥(Dioscorea panthaica Yunnanensis)系薯蕷科植物的干燥根狀莖，屬于中草藥黃山藥(Dioscorea panthaica)一類藥材，主要成分有Progenin(A)、Dioscin、Gracillin和pesudoproto-dioscin一類薯蕷皂苷藥用成分，其中Progenin(A)含量0.1-0.3％，Dioscin為1.5％-2.6％，Gracillin約0.8-1.0％，pesudoproto-dioscin0.2-0.5％，淀粉類物質(zhì)40-60％，蛋白質(zhì)、有酸類成分10-16％，其他8.0％。以云南黃山藥為發(fā)酵基質(zhì)，通過黑曲霉YM33182微生物固體發(fā)酵方式，既能改變黃山藥薯蕷皂苷有效成分的種類，形成新的天然薯蕷皂苷元成分，又可以使轉(zhuǎn)化黃山藥薯蕷皂苷藥用成分的含量發(fā)生改變。
本發(fā)明所述云南黃山藥有效成分轉(zhuǎn)化方法其工藝步驟為菌種→一級(jí)種子培養(yǎng)→二級(jí)種子培養(yǎng)→發(fā)酵基質(zhì)→發(fā)酵培養(yǎng)→烘干→黃山藥發(fā)酵產(chǎn)物→提取→黃山藥轉(zhuǎn)化提取物→分離→薯蕷皂苷。此步驟中，發(fā)酵基質(zhì)為中藥材黃山藥(Dioscorea panthaica)。本工藝適合于半知菌類的其它絲狀真菌類微生物。
上述黃山藥發(fā)酵工藝中，編號(hào)YM33182菌種的發(fā)酵條件如下(1)發(fā)酵方式固體發(fā)酵。
(2)種子培養(yǎng)一級(jí)種子培養(yǎng)采用馬鈴薯葡萄糖固體培養(yǎng)基(固體PDA)。二級(jí)種子培養(yǎng)為馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基(液體PDA)。
馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基(PDA)制備取新鮮馬鈴薯200克，去皮切成小塊，加水1升煮沸30分鐘，過濾棄馬鈴薯，濾夜加水補(bǔ)足至1升，加入葡萄糖20克，PH自然。
上述馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基中加入瓊脂15克，即為固體PDA培養(yǎng)基。
(3)發(fā)酵培養(yǎng)發(fā)酵培養(yǎng)基為銀杏提取物(25-30％)，鮮豆渣(30-35％)，麥麩(30-35％)，按重量(w/w)計(jì)。PH自然。
(4)培養(yǎng)時(shí)間菌種活化培養(yǎng)72-96小時(shí)，一級(jí)種子靜止培養(yǎng)時(shí)間72-96小時(shí)，二級(jí)種子搖床培養(yǎng)時(shí)間96-120小時(shí)，發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)間12-15天。
(5)培養(yǎng)溫度一級(jí)種子培養(yǎng)溫度28℃±2℃，二級(jí)種子搖床培養(yǎng)溫度28℃±2℃，發(fā)酵培養(yǎng)溫度為28℃±5℃。
(6)烘干發(fā)酵完畢，發(fā)酵產(chǎn)物置60℃下烘干，備用。
(7)提取發(fā)酵產(chǎn)物用70-90％乙醇萃取，經(jīng)濃縮，獲得黃山藥轉(zhuǎn)化提取物。
(8)分離黃山藥轉(zhuǎn)化提取物采用硅膠G柱層析分離，再經(jīng)凝膠(Sephadex)柱層純化，分別得到薯蕷皂苷類化合物。
本發(fā)明是通過微生物發(fā)酵途徑，以中藥材黃山藥為基質(zhì)，通過微生物轉(zhuǎn)化作用，發(fā)掘新的藥用部位，新的有效成分或新結(jié)構(gòu)(先導(dǎo)化合物)，提升黃山藥的藥用價(jià)值，以求獲得抗人類心腦血管疾病新型天然藥用成分。
