專利名稱：抗il-17f 抗體及其使用方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明總體上涉及識別IL-17F但不識別IL-17A的單克隆抗體(例如全人單克隆抗體)、識別異二聚體IL-17A/IL-17F復(fù)合體的單克隆抗體(例如全人單克隆抗體)的產(chǎn)生，及使用該單克隆抗體作為療法的方法。
背景技術(shù)：
IL-17F (也稱為ML-1)是IL-17細(xì)胞因子家族的成員，IL-17細(xì)胞因子家族還包括蛋白質(zhì) IL-17A(也稱為 CTL-8、IL-17)、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL_17E(也稱為 IL-25)。 IL-17A和IL-17F作為二硫化物連接的同二聚體分泌，所述同二聚體通過受體IL-17R、 IL-17RC或由IL-17R和IL-17RC組成的多聚體受體復(fù)合體傳導(dǎo)信號。兩者還在相同T細(xì)胞亞群(主要通過Thl7⑶4+T細(xì)胞)上共表達(dá)。IL-17A和IL-17F還相互作用并形成異二聚體 IL-17A/IL-17F 復(fù)合體。IL-17F和IL-17A/IL-17F復(fù)合體的水平升高與多種炎性病癥和自身免疫性疾病有關(guān)。因此，對中和IL-17F的生物活性的療法存在需要。發(fā)明概述本發(fā)明提供特異性結(jié)合到IL-17F和/或IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合體但不特異性結(jié)合到IL-17A的單克隆抗體，例如全人單克隆抗體。IL-17F通常作為同二聚體蛋白被表達(dá)且具有生物活性。因此，除非另外說明，使用的術(shù)語“IL-17F”及其等同物是指IL-17F 同二聚體蛋白。本發(fā)明的抗體能夠調(diào)節(jié)例如阻斷、抑制、降低、拮抗、中和或以其他方式干擾 IL-17F-介導(dǎo)的促炎細(xì)胞因子和/或趨化因子的產(chǎn)生。本發(fā)明的示例性單克隆抗體包括，例如5E12抗體、41B10抗體、11C5抗體、21B10抗體、IFl抗體和2E12抗體。可選地，單克隆抗體是與41B10抗體、11C5抗體、21B10抗體、IFl 抗體、2E12抗體、5D3抗體、22F8抗體、28B11抗體、41A4抗體和43G6抗體結(jié)合到相同表位的抗體。這些抗體在本文分別稱作“huIL17F”抗體。huIL-17F抗體包括全人單克隆抗體以及人源化單克隆抗體和嵌合抗體。優(yōu)選地，全人單克隆抗體選自11C5抗體、21B10抗體、IFl抗體、2E12抗體、5D3抗體、22F8抗體、28B11抗體、41A4抗體和43G6抗體。與結(jié)合IL-17F和/或IL-17A/IL-17F 異二聚體復(fù)合體的其它抗體(例如5E12抗體和41B10抗體)相比，這些抗體對IL-17F和 /或IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合體顯示出更高的親和力。與結(jié)合IL-17F和/或IL-17A/ IL-17F異二聚體復(fù)合體的其它抗體(例如5E12抗體和41B10抗體)相比，這些抗體是 IL-17F的至少一種生物活性或功能的更好的抑制劑。例如11C5抗體、21B10抗體、IFl抗體、2E12抗體、5D3抗體、22F8抗體、28B11抗體、41A4抗體和43G6抗體比5E12抗體和/或 41B10抗體在更大程度上抑制IL-17F的生物活性和/或功能。在一些實施方案中，與在存在結(jié)合IL-17F和/或IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合體的其它抗體(例如5E12抗體和/或 41B10抗體)的情況下促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生減少相比，在存在這些抗體的情況下11C5抗體、 2IB10抗體、IFl抗體、2E12抗體、5D3抗體、22F8抗體、28B11抗體、41A4抗體和43G6抗體在更大程度上減少促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生。相比，在存在11C5抗體、21B10抗體、IFl抗體、2E12 抗體、5D3抗體、22F8抗體、28B11抗體、41A4抗體和43G6抗體的情況下促炎細(xì)胞因子(例如IL-6)產(chǎn)生的水平比例如與結(jié)合IL-17F和/或IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合體的其它抗體(例如5E12抗體和/或41B10抗體)的促炎細(xì)胞因子產(chǎn)生的水平低大于或等于5%、 10%、20%、25%、30%、40%、50%、60%、70%、75%、80%、90%、95%、99% 或 100%。
