本發(fā)明涉及醫(yī)藥生物，具體涉及抗腫瘤化合物、制備該抗腫瘤化合物的菌株及其制備方法。

背景技術(shù)：

1、現(xiàn)常用治療腫瘤藥物包括：細(xì)胞毒性藥物(烷化劑、抗代謝藥、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑等)；激素類藥物(腎上腺皮質(zhì)激素、雄激素、雌激素等)；免疫類藥物(細(xì)胞因子、單克隆抗體等)；靶向藥物(小分子化合物、單抗類藥物等)。但是腫瘤耐藥性的快速上升趨勢(shì)迫使研究學(xué)者們不斷尋找新的抗腫瘤藥物先導(dǎo)化合物。

2、抗腫瘤化合物eupenifeldin具有優(yōu)良的抗腫瘤活性，它能引起g1期細(xì)胞周期阻滯和細(xì)胞凋亡，降低細(xì)胞周期蛋白和存活蛋白的水平，誘導(dǎo)活性氧(ros)的產(chǎn)生，從而影響腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和死亡。eupenifeldin因其良好的抗腫瘤活性，一直以來作為優(yōu)良的抗腫瘤藥物先導(dǎo)化合物而備受關(guān)注，現(xiàn)有技術(shù)中僅有申請(qǐng)?zhí)枺篶n201510702627.6中公開了如何制備抗腫瘤化合物eupenifeldin，如何擴(kuò)大抗腫瘤化合物eupenifeldin的制備渠道以及尋找新的抗腫瘤化合物是本領(lǐng)域急需考慮的問題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的上述不足，本發(fā)明提供了一種具有良好抗腫瘤活性的抗腫瘤化合物、制備該抗腫瘤化合物的菌株及其制備方法。

2、為達(dá)到上述發(fā)明目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為：

3、提供一種抗腫瘤化合物，命名為phomeroid?c，包括如下式結(jié)構(gòu)：

4、

5、一種上述的抗腫瘤化合物的應(yīng)用，用于抑制肝癌細(xì)胞hepg2和人非小細(xì)胞肺癌a549細(xì)胞系。

6、進(jìn)一步的，抗腫瘤化合物用于制備抗腫瘤藥物。

7、一種青霉菌，命名為penicillium?sp.152，于2024年5月8日在廣東省微生物菌種保藏中心登記保藏，保藏編號(hào)為gdmcc?64483。

8、一種上述的菌株的應(yīng)用，用于制備抗腫瘤化合物phomeroid?c和eupenifeldin。

9、一種采用青霉菌penicillium?sp.152制備抗腫瘤化合物的制備方法，包括如下步驟：

10、s1：將青霉菌penicillium?sp.152于固體大米培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵，得到發(fā)酵產(chǎn)物；

11、s2：向發(fā)酵產(chǎn)物中加入等量乙酸乙酯進(jìn)行萃取，將萃取物經(jīng)二氯甲烷-甲醇正向體系進(jìn)行梯度洗脫；二氯甲烷-甲醇體系正向體系的梯度為100:0，99:1，98:2，97:3，96:4，95:5，93:7，9:1；洗脫得到8個(gè)餾分，依次編號(hào)為fr.a1-fr.a8；

12、s3：取餾分fr.a5和fr.a6，混勻后經(jīng)正向硅膠石油醚-乙酸乙酯體系進(jìn)行梯度洗脫；正向硅膠石油醚-乙酸乙酯體系的梯度為100％，90％，80％，70％，60％，50％，30％，10％；洗脫得到8個(gè)餾分，依次編號(hào)為fr.b1-fr.b8；

13、s4：取餾分fr.b4使用高效液相色譜法制備即可得到抗腫瘤化合物eupenifeldin。

14、進(jìn)一步的，還包括對(duì)抗腫瘤化合物phomeroid?c的制備，具體方法為：取餾分fr.b7使用高效液相色譜法制備即可得到抗腫瘤化合物phomeroid?c。

15、進(jìn)一步的，所述固體大米培養(yǎng)基采用大米10％、酵母粉0.2％、蛋白胨0.2％和葡萄糖0.05％，經(jīng)121℃高壓滅菌30min制得。

