專利名稱：從對萼獼猴桃葉中分離制備高純度黃酮苷類化合物的方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及一種從對萼獼猴桃葉分離制備 黃酮苷類化合物，即山柰酚-3-0-a-L-鼠李糖基-a — 3) - a -L-鼠李糖基-(I — 6) - ^ -D-吡喃半乳糖苷、山柰酚-3-0- a -L-鼠李糖基-(I — 3) - (4-0-乙?；?a -L-鼠李糖基)-(I — 6) - P -D-吡喃半乳糖苷和山奈酌' -3-0- a -L-鼠李糖基_(1 — 3)-(2,4_ 二 _0_乙酸基-a -L-鼠李糖基)-(I — 6)-P-D-吡喃半乳糖苷的工藝方法。
背景技術(shù)：
對萼稱猴桃(Actinidia valvata Dunn)為稱猴桃科稱猴桃屬植物,主要分布于安徽、浙江、江西等華東地區(qū)，其根為貓人參，為華東地區(qū)常用的抗腫瘤中藥。近年來，發(fā)明人投入大量精力對該藥用植物進行了系列藥學研究[H.L.Xin，Y.C.Wu，Y.F.Xu，et al. Chin JNat Med. , 2010,8 :260 ；H. L. Xin, X. Q. Yue, Y. F. Xu, et al. Helv. Chim. Acta, 2008,91 :575 ；Y. F Xu, R. L. Ge, J. Du, et al. Cancer Lett，2009，284 :229 ;張亞妮，劉嶺，凌昌全.中國中藥雜志，2006,36 :918.]，所獲研究成果處于該領域先進水平。由于長期以來對萼獼猴桃以根入藥，自然更新緩慢，野生資源急劇減少。為擴大該藥用植物的藥用部位，發(fā)明人還對其葉的化學成分、藥理作用進行了深入研究，是該領域中最早開展此項研究工作的學者。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)其葉中主要含有皂苷、黃酮類化學成分等[H. L. Xin, Y. C. ffu, Y. F. Xu, et al. Chin JNat Med.，2010，8 :260 ；H. L. Xin,Y. C. ffu,Y. H. Su, et al. Planta Med.，2011，77 :70.]，其中山柰酚-3-0- a -L-鼠李糖基-(I — 3) - (4-0-乙酰基-a -L-鼠李糖基)-(I — 6) - P -D-批喃半乳糖苷和山柰酚-3-0-a-L-鼠李糖基-(I — 3)-(2，4_ 二-0-乙?；?a-L-鼠李糖基)_(1 — 6)-0_D-吡喃半乳糖苷系由本發(fā)明人通過采用經(jīng)典硅膠柱色譜法首次從對萼獼猴桃葉中制備得到，純度在 98% 以上[H. L. Xin, Y. C. ffu, Y. H. Su, et al. Planta Med.，2011，77 :70.]，它們具有顯著的抗氧化、抗心肌缺血的藥理作用，并分別就其化學結(jié)構(gòu)、藥理作用申請了中國專利(申請?zhí)朇N201010138085. I、CN201110271050. X)?；衔锷借头?3-0- a -L-鼠李糖基-(I — 3) - a -L-鼠李糖基-(I — 6) - P -D-吡喃半乳糖苷，與上述兩個化合物結(jié)構(gòu)相似，該單體已有報道從山茶及蛇莓中分離制備得到[許文東，林厚文，邱峰，等 沈陽藥科大學學報，2007, 24 402 ；C. Lakenbrink, T. M. L. Lam, U. H. Engelhardt, etal. Nat. Prod. Lett.，2000,14 :233.]。前述三種黃酮苷類化合物的化學結(jié)構(gòu)式如下
權(quán)利要求
1.一種從對萼獼猴桃葉中分離制備高純度黃酮苷類化合物的方法，其特征是，包括藥材提取工序、粗提物制備工序和單體化合物分離純化工序， 藥材提取工序中，將對萼獼猴桃葉用體積濃度為50% 80%的乙醇回流提取2-4次，減壓回收乙醇后得提取液； 粗提物制備工序中，提取液過大孔吸附樹脂，用水、體積濃度為20 % 30 %的乙醇及體積濃度為50% 60%的乙醇洗脫，收集體積濃度為50% 60%的乙醇洗脫液，濃縮干燥后得到粗提物； 單體化合物分離純化工序中，采用高速逆流色譜法對所得粗提物進行分離純化，包括配制構(gòu)成固定相、流動相的溶劑體系，使逆流色譜儀柱子中充滿固定相，然后使柱子轉(zhuǎn)動，再將流動相泵入柱內(nèi)，將制備好的粗提物進入進樣閥，根據(jù)檢測圖譜接收目標流份，其中，溶劑體系為乙酸乙酯正丁醇水，當乙酸乙酯正丁醇水為2 : I : 3時，分離得到山柰酚-3-O-a-L-鼠李糖基-(I — 3)-a-L-鼠李糖基-(I — 6)-β- -吡喃半乳糖苷、山柰酚-3-O-a-L-鼠李糖基-(I — 3)-(4-0-乙酰基_ a -L-鼠李糖基)-(1 — 6)-β-D-卩比喃半乳糖苷；當乙酸乙酯正丁醇水為4 I 5時，分離得到山柰酚-3-0- a -L-鼠李糖基-(I — 3) - (4-0-乙酰基-a -L-鼠李糖基)-(I — 6) - β -D-吡喃半乳糖苷、山柰酚-3-0-a-L-鼠李糖基-(I — 3)-(2，4_ 二-O-乙?；?a-L-鼠李糖基)_ (I — 6) - β -D-卩比喃半乳糖苷ο
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的從對萼獼猴桃葉中分離制備高純度黃酮苷類化合物的方法，其特征在于，藥材提取工序中，對萼獼猴桃葉用體積濃度為70%的乙醇回流提取。
3.據(jù)權(quán)利要求I所述的從對萼獼猴桃葉中分離制備高純度黃酮苷類化合物的方法，其特征在于，粗提物制備工序中，大孔吸附樹脂型號為HPD-300或DM-301型，依次用水、體積濃度為20%、體積濃度為60%乙醇洗脫，收集體積濃度為60%乙醇洗脫液，濃縮干燥后可得到粗提物。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從對萼獼猴桃葉中分離制備高純度黃酮苷類化合物的方法，包括藥材提取工序、粗提物制備工序和單體化合物分離純化工序，藥材提取工序中，將對萼獼猴桃葉用體積濃度為50％～80％的乙醇回流提取2-4次，減壓回收乙醇后得提取液；粗提物制備工序中，提取液過大孔吸附樹脂，用水、體積濃度為20％～30％的乙醇及體積濃度為50％～60％的乙醇洗脫，收集體積濃度為50％～60％的乙醇洗脫液，濃縮干燥后得到粗提物；單體化合物分離純化工序中，采用高速逆流色譜法對所得粗提物進行分離純化，包括配制構(gòu)成固定相、流動相的溶劑體系，使逆流色譜儀柱子中充滿固定相，然后使柱子轉(zhuǎn)動，再將流動相泵入柱內(nèi)，將制備好的粗提物進入進樣閥，根據(jù)檢測圖譜接收目標流份。
文檔編號C07H1/08GK102617656SQ20121002283
公開日2012年8月1日 申請日期2012年2月2日 優(yōu)先權(quán)日2012年2月2日
發(fā)明者凌昌全, 彭浩, 曲麗萍, 李同明, 蘇永華, 辛海量, 鄭國銀 申請人:中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學