專利名稱：抗消化道潰瘍的倍半萜內(nèi)酯類化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及碳環(huán)化合物領(lǐng)域，特別是涉及一類倍半萜內(nèi)酯類化合物及其主要在防治消化道疾病方面的應(yīng)用。
菊科(Compositae)植物含有不同類型的倍半萜成分，主要是由桉葉烷(Eudesmane)和牻牛兒烷(Germacrane)等倍半萜骨架在植物體內(nèi)經(jīng)生物體內(nèi)的氧化、酯化和環(huán)化衍生出的一大類倍半萜及其內(nèi)酯化合物，少數(shù)與糖結(jié)合成為倍半萜甙，這些代謝產(chǎn)物具有不同的生物活性，諸如抗炎、殺菌、抗腫瘤。菊科植物中所含的這些倍半萜成分比較復(fù)雜，并且含量低，分離上有難度，在開發(fā)應(yīng)用上也有一定的限制，因此對菊科植物的研究，應(yīng)注重選擇活性高，且有效成分含量較高者為研究對象，為進(jìn)一步開發(fā)利用打基礎(chǔ)。
本發(fā)明基于目前菊科植物中倍半萜成分在植物體內(nèi)含量低、分離難、藥物有效成分少，尚未研制出本發(fā)明從植物體內(nèi)分離以及進(jìn)一步合成的衍生物的現(xiàn)狀，目的在于提供一類在植物體內(nèi)含量高、結(jié)構(gòu)新、毒性低、高效價廉的倍半萜內(nèi)酯類化合物，同時提供該類化合物的制備方法及其在制備預(yù)防和治療消化道疾病的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的提供一類以下列通式(Ⅰ)表示的化合物，
式中，R1和R2為甲基、亞甲基、-CH2OR′、-COOR′、-CONR′R′(R′為氫、選自C1-C5的烷基、C1-C20的酰基、C3-C6的環(huán)烷基、取代或未取代的苯甲酰基、葡萄糖、葡萄糖醛酸、鼠李糖、半乳糖、阿拉伯糖)，3,4或4,5形成雙鍵或環(huán)氧或不形成雙鍵，1,2或9,10形成雙鍵或環(huán)氧或不形成雙鍵，1,5成鍵或不成鍵，11位形成吡唑琳甲基酯(R1為-N=N-CH2-CH2-)。上述通式(Ⅰ)可用于制備預(yù)防和治療消化道疾病的藥物。
本發(fā)明化合物因在植物體內(nèi)含量高、毒性低、結(jié)構(gòu)新，具有預(yù)防阿司匹林對胃粘膜的損傷作用，且不會影響組胺促進(jìn)的胃酸分泌，從而可實現(xiàn)本發(fā)明的第一個目的；此外，本發(fā)明采用植物一支箭(Crepis napifera)中提取分離的倍半萜類化合物及其合成的相關(guān)衍生物的制備方法因方法簡便，所得產(chǎn)品質(zhì)量高，通式(Ⅰ)化合物在抗消化道潰瘍的作用上取得新的進(jìn)展，從而可實現(xiàn)本發(fā)明的第二個目的。
以上本發(fā)明化合物用作藥物上時，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用。該藥物組合物含有0.1～9.5％，優(yōu)選為0.5～90％的本發(fā)明化合物，其余為藥物學(xué)上可接受的，對人和動物無毒和惰性的載體。
所述的載體是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料以及藥物制品輔劑。建議將所述的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明的藥物可經(jīng)口服給藥。
口服可服用其固體或液體制劑，如粉劑、片劑、糖衣劑、膠囊、粒劑懸浮液、糖漿、滴丸劑型等。
下面用本發(fā)明通式(Ⅰ)化合物的藥理實驗結(jié)果來證明本發(fā)明的藥用效果1、抗藥物導(dǎo)致的胃損傷作用實驗威斯塔(Wistar)雌鼠，體重100-150g,經(jīng)過18個小時的前期實驗，在幽門結(jié)扎后給藥，30分鐘后，刺激胃粘膜，再過一小時，動物處死。立即取出胃，并且沿胃大彎展開，用立體顯微鏡檢查胃。Ln計為損傷值，測出受損傷總面積La(mm2)，每一組動物受損傷的百分率為Lup，可求出損傷指數(shù)Li=Ln+La。刺激胃粘膜用30mg/kg阿司匹林，藥物懸浮于1％羧甲基纖維素溶液中，劑量為1ml/kg動物體重。