這些抗體對人IL-17F和/或人IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合體顯示特異性，并且它們顯示了抑制IL-17F-介導(dǎo)的細(xì)胞因子的產(chǎn)生。這些抗體具有不同的特異性。在一些實施方案中，本發(fā)明的huIL-17F抗體特異性結(jié)合IL-17F，但不特異性結(jié)合IL-17A。優(yōu)選地， 本發(fā)明的huIL-17抗體還特異性結(jié)合IL-17F同二聚體，但不特異性結(jié)合IL-17A同二聚體。 在一些實施方案中，本發(fā)明的huIL-17F抗體特異性結(jié)合IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合體， 但不特異性結(jié)合IL-17A或IL-17A同二聚體。在一些實施方案中，本發(fā)明的huIL_17F抗體特異性結(jié)合IL-17F和IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合體，但不特異性結(jié)合IL-17A或IL-17A 同二聚體。例如抗體11C5、21B10、1F1、2E12、41B10、OT3、22F8、 B11、41A4 和 43G6 特異性結(jié)合IL-17F，并且這些抗體不結(jié)合IL-17A或IL-17A同二聚體。優(yōu)選地，huIL_17F抗體結(jié)合 IL-17F 并且不與 IL-17A 或 IL-17A 同二聚體交叉反應(yīng)。例如 5E12、11C5、21B10、1F1、2E12、 41B10,5D3,22F8,28B1U41A4 和 43G6 結(jié)合 IL-17F，但不與 IL-17A 交叉反應(yīng)。本發(fā)明的全人抗體包含具有SEQ ID NOS :10、14、18、22、26、30、34、38和42的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)。本發(fā)明的人抗體包含具有SEQ ID NOS :12、16、20、對、28、32、36、 40和44的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)。重鏈⑶R包括VH⑶Rl區(qū)，其包含與選自由SEQ ID NOS :45、48、51、56、59、64、67 和 70 組成的組的序列具有至少 90%,92%,95%,97%,98%, 99%或以上同一性的氨基酸序列；VH⑶R2區(qū)，其包含與選自由SEQ ID NOS :46,49,52,54, 57、60、62、65、68、71和73組成的組的序列具有至少90%、92%、95%、97%、98%、99%或以上同一性的氨基酸序列；和VH CDR3區(qū)，其包含與選自由SEQ ID NOS :47、50、53、55、58、61、 63、66、69和72組成的組的序列具有至少90%、92%、95%、97%、98%、99%或以上同一性的氨基酸序列。三個輕鏈⑶R包括VL⑶Rl區(qū)，其包含與選自由SEQ ID NOS :74、77、80、 85、88、91和94組成的組的序列具有至少90%、92%、95%、97%、98%、99%或以上同一性的氨基酸序列；VL CDR2區(qū)，其包含與選自由SEQ ID NOS :75、78、81、83、86、89、92和96組成的組的序列具有至少90%、92%、95%、97%、98%、99%或以上同一性的氨基酸序列；和 VL CDR3 區(qū)，其包含選自由 SEQ ID NOS :76、79、82、84、87、90、93、95、97、98 和 99 組成的組的序列具有至少90%、92%、95%、97%、98%、99%或以上同一性的氨基酸序列。