16、進(jìn)一步的，所述高效液相色譜法制備抗腫瘤化合物eupenifeldin或phomeroid?c的洗脫程序?yàn)椋?-20min按體積分?jǐn)?shù)比從60％至100％的乙腈:水梯度洗脫(含水相和乙腈中分別含0.1％冰醋酸)，當(dāng)制備抗腫瘤化合物eupenifeldin時(shí)，保留時(shí)間為17.5min；當(dāng)制備抗腫瘤化合物phomeroid?c時(shí)，保留時(shí)間為12min。

17、本發(fā)明的有益效果為：

18、本發(fā)明提供了一種新的抗腫瘤化合物phomeroid?c，能夠有效對(duì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行抑制殺傷。

19、同時(shí)，提供了一種能夠制備抗腫瘤化合物eupenifeldin以及新的抗腫瘤化合物phomeroid?c的菌株penicillium?sp.152，該菌株具有產(chǎn)物單一、產(chǎn)量高的特點(diǎn)，能夠良好的應(yīng)用于抗腫瘤化合物的工業(yè)制備上。

技術(shù)特征：

1.一種抗腫瘤化合物，其特征在于，命名為phomeroid?c，包括如下式結(jié)構(gòu)：

2.一種權(quán)利要求1所述的抗腫瘤化合物的應(yīng)用，其特征在于，用于抑制肝癌細(xì)胞hepg2和人非小細(xì)胞肺癌a549細(xì)胞系。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，抗腫瘤化合物用于制備抗腫瘤藥物。

4.一種青霉菌，其特征在于，命名為penicillium?sp.152，于2024年5月8日在廣東省微生物菌種保藏中心登記保藏，保藏編號(hào)為gdmcc?64483。

5.一種權(quán)利要求4所述的菌株的應(yīng)用，其特征在于，用于制備抗腫瘤化合物phomeroidc和eupenifeldin。

6.一種采用青霉菌penicillium?sp.152制備抗腫瘤化合物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的抗腫瘤化合物的制備方法，其特征在于，還包括對(duì)抗腫瘤化合物phomeroid?c的制備，具體方法為：取餾分fr.b7使用高效液相色譜法制備即可得到抗腫瘤化合物phomeroid?c。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的抗腫瘤化合物的制備方法，其特征在于，所述固體大米培養(yǎng)基采用大米10％、酵母粉0.2％、蛋白胨0.2％和葡萄糖0.05％，經(jīng)121℃高壓滅菌30min制得。

9.根據(jù)權(quán)利要求6-7任一所述的抗腫瘤化合物的制備方法，其特征在于，所述高效液相色譜法制備抗腫瘤化合物eupenifeldin或phomeroid?c的洗脫程序?yàn)椋?-20min按體積分?jǐn)?shù)比從60％至100％的乙腈:水梯度洗脫(含水相和乙腈中分別含0.1％冰醋酸)，當(dāng)制備抗腫瘤化合物eupenifeldin時(shí)，保留時(shí)間為17.5min；當(dāng)制備抗腫瘤化合物phomeroid?c時(shí)，保留時(shí)間為12min。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了抗腫瘤化合物、制備該抗腫瘤化合物的菌株及其制備方法，涉及醫(yī)藥生物技術(shù)領(lǐng)域，本發(fā)明提供了一種新的抗腫瘤化合物Phomeroid?C，能夠有效對(duì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行抑制殺傷。同時(shí)，提供了一種能夠制備抗腫瘤化合物Eupenifeldin以及新的抗腫瘤化合物Phomeroid?C的菌株P(guān)enicillium?sp.152，該菌株具有產(chǎn)物單一、產(chǎn)量高的特點(diǎn)，能夠良好的應(yīng)用于抗腫瘤化合物的工業(yè)制備上。

技術(shù)研發(fā)人員：羅明和,王遠(yuǎn)強(qiáng),李思怡,顏禎陽
受保護(hù)的技術(shù)使用者：重慶理工大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6