專利名稱：選擇親和性多肽分子刷及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種多肽分子刷及其制備方法。特別是一種選擇親和性多肽分子刷及其制備方法。
背景技術(shù)：
近年來，利用生物大分子合成金屬納米材料和器件引起了研究者的廣泛關(guān)注。利用生物大分子合成納米材料因其反應(yīng)條件溫和、制備產(chǎn)物可控性好、反應(yīng)完成后易于降解已成為納米科技一個重要分支。多肽是由氨基酸組成的具有選擇親和性的生物大分子，且二十種氨基酸每一種 都有獨特的尺寸和功能，經(jīng)過自組裝形成特定的序列，使多肽成為具有特定結(jié)構(gòu)和生物信號的系統(tǒng)。因此，多肽的自組裝和選擇識別特性對金屬納米粒子的形成和組裝起到了重要的作用。由于多肽奇特的自組裝和識別特性，利用多肽來合成納米粒子的方法得到了越來越多的關(guān)注。其中利用水溶性多肽AYSSGAPPMPPF (結(jié)構(gòu)如下圖所示)制備納米粒子，因其具有良好的自組裝和識別金粒子的特性，可實現(xiàn)金納米粒子大小及形貌的可控。Naik等人利用水溶性多肽AYSSGAPPMPPF (結(jié)構(gòu)如下圖所示)合成了 Pd-Au雙金屬納米粒子，并通過其它三種序列的多肽在納米粒子成核機(jī)理等方面進(jìn)行了研究(R.R.Naik, S.J.Stringger,
G.Agarwal, S.E.Jones, Μ.0.Stone.Nature Mater.2002, I, 169.)。Chun 等人也利用多肽AYSSGAPPMPPF合成金納米粒子，并同時實現(xiàn)其雙螺旋結(jié)構(gòu)自組裝(C.L.Chen,N.L.Ros1.Angew.Chem.1nt.Ed.2010, 49，1924.)。Yang 等人將多肽 AYSSGAPPMPPF涂在PET薄膜上,形成peptide-PET薄膜涂層，制備出立方晶型的銀納米晶體,并成功的控制了晶粒大小在 1_4微米(X.Zhang, J.C.Chen, ff.T.Yang.J.1norg.Biochem.2005,99，1692.)。
權(quán)利要求
1.一種選擇親和性多肽分子刷，其特征在于該分子刷是以選擇親和性十二肽Ala-Tyr-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Met-Pro-Pro-Phe為側(cè)鏈，經(jīng)與甲基丙烯酸輕乙酯聚合形成的聚合物分子刷，其結(jié)構(gòu)式為:
2.一種制備根據(jù)權(quán)利要求1所述的選擇親和性多肽分子刷的方法，其特征在于該方法的具體步驟為: 1)在室溫下，根據(jù)權(quán)利要求1所述結(jié)構(gòu)式，將相鄰的兩個單肽按1:1.05 1.20的摩爾比溶于干燥的DCM (二氯甲烷)中，得到混合溶液，再加入2飛倍摩爾當(dāng)量的DiPEA (N,N-二異丙基乙胺)，使混合溶液的pH值為堿性，惰性氣氛下，加入1.廣1.3倍摩爾當(dāng)量的HOBt (1-羥基苯并三唑)，在冰鹽浴下攪拌2(Γ30分鐘后，再加入1.f 1.2倍摩爾當(dāng)量的EDC.HCl (1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽)，攪拌過夜，然后將反應(yīng)混合液依次用10% KHSO4水溶液，飽和NaHCO3水溶液，飽和NaCl水溶液進(jìn)行洗滌，MgSO4干燥，過濾，蒸干得粗產(chǎn)物，該粗產(chǎn)物經(jīng)分離純化得到四個二肽，即Boc-Ala-Tyr(Bzl)-0H、Boc-Ser (Bzl)-Ser (Bzl)-OH、Boc-Gly-Ala-OMe、Boc-Pro-Pro-OMe ;其中 1-羥基苯并三唑用量為1.f 1.3倍摩爾當(dāng)量、1.f 1.2倍摩爾當(dāng)量1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽的用量為。