優(yōu)選地，重鏈CDR包括VH CDRl區(qū)，其包含與選自由SEQ ID NOS :45、48、51、64、 67和70組成的組的序列具有至少90%、92%、95%、97%、98%、99%或以上同一性的氨基酸序列；VH CDR2區(qū)，其包含與選自由SEQ ID NOS :46、49、52J4、62、65、68、71和73組成的組的序列具有至少90%、92%、95%、97%、98%、99%或以上同一性的氨基酸序列；和VH CDR3區(qū)，其包含與選自由SEQ ID NOS :47、50、53、55、63、66、69和72組成的組的序列具有至少90%、92%、95%、97%、98%、99%或以上同一性的氨基酸序列。三個輕鏈⑶R包括VL CDRl區(qū)，其包含與選自由SEQ ID NOS :74、77、80、85、91和94組成的組的序列具有至少90%、92%、95%、97%、98%、99%或以上同一性的氨基酸序列；VL⑶R2區(qū)，其包含與選自由SEQ ID NOS :75、78、81、83、86、92和96組成的組的序列具有至少90%、92%、95%、 97%、98%、99%或以上同一性的氨基酸序列；和VL⑶R3區(qū)，其包含與選自由SEQ ID NOS 76、79、82、84、93、95、97、98 和 99 組成的組的序列具有至少 90 % ,92 % ,95 % ,97 % ,98 %, 99%或以上同一性的氨基酸序列，條件是當(dāng)VL⑶Rl包含與SEQ ID NO :85的序列具有至少 90%、92%、95%、97%、98%、99%或以上同一性的氨基酸序列時，則VL CDR2包含與SEQ ID NO 86的序列具有至少90%、92%、95%、97%、98%、99%或以上同一性的氨基酸序列，并且VL CDR3包含與SEQ ID NO :98的序列具有至少90%、92%、95%、97%、98%、99%或以上同一性的氨基酸序列，并且條件是當(dāng)VL⑶R2包含與SEQ ID NO 86的序列具有至少90%、 92%、95%、97%、98%、99%或以上同一性的氨基酸序列時，則VL CDRl包含與SEQ ID NO: 85的序列具有至少90%、92%、95%、97%、98%、99%或以上同一性的氨基酸序列并且VL CDR3包含與SEQ ID NO :98的序列具有至少90%、92%、95%、97%、98%、99%或以上同一性的氨基酸序列。本發(fā)明的抗體免疫特異性結(jié)合IL-17F，其中抗體結(jié)合到包括人IL-17F上一個或多個氨基酸殘基的表位。在一些實施方案中，本發(fā)明的抗體還特異性結(jié)合異二聚體IL-17A/ IL-17F復(fù)合體但不特異性結(jié)合IL-17A，其中抗體結(jié)合到包括人IL-17F上一個或多個氨基酸殘基的表位。本發(fā)明的抗體還包括特異性結(jié)合IL-17F和/或異二聚體IL-17A/IL-17F復(fù)合體的全人抗體，其中抗體顯示抑制大于50%的IL-17F-介導(dǎo)的促炎細(xì)胞因子在體外的產(chǎn)生。 例如本發(fā)明的抗體顯示抑制IL-17刺激的細(xì)胞大于55%、60%、65%、70%、75%、80%、 85%、90%、92%、95%、97%、98%或99%的IL-6分泌。如本文所使用，術(shù)語“促炎細(xì)胞因子”是指促進(jìn)炎癥和/或與炎癥相關(guān)的那些免疫調(diào)節(jié)性細(xì)胞因子。促炎細(xì)胞因子和趨化因子包括，例如IL-6、IL-8、G-CSF和GM-CSF。促炎趨化因子包括，例如GRO- α、GR0_b、LIX、 GCP-2、MIG、IP10、I-TAC、和 MCP-1、RANTES, Eotaxin (嗜酸細(xì)胞活化趨化因子)、SDF-1 禾口 MIP3a。本發(fā)明還提供通過給其中需要此治療或預(yù)防的受治療者施用本發(fā)明的單克隆抗體(例如全人單克隆抗體)來治療或預(yù)防與異常IL-17F活性(例如異常促炎細(xì)胞因子例如異常IL-6的產(chǎn)生)相關(guān)的病理學(xué)，或緩解與此病理學(xué)相關(guān)的癥狀的方法。待治療的受治療者是例如人。單克隆抗體以足以治療、預(yù)防或緩解與該病理學(xué)相關(guān)的癥狀的量施用。足以治療或預(yù)防受治療者的病理學(xué)的單克隆抗體的量是，例如足以降低IL-17F信號(例如 IL-17F-誘導(dǎo)一種或多種促炎細(xì)胞因子例如IL-6的產(chǎn)生)的量。如本文所使用，術(shù)語“降低”是指在存在本發(fā)明的單克隆抗體的情況下促炎細(xì)胞因子產(chǎn)生的減少，其中產(chǎn)生是，例如產(chǎn)生局部促炎細(xì)胞因子(例如在發(fā)炎組織的部位)或產(chǎn)生系統(tǒng)性促炎細(xì)胞因子。