實驗結(jié)果本發(fā)明之藥物化合物可以有效地抑制小鼠體內(nèi)由于阿司匹林導(dǎo)致的胃損傷，阿司匹林以80mg/kg的劑量灌胃給藥。損傷處只有輕度感染，但損傷數(shù)量有明顯降低，近半數(shù)的動物可以完全得到保護(hù)。表1作用于阿司匹林導(dǎo)致的胃損傷
*p＜0.052、對鼠體胃腔內(nèi)胃酸分泌的作用斯普拉道來氏(Sprague-Dawley)特種雄鼠，體重300-350g，麻醉后，用不同的動物標(biāo)本來測定其胃酸分泌物。動物經(jīng)18個小時的前期實驗，自由攝水，用30％烏拉坦(urethane)以5ml/kg的劑量肌肉注射將其麻醉后，切開氣管，打開腹部，結(jié)扎食管和幽門，將一雙腔環(huán)流的套管插入胃內(nèi)并固定在胃前部。用37℃的溫鹽水以1ml/min的速度連續(xù)灌入胃內(nèi)，每15分鐘收集一次灌注液，灌注液的酸濃度用NaOH滴定至PH=7為終點來測定。以此法同時研究5只小鼠的胃酸分泌物。以10mgkg/h的劑量靜脈注射組胺促分泌素，90分鐘后，當(dāng)胃酸的排出量穩(wěn)定后以靜脈注射的方式給藥。
實驗結(jié)果本發(fā)明之化合物以70mg/kg的劑量靜脈注射不會影響小鼠胃內(nèi)由組胺刺激產(chǎn)生的胃酸分泌物。
表2作用于組胺刺激的胃酸分泌物
下面所給出的優(yōu)選實施例，旨在進(jìn)一步闡明本發(fā)明的化合物，制備方法，而并非限定所舉例的化合物的范圍，即是說通過這些實施例所述的方法可很容易地制得通式(Ⅰ)化合物，對本發(fā)明的互換或改動，以及使用類似的溶劑，對于本專業(yè)的普通技術(shù)人員是不需要創(chuàng)造性勞動的。
實施例1將經(jīng)風(fēng)干粉碎的植物一支箭(Crepis napifera)樣品2kg，用甲醇冷浸提取3次，過濾后，回收甲醇，得甲醇提取物，溶于水，依次用石油醚、氯仿、正丁醇萃取。正丁醇部分經(jīng)硅膠柱層析，以氯仿-甲醇溶劑系統(tǒng)梯度洗脫，得化合物1通式(Ⅰ)中的R1==CH2,R2=-COOGlu,1,10雙鍵，4,5雙鍵。
化合物1(Ainsliaside B)無色針晶，C21H28O9,mp186-188℃.[α]D22=57.7°(CH3OH,c=0.45).FAB-MS(negative)m/e:423[M-H],261[M-C6H11O5].UVλmax(MeOH)nm(logε):209.5(4.5).IRνmax(KBr)cm-1:3393(br),2930,1762,1726,1665,1380,1293,1249,1141,1098,1075,1017,971.1H-NMR(400MHzCD3COCD3,δ,ppm):1.61(3H,s,H-15),2.71(1H,m,H-7),4.69(1H,dd,J=10Hz,H-6),5.01(1H,d,J=10Hz,H-5),5.58(1H,d,J=6Hz,H-101 glucose),5.60(1H,d,J=3Hz,H-13a),5.88(1H,dd,J=13Hz,J=4Hz,H1),6.09(1H,d,J=3Hz,H-13b).13C-NMR(400MHz,CD3COCD3,δ,ppm):118.9(C-1),27.3(C-2),39.7(C-3),143.4(C-4),127.5(C-5),82.5(C-6),50.7(C-7),31.1(C-8),37.1(C-9),131.9(C-10),142.0(C-11).170.5(C-12),120.7(C-13),167.0(C-14),17.1(C-15),95.2(C-1′),73.8(C-2′),78.2(C-3′),71.4(C-4′),78.4(C-5′),62.6(C-6′).
