本實用新型屬于一種實驗器皿,具體的是一種培養(yǎng)臍帶組織細胞的培養(yǎng)瓶。
背景技術:
臍帶間充質干細胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)是指存在于新生兒臍帶組織中的一種多功能干細胞,它能分化成許多種組織細胞,具有廣闊的臨床應用前景。
取新鮮健康臍帶,用PBS沖洗干凈后,用剪刀鑷子剔去血管,剝出里面的華氏膠組織,將所得組織充分剪碎至1mm3大小,加入α-MEM培養(yǎng)液置于37℃,5%的CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng),培養(yǎng)液中含10%FBS,100U/ml青霉素,100U/ml鏈霉素。臍帶組織培養(yǎng)5-7天后,可見有部分細胞從組織塊周圍爬出,形態(tài)呈細小的梭形,一周后,細胞開始迅速增殖,形成大小不等的細胞集落,待細胞長滿后,用0.25%胰蛋白酶消化傳代。臍帶組織塊貼壁后,培養(yǎng)一段時間,慢慢爬出細胞,貼壁很關鍵。
目前技術缺陷:現(xiàn)有技術將組織塊加培養(yǎng)基一起加入培養(yǎng)瓶,自然沉降貼壁,一是有一定的隨機性,貼壁組織塊少,二是換液,或者觀察時,移動培養(yǎng)瓶,組織塊很容易脫落掉。
技術實現(xiàn)要素:
本實用新型的目的是為了解決上述問題,提出一種臍帶組織塊貼壁法培養(yǎng)固定組織塊的培養(yǎng)瓶裝置,該臍帶組織塊貼壁法培養(yǎng)固定組織塊的培養(yǎng)瓶裝置將將組織塊固定在凹槽里,平移培養(yǎng)瓶,組織塊不會脫落,增加了組織塊長出細胞的機會,同時過程簡單化,減少孵育時間,操作方便。
本實用新型的目的是通過以下技術方案來實現(xiàn)的:臍帶組織塊貼壁法培養(yǎng)固定組織塊的培養(yǎng)瓶裝置,其特征在于:設有培養(yǎng)瓶體所述培養(yǎng)瓶為一臥式的偏平狀瓶體,所述偏平狀瓶體在內部裝水平設置有一孔板懸架,所述孔板懸架通過兩側邊與培養(yǎng)瓶體的兩瓶體連接成一體結構,所述孔板懸架上均勻設置有若干個圓形凹槽,所述圓形凹槽的直徑為4mm,所述圓形凹槽的深度為4mm,孔板懸架在下底面與培養(yǎng)瓶底面高度為1mm,孔板懸架的上表面是平整的,所述培養(yǎng)瓶體在一側設有瓶口,所述瓶口上設有瓶蓋。
本實用新型將過程簡單化,減少孵育時間,操作方便;將組織塊固定在凹槽里,平移培養(yǎng)瓶,組織塊不會脫落,大大增加了組織塊長出細胞的機會。
附圖說明
圖1是本實用新型的整體結構示意圖;
圖2是本實用新型的孔板懸架結構示意圖;
具體實施方式
下面結合附圖和實施例對本實用新型作進一步的說明:
實施例:參見附圖1、2,臍帶組織塊貼壁法培養(yǎng)固定組織塊的培養(yǎng)瓶裝置,設有培養(yǎng)瓶體1,所述培養(yǎng)瓶為一臥式的偏平狀瓶體,所述偏平狀瓶體在內部裝水平設置有一孔板懸架2,所述孔板懸架通過兩側邊與培養(yǎng)瓶體的兩瓶體連接成一體結構,所述孔板懸架上均勻設置有若干個圓形凹槽3,所述圓形凹槽的直徑為4mm,所述圓形凹槽的深度為4mm,孔板懸架在下底面與培養(yǎng)瓶底面高度為1mm,孔板懸架的上表面是平整的,所述培養(yǎng)瓶體在一側設有瓶口4,所述瓶口上設有瓶蓋5。
培養(yǎng)瓶上我畫的黑線區(qū)域為孔板區(qū)域,孔板類似于96孔板,孔徑4mm,高度4mm,距離培養(yǎng)瓶底面1mm,孔板上表面是平整的,孔板兩側與培養(yǎng)瓶側壁是一體的,聯(lián)在側壁上的。這是一個特殊的培養(yǎng)瓶。培養(yǎng)時,首先將組織塊剪成2-4mm塊粒,然后用折斷尖頭的移液管吸取塊粒加入培養(yǎng)瓶孔板上,再用移液管或細胞刮刀將組織塊鋪入孔內。再把培養(yǎng)液加入到離瓶口近的培養(yǎng)瓶底面。培養(yǎng)瓶平放在二氧化碳培養(yǎng)箱內培養(yǎng)。因為孔板距離培養(yǎng)瓶底面有1mm的距離,細胞從組織塊長出后貼壁在培養(yǎng)瓶底面,而組織塊在孔內,而不會漂動,孔板與培養(yǎng)瓶一體的,孔板不會移動??装鍏^(qū)域距離培養(yǎng)瓶底部有一定的距離,并且孔板高度距離培養(yǎng)瓶上表面空間很大,易于將移液管伸到底部吸取液體,不影響培養(yǎng)。
最后應說明的是:顯然,上述實施例僅僅是為清楚地說明本實用新型所作的舉例,而并非對實施方式的限定。對于所屬領域的普通技術人員來說,在上述說明的基礎上還可以做出其它不同形式的變化或變動。這里無需也無法對所有的實施方式予以窮舉。而由此所引伸出的顯而易見的變化或變動仍處于本實用新型的保護范圍之中。