當(dāng)在存在本發(fā)明的單克隆抗體的情況下促炎細(xì)胞因子(例如IL-6)產(chǎn)生的水平比促炎細(xì)胞因子產(chǎn)生的對照水平(即，在不存在單克隆抗體的情況下促炎細(xì)胞因子產(chǎn)生水平)低大于或等于 5%、10%、20%、25%、30%、40%、50%、60%、70%、75%、80%、90%、95%、99%或 100% 時，IL-17F信號(例如IL-17F-誘導(dǎo)的促炎細(xì)胞因子，例如IL-6)減少。例如使用本文所述IL-17F-刺激的小鼠胚胎成纖維(MEF)細(xì)胞測定來測量促炎細(xì)胞因子(例如IL-6)產(chǎn)生的水平。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解促炎細(xì)胞因子產(chǎn)生的水平可使用多種測定(包括例如市售的ELISA試劑盒)來測量。使用本發(fā)明的單克隆抗體(例如全人單克隆抗體)治療和/或預(yù)防的病理學(xué)包括，例如急性炎癥、慢性炎癥(例如與變應(yīng)性疾患和哮喘相關(guān)的慢性炎癥，與關(guān)節(jié)炎疾患相關(guān)的慢性炎癥)、自身免疫性疾病(例如克羅氏病、多發(fā)性硬化、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和其它自身免疫性關(guān)節(jié)炎疾患)、炎性腸道疾病和移植排異。根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物可包括本發(fā)明的抗體和載體。這些藥物組合物可包括于試劑盒例如診斷試劑盒中。本發(fā)明還提供可溶性IL-17F蛋白、用于表達(dá)IL-17F蛋白的方法及用于純化可溶形式的此類蛋白質(zhì)的方法。在一些實施方案中，待治療的病理學(xué)是一種或多種自身免疫性疾病、炎性病癥或癌。例如不限于，所述病理學(xué)是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和其它關(guān)節(jié)炎疾患、克羅氏病、銀屑病、多發(fā)性硬化、慢性阻塞性肺部疾病和/或哮喘、癌和血管生成。 根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物可包括本發(fā)明的抗體和載體。這些藥物組合物可包括于試劑盒例如診斷試劑盒中。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解本發(fā)明的抗體具有多種用途。例如本發(fā)明的蛋白質(zhì)用作治療劑以防止病癥(例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、克羅氏病、銀屑病、多發(fā)性硬化、慢性阻塞性肺部疾病、血管生成、哮喘和癌)中IL-17F受體的活化。本發(fā)明的抗體還用作診斷試劑盒中的試劑或用作診斷工具，或這些抗體可用于競爭測定以產(chǎn)生治療試劑。附圖簡述

圖1是描述使用標(biāo)準(zhǔn)關(guān)節(jié)炎評分方法在小鼠中進(jìn)行膠原-誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎的臨床評分的進(jìn)展的圖。圖2A-2F是描述在終點(第22天)時測定的用II型牛膠原免疫的小鼠中的多種細(xì)胞因子血清水平的一系列圖。圖2A描述檢測的腫瘤壞死因子α (TNF- α )的血清水平； 圖2B描述檢測的白細(xì)胞介素6(IL-6)的血清水平；圖2C描述檢測的干擾素Y(IFN-Y) 的血清水平；圖2D描述檢測的白細(xì)胞介素la (IL-Ια)的血清水平；圖2E描述檢測的單核細(xì)胞趨化蛋白(MCP-I)的血清水平；以及圖2F描述檢測的白細(xì)胞介素12/白細(xì)胞介素 23 (IL-12/IL-23)異二聚體復(fù)合體的血清水平。詳述本發(fā)明提供特異性結(jié)合IL-17F的單克隆抗體。本發(fā)明還提供特異性結(jié)合IL-17F 和異二聚體IL-17A/IL-17F復(fù)合體(在本文也稱作IL-17A/IL-17F異二聚體)的單克隆抗體。所述抗體是例如全人單克隆抗體。本發(fā)明的抗體特異性結(jié)合IL-17F但不特異性結(jié)合IL-17A，其中抗體結(jié)合到包括人IL-17F的一個或多個氨基酸殘基的表位。在一些實施方案中，本發(fā)明的抗體特異性結(jié)合 IL-17F和異二聚體IL-17A/IL-17F復(fù)合體但不特異性結(jié)合IL-17A或IL-17A同二聚體，其中抗體結(jié)合到包括人IL-17F的一個或多個氨基酸殘基的表位。本發(fā)明的抗體以彡1 μ Μ、例如彡ΙΟΟηΜ、優(yōu)選地彡ΙΟηΜ、并且更優(yōu)選地彡InM的平衡結(jié)合常數(shù)(Kd)結(jié)合到IL-17F表位。例如本文提供的huIL-17F抗體顯示Kd大約在彡InM 至約IpM之間的范圍內(nèi)。