菌株YM33182發(fā)酵轉(zhuǎn)化12-15天之后，與原云南黃山藥比較，其轉(zhuǎn)化后的黃山藥產(chǎn)物由β-胡蘿卜苷(Daucosterol)(I)，薯蕷皂甙元-α-L鼠李糖(1→4)-β-D葡萄糖甙(Prosapogenin B)(II)，薯蕷皂甙元[-α-L鼠李糖(1→2)]-α-L鼠李糖(1→4)-β-D葡萄糖甙(Dioscin)(III)，薯蕷皂甙元[-α-L鼠李糖(1→2)]-β-D葡萄糖(1→3)-β-D葡萄糖甙(Gracillin)(IV)等4種主體薯蕷皂苷物質(zhì)組成。原黃山藥Progenin(A)和pesudoproto-dioscin薯蕷皂苷成分降解消失，同時(shí)，轉(zhuǎn)化形成β-胡蘿卜苷(daucosterol)(I)及薯蕷皂甙元-α-L鼠李糖(1→4)-β-D葡萄糖甙(Prosapogenin B)(II)新天然產(chǎn)物，其結(jié)構(gòu)式為已知。
菌株YM33182的黃山藥轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，與原黃山藥比較，轉(zhuǎn)化產(chǎn)物薯蕷皂苷元含量發(fā)生顯著變化，即轉(zhuǎn)化產(chǎn)物中Prosapogenin B含量10％-11％、Dioscin為10％-12％、Gracillin是9％-10％、Daucosterol也達(dá)到了7％-8％。同時(shí)，云南黃山藥(Dioscorea panthaica Yunnanensis)經(jīng)編號(hào)YM33182黑曲霉發(fā)酵后，轉(zhuǎn)化產(chǎn)物薯蕷皂苷提取總含量達(dá)到了40％，最高42％。與轉(zhuǎn)化前黃山藥中藥材薯蕷皂苷總含量36％比較，轉(zhuǎn)化后薯蕷皂苷總含量提高了6個(gè)百分點(diǎn)，最高可達(dá)到8個(gè)百分點(diǎn)。由此可見，該微生物是轉(zhuǎn)化云南黃山藥中藥材薯蕷皂苷類物質(zhì)種類和含量的天然藥用微生物資源。



圖1為本發(fā)明所述的黑曲霉YM33182在麥芽汁培養(yǎng)基上的菌落圖。
圖2為本發(fā)明所述的黑曲霉YM33182菌株顯微鏡圖(×200)。
圖3為本發(fā)明所述的黑曲霉YM33182分生孢子穗電鏡圖(×1800)。
圖4為本發(fā)明所述的黑曲霉YM33182分生孢子電鏡圖(×5000)。
圖5為本發(fā)明所述的YM33182黑曲霉(Aspergillus niger V.Tiegh)18SrDNA序列同源性的系統(tǒng)發(fā)育樹。
圖6為本發(fā)明所述的黃山藥轉(zhuǎn)化前后薯蕷皂苷種類的HPLC分析圖。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例YM33182菌株的黃山藥發(fā)酵培養(yǎng)黑曲霉YM33182菌株是發(fā)酵轉(zhuǎn)化云南黃山藥(Dioscorea panthaicaYunnanensis)中藥材、提高或改變抗人類心血管疾病藥用成分的天然微生物藥源。
取YM33182(黑曲霉Aspergillus niger V.Tiegh)菌種，在無菌條件下(無菌室或超凈工作臺(tái))，用接種針挑取少許菌種，轉(zhuǎn)接于已滅菌的固體PDA(麥芽汁、察氏、馬丁氏等)培養(yǎng)基試管(15×150mm)中，置培養(yǎng)箱內(nèi)28℃±1℃活化培養(yǎng)96小時(shí)。取出活化96小時(shí)的菌種，在無菌條件下，以同樣方式接入活化好的菌種到已滅菌的一級(jí)種子固體PDA培養(yǎng)基中，在28℃±2℃下培養(yǎng)72-96小時(shí)，即為YM33182一級(jí)種子。
采用500毫升玻璃三角瓶，裝入配制好的液體PDA培養(yǎng)基100毫升，15磅滅菌30分鐘備用。取YM33182菌株一級(jí)種子，在無菌條件下，接種于裝有100毫升液體PDA培養(yǎng)基的500毫升玻璃三角瓶中，一級(jí)種子接種量為每支斜面接三個(gè)三角瓶，置28℃±2℃搖床培養(yǎng)72-96小時(shí)后，作為發(fā)酵二級(jí)種子用。
