本發(fā)明涉及一種抗氧化多肽制備工藝，特別涉及一種櫻桃核的抗氧化多肽制備工藝，屬于抗氧化多肽制備技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
櫻桃是阿西羅拉櫻桃的中文名稱。原產(chǎn)于熱帶美洲西印度群島加勒比海地區(qū)，因此又叫西印度櫻桃。適合在雨量充沛、日照充足、溫度適宜的熱帶及亞熱帶地區(qū)生長，以富含維生素C而聞名于世，是世界公認的“天然VC之王”和“生命之果”。櫻桃可用于脾胃虛弱，少食腹瀉，或脾胃陰傷，口舌干燥，肝腎不足，腰膝酸軟，四肢乏力，遺精，血虛，頭暈心悸等癥狀；對于面色不華，面部雀斑等頑固性斑類可起淡化作用。在我國南方，櫻桃產(chǎn)量巨大，櫻桃深加工廠每年都會浪費丟棄大量的櫻桃核，不僅浪費了資源，而且降低了櫻桃加工廠的利潤。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是克服櫻桃深加工廠每年都會浪費丟棄大量的櫻桃核，不僅浪費了資源，而且降低了櫻桃加工廠的利潤的缺陷，提供一種櫻桃核的抗氧化多肽制備工藝。
為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案：
本發(fā)明提供了一種櫻桃核的抗氧化多肽制備工藝，具體制備步驟如下：
1）櫻桃核蛋白粉提?。簩烟液酥糜?0℃烘箱內(nèi)3-4h烘干，直至重量不發(fā)生改變，粉碎后，用丙酮進行索氏抽提6小時，去脂后，60℃烘干去除溶劑，得到去脂櫻桃核粉。將此粉過60目篩備用。取一定量的去脂櫻桃核粉，按一定料液比加水浸泡過夜，然后以4000r/min低溫離心20min，去除不溶性雜質(zhì)，得到上清液，為蛋白粗提液。上清液使用濾紙過濾并用1mol/L的鹽酸溶液調(diào)整濾液pH為3.84來沉淀蛋白質(zhì)，4000r/min離心20min獲得沉淀物，沉淀物用蒸餾水洗至中性，冷凍干燥制得蛋白質(zhì)粉備用；
2）櫻桃核蛋白酶解：取適量櫻桃核蛋白粉，按一定料液比配制蛋白溶液，在酶解溫度下先超聲波預處理20min后，調(diào)節(jié)pH=7，加入一定量堿性蛋白酶和胃蛋白酶（1:1）（加酶量4500U/g）協(xié)同酶解，50℃恒溫水浴鍋內(nèi)震蕩，水解120min后，置于90℃水浴中10min滅酶，取上清液為櫻桃核酶解液，真空濃縮，冷凍干燥為櫻桃核多肽，粉碎過篩后為櫻桃核多肽粉。
作為本發(fā)明的一種優(yōu)選技術(shù)方案，在制備過程中可檢測所述櫻桃核酶解液的抗氧化能力，具體步驟為：抗氧化能力用羥自由基清除率來測試：選取三支10mL比色管，依次加入羅丹明6G溶液和H2SO4溶液，第一支比色管作試劑參比,其余兩支再分別加入FeSO4和H2O2溶液，在第三支中加入酶解液，用水稀釋至并搖勻,常溫下放置12 min，以蒸餾水為空白參比，在波長520 nm處測定3個體系吸光度值，試劑參比體系的吸光度為A，未加酶解液的體系的A0，加酶解液的為As。酶解液中多肽的抗氧化能力可以用清除率表示,清除率的計算公式如下:
清除率%=（As－A0）／（A－A0）×100%
經(jīng)過計算，此工藝櫻桃核酶解液的?OH清除率平均值為51.98%。
本發(fā)明所達到的有益效果是：在我國南方，櫻桃產(chǎn)量巨大，櫻桃深加工廠每年都會浪費丟棄大量的櫻桃核，本發(fā)明工藝能提取櫻桃核蛋白進行酶解制備抗氧化多肽，可以用作食品添加劑，天然抗氧化劑，不僅能起到抗氧化作用，而且是天然的被人體極易吸收，對健康有利；對櫻桃核進行了廢物利用，增加了櫻桃深加工廠的利潤。
具體實施方式
以下對本發(fā)明的優(yōu)選實施例進行說明，應當理解，此處所描述的優(yōu)選實施例僅用于說明和解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
實施例1
本發(fā)明提供了一種櫻桃核的抗氧化多肽制備工藝，具體制備步驟如下：
1）櫻桃核蛋白粉提?。簩烟液酥糜?0℃烘箱內(nèi)3-4h烘干，直至重量不發(fā)生改變，粉碎后，用丙酮進行索氏抽提6小時，去脂后，60℃烘干去除溶劑，得到去脂櫻桃核粉。將此粉過60目篩備用。取一定量的去脂櫻桃核粉，按一定料液比加水浸泡過夜，然后以4000r/min低溫離心20min，去除不溶性雜質(zhì)，得到上清液，為蛋白粗提液。上清液使用濾紙過濾并用1mol/L的鹽酸溶液調(diào)整濾液pH為3.84來沉淀蛋白質(zhì)，4000r/min離心20min獲得沉淀物，沉淀物用蒸餾水洗至中性，冷凍干燥制得蛋白質(zhì)粉備用；
2）櫻桃核蛋白酶解：取適量櫻桃核蛋白粉，按一定料液比配制蛋白溶液，在酶解溫度下先超聲波預處理20min后，調(diào)節(jié)pH=7，加入一定量堿性蛋白酶和胃蛋白酶（1:1）（加酶量4500U/g）協(xié)同酶解，50℃恒溫水浴鍋內(nèi)震蕩，水解120min后，置于90℃水浴中10min滅酶，取上清液為櫻桃核酶解液，真空濃縮，冷凍干燥為櫻桃核多肽，粉碎過篩后為櫻桃核多肽粉。
在制備過程中可檢測所述櫻桃核酶解液的抗氧化能力，具體步驟為：抗氧化能力用羥自由基清除率來測試：選取三支10mL比色管，依次加入羅丹明6G溶液和H2SO4溶液，第一支比色管作試劑參比,其余兩支再分別加入FeSO4和H2O2溶液，在第三支中加入酶解液，用水稀釋至并搖勻,常溫下放置12 min，以蒸餾水為空白參比，在波長520 nm處測定3個體系吸光度值，試劑參比體系的吸光度為A，未加酶解液的體系的A0，加酶解液的為As。酶解液中多肽的抗氧化能力可以用清除率表示,清除率的計算公式如下:
清除率%=（As－A0）／（A－A0）×100%
經(jīng)過計算，此工藝櫻桃核酶解液的?OH清除率平均值為51.98%，計算出櫻桃酶解液的抗氧化率，方便確定櫻桃核多肽作為食品添加劑時所需的計量。
在我國南方，櫻桃產(chǎn)量巨大，櫻桃深加工廠每年都會浪費丟棄大量的櫻桃核，本發(fā)明工藝能提取櫻桃核蛋白進行酶解制備抗氧化多肽，可以用作食品添加劑，天然抗氧化劑，不僅能起到抗氧化作用，而且是天然的被人體極易吸收，對健康有利；對櫻桃核進行了廢物利用，增加了櫻桃深加工廠的利潤。
最后應說明的是：以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實施例而已，并不用于限制本發(fā)明，盡管參照前述實施例對本發(fā)明進行了詳細的說明，對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，其依然可以對前述各實施例所記載的技術(shù)方案進行修改，或者對其中部分技術(shù)特征進行等同替換。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。