IL-17F的晶體結(jié)構(gòu)顯示該蛋白質(zhì)采用半胱氨酸結(jié)折疊，表明與半胱氨酸結(jié)蛋白質(zhì)超家族有關(guān)系。然而，IL-17F的半胱氨酸結(jié)基序僅利用4個半胱氨酸而不是傳統(tǒng)的6個半胱氨酸以形成結(jié)。和半胱氨酸結(jié)家族的其它成員一樣，IL-17F還與IL-17A作為異二聚體存在。據(jù)認(rèn)為IL-17A/IL-17F異二聚體通過IL-17R和/或多聚體IL-17R/IL-17RC復(fù)合體傳導(dǎo)信號。最近的證據(jù)已顯示用于形成IL-17A/IL-17F異二聚體的相同的半胱氨酸殘基與用于IL-17F同二聚體形成的半胱氨酸相同。該數(shù)據(jù)表明與半胱氨酸結(jié)家族中的其它蛋白質(zhì)一樣，IL-17F同二聚體或IL-17A/IL-17F異二聚體的受體可結(jié)合到二聚體界面處的保守半胱氨酸殘基。已報道IL-17細(xì)胞因子家族的很多免疫調(diào)節(jié)功能，大概由于它們誘導(dǎo)許多免疫信號分子。IL-17A表達(dá)為IL-17A同二聚體，并且IL-17F表達(dá)為IL-17F同二聚體，在一些情況下共有非常相似的生物學(xué)功能。兩者都促進(jìn)從包括成纖維細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、 上皮細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的多種細(xì)胞中分泌促炎細(xì)胞因子(例如IL-6、IL-8、G-CSF*GM-CSF)、 趨化因子(例如 GRO-α、GR0-b、LIX、GCP-2、MIG、IP10、I-TAC、和 MCP-1、RANTES、Eotaxin、 SDF-1、和MIP3a)及前列腺素(例如PGE2)。兩者還已顯示調(diào)節(jié)軟骨基質(zhì)更新。IL-17F同二聚體還具有不同于IL-17A同二聚體的生物學(xué)功能，例如刺激T細(xì)胞和外周血單核細(xì)胞 (PBMC)增殖和活化的能力，及抑制血管生成的能力。本發(fā)明的huIL17F抗體有助于調(diào)節(jié)、阻斷、抑制、降低、拮抗、中和或以其它方式干擾IL-17F的生物活性。IL-17F的生物活性包括，例如結(jié)合到IL-17R、IL-17RC和/或多聚體IL-17R/IL-17RC受體復(fù)合體，及誘導(dǎo)靶細(xì)胞中的細(xì)胞因子和/或趨化因子(例如IL-6、 IL-8、G-CSF, GM-CSF, GRO-α、GR0_b、LIX、GCP—2、MIG、IP10、I-TAC,禾口 MCP—1、RANTES、 Eotaxin、SDF-1、和MIP3a)表達(dá)。例如huIL_17F抗體通過部分或完全調(diào)節(jié)、阻斷、抑制、降低、拮抗、中和或以其它方式干擾IL-17F結(jié)合到其受體，或以其它方式部分或完全調(diào)節(jié)、阻斷、抑制、減少、拮抗、中和IL-17F信號活性來完全或部分抑制IL-17F生物活性。當(dāng)在存在huIL_17F抗體的情況下的IL-17F活性的水平與在不存在與本文所述 huIL-17F抗體結(jié)合的情況下的IL-17F活性的水平相比較減少至少95%，例如96%、97%、 98%、99%或100%時，認(rèn)為HuIL-17F抗體完全調(diào)節(jié)、阻斷、抑制、降低、拮抗、中和或以其它方式干擾IL-17F生物活性。當(dāng)在存在huIL-17F抗體的情況下的IL-17F活性的水平與在不存在與本文所述huIL-17F抗體結(jié)合的情況下的IL-17F活性的水平相比較減少小于95%， 例如 10%、20%、25%、30%、40%、50%、60%、75%、80%、85%或90%時，認(rèn)為!111比-17卩抗體部分調(diào)節(jié)、阻斷、抑制、降低、拮抗、中和或以其它方式干擾IL-17F活性。^X除非另外定義，本發(fā)明使用的相關(guān)科學(xué)和技術(shù)術(shù)語應(yīng)具有本領(lǐng)域的那些普通技術(shù)人員通常理解的含義。