實施例2將經(jīng)風(fēng)干粉碎的植物-支箭(Crepis napifera)樣品2kg，用甲醇冷浸提取3次，過濾后，回收甲醇，得甲醇提取物，溶于水，依次用石油醚、氯仿、正丁醇萃取。正丁醇部分經(jīng)硅膠柱層析，以氯仿-甲醇溶劑系統(tǒng)梯度洗脫，得化合物2通式(Ⅰ)中的R1=-CH3,R2=-COOGlu,1,10雙鍵，4,5雙鍵。
化合物2無色針晶，C21H30O9,mp175-177℃.[α]D21=-52.0°(CH3OH,0.50).FAB-MS(negativc)m/e:425[M-H],263[M-C6H11O5].UVλmax(MeOH)nm(logε):207.5(4.3),221.5(4.1).IRνmax(KBr)cm-1:3463,3397,2917,1755,1731,1673,1377,1311,1242,1163,1070,1007,963.1H-NMR(400MHz,CD3COCD3,δ,ppm):1.16(3H,d,J=8Hz,H-13),1.60(3H,s,H-15),2.25(1H,m,H-11),2.76(1H,m,H-7),4.67(1H,dd,J=9Hz,H-6),4.89(1H,d,J=10Hz,H-5),5.58(1H,d,J=8Hz,H-1 of glucose),5.84(1H,dd,J=12Hz,J=3Hz,H-1).13C-NMR(400MHz,CD3COCD3,δ,ppm):118.9(C-1),27.2(C-2),39.8(C-3),142.0(C-4),127.7(C-5),81.8(C-6),bb.1(C-7),31.1(C-8),37.2(C-9),131.9(C-10),42.8(C-11),178.6(C-12)；13.4(C-13),167.0(C-14),17.0(C-15),95.2(C-1′),73.8(C-2′),78.2(C-3′),71.4(C-4′),78.4(C-5′),62.6(C-6′).
實施例3用實施例1所得化合物400mg溶于10ml甲醇溶液中，加入10ml 0.2mol/L甲醇鈉的甲醇溶液，直至反應(yīng)完成，用稀鹽酸酸化至溶液呈中性，加入水，再用氯仿萃取反應(yīng)混合物，氯仿層經(jīng)無水Na2SO4干燥后，回收溶劑，得反應(yīng)混合物。反應(yīng)混合物經(jīng)硅膠柱層析，用環(huán)己烷-醋酸乙酯(6∶1)洗脫得化合物3通式(Ⅰ)中的R1=CH2OCH3.R2=-COOCH3,1,10雙鍵，4,5雙鍵。
化合物3無色透明液體，C17H24O5,EI-MSm/e:308[M]+,293[M-CH3],276[M-CH3OH],263[M-CO2H],248[M-HCOOCH3],216,203,171,145,105,80.UVλmax(MeOH)nm(ε):206(25000),234(8400),246(4500).IRνmax(KBr)cm-1:3624,3530,2930,2865,1712,1669,1442,1380,1244,1190,960,778.1H-NMR(400MHz,CDCl3,δ,ppm):1.56(3H,s,H-15),2.20(1H,m,H-11),2.77(1H,m,H7),3.37(3H,s,OCH3),3.70(3H,s,COOCH3),3.75(2H,d,J=10Hz,H13),4.60(1H,dd,J=10Hz,H-6),4.88(1H,d,J=10Hz,H-5),5.63(1H,dd.J=12Hz,H-1).13C-NMR(400MHz,CDCl3,δ,ppm):145.7(C-1),26.5C-2),39.2(C-3),141.5(C-4),126.2(C-5),81.3(C-6),48.3(C-7).10.3(C-8),36.6(C-9),131.0(C-10),48.3(C-11),175.7(C-12),68.5(C-13),168.3(C-14),16.6(C-15),59.2(C-16),51.0(C-17).
實施例4用實施例2所得化合物400mg溶于10ml甲醇溶液中，加入10ml 0.2mol/L甲醇鈉的甲醇溶液，直至反應(yīng)完成，用稀鹽酸酸化至溶液呈中性，加入水，再用氯仿萃取反應(yīng)混合物，氯仿層經(jīng)無水Na2SO4干燥后，回收溶劑，得反應(yīng)混合物。反應(yīng)混合物經(jīng)硅膠柱層析，用環(huán)己烷-醋酸乙酯(6∶1)洗脫得化合物4通式(Ⅰ)中的R1=-CH3,R=-COOCH3,1,10雙鍵，4,5雙鍵。
化合物4無色透明液體，C16H22O4,EI-MS m/e:278[M]+,263[M-CH3],246[M-H3OH],218[M-HCOOCH3],203,173,145,107,80.UVλmax(MeOH)nm(ε):206.5(31928),242(8643).IRνmax(KBr)cm-1:3024,2939,2862,1769,1716,1635,1445,1376,1342,1245,1194,1111,964.1H-NMR(400MHz,CDCl3,δ,ppm):1.12(3H,d,H-13),1.43(3H,s,H-15),2.68(1H,m,H-7),1.57(3H,s,COOCH3),4,46(1H,dd,J=10Hz,H-6),4.69(1H,d,J=10Hz,H5),5.49(1H,dd,J=12Hz,H-1).13C-NMR(400MHz,CDCl3,δ,ppm):115.6(C-1),26.1(C-2),38.8(C-3),141.0(C-4),125.9(C-5),81.0(C-6),51.1(C-7),29.9(C-8),36.3(C-9),130.6(C-10),41.9(C-11),177.9(C-12),12.7(C-13),167.9(C-14),16.3(C-15),50.7(C-16).
