本發(fā)明涉及生物技術領域，尤其涉及bmx剪切體及其在肺癌耐藥性中的應用。
背景技術：
肺癌發(fā)生于支氣管黏膜上皮。近年來，肺癌的發(fā)病率在全球均呈顯著上升趨勢，在歐美工業(yè)發(fā)達國家和我國的一些工業(yè)大城市中，肺癌發(fā)病率在男性惡性腫瘤中已居首位，在女性發(fā)病率也迅速增高，占女性常見惡性腫瘤的第2位或第3位。肺癌成為危害生命健康的一種主要疾病。臨床上，第三代基于鉑的聯(lián)合療法治療非小細胞肺癌雖具有一些優(yōu)勢，但是結合幾種細胞毒類藥物的治療方式并沒有取得比鉑雙試劑治療更好的效果，表明這種治療方法已經達到了瓶頸。隨著對肺癌生物學的深入研究以及對肺癌發(fā)病分子機制的進一步了解，根據(jù)不同患者個體腫瘤中存在的關鍵致病基因進行針對性的分子靶向治療。比較成功的例子即針對表皮生長因子受體(egfr)激活型突變(比如l858r點突變、19號外顯子缺失突變)所設計的靶向egfr激酶域的小分子抑制劑，包括吉非替尼(gefitinib,iressa)和厄洛替尼(erlotinib,tarceva)。臨床上這些小分子抑制劑對具有上述egfr激酶域突變的肺癌患者療效顯著，然而一些耐藥突變(比如egfr激酶域t790m點突變等)的出現(xiàn)卻極大削弱了靶向藥物的治療效果，且目前并沒有很好的解決策略。
因此，深入研究肺癌的耐藥機制，制定肺癌耐藥性防治的有效策略迫在眉睫?；谏鲜鲫愂?，本發(fā)明提出了bmx剪切體及其在肺癌耐藥性中的應用。
技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有技術中存在的缺點，而提出的bmx剪切體及其在肺癌耐藥性中的應用。
bmx剪切體位于染色體xp25.5的dxs203與dxs212兩位點之間，是由前380個氨基酸組成，具有seqidno1-15、39-54、72-83、102-137所示的氨基酸序列；所述bmx剪切體不包含蛋白缺失野生型bmx的n端。
優(yōu)選的，所述bmx剪切體由包含seqno.1所包含的核苷酸序列或其互補序列的多核苷酸編碼。
優(yōu)選的，所述bmx剪切體的cdna引物包括5'-agagttcgcggtgatatgcc-3'片段和5'-gtgcgagatcacgagagagga-3'片段。
一種bmx剪切體的制備方法，包括以下步驟：準備防爆玻璃反應器，從反應器的下方通入氮氣，通入反應器的氮氣從反應器的上方排出，按權利要求1中所述的氨基酸序列將氨基酸加入反應器中，加入權利要求2中的多核苷酸，利用氮氣鼓泡的方式對反應物進行攪拌，從而制得bmx剪切體。
優(yōu)選的，所述bmx剪切體可用于制備檢測肺癌耐藥性機制的試劑。
優(yōu)選的，所述檢測肺癌耐藥性機制試劑的篩選方法，包括以下步驟：
步驟s1、在酪氨酸激酶的催化作用下，將bmx剪切體進行分解，將所得的分解產物分別注射于小鼠腹腔內，并向小鼠腹腔內注射肺癌感染病毒；
步驟s2、觀察注射bmx剪切體分解產物后的小鼠，并對小鼠體內的氨基酸n端片段、中間片段及c端片段的表達抑制結果進行檢測，從而獲得bmx剪切體具有肺癌耐藥性機制檢測活性的關鍵位點；
步驟s3、將獲得的具有肺癌耐藥性機制檢測活性的關鍵位點利用現(xiàn)有的醫(yī)學技術，制備檢測肺癌耐藥性機制試劑。
本發(fā)明提出的bmx剪切體可作為肺癌細胞對抗癌藥物耐藥性形成和程度的相關因子，能夠有效的檢測肺癌耐藥性機制，本發(fā)明提出的bmx剪切體，其制備方法簡單，制備條件溫和，制備所需成本低，制備的bmx剪切體用于制備檢測肺癌耐藥性機制的試劑，其篩選方法簡單，值得推廣。
具體實施方式
下面結合具體實施例對本發(fā)明作進一步解說。
實施例
本發(fā)明提出的bmx剪切體，位于染色體xp25.5的dxs203與dxs212兩位點之間，是由前380個氨基酸組成，具有seqidno1-15、39-54、72-83、102-137所示的氨基酸序列；所述bmx剪切體不包含蛋白缺失野生型bmx的n端；其中bmx剪切體由包含seqno.1所包含的核苷酸序列或其互補序列的多核苷酸編碼。
bmx剪切體的cdna引物包括5'-agagttcgcggtgatatgcc-3'片段和5'-gtgcgagatcacgagagagga-3'片段，其擴增條件為：以bmx剪切體的cdna為模板，以蛋白缺失野生型bmx的n端為參照，以引物5'-agagttcgcggtgatatgcc-3'片段和5'-gtgcgagatcacgagagagga-3'片段，在反應體系為15ul，反應條件為：88℃5min；88℃30sec，59℃30sec，65℃30sec，32個循環(huán)；65℃5min，進行擴增。
一種bmx剪切體的制備方法，包括以下步驟：準備防爆玻璃反應器，從反應器的下方通入氮氣，通入反應器的氮氣從反應器的上方排出，按權利要求1中所述的氨基酸序列將氨基酸加入反應器中，加入權利要求2中的多核苷酸，利用氮氣鼓泡的方式對反應物進行攪拌，從而制得bmx剪切體。
bmx剪切體可用于制備檢測肺癌耐藥性機制的試劑，其中檢測肺癌耐藥性機制試劑的篩選方法，包括以下步驟：
步驟s1、在酪氨酸激酶的催化作用下，將bmx剪切體進行分解，將所得的分解產物分別注射于小鼠腹腔內，并向小鼠腹腔內注射肺癌感染病毒；
步驟s2、觀察注射bmx剪切體分解產物后的小鼠，并對小鼠體內的氨基酸n端片段、中間片段及c端片段的表達抑制結果進行檢測，從而獲得bmx剪切體具有肺癌耐藥性機制檢測活性的關鍵位點；
步驟s3、將獲得的具有肺癌耐藥性機制檢測活性的關鍵位點利用現(xiàn)有的醫(yī)學技術，制備檢測肺癌耐藥性機制試劑。
以上所述，僅為本發(fā)明較佳的具體實施方式，但本發(fā)明的保護范圍并不局限于此，任何熟悉本技術領域的技術人員在本發(fā)明揭露的技術范圍內，根據(jù)本發(fā)明的技術方案及其發(fā)明構思加以等同替換或改變，都應涵蓋在本發(fā)明的保護范圍之內。