根據(jù)發(fā)酵規(guī)模大小，按發(fā)酵料重量比率，稱取黃山藥干粉(細(xì)度100-200目)50％加入50％鮮豆渣，充分拌勻，控制發(fā)酵料水分62-68％。銀杏提取物發(fā)酵料配制好后，裝入500毫升罐頭瓶中，塑料薄膜、牛皮紙封口，置滅菌鍋內(nèi)15磅滅菌60分鐘后，取出待冷卻至30℃，接入液體二級(jí)種子，二級(jí)種子接用量為2-5％(v/w)。搖勻，放置28℃±5℃下，靜止發(fā)酵12-15天。在發(fā)酵期間，控制發(fā)酵室保濕不低70-80％相對(duì)濕度，第2天分別進(jìn)行搖瓶一次，并注意檢查有無染菌現(xiàn)象。
發(fā)酵完畢，發(fā)酵產(chǎn)物置60℃下烘干，得到黃山藥發(fā)酵產(chǎn)物。再經(jīng)化學(xué)提取、分離技術(shù)處理，即可得到轉(zhuǎn)化黃山藥薯蕷皂苷化合物。
本發(fā)明所述的黑曲霉(Aspergillus niger V.Tiegh)YM33182 18SrDNA基因組由1861個(gè)堿基(bp)組成，其系列如下1 GCTATGCATC AACGCGTTTG GGAGCTCTCC CATATGGTCG ACCTGCAGGC GGCCGCACTA61 GTGATTGTAG TCATATGCTT GTCTCAAAGA TTAAGCCATG CATGTCTAAG TATAAGCACT121 TTATACTGTG AAACTGCGAA TGGCTCATTA AATCAGTTAT CGTTTATTTG ATAGTACCTT181 ACTACATGGA TACCTGTGGT AATTCTAGAG CTAATACATG CTGAAAACCT CGACTTCGGA241 AGGGGTGTAT TTATTAGATA AAAAACCAAT GCCCTTCGGG GCTCCTTGGT GAATCATAAT301 AACTTAACGA ATCGCATGGC CTTGCGCCGG CGATGGTTCA TTCAAATTTC TGCCCTATCA361 ACTTTCGATG GTAGGATAGT GGCCTACCAT GGTGGCAACG GGTAACGGGG AATTAGGGTT421 CGATTCCGGA GAGGGAGCCT GAGAAACGGC TACCACATCC AAGGAAGGCA GCAGGCGCGC481 AAATTACCCA ATCCCGACAC GGGGAGGTAG TGACAATAAA TACTGATACG GGGCTCTTTT541 GGGTCTCGTA ATTGGAATGA GTACAATCTA AATCCCTTAA CGAGGAACAA TTGGAGGGCA601 AGTCTGGTGC CAGCAGCCGC GGTAATTCCA GCTCCAATAG CGTATATTAA AGTTGTTGCA661 GTTAAAAAGC TCGTAGTTGA ACCTTGGGTC TGGCTGGCCG GTCCGCCTCA CCGCGAGTAC721 TGGTCCGGCT GGACCTTTCC TTCTGGGGAA TCTCATGGCC TTCACTGGCT GTGGGGGGAA781 CCAGGACTTT TACTGTGAAA AAATTAGAGT GTTCAAAGCA GGCCTTTGCT CGAATACATT841 AGCATGGAAT AATAGAATAG GACGTGCGGT TCTATTTTGT TGGTTTCTAG GACCGCCGTA901 ATGATTAATA GGGATAGTCG GGGGCGTCAG TATTCAGCTG TCAGAGGTGA AATTCTTGGA961 TTTGCTGAAG ACTAACTACT GCGAAAGCAT TCGCCAAGGA ATGTTTTCAT TAATCAGGGA1021 ACGAAAGTTA GGGGATCGAA GACGATCAGA TACCGTCGTA GTCTTAACCA TAAACTATGC1081 CGACTAGGGA TCGGACGGTG TTTCTATTAT GACCCGTTCG GCACCTTACG AGAAATCAAA1141 GTTTTTGGGT TCTGGGGGGA GTATGGTCGC AAGGCTGAAA CTTAAAGAAA TTGACGGAAG1201 GGCACCACCA GGCGTGGAGC CTGCGGCTTA ATTTGACTCA ACACGGGGAA ACTCACCAGG1261 TCCAGACAAA ATAAGGATTG ACAGATTGAG AGCTCTTTCT