實施例5重氮甲烷(CH2N2)的乙醚液逐滴加入實施例1所得化合物的乙醇溶液，直至反應(yīng)完成，除去溶劑，反應(yīng)混合物經(jīng)硅膠柱層析，用正己烷-醋酸乙酯(7∶3)洗脫得化合物5通式(Ⅰ)中R1=-N=N-CH2-CH2-,R2=-COOCH3,1,10雙鍵，4,5雙鍵。
化合物5C17H22O4N2,mp:187℃.EI-MS m/e:318[M]+,290[M-N2],230[290HCO2Me].IRνmax(CHCl3)cm1:1773,17005,1631,1602,981.1H NMR(400MHz,CDCl3,δ,ppm):1.68(3H,s,H-15),4.64(1H,ddd,J=18Hz,J=10Hz,H-16),4.81(1H,ddd,J=18Hz,J=9.5Hz,H-16’),4.91(1H,d,J=10Hz,H-5),5.59(1H,dd,J=10Hz,H6),5.62(1H,dd,J=12Hz,H-1),3.70(3H,s,OCH3).
實施例6在實施例1所得化合物的甲醇溶液中，加入過氧苯甲酸，直至反應(yīng)完成，除去溶制，反應(yīng)物經(jīng)純化得化合物6通式(Ⅰ)中R1==CH2,R2=-COOGlu,1,10環(huán)氧4,5環(huán)氧。
實施例7
在實施例2所得化合物的甲醇溶液中，加入過氧苯甲酸，直至反應(yīng)完成，除去溶制，經(jīng)純化得化合物7通式(Ⅰ)中R1=-CH3,R2=-COOGlu,1,10環(huán)氧，4,5環(huán)氧。
實施例8在實施例1所得化合物的水溶液中，加入稀HCl，直至反應(yīng)完全，用氯仿萃取，氯仿層經(jīng)無水NaSO4干燥后，回收溶劑，反應(yīng)物經(jīng)純化得化合物8通式(Ⅰ)中R1=CH2,R2=-COOH,1,10雙鍵，4,5雙鍵。
實施例9在實施例2所得化合物的水溶液中，加入稀HCl，直至反應(yīng)完全，用氯仿萃取，氯仿層經(jīng)無水NaSO4干燥后，回收溶劑，反應(yīng)物經(jīng)純化得化合物9通式(Ⅰ)中R1=CH3,R2=-COOH,1,10雙鍵，4,5雙鍵。
實施例10在實施例8所得化合物的氯仿溶液中，加入過氧苯甲酸，直至反應(yīng)完全，除去溶制，經(jīng)純化得化合物10通式(Ⅰ)中R1==CH2,R2=-COOH,1,10環(huán)氧，4,5環(huán)氧。
實施例11在實施例9所得化合物的氯仿溶液中，加入過氧苯甲酸，直至反應(yīng)完全，除去溶劑，經(jīng)純化得化合物11通式(Ⅰ)中R1=-CH3,R2=-COOH,1,10環(huán)氧，4,5環(huán)氧。
權(quán)利要求
1.通式(Ⅰ)所示的倍半萜內(nèi)酯類化合物，
式中，R1和R2為甲基、亞甲基、-CH2OR′、-COOR′、CONR′R′(R′為氫、選自C1-C5的烷基、C1-C20的?；3-C6的環(huán)烷基、取代或未取代的苯甲酰基、葡萄糖、葡萄糖醛酸、鼠李糖、半乳糖、阿拉伯糖)，3,4或4,5形成雙鍵或環(huán)氧或不形成雙鍵，1,2或9,10形成雙鍵或環(huán)氧或不形成雙鍵，1,5成鍵或不成鍵，11位形成吡唑琳甲基酯(R1為-N=N-CH2-CH2-)。
2.權(quán)利要求1通式(Ⅰ)化合物在制備預(yù)防和治療消化道疾病的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及通式(Ⅰ)表示的化合物及其制備方法和應(yīng)用。式中,R
文檔編號C07D307/00GK1215055SQ9811818
公開日1999年4月28日 申請日期1998年9月8日 優(yōu)先權(quán)日1998年9月8日
發(fā)明者吳少華, 馬云保, 羅曉東, 劉吉開, 吳大剛 申請人:中國科學(xué)院昆明植物研究所