專利名稱：一種從三葉蜜茱萸中制備3,3’,4’,5,7-五甲氧基黃酮的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然藥物化學(xué)領(lǐng)域，涉及一種從三葉蜜茱萸中制備3，3’，4’，5，7-五
甲氧基黃酮的方法。
背景技術(shù)：
3，3，，4，，5，7_ 五甲氧基黃酮(3，3，，4，，5，7-PentumethoxyfIavone)為淡黃色板狀結(jié)晶，分子式為C2tlH2tlO7，分子量為372. 37，mp. 150_151°C。存在于多種植物中，如蕓香科三葉蜜茱萸triphylla Merr.的葉、馬鞭草科植物杜虹花formosanaRolfe的葉以及姜科植物琴狀凹唇姜pandurata (Roxb. ) Schltr.的根莖中等等。三葉蜜茱萸，又名假山腳鱉，為灌木，產(chǎn)自臺灣(恒春半島、蘭嶼)，菲律賓亦產(chǎn)，有報道從三葉蜜茱萸中分離得到多種高度氧化的黃酮類物質(zhì)，但操作繁瑣，不適合工業(yè)制備。3，3’，4’，5，7-五甲氧基黃酮具有廣泛的生理活性?，F(xiàn)代藥理研究表明，3，3’，4’，5，7-五甲氧基黃酮具有抗腫瘤活性、抑制cAMP磷酸二酯酶活性、血管擴張作用和抗炎作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種低成本、產(chǎn)品質(zhì)量好的從三葉蜜茱萸中制備3，3’，4’，5，7-五甲氧基黃酮的方法。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案
一種從三葉蜜茱萸中制備3，3’，4’，5，7-五甲氧基黃酮的方法，其特征在于包括以下步驟取三葉蜜茱萸葉烘干粉碎，用石油醚脫脂，將脫脂藥材用60-80%乙醇溫浸12-48小時，提取1-3次，過濾，合并濾液，濃縮得浸膏，按比例加入丙酮和硫酸銨雙水相系統(tǒng)混勻，分為上、下兩相，取出富含三葉蜜茱萸黃酮的丙酮相，加水、乙酸乙酯和無機鹽反萃取，將乙酸乙酯相減壓濃縮，進(jìn)行硅膠柱層析，二氯甲烷-丙酮重結(jié)晶得到3，3’，4’，5，7-五甲氧基黃酮。所述丙酮和硫酸銨雙水相系統(tǒng)中，丙酮加入量為浸膏體積量的12_25%(V/V)，硫酸銨加入量為液體總體積量的15-20% (W/V)。所述反萃取中，所述無機鹽為硫酸銨、磷酸氫二鉀、磷酸鉀中的一種或多種復(fù)合，分相溫度為20-30°C，靜置時間為3-6小時。所述硅膠柱為短粗柱，采用乙酸乙酯-丙酮混合溶液為洗脫劑，體積比為5:1-1:3,收集洗脫液,濃縮、干燥得粗晶。本發(fā)明的有益效果是采用雙水相萃取和硅膠短粗柱層析后再重結(jié)晶，獲得含量95%以上的3，3’，4’，5，7-五甲氧基黃酮結(jié)晶，成本低、分離效果好、產(chǎn)品質(zhì)量高；本發(fā)明所用試劑均為低毒、可回收利用，大大降低了對環(huán)境的污染。下面將結(jié)合具體實施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實施方式。
具體實施例方式實施例I :
取三葉蜜茱萸葉低溫烘干粉碎，稱取5kg用5倍量的石油醚回流脫脂2次，每次I小時，將脫脂藥材揮干殘留試劑，加入75%的乙醇于50°C溫浸24小時，提取2次，過濾，合并濾液，濃縮得浸膏，然后加入丙酮和硫酸銨混勻，使形成的雙水相體系中丙酮的體積為浸膏量的18%，硫酸銨質(zhì)量占總液體體積量的15%，于55°C水浴中振搖I小時，靜置3小時分相，將富含三葉蜜茱萸黃酮的丙酮上相取出，加入乙酸乙酯、磷酸氫二鉀、水，充分混勻，在25°C條件下靜置5小時，取出乙酸乙酯相，減壓濃縮回收試劑，加入硅膠短粗柱層析，以乙酸乙酯-丙酮為洗脫機，依次按體積比5:1、3:1、1:1、1:3進(jìn)行洗脫，收集3，3’，4’，5，7-五甲氧基黃酮洗脫液，回收試劑，干燥得粗晶，再用二氯甲烷-丙酮(3:2)重結(jié)晶，濾出晶體，低溫干燥即得3，3’，4’，5，7-五甲氧基黃酮312mg，純度為97. 4%。實施例2:
取三葉蜜茱萸葉低溫烘干粉碎，稱取5kg用5倍量的石油醚回流脫脂2次，每次I小時，將脫脂藥材揮干殘留試劑，加入60%的乙醇于50°C溫浸36小時，提取2次，過濾，合并濾液，濃縮得浸膏，然后加入丙酮和硫酸銨混勻，使形成的雙水相體系中丙酮的體積為浸膏量的21%，硫酸銨質(zhì)量占總液體體積量的18%，于55°C水浴中振搖I小時，靜置3小時分相，將富含三葉蜜茱萸黃酮的丙酮上相取出，加入乙酸乙酯、硫酸銨、水，充分混勻，在30°C條件下靜置6小時，取出乙酸乙酯相，減壓濃縮回收試劑，加入硅膠短粗柱層析，以乙酸乙酯-丙酮為洗脫機，依次按體積比5:1、3:1、I: I、1:3進(jìn)行洗脫，收集3，3 ’，4’，5，7-五甲氧基黃酮洗脫液，回收試劑，干燥得粗晶，再用二氯甲烷-丙酮(3:2)重結(jié)晶，濾出晶體，低溫干燥即得3，3，，4，，5，7-五甲氧基黃酮307mg，純度為98. 2%。實施例3:
取三葉蜜茱萸葉低溫烘干粉碎，稱取IOkg用5倍量的石油醚回流脫脂2次，每次I小時，將脫脂藥材揮干殘留試劑，加入80%的乙醇于50°C溫浸12小時，提取3次，過濾，合并濾液，濃縮得浸膏，然后加入丙酮和硫酸銨混勻，使形成的雙水相體系中丙酮的體積為浸膏量的12%,硫酸銨質(zhì)量占總液體體積量的20%,于50°C水浴中振搖I小時，靜置3小時分相，將富含三葉蜜茱萸黃酮的丙酮上相取出，加入乙酸乙酯、磷酸氫二鉀、水，充分混勻，在20°C條件下靜置3小時，取出乙酸乙酯相，減壓濃縮回收試劑，加入硅膠短粗柱層析，以乙酸乙酯-丙酮為洗脫機，依次按體積比5:1、3:1、1:1、1:3進(jìn)行洗脫，收集3，3’，4’，5，7-五甲氧基黃酮洗脫液，回收試劑，干燥得粗晶，再用二氯甲烷-丙酮(3:2)重結(jié)晶，濾出晶體，低溫干燥即得3, 3，，4，，5, 7-五甲氧基黃酮644mg,純度為96. 6%。實施例4:
取三葉蜜茱萸葉低溫烘干粉碎，稱取IOkg用5倍量的石油醚回流脫脂2次，每次I小時，將脫脂藥材揮干殘留試劑，加入65%的乙醇于50°C溫浸48小時，提取I次，過濾，濃縮得浸膏，然后加入丙酮和硫酸銨混勻，使形成的雙水相體系中丙酮的體積為浸膏量的25%，硫酸銨質(zhì)量占總液體體積量的17%，于50°C水浴中振搖I小時，靜置3小時分相，將富含三葉蜜茱萸黃酮的丙酮上相取出，加入乙酸乙酯、磷酸鉀、水，充分混勻，在28°C條件下靜置4小時，取出乙酸乙酯相，減壓濃縮回收試劑，加入硅膠短粗柱層析，以乙酸乙酯-丙酮為洗脫機，依次按體積比5:1、3:1、1:1、1:3進(jìn)行洗脫，收集3，3’，4’，5，7-五甲氧基黃酮洗脫液，回收試劑，干燥得粗晶，再用二氯甲烷-丙酮(3:2)重結(jié)晶，濾出晶體，低溫干燥即得 3，3，，4’，5，7-五甲氧基黃酮636mg，純度為97. 9%。
權(quán)利要求
1.一種從三葉蜜茱萸中制備3，3’，4’，5，7-五甲氧基黃酮的方法，其特征在于包括以下步驟取三葉蜜茱萸葉烘干粉碎，用石油醚脫脂，將脫脂藥材用60-80%乙醇溫浸12-48小時，提取1-3次，過濾，合并濾液，濃縮得浸膏，按比例加入丙酮和硫酸銨雙水相系統(tǒng)混勻，分為上、下兩相，取出富含三葉蜜茱萸黃酮的丙酮相，加水、乙酸乙酯和無機鹽反萃取，將乙酸乙酯相減壓濃縮，進(jìn)行硅膠柱層析，二氯甲烷-丙酮重結(jié)晶得到3，3’，4’，5，7-五甲氧基黃酮。
2.如權(quán)利要求I所述的一種從三葉蜜茱萸中制備3，3’，4’，5，7-五甲氧基黃酮的方法，其特征在于所述丙酮和硫酸銨雙水相系統(tǒng)中，丙酮加入量為浸膏體積量的12-25% (V/V)，硫酸銨加入量為液體總體積量的15-20% (W/V)。
3.如權(quán)利要求I所述的一種從三葉蜜茱萸中制備3，3’，4’，5，7-五甲氧基黃酮的方法，其特征在于所述反萃取中，所述無機鹽為硫酸銨、磷酸氫二鉀、磷酸鉀中的一種或多種復(fù)合，分相溫度為20-30°C，靜置時間為3-6小時。
4.如權(quán)利要求I所述的一種從三葉蜜茱萸中制備3，3’，4’，5，7-五甲氧基黃酮的方法，其特征在于所述硅膠柱為短粗柱，采用乙酸乙酯-丙酮混合溶液為洗脫劑，體積比為5:1-1:3,收集洗脫液,濃縮、干燥得粗晶。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從三葉蜜茱萸中制備3,3’,4’,5,7-五甲氧基黃酮的方法，屬于天然藥物化學(xué)領(lǐng)域。方法步驟是取三葉蜜茱萸葉烘干粉碎，用石油醚脫脂，將脫脂藥材用60-80%乙醇溫浸，濃縮過濾液得浸膏，按比例加入丙酮和硫酸銨雙水相系統(tǒng)混勻，分為上、下兩相，取出富含三葉蜜茱萸黃酮的丙酮相，加水、乙酸乙酯和無機鹽反萃取，將乙酸乙酯相減壓濃縮，進(jìn)行硅膠柱層析，二氯甲烷-丙酮重結(jié)晶得到3,3’,4’,5,7-五甲氧基黃酮。本發(fā)明方法經(jīng)濟、提率高、適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C07D311/30GK102659737SQ20121011754
公開日2012年9月12日 申請日期2012年4月20日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月20日
發(fā)明者劉東鋒, 郭琴 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司