新化合物及其對(duì)進(jìn)食行為的效應(yīng)的制作方法
【專利摘要】本文提供了PYY肽類似物、包含所述類似物的組合物以及所述類似物用于治療和預(yù)防代謝病癥，例如能量代謝病癥例如糖尿病和肥胖，以及用于在受試者中降低食欲，減少食物攝入或者減少熱量攝入的方法。
【專利說(shuō)明】新化合物及其對(duì)進(jìn)食行為的效應(yīng)
1.【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本申請(qǐng)涉及使用試劑來(lái)控制食欲、進(jìn)食、食物攝入、能量消耗和熱量攝入，尤其在肥胖領(lǐng)域中。
2.【背景技術(shù)】
[0002]根據(jù)國(guó)家健康和營(yíng)養(yǎng)檢查調(diào)查(NationalHealth and Nutrition ExaminationSurvey, NHANES III，1988-1994)，美國(guó)的男性和女性中有三分之一至二分之一超重。在美國(guó)，20歲或20歲以上的人中，60%的男性和51%的女性超重或肥胖。此外，在美國(guó)，大比例的兒童超重或肥胖。
[0003]肥胖的原因是復(fù)雜的和多因素的。日益增加的證據(jù)表明，肥胖不是一個(gè)自我控制的簡(jiǎn)單問(wèn)題，而是涉及食欲調(diào)節(jié)和能量代謝的復(fù)雜病癥。此外，肥胖與在人群中發(fā)病率和死亡率增高有關(guān)的多種病癥有關(guān)。雖然沒(méi)有最后確定肥胖的病因?qū)W，但是遺傳因素、新陳代謝因素、生物化學(xué)因素、文化因素和心理社會(huì)因素被認(rèn)為起作用。通常，肥胖被描述為其中過(guò)多身體脂肪使個(gè)體有健康風(fēng)險(xiǎn)的病癥。
[0004]有強(qiáng)有力的證據(jù)表明，肥胖與發(fā)病率和死亡率增高相關(guān)。疾病風(fēng)險(xiǎn)，例如心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)和2型糖尿病疾病風(fēng)險(xiǎn)隨體重指數(shù)(BMI)的增加而獨(dú)立地增加。實(shí)際上，該風(fēng)險(xiǎn)己被量化為:BMI每高于24.9 —個(gè)點(diǎn)，對(duì)女性來(lái)說(shuō)就增加5%的患心臟病的風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)男性來(lái)說(shuō)就增加7%的患心臟病的風(fēng)險(xiǎn)(參見(jiàn)，Kenchaiah et al., N.Engl.J.Med.，347:305，2002;Massie, N.Engl.J.Med.，347:358，2002)。此外，有大量證據(jù)表明，胖人體重減輕可減少重要的疾 病風(fēng)險(xiǎn)因素。即使較小的減重減輕，例如超重和肥胖成人初始體重的10%,也與風(fēng)險(xiǎn)因素例如聞血壓、聞脂血癥和聞血糖減少有關(guān)。
[0005]雖然飲食和鍛煉提供了一種降低體重增加的簡(jiǎn)單方法，但是超重和肥胖的個(gè)體經(jīng)常不能充分地控制這些因素以有效減輕體重。可以使用藥物療法；可用作綜合減重計(jì)劃的一部分的若干體重減輕藥物已經(jīng)被美國(guó)食品與藥品管理局批準(zhǔn)。然而，這些藥物中的許多具有嚴(yán)重的不利副作用。當(dāng)侵入性較小的方法已失敗并且患者處于肥胖相關(guān)的發(fā)病率或死亡率的高風(fēng)險(xiǎn)時(shí)，在謹(jǐn)慎選擇的臨床上患有嚴(yán)重肥胖的患者中，減重外科手術(shù)是一個(gè)選擇。然而，這些治療是高風(fēng)險(xiǎn)的，并且僅適用于有限數(shù)量的患者。不僅僅是肥胖的受試者希望減輕體重。體重在建議范圍內(nèi)，例如在建議范圍的上部的人們，可能希望降低他們的體重以使其更接近于理想體重。因此，仍需要可用于在超重和肥胖的受試者中實(shí)現(xiàn)體重減輕的試劑。
[0006]在W003/026591中公開(kāi)了，向受試者外周給予肽YY (下文稱為PYY)或其激動(dòng)劑可導(dǎo)致食物攝入、熱量攝入和食欲的降低，以及能量代謝的改變。公開(kāi)了所述PYY或其激動(dòng)劑優(yōu)選為N末端缺失的PYY分子PYY3-36NH2。
[0007]本發(fā)明基于這樣的發(fā)現(xiàn)，即其中特定的氨基酸殘基缺失和/或取代的PPY類似物也可被給予受試者，以引起食物攝入減少、熱量攝入減少、食欲降低以及能量代謝的改變。在許多情況下，比天然PYY相比，本發(fā)明的類似物顯示出提高的效力和/或更長(zhǎng)的作用持續(xù)時(shí)間和/或更少的副作用。3.