2)依照步驟I)的方法將步驟I)所得的兩個二肽的合成一個四肽片段，即Boc-Ser(Bzl)-Ser(Bzl)- Gly-Ala-OMe,再將一個二肽分別與兩個不同氨基酸反應(yīng)，生成兩個三妝,即Boc-Pro-Pro-Met-OMe、Boc-Pro-Pro-Phe-OMe;再合成得到兩個六妝片段，S卩Boc-Ala-Tyr(Bzl)-Ser(Bzl)-Ser(Bzl)-Gly-Ala-OMe> Boc-Pro-Pro- Met-Pro - Pro-Phe -OMe ； 3)將步驟2)得到的兩個六肽片段連接起來最終得到了十二肽=Boc-Ala-Tyr(bzl)-Ser(bzl)-Ser(bzl)-Gly-Ala-Pro-Pro-Met-Pro-Pro-Phe-OH (Boc-AYSSGAPPMPPF-OH)。
4)將步驟3)所得的十二肽Boc-AYSSGAPPMPPF-OH與甲基丙烯酸羥乙酯HEMA按摩爾比1: 1.5 2溶于DCM之中，室溫下加入l(T20mg的4-二甲氨基吡啶DMAP ;在惰性氣氛和冰鹽浴下，加入1.3^1.5倍摩爾當(dāng)量的1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽EDC.Η(:1，攪拌過夜，將反應(yīng)混合溶液用去離子水洗滌，MgSO4干燥，過濾，蒸干得粗產(chǎn)物；將該粗產(chǎn)物分離純化，得到單體Boc-AY (bzl) S (bzl) S (bzl) GAPPMPPF-HEMA ； 5)將步驟4)所得單體溶于干燥的0.Γ 0.5 mL DMF中，加入質(zhì)量比為0.5 1.0%的偶氮類引發(fā)劑，即AIBN (偶氮二異丁腈)，在惰性氣氛下，在6(T70°C溫度下攪拌反應(yīng)6 10小時，冷卻至室溫，蒸干洗脫劑得聚合物和單體的混合物；將該混合物在冰鹽浴下溶于純2飛mL三氟乙酸中，加入2飛倍摩爾當(dāng)量的HBr，攪拌2 4小時后，用乙醚沉淀，經(jīng)離心、干燥，用去離子水透析2 3天，冷凍干燥后，得目標(biāo)產(chǎn)物選擇親和性多肽分子刷。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述步驟I)中的調(diào)節(jié)混合溶液的pH=2 4。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述的步驟5)中的偶氮類引發(fā)劑為:AIBN(偶氮二異丁腈)。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于將所述的步驟I)替換為:將根據(jù)權(quán)利要求1所述結(jié)構(gòu)式，合成四個二肽片段，即Boc-Ala-Tyr (Bzl)-0H、Boc- Ser (Bzl)-Gly -OH、Boc- Pro-Pro -OMe> Boc-Pro-Pro-Ome ；再合成四個三妝，即:Boc_ Ala-Tyr (Bzl)-Ser (Bzl)-0Me> Boc- Ser (Bzl) -Gly-Ala -OMe、Boc- Pro-Pro-Met - Ome 和 Boc-Pro-Pro-Phe - Ome ;所述的步驟 2)替換為:將步驟I)所得的四個三肽合成二個六肽，即B0c-Ala-Tyr(Bzl)-Ser (BzI)-Ser(BzI)-GIy-AIa-OMe、Boc-Pro-Pro- Met-Pro - Pro-Phe -OMe?！?br> 全文摘要
本發(fā)明涉及一種選擇親和性多肽分子刷及其制備方法。該分子刷的結(jié)構(gòu)式為。本發(fā)明首次采用液相合成法制備出具有選擇親和性的十二肽鏈Ala-Tyr-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Met-Pro-Pro-Phe，在其端基引入聚合單元后，進(jìn)一步經(jīng)自由基聚合制備出聚合物分子刷。由于該多肽分子刷具有β折疊二級結(jié)構(gòu)、良好的生物相容性、可降解性、以及對金屬離子的選擇親和性，可用于制備尺寸穩(wěn)定性好、長度可調(diào)控并可在三維方面增長的金屬納米材料。
文檔編號C08F120/36GK103232561SQ20131012187
公開日2013年8月7日 申請日期2013年4月10日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月10日
發(fā)明者張阿方, 喬瀟, 張修強(qiáng), 王磊, 代玉堂, 李文, 薄潔 申請人:上海大學(xué)