TGATCTTTTG GATGGTGGTG1321 CATGGCCGTT CTTAGTTGGT GGAGTGATTT GTCTGCTTAA TTGCGATAAC GAACGAGACC1381 TCGGCCCTTA AATAGCCCGG TCCGCATTTG CGGGCCGCTG GCTTCTTAGG GGGACTATCG1441 GCTCAAGCCG ATGGAAGTGC GCGGCAATAA CAGGTCTGTG ATGCCCTTAG ATGTTCTGGG1501 CCGCACGCGC GCTACACTGA CAGGGCCAGC GAGTACATCA CCTTGGCCGA GAGGTCTGGG1561 TAATCTTGTT AAACCCTGTC GTGCTGGGGA TAGAGCATTG CAATTATTGC TCTTCAACGA1621 GGAATGCCTA GTAGGCACGA GTCATCAGCT CGTGCCGATT ACGTCCCTGC CCTTTGTACA1681 CACCGCCCGT CGCTACTACC GATTGAATGG CTCGGTGAGG CCTTCGGACT GGCTCAGGAG1741 GGTTGGCAAC GACCCCCCAG AGCCGGAAAG TTGGTCAAAC CCGGTCATTT AGAGGAAGTA1801 AAAGTCGTAA CAAGGTTTCC GTAGGTGAAC CTGCGGAAAT CCCGCGGCCA TGGCGGCCGG1861 AGC。
權(quán)利要求
1.一種黑曲霉，其特征在于命名為黑曲霉Aspergillus niger YM33182，現(xiàn)保藏在國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局指定的保藏單位，保藏編號(hào)為CCTCC NO206113。
2.按照權(quán)利要求
1所述的黑曲霉，其特征是其18SrDNA基因組由1861個(gè)堿基(bp)組成，其系列如下1 GCTATGCATC AACGCGTTTG GGAGCTCTCC CATATGGTCG ACCTGCAGGC GGCCGCACTA61 GTGATTGTAG TCATATGCTT GTCTCAAAGA TTAAGCCATG CATGTCTAAG TATAAGCACT121 TTATACTGTG AAACTGCGAA TGGCTCATTA AATCAGTTAT CGTTTATTTG ATAGTACCTT181 ACTACATGGA TACCTGTGGT AATTCTAGAG CTAATACATG CTGAAAACCT CGACTTCGGA241 AGGGGTGTAT TTATTAGATA AAAAACCAAT GCCCTTCGGG GCTCCTTGGT GAATCATAAT301 AACTTAACGA ATCGCATGGC CTTGCGCCGG CGATGGTTCA TTCAAATTTC TGCCCTATCA361 ACTTTCGATG GTAGGATAGT GGCCTACCAT GGTGGCAACG GGTAACGGGG AATTAGGGTT421 CGATTCCGGA GAGGGAGCCT GAGAAACGGC TACCACATCC AAGGAAGGCA GCAGGCGCGC481 AAATTACCCA ATCCCGACAC GGGGAGGTAG TGACAATAAA TACTGATACG GGGCTCTTTT541 GGGTCTCGTA ATTGGAATGA GTACAATCTA AATCCCTTAA CGAGGAACAA TTGGAGGGCA601 AGTCTGGTGC CAGCAGCCGC GGTAATTCCA GCTCCAATAG CGTATATTAA AGTTGTTGCA661 GTTAAAAAGC TCGTAGTTGA ACCTTGGGTC TGGCTGGCCG GTCCGCCTCA CCGCGAGTAC721 TGGTCCGGCT GGACCTTTCC TTCTGGGGAA TCTCATGGCC TTCACTGGCT GTGGGGGGAA781 CCAGGACTTT TACTGTGAAA AAATTAGAGT GTTCAAAGCA GGCCTTTGCT CGAATACATT841 AGCATGGAAT