技術領域：
本發(fā)明公開一種屬于發(fā)酵領域，利用海藻酸錳和紅花石蒜鱗莖發(fā)酵制備乙醇發(fā)酵液的方法。
背景技術：
：紅花石蒜鱗莖中含多種生物堿，主要的有高石蒜堿、石蒜倫堿、多花水仙堿、石蒜胺堿、石蒜堿、偽石蒜堿和雪花蓮胺堿，還含雨石蒜堿、去甲雨石蒜堿、去甲基高石蒜堿、小星蒜堿、表雪花蓮胺堿、條紋堿和網(wǎng)球花定等生物堿，且含兩種有抑制植物生長和抗癌作用的成分石蒜西定醇、石蒜西定。申請?zhí)枮镃N201410588693.0的專利公開了一種利用木糖進行乙醇發(fā)酵的釀酒酵母工程菌及制備方法與應用。該菌株含有如下核苷酸序列：木糖還原酶基因、木糖醇脫氫酶基因和木酮糖激酶基因；其中，木酮糖激酶基因過表達。本發(fā)明通過同源重組，將組成型強啟動子整合到釀酒酵母出發(fā)菌株基因組上木酮糖激酶基因上游，得到木酮糖激酶過表達的菌株；再轉(zhuǎn)化入從葡牙假絲酵母獲得木糖還原酶基因和木糖醇脫氫酶基因。通過釀酒酵母工程菌為基礎發(fā)酵乙醇，大大降低乙醇的成本，但是現(xiàn)有技術的乙醇轉(zhuǎn)化率普遍較低。技術實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是：提供了一種利用海藻酸錳和紅花石蒜鱗莖發(fā)酵制備乙醇發(fā)酵液的方法，乙醇提取率高。技術方案是：利用海藻酸錳和紅花石蒜鱗莖發(fā)酵制備乙醇發(fā)酵液的方法，包括以下步驟，第一步，將紅花石蒜鱗莖浸泡在40°～50°的白酒中，在常溫條件下浸泡5～7天，取出紅花石蒜鱗莖，浸泡后的白酒備用；第二步，將取出的紅花石蒜鱗莖搗碎，加入淀粉酶和纖維素酶，在70～80℃條件下蒸煮40～60min；第三步，按照質(zhì)量比9：1將海藻酸錳加入第一步中浸泡后的白酒中，加熱至40～50℃，加入第二步蒸煮后的紅花石蒜鱗莖；第四步，加入糖化酶的同時接種酵母發(fā)酵，得到乙醇發(fā)酵液。作為優(yōu)選，以1kg的紅花石蒜鱗莖計，淀粉酶4～5g、纖維素酶6～10g、海藻酸錳500～800g、糖化酶10～20g，酵母5～10g。作為優(yōu)選，酵母為釀酒酵母。作為優(yōu)選，淀粉酶為α-淀粉酶。作為優(yōu)選，發(fā)酵溫度為30～40℃，發(fā)酵時間為20～30小時。紅花石蒜中含淀粉約20%，糖化產(chǎn)生的葡萄糖能供細菌生長繁殖，發(fā)酵糖化同時進行，糖化生產(chǎn)的葡萄糖一生產(chǎn)就被酵母充分利用，提高效率，發(fā)酵液乙醇含量高達53％，且有利于防止染菌。第一步的白酒浸泡可以使紅花石蒜鱗莖中的淀粉充分糖化。具體實施方式下面通過具體實施例對本發(fā)明作進一步詳細介紹。實施例1利用海藻酸錳和紅花石蒜鱗莖發(fā)酵制備乙醇發(fā)酵液的方法，包括以下步驟，第一步，將紅花石蒜鱗莖浸泡在45°的白酒中，在常溫條件下浸泡6天，取出紅花石蒜鱗莖，浸泡后的白酒備用；第二步，將取出的紅花石蒜鱗莖搗碎，加入α-淀粉酶和纖維素酶，在75℃條件下蒸煮50min；第三步，按照質(zhì)量比9：1將海藻酸錳加入第一步中浸泡后的白酒中，加熱至45℃，加入第二步蒸煮后的紅花石蒜鱗莖；第四步，加入糖化酶的同時接種釀酒酵母發(fā)酵，發(fā)酵溫度為35℃，發(fā)酵時間為25小時，得到乙醇發(fā)酵液。上述過程中，以1kg的紅花石蒜鱗莖計，淀粉酶4.5g、纖維素酶8g、海藻酸錳650g、糖化酶15g和酵母7.5g。實施例2利用海藻酸錳和紅花石蒜鱗莖發(fā)酵制備乙醇發(fā)酵液的方法，包括以下步驟，第一步，將紅花石蒜鱗莖浸泡在40°的白酒中，在常溫條件下浸泡5天，取出紅花石蒜鱗莖，浸泡后的白酒備用；第二步，將取出的紅花石蒜鱗莖搗碎，加入α-淀粉酶和纖維素酶，在70℃條件下蒸煮40min；第三步，按照質(zhì)量比9：1將海藻酸錳加入第一步中浸泡后的白酒中，加熱至40℃，加入第二步蒸煮后的紅花石蒜鱗莖；第四步，加入糖化酶的同時接種釀酒酵母發(fā)酵，發(fā)酵溫度為30℃，發(fā)酵時間為20小時，得到乙醇發(fā)酵液。上述過程中，以1kg的紅花石蒜鱗莖計，淀粉酶4g、纖維素酶6g、海藻酸錳500g、糖化酶10g和酵母5g。實施例3利用海藻酸錳和紅花石蒜鱗莖發(fā)酵制備乙醇發(fā)酵液的方法，包括以下步驟，第一步，將紅花石蒜鱗莖浸泡在50°的白酒中，在常溫條件下浸泡7天，取出紅花石蒜鱗莖，浸泡后的白酒備用；第二步，將取出的紅花石蒜鱗莖搗碎，加入α-淀粉酶和纖維素酶，在80℃條件下蒸煮60min；第三步，按照質(zhì)量比9：1將海藻酸錳加入第一步中浸泡后的白酒中，加熱至50℃，加入第二步蒸煮后的紅花石蒜鱗莖；第四步，加入糖化酶的同時接種釀酒酵母發(fā)酵，發(fā)酵溫度為40℃，發(fā)酵時間為30小時，得到乙醇發(fā)酵液。上述過程中，以1kg的紅花石蒜鱗莖計，淀粉酶5g、纖維素酶10g、海藻酸錳800g、糖化酶20g和酵母10g。實施例4利用海藻酸錳和紅花石蒜鱗莖發(fā)酵制備乙醇發(fā)酵液的方法，包括以下步驟，第一步，將紅花石蒜鱗莖浸泡在44°的白酒中，在常溫條件下浸泡6天，取出紅花石蒜鱗莖，浸泡后的白酒備用；第二步，將取出的紅花石蒜鱗莖搗碎，加入α-淀粉酶和纖維素酶，在78℃條件下蒸煮45min；第三步，按照質(zhì)量比9：1將海藻酸錳加入第一步中浸泡后的白酒中，加熱至42℃，加入第二步蒸煮后的紅花石蒜鱗莖；第四步，加入糖化酶的同時接種釀酒酵母發(fā)酵，發(fā)酵溫度為38℃，發(fā)酵時間為26小時，得到乙醇發(fā)酵液。上述過程中，以1kg的紅花石蒜鱗莖計，淀粉酶4.7g、纖維素酶9g、海藻酸錳600g、糖化酶17g和酵母8g。對照例1與實施例4的區(qū)別在于：第四步加入糖化酶之后，再接種酵母發(fā)酵。利用海藻酸錳和紅花石蒜鱗莖發(fā)酵制備乙醇發(fā)酵液的方法，包括以下步驟，第一步，將紅花石蒜鱗莖浸泡在44°的白酒中，在常溫條件下浸泡6天，取出紅花石蒜鱗莖，浸泡后的白酒備用；第二步，將取出的紅花石蒜鱗莖搗碎，加入α-淀粉酶和纖維素酶，在78℃條件下蒸煮45min；第三步，按照質(zhì)量比9：1將海藻酸錳加入第一步中浸泡后的白酒中，加熱至42℃，加入第二步蒸煮后的紅花石蒜鱗莖；第四步，加入糖化酶，然后接種釀酒酵母發(fā)酵，發(fā)酵溫度為38℃，發(fā)酵時間為26小時，得到乙醇發(fā)酵液。上述過程中，以1kg的紅花石蒜鱗莖計，淀粉酶4.7g、纖維素酶9g、海藻酸錳600g、糖化酶17g和酵母8g。對照例2與實施例3的區(qū)別在于：白酒替換為水。利用海藻酸錳和紅花石蒜鱗莖發(fā)酵制備乙醇發(fā)酵液的方法，包括以下步驟，第一步，將紅花石蒜鱗莖浸泡在水中，在常溫條件下浸泡7天，取出紅花石蒜鱗莖，浸泡后的水備用；第二步，將取出的紅花石蒜鱗莖搗碎，加入α-淀粉酶和纖維素酶，在80℃條件下蒸煮60min；第三步，按照質(zhì)量比9：1將海藻酸錳加入第一步中浸泡后的水中，加熱至50℃，加入第二步蒸煮后的紅花石蒜鱗莖；第四步，加入糖化酶的同時接種釀酒酵母發(fā)酵，發(fā)酵溫度為40℃，發(fā)酵時間為30小時，得到乙醇發(fā)酵液。上述過程中，以1kg的紅花石蒜鱗莖計，淀粉酶5g、纖維素酶10g、海藻酸錳800g、糖化酶20g和酵母10g。對照例3與實施例3的區(qū)別在于：海藻酸錳和白酒的質(zhì)量比為1:1。利用海藻酸錳和紅花石蒜鱗莖發(fā)酵制備乙醇發(fā)酵液的方法，包括以下步驟，第一步，將紅花石蒜鱗莖浸泡在50°的白酒中，在常溫條件下浸泡7天，取出紅花石蒜鱗莖，浸泡后的白酒備用；第二步，將取出的紅花石蒜鱗莖搗碎，加入α-淀粉酶和纖維素酶，在80℃條件下蒸煮60min；第三步，按照質(zhì)量比1：1將海藻酸錳加入第一步中浸泡后的白酒中，加熱至50℃，加入第二步蒸煮后的紅花石蒜鱗莖；第四步，加入糖化酶的同時接種釀酒酵母發(fā)酵，發(fā)酵溫度為40℃，發(fā)酵時間為30小時，得到乙醇發(fā)酵液。上述過程中，以1kg的紅花石蒜鱗莖計，淀粉酶5g、纖維素酶10g、海藻酸錳800g、糖化酶20g和酵母10g。性能測試：乙醇含量%實施例153實施例250實施例351實施例452對照例133對照例242對照例339從表中可以看出，紅花石蒜鱗莖糖化產(chǎn)生的葡萄糖能供細菌生長繁殖，發(fā)酵糖化同時進行，糖化生產(chǎn)的葡萄糖一生產(chǎn)就被酵母充分利用，提高效率，發(fā)酵液乙醇含量高達53％，且有利于防止染菌，白酒浸泡可以使紅花石蒜鱗莖中的淀粉充分糖化。從對照例3可以看出，海藻酸錳和白酒的比例為對本發(fā)明的發(fā)酵也有很大影響。當前第1頁1 2 3