【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]根據(jù)本發(fā)明的第一方面，提供了一種包含由式(I)表示的氨基酸序列的PYY類似物，
[0009]Xaa2-1le-His-Pro-His-Ala-Pro-Gly-Glu-Asp-Ala-Ser-Pro-Glu-Glu-Leu-Xaa18-His-Tyr-
[0010]Xaa21-Xaa22-Xaa23-Leu-Xaa25-His-Tyr-Leu-Asn-Xaa30-Val-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH2
[0011][SEQ ID N01]
[0012](I)
[0013]其中
[0014]Xaa2 選自 Pro 和 Gly ；
[0015]Xaa18 選自 Leu、Ile 和 Lys ;
[0016]Xaa21 選自 Tyr 和 Phe ；
[0017]Xaa22 選自 lie、Leu、Ala 和 Val;
[0018]Xaa23 選自 Ala、Leu、Gly、Val 和 Ser;
[0019]Xaa25 選自 Arg 和 His ;和
[0020]Xaa3ci 選自 Leu 和 His ；
[0021]或者是其變體和/或衍生物的化合物；或者其鹽，包括這種變體和/或衍生物的鹽，
[0022]一種變體，為具有最多達(dá) 2 個(gè)除 Xaa2、Xaa18、Xaa21、Xaa22、Xaa23、Xaa25 和 Xaa3° 以外的氨基酸被不同氨基酸替換的氨基酸序列。
[0023]根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了本發(fā)明的PYY類似物用作藥物。
[0024]根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了一種藥物組合物，其包含本發(fā)明的PYY類似物，以及可藥用載體和任選的其他治療成分。
[0025]根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了本發(fā)明的PYY類似物或者包含本發(fā)明的PYY類似物的藥物組合物用于治療代謝病癥。
[0026]根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了本發(fā)明的PYY類似物或者包含本發(fā)明PYY類似物的藥物組合物，用于降低受試者的食欲，用于減少受試者的食物攝入，或者用于減少受試者的熱量攝入。
[0027]根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了一種治療疾病或病癥或其他不需要的生理狀態(tài)的方法，其包括皮下給予本發(fā)明的PYY類似物或包含本發(fā)明PYY類似物的藥物組合物。
[0028]根據(jù)本發(fā)明，還提供了一種治療有此需要的受試者的代謝病癥的方法，其包括向受試者給予本發(fā)明的PYY類似物或包含本發(fā)明PYY類似物的藥物組合物。
[0029]還提供了本發(fā)明的PYY類似物用于制造用于治療代謝病癥的藥物的用途。
[0030]還提供了本發(fā)明的PYY類似物用于制造用于降低受試者的食欲，用于減少受試者的食物攝入，或者用于減少受試者的熱量攝入的藥物的用途。
4.【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】[0031]圖1示出了本發(fā)明的PYY類似物的氨基酸序列(類似物編號(hào)1-3)，使用這些PYY類似物的結(jié)合實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，以及其中將本發(fā)明的這些PYY類似物在小鼠中的食欲抑制效應(yīng)與天然PYY3-36NH2作比較的實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，如實(shí)施例1所述。
[0032]圖2、3和4示出了實(shí)施例2中描述的大鼠藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究的結(jié)果。
[0033]圖5和6示出了實(shí)施例3中描述的向超重小鼠長(zhǎng)期給予本發(fā)明的化合物的結(jié)果。
[0034]5.序列表
[0035]本申請(qǐng)列出的氨基酸序列用氨基酸的標(biāo)準(zhǔn)字母縮寫(xiě)示出。本文給出的具體序列涉及本發(fā)明的具體的優(yōu)選實(shí)施方案。
[0036]6.定義
[0037]為便于閱讀本公開(kāi)的多個(gè)實(shí)施方案，提供了對(duì)具體術(shù)語(yǔ)的以下解釋:
[0038]動(dòng)物:活的多細(xì)胞脊椎生物，該范疇包括，例如哺乳動(dòng)物和鳥(niǎo)。術(shù)語(yǔ)哺乳動(dòng)物包括人和非人哺乳動(dòng)物。類似地，術(shù)語(yǔ)“受試者”包括人和獸受試者。
[0039]食欲:對(duì)食物的天然的欲望或渴望。在一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)調(diào)查測(cè)量食欲以評(píng)估對(duì)食物的欲望。食欲增加通常導(dǎo)致進(jìn)食行為增加。
[0040]食欲抑制劑:降低對(duì)食物的欲望的化合物。市售的食欲抑制劑包括，但不限于，安非拉酮(二乙胺苯酮)、芬特明、馬吲哚和苯丙醇胺苯氟拉明、右苯氟拉明以及氟西汀。
[0041]體重指數(shù)(BMI):用于測(cè)量體重的數(shù)學(xué)公式，有時(shí)也稱為克托萊指數(shù)(Quetelet指數(shù))。通過(guò)用體重(kg)除以身高的平方(m2)計(jì)算BMI。對(duì)男性和女性來(lái)說(shuō)，視為“正?！钡默F(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)是20-24.9kg/m2的BMI。在一個(gè)實(shí)施方案中，高于25kg/m2的BMI可用于鑒定肥胖的受試者。I級(jí)肥胖對(duì)應(yīng)25-29.9kg/m2的BMI。II級(jí)肥胖對(duì)應(yīng)30_40kg/m2的BMI ;III肥胖對(duì)應(yīng)高于 40kg/m2 的 BMI (Jequier, Am.J Clin.Nutr, 45:1035-47，1987)。理想體重基于身高、體型、骨骼結(jié)構(gòu)和性別而在物種間和個(gè)體間不同。
[0042]保守置換:在多肽中一個(gè)氨基酸殘基被另一個(gè)生物學(xué)上相似的殘基替換。術(shù)語(yǔ)“保守變化”也包括使用取代氨基酸，即氨基酸上一個(gè)或多個(gè)原子被另一原子或基團(tuán)取代，以替換原始氨基酸，條件是針對(duì)所述置換的多肽產(chǎn)生的抗體也可與未置換的多肽發(fā)生免疫反應(yīng)。
[0043]糖尿病:因?yàn)閮?nèi)源性胰島素不足和/或胰島素敏感度缺陷，細(xì)胞不能運(yùn)送內(nèi)源性葡萄糖穿越其細(xì)胞膜。糖尿病是受損的碳水化合物、蛋白質(zhì)以及脂肪代謝的慢性綜合征，是由于胰島素分泌不足或者靶組織胰島素抗性。糖尿病以兩種主要的形式發(fā)生:胰島素依賴型糖尿病(IDDM，I型)和非胰島素依賴型糖尿病(NIDDM，II型)，它們?cè)诓∫驅(qū)W、病理學(xué)、遺傳學(xué)、發(fā)病年齡以及治療上是不同的。
[0044]所述兩種主要形式的糖尿病均以不能用控制葡萄糖體內(nèi)平衡所需的量和精確定時(shí)來(lái)遞送胰島素為特征。I型糖尿病或胰島素依賴型糖尿病(IDDM)由可導(dǎo)致內(nèi)源性胰島素的水平不足的β細(xì)胞的破壞引起。II型糖尿病或非胰島素依賴型糖尿病由身體對(duì)胰島素的敏感度的缺陷以及胰島素產(chǎn)生的相對(duì)不足引起。
[0045]食物攝入:個(gè)體消費(fèi)的食物的量。食物攝入可用體積或重量測(cè)量。例如，食物攝入可以是個(gè)體消費(fèi)的食物的總量。或者，食物攝入可以是個(gè)體的蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物、膽固醇、維生素、礦物或任何其他食物組分的量?！暗鞍踪|(zhì)攝入”是指?jìng)€(gè)體消費(fèi)的蛋白質(zhì)的量。類似地，“脂肪攝入”、“碳水化合物攝入”、“膽固醇攝入”、“維生素?cái)z入”和“礦物質(zhì)攝入”是指?jìng)€(gè)體消費(fèi)的蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物、膽固醇、維生素或礦物質(zhì)的量。
[0046]超極化:細(xì)胞的膜電位的降低。抑制性神經(jīng)遞質(zhì)通過(guò)超極化抑制神經(jīng)沖動(dòng)的傳遞。這種超極化被稱為抑制性突觸后電位(IPSP)。雖然細(xì)胞的閾電壓是不帶電的，但是超極化的細(xì)胞需要更強(qiáng)的興奮性刺激以達(dá)到閾值。
[0047]正常的日常飲食:給定物種的個(gè)體的平均食物攝入。正常的日常飲食可以用熱量攝入、蛋白質(zhì)攝入、碳水化合物攝入和/或脂肪攝入來(lái)表示。人的正常的日常飲食通常包含以下熱量:約2000、約2400或約2800至顯著更多的熱量。此外，人的正常的日常飲食通常包括約12g至約45g的蛋白質(zhì)、約120g至約610g的碳水化合物以及約Ilg至約90g的脂肪。低熱量飲食不會(huì)超過(guò)個(gè)人正常熱量攝入的約85%，優(yōu)選不超過(guò)約70%。
[0048]在動(dòng)物中，熱量和營(yíng)養(yǎng)需求根據(jù)動(dòng)物的種類和大小而不同。例如，在貓中，每磅的總熱量攝入、以及蛋白質(zhì)、碳水化合物和脂肪的分布百分比隨著貓的年齡和生殖狀態(tài)而改變。然而，對(duì)貓來(lái)說(shuō)一般指導(dǎo)線為40卡/磅/天(18.2卡/千克/天)。約30%至約40%應(yīng)為蛋白質(zhì)，約7%至約10%應(yīng)為碳水化合物，約50%至約62.5%應(yīng)來(lái)源于脂肪攝入。本領(lǐng)域的技術(shù)人員可容易地鑒定任何物種的個(gè)體的正常的日常飲食。
[0049]肥胖:過(guò)多的體脂肪可能使個(gè)人有健康風(fēng)險(xiǎn)的病癥(參見(jiàn)Barlow and Dietz, Pediatricsl02:E29, 1998;National Institutes of Health, National Heart, Lung, and BloodInstitute (NHLBI)，Obes.Res.6(suppl.2):51S_209S, 1998)。過(guò)多的體脂肪是能量攝入和能量消耗不平衡的結(jié)果。例如，體重指數(shù)(BMI)可用于評(píng)估肥胖。在一個(gè)通常使用的慣例中，25.0kg/m2至29.9kg/m2的BMI是超重的，而30kg/m2或高于30kg/m2的BMI是肥胖的。
[0050]在另一慣例中，腰圍被用于評(píng)估肥胖。在該慣例中，男性腰圍為102cm或多于102cm被認(rèn)為是肥胖的，而女性腰圍為89cm或多`于89cm被認(rèn)為是肥胖的。強(qiáng)有力的證據(jù)表明，肥胖影響個(gè)體的發(fā)病率和死亡率。例如，肥胖的個(gè)體有更高的患上心臟病、非胰島素依賴型(2型)糖尿病、高血壓、中風(fēng)、癌癥(例如子宮內(nèi)膜癌、乳癌、前列腺癌和結(jié)腸癌)、血脂障礙、膽囊疾病、睡眠性呼吸暫停、生育力降低以及骨關(guān)節(jié)炎等的風(fēng)險(xiǎn)(參見(jiàn)，Lyznicki etal., Am.Fam.Phys.63:2185, 2001 )。
[0051]超重:體重超過(guò)其理想體重的個(gè)體。超重個(gè)體可以是肥胖的，但不一定是肥胖的。例如，超重個(gè)體是希望減輕其體重的任何個(gè)體。在一個(gè)慣例中，超重個(gè)體是BMI為25.0kg/m2至29.9kg/m2的個(gè)體。
[0052]聚乙二醇化的和聚乙二醇化:使聚(亞烷基二醇)，優(yōu)選為活性聚(亞烷基二醇)反應(yīng)以形成共價(jià)鍵的過(guò)程。可使用促進(jìn)劑，例如氨基酸，例如賴氨酸。雖然“聚乙二醇化”經(jīng)常使用聚(乙二醇)或其衍生物例如甲氧聚(乙二醇)進(jìn)行，但是本文的術(shù)語(yǔ)不限于使用甲氧聚(乙二醇),而是還包括使用任何其他有用的聚(亞烷基二醇)，例如聚(丙二醇)。
[0053]pi:pl是等電點(diǎn)的縮寫(xiě)。有時(shí)使用的另一縮寫(xiě)為IEP。其為具體分子不帶凈電荷的pH。在低于其pi的pH下,蛋白質(zhì)或肽攜帶凈正電荷。在高于其pi的pH下,蛋白質(zhì)或肽攜帶凈負(fù)電荷。蛋白質(zhì)和肽可根據(jù)其等電點(diǎn)使用稱為等電聚焦法的技術(shù)來(lái)分離，所述等電聚焦法是利用包含在聚丙烯酰胺凝膠中的PH梯度的電泳法。
[0054]肽YY (PYY):本文使用的術(shù)語(yǔ)PYY是指肽YY多肽，一種由沿著小腸下部(回腸)和結(jié)腸內(nèi)層細(xì)胞分泌至血液的激素。多個(gè)物種的天然存在的野生型PYY序列示于表I。
[0055]表1:多個(gè)物種的PYY序列
【權(quán)利要求】
1.一種包含由式(I)表示的氨基酸序列的PYY類似物，
Xaa2-1le-His-Pro-His-Ala-Pro-Gly-Glu-Asp-Ala-Ser-Pro-Glu-Glu-Leu-Xaa18-His-Tyr-
Xaa21-Xaa22-Xaa23-Leu-Xaa25-His-Tyr-Leu-Asn-Xaa30-Val-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH2
[SEQ ID NOl]
(I) 其中
Xaa2 選自 Pro 和 Gly ；
Xaa18 選自 Leu、Ile 和 Lys ；
Xaa21 選自 Tyr 和 Phe ；
Xaa22 選自 lie、Leu、Ala 和 Val; Xaa23 選自 Ala、Leu、Gly、Val 和 Ser; Xaa25選自Arg和His ;并且 Xaa3ci 選自 Leu 和 His ； 或者是其變體和/或衍生物的化合物；或者其鹽，包括這種變體和/或衍生物的鹽，一種變體，為具有最多達(dá)2個(gè)除Xaa2、Xaa18、Xaa21、Xaa22、Xaa23、Xaa25和Xaa3°以外的氨基酸被不同氨基酸替換的氨基酸序列。
2.權(quán)利要求1的PYY類似物，其不是變體。
3.權(quán)利要求1或2的PYY類似物，其中Xaa2為Pro[SEQ ID N018]。
4.權(quán)利要求1、2或3的PYY類似物，其中Xaa18為L(zhǎng)eu[SEQID N021]。
5.權(quán)利要求1、2、3或4的PYY類似物，其中 Xaa2 為 Pro
Xaa18 為 Leu;
Xaa21 為 Tyr;
Xaa22 為 11 e 或 Leu;
Xaa23 為 Ala; Xaa25選自Arg或His ;并且 Xaa3。選自 Leu 和 His。[SEQ ID N047]
6.權(quán)利要求1、2、3、4或5的PYY類似物，其中Xaa25為Arg[SEQID N028]。
7.權(quán)利要求1、2、3、4、5或6的PYY類似物，其中 Xaa22 為 lie [SEQ ID N026]。
8.權(quán)利要求1、2、3、4、5或6的PYY類似物，其中Xaa22為L(zhǎng)eu[SEQID N025]。
9.權(quán)利要求1、2、3、4、5、6、7 或 8 的 PYY 類似物，其中 Xaa3ci 為 Leu[SEQ ID N031]。
10.權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的PYY類似物，其為通過(guò)選自酰胺化、糖基化、氨甲?；Ⅴ；⒘蛩峄?、磷酸化、環(huán)化、酯化和聚乙二醇化的一種或多種方法修飾的衍生物。
11.權(quán)利要求1-10任一項(xiàng)的PYY類似物，其為衍生物，所述衍生物為融合蛋白。
12.權(quán)利要求11的PYY類似物，其通過(guò)重組方法產(chǎn)生。
13.權(quán)利要求11的PYY類似物，其通過(guò)合成方法產(chǎn)生。
14.權(quán)利要求1-13任一項(xiàng)的PYY類似物，用作藥物。
15.一種藥物組合物，其包含權(quán)利要求1-13任一項(xiàng)的PYY類似物以及可藥用載體和任選的其他治療性成分。
16.權(quán)利要求15的藥物組合物，存在于注射器或其他用于向人皮下給藥的給藥裝置中。
17.一種治療或預(yù)防疾病或病癥或其他不需要的生理狀態(tài)的方法，包括皮下給予權(quán)利要求1-13任一項(xiàng)中限定的PYY類似物或者權(quán)利要求16或權(quán)利要求15中限定的藥物組合物。
18.權(quán)利要求1-13任一項(xiàng)的PYY類似物或者權(quán)利要求15或權(quán)利要求16的藥物組合物，用于治療能量代謝病癥例如肥胖或糖尿病。
19.權(quán)利要求1-13任一項(xiàng)的PYY類似物或者權(quán)利要求15或權(quán)利要求16的藥物組合物，用于降低受試者的食欲，用于減少受試者的食物攝入或者用于減少受試者的熱量攝入。
20.權(quán)利要求1-13任一項(xiàng)的PYY類似物或者權(quán)利要求15或權(quán)利要求16的藥物組合物，用于預(yù)防膜島功能損失和/或恢復(fù)膜島功能。
21.一種治療有此需要的受試者中的能量代謝病癥例如肥胖或糖尿病的方法，包括向所述受試者給予權(quán)利要求1-13任一項(xiàng)的PYY類似物或者權(quán)利要求15或權(quán)利要求16的藥物組合物。
22.權(quán)利要求17或權(quán)利要求21的方法，其中所述受試者是超重的。
23.權(quán)利要求17或權(quán)利要求21的方法，其中所述受試者是肥胖的。
24.權(quán)利要求17或權(quán)利要求21的方法，其中所述受試者是患有糖尿病的。
25.一種預(yù)防受試者中胰島功能損失和/或恢復(fù)胰島功能的方法，包括向所述受試者給予權(quán)利要求1-13任一項(xiàng)的PYY類似物或者權(quán)利要求15或權(quán)利要求16的藥物組合物。
26.權(quán)利要求17或21-25任一項(xiàng)的方法，其中所述化合物經(jīng)腸胃外給藥。
27.權(quán)利要求17或21-25任一項(xiàng)的方法，其中所述化合物經(jīng)皮下、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、鼻內(nèi)、透皮或舌下給藥。
28.權(quán)利要求1-13任一項(xiàng)的PYY類似物用于制造用于治療能量代謝病癥例如肥胖或糖尿病的藥物的用途。
29.權(quán)利要求1-13任一項(xiàng)的PYY類似物用于制造用于降低受試者食欲，減少受試者食物攝入或者減少受試者的熱量攝入的藥物的用途。
30.權(quán)利要求1-13任一項(xiàng)的PYY類似物用于制造用于預(yù)防胰島功能損失和/或恢復(fù)胰島功能的藥物的用途。
【文檔編號(hào)】C07K14/575GK103459416SQ201280015089
【公開(kāi)日】2013年12月18日 申請(qǐng)日期:2012年1月27日 優(yōu)先權(quán)日:2011年1月27日
【發(fā)明者】S·R·布盧姆 申請(qǐng)人:帝國(guó)改革有限公司