AATAGAATAG GACGTGCGGT TCTATTTTGT TGGTTTCTAG GACCGCCGTA901 ATGATTAATA GGGATAGTCG GGGGCGTCAG TATTCAGCTG TCAGAGGTGA AATTCTTGGA961 TTTGCTGAAG ACTAACTACT GCGAAAGCAT TCGCCAAGGA ATGTTTTCAT TAATCAGGGA1021 ACGAAAGTTA GGGGATCGAA GACGATCAGA TACCGTCGTA GTCTTAACCA TAAACTATGC1081 CGACTAGGGA TCGGACGGTG TTTCTATTAT GACCCGTTCG GCACCTTACG AGAAATCAAA1141 GTTTTTGGGT TCTGGGGGGA GTATGGTCGC AAGGCTGAAA CTTAAAGAAA TTGACGGAAG1201 GGCACCACCA GGCGTGGAGC CTGCGGCTTA ATTTGACTCA ACACGGGGAA ACTCACCAGG1261 TCCAGACAAA ATAAGGATTG ACAGATTGAG AGCTCTTTCT TGATCTTTTG GATGGTGGTG1321 CATGGCCGTT CTTAGTTGGT GGAGTGATTT GTCTGCTTAA TTGCGATAAC GAACGAGACC1381 TCGGCCCTTA AATAGCCCGG TCCGCATTTG CGGGCCGCTG GCTTCTTAGG GGGACTATCG1441 GCTCAAGCCG ATGGAAGTGC GCGGCAATAA CAGGTCTGTG ATGCCCTTAG ATGTTCTGGG1501 CCGCACGCGC GCTACACTGA CAGGGCCAGC GAGTACATCA CCTTGGCCGA GAGGTCTGGG1561 TAATCTTGTT AAACCCTGTC GTGCTGGGGA TAGAGCATTG CAATTATTGC TCTTCAACGA1621 GGAATGCCTA GTAGGCACGA GTCATCAGCT CGTGCCGATT ACGTCCCTGC CCTTTGTACA1681 CACCGCCCGT CGCTACTACC GATTGAATGG CTCGGTGAGG CCTTCGGACT GGCTCAGGAG1741 GGTTGGCAAC GACCCCCCAG AGCCGGAAAG TTGGTCAAAC CCGGTCATTT AGAGGAAGTA1801 AAAGTCGTAA CAAGGTTTCC GTAGGTGAAC CTGCGGAAAT CCCGCGGCCA TGGCGGCCGG1861 AGC。
專利摘要
本發(fā)明涉及微生物技術(shù)領(lǐng)域：
，特別是涉及一種能夠轉(zhuǎn)化云南黃山藥中有效成分種類和含量的微生物菌株。本發(fā)明所述的黑曲霉命名為黑曲霉Aspergillus niger YM33182，現(xiàn)保藏在國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局指定的保藏單位，保藏編號(hào)為CCTCC No206113。該微生物是轉(zhuǎn)化云南黃山藥中藥材薯蕷皂苷類物質(zhì)種類和含量的天然藥用微生物資源。云南黃山藥(Dioscorea panthaica Yunnanensis)經(jīng)YM33182黑曲霉發(fā)酵后，轉(zhuǎn)化產(chǎn)物薯蕷皂苷提取總含量達(dá)到了40％，最高42％。與轉(zhuǎn)化前黃山藥中藥材薯蕷皂苷總含量36％比較，轉(zhuǎn)化后薯蕷皂苷總含量提高了6個(gè)百分點(diǎn)，最高可達(dá)到8個(gè)百分點(diǎn)。
文檔編號(hào)C12R1/685GKCN1970730SQ200610048888
公開日2007年5月30日 申請(qǐng)日期2006年12月7日
發(fā)明者陳有為, 張傳會(huì), 吳少華, 李紹蘭, 李治瀅, 楊麗源 申請(qǐng)人:云南省微生物研究所導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan