專利名稱:從地烏中提取得到的地烏皂苷w的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種標準品及提取分離工藝，具體是從地烏提取的地烏皂苷W3標準品及制備工藝。
背景技術：
地烏系毛茛科銀蓮花屬植物林蔭銀蓮花(Anemone flaccida Fr.Schmidt)的干燥根莖(中藥大辭典，上海上?？茖W技術出版社，2002802)。地烏皂苷W3是從地烏中提取分離純化得到的。目前尚無地烏皂苷W3標準品，作為控制有關地烏藥材、地烏提取物及制劑的質量標準。
地烏皂苷W3標準品的制備是用硅膠層析作為粗分離手段是一種先進方法，與硅膠柱分離方法比較，速度快；用制備液相制備、分離，可得到純度高產(chǎn)品。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種從地烏提取的地烏皂苷W3標準品及制備工藝。得到的地烏皂苷W3標準品純度≥98％。該標準品可用來控制有關地烏藥材、地烏提取物及制劑的質量標準。
本發(fā)明從地烏中提取得到的化合物3-O-α-L-吡喃鼠李糖(1→2)β-D-吡喃木糖-齊墩果酸-28-O-α-L-吡喃鼠李糖(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷，命名為地烏皂苷W3，分子式為C59H96O25，化合物純度≥98％。以下所述地烏皂苷W3均指該化合物。
本發(fā)明的化合物的提取分離工藝步驟是第1、取地烏粗粉，用容量70～95％乙醇水溶液加熱回流提取3～8次，每次3～6h，合并提取液，減壓濃縮至干，得浸膏；第2、將步驟1所得的浸膏混懸于水中，用水飽和正丁醇萃取3～8次，正丁醇層減壓濃縮至干，得浸膏第3、將步驟2所得的浸膏用水溶解、過濾，濾液上D101大孔樹脂柱吸附，并依次用水、40～80％乙醇、80～95％乙醇洗脫；收集40～80％乙醇洗脫物，回收乙醇并水浴蒸干，得地烏總苷；第4、將步驟3所得的總苷進行硅膠層析，以氯仿∶甲醇∶水＝20～26∶10～16∶1～3體積比的混合液洗脫，粗分成5段，高效液相色譜(TLC)檢測，收集富含地烏皂苷W3的第2段部分；
第5、將步驟4所得的富含地烏皂苷W3的第2段部分再進行硅膠層析，以氯仿∶甲醇∶水＝7∶4∶1體積比的混合液洗脫，高效液相色譜檢測，收集富含地烏皂苷W3的部分，以制備型高效液相分離精制得純度≥98％化合物W3。制備型高效液相分離條件固定相十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動相乙腈∶水為1∶2～2∶3體積比的混合液；流速1.0～5ml/min；柱溫25℃～40℃；檢測波長205～250nm。
本發(fā)明的化合物地烏皂苷W3作為標準品來控制地烏藥材、地烏提取物及其制劑的質量標準。
本發(fā)明的有益效果是，利用此制備工藝，可以快速的由地烏中得到高純度的W3，并作為有關地烏藥材、地烏提取物及其制劑的標準品。
本發(fā)明中除另有說明之外，乙醇百分濃度均是指容量百分濃度，化合物百分含量是指質量百分含量。



圖1是從地烏提取分離地烏皂苷W3的工藝流程圖。
具體實施方式
實施例1從地烏提取分離地烏皂苷W3的工藝流程如圖1所示，取地烏粗粉，用70～95％乙醇加熱回流提取3次，每次3h，合并提取液，60℃減壓濃縮至干，得干浸膏；將干浸膏混懸于水中，用水飽和正丁醇萃取3次，正丁醇層減壓濃縮至干，得正丁醇干浸膏；正丁醇干浸膏用水溶解、過濾，濾液上D101大孔樹脂吸附，并依次用水、40～80％乙醇、80～95％乙醇洗脫；收集40～80％乙醇洗脫物，回收乙醇并水浴蒸干，得地烏總苷；將總苷進行硅膠層析，以氯仿∶甲醇∶水為20∶10∶1體積比的混合液洗脫，粗分成5段，TLC檢識，收集富含地烏皂苷W3的第2段部分，再進行硅膠層析，以氯仿∶甲醇∶水為7∶4∶1體積比的混合液洗脫，TLC檢識，收集富含地烏皂苷W3的部分，以制備型高效液相分離精制得化合物W3。此化合物純度可達98％。制備型高效液相分離條件固定相十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動相乙腈∶水為1∶2～2∶3體積比的混合液；流速1.0～5ml/min；柱溫25℃～40℃；檢測波長205～250nm。
權利要求
1.一種從地烏中提取得到地烏皂苷W3標準品的提取分離工藝，其中所述的地烏皂苷W3分子式為C59H96O25，名稱為3-O-α-L-吡喃鼠李糖(1→2)β-D-吡喃木糖-齊墩果酸-28-O-α-L-吡喃鼠李糖(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷，地烏皂苷W3純度≥98％，其特征是提取分離步驟為第1、取地烏粗粉，用容量70～95％乙醇水溶液加熱回流提取3～8次，每次3～6小時，合并提取液，減壓濃縮至干，得浸膏；第2、將步驟1所得的浸膏混懸于水中，用水飽和正丁醇萃取3～8次，正丁醇層減壓濃縮至干，得浸膏；第3、將步驟2所得的浸膏用水溶解、過濾，濾液上D101大孔樹脂柱吸附，并依次用水、40～80％乙醇、80～95％乙醇洗脫；收集40～80％乙醇洗脫物，回收乙醇并水浴蒸干，得地烏總苷；第4、將步驟3所得的總苷進行硅膠層析，以氯仿∶甲醇∶水＝20～26∶10～16∶1～3體積比的混合液洗脫，粗分成5段，高效液相色譜檢測，收集富含地烏皂苷W3的第2段部分；第5、將步驟4所得的富含地烏皂苷W3的第2段部分再進行硅膠層析，以氯仿∶甲醇∶水＝7∶4∶1體積比的混合液洗脫，高效液相色譜檢測，收集富含地烏皂苷W3的部分，以制備型高效液相分離精制得純度≥98％地烏皂苷W3。
專利摘要
從地烏中提取得到的化合物3-O-α-L-吡喃鼠李糖(1→2)β-D-吡喃木糖-齊墩果酸-28-O-α-L-吡喃鼠李糖(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷，命名為地烏皂苷W
文檔編號C07H1/08GKCN1308340SQ200510018363
公開日2007年4月4日 申請日期2005年3月10日
發(fā)明者邴飛虹, 韓林濤 申請人:湖北中醫(yī)學院導出引文BiBTeX, EndNote, RefMan專利引用 (1), 非專利引用 (1),