此外，除非上下文另外要求，單數(shù)術(shù)語應(yīng)包括復(fù)數(shù)并且復(fù)數(shù)術(shù)語應(yīng)包括單數(shù)。一般來說，本文所述的細(xì)胞和組織培養(yǎng)、分子生物學(xué)、及蛋白質(zhì)和寡核苷酸或多核苷酸化學(xué)及雜交的技術(shù)及利用的相關(guān)命名法是本領(lǐng)域所熟知的和常用的。標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)用于重組DNA、寡核苷酸合成、及組織培養(yǎng)和轉(zhuǎn)化(例如電穿孔、脂質(zhì)轉(zhuǎn)染)。根據(jù)制造商的說明書或如本領(lǐng)域通常所實現(xiàn)或如本文所述進(jìn)行酶反應(yīng)和純化技術(shù)。通常根據(jù)本領(lǐng)域熟知的常規(guī)方法和如在貫穿本說明書引用和討論的多種一般的和更具體的參考所述進(jìn)行上述技術(shù)和程序。參見例如 Sambrook 等人，Molecular Cloning :A Laboratory Manual (第 2 版，ColdSpring Harbor Laboratory Press，Cold Spring Harbor, N. Y. (1989))。本文所述的分析化學(xué)、有機(jī)合成化學(xué)、及醫(yī)學(xué)和藥物化學(xué)的實驗室程序和技術(shù)及使用的相關(guān)命名法是本領(lǐng)域熟知的和常用的。標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)可用于化學(xué)合成、化學(xué)分析、藥物制備、配制、和遞送及患者的治療。除非另外指明，根據(jù)本公開內(nèi)容使用的以下術(shù)語應(yīng)理解為具有以下含義如本文所使用，術(shù)語白細(xì)胞介素-17A、IL-17A、IL17A、IL-17、IL17、CTLA8、CTLA-8、 細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原8和白細(xì)胞介素-17A前體是同義的并且可替換使用。這些術(shù)語中的每一個是指同二聚體蛋白，除非另外說明。如本文所使用，術(shù)語白細(xì)胞介素-17F、IL-17F、IL17F、ML_1、ML1、白細(xì)胞介素H IL-24、ILM和白細(xì)胞介素-17F前體是同義的并且可替換使用。這些術(shù)語中的每一個是指 IL-17F同二聚體蛋白，除非另外說明。如本文所使用，術(shù)語“抗體”是指免疫球蛋白分子和免疫球蛋白(Ig)分子的免疫活性部分，即包含特異性結(jié)合抗原(與抗原免疫反應(yīng))的抗原結(jié)合位點的分子?！疤禺愋越Y(jié)合”或“免疫反應(yīng)”或“針對”是指抗體與所需的抗原的一個或多個抗原決定簇反應(yīng)并且與其它多肽不反應(yīng)或以更低的親和力(Kd > 10_6)結(jié)合?？贵w包括但不限于，多克隆抗體，單克隆抗體，嵌合抗體，dAb (結(jié)構(gòu)域抗體)，單鏈抗體，F(xiàn)ab、Fab，和F(ab, )2片段，SCFv和Fab表達(dá)文庫。已知基本結(jié)構(gòu)單元包含四聚體。每個四聚體由兩對相同的多肽鏈組成，每對具有一條“輕鏈”(約25kDa)和一條“重鏈”(約50-70kDa)。每條鏈的氨基末端部分包括主要負(fù)責(zé)抗原識別的約100至110個或以上氨基酸的可變區(qū)。每條鏈的羧基末端部分界定了主要負(fù)責(zé)效應(yīng)子功能的恒定區(qū)。一般來說，由人獲得的抗體分子涉及IgG、IgM、IgA、IgE和 IgD任何類，其通過存在于分子中的重鏈的性質(zhì)而相互不同。某些類還具有亞類，例如IgGp
及其它。而且，在人類中，輕鏈可以是κ鏈或λ鏈。如本文所使用的術(shù)語“單克隆抗體”(MAb)或“單克隆抗體組合物”是指僅包含由獨特的輕鏈基因產(chǎn)物和獨特的重鏈基因產(chǎn)物組成的抗體分子的一種分子種類的抗體分子種群。特別地，該種群的所有分子中的單克隆抗體的互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)均相同。MAb包含能夠與抗原的特定表位免疫反應(yīng)的抗原結(jié)合位點，所述抗原特征在于對抗原具有獨特的結(jié)合親和力。一般來說，由人獲得的抗體分子涉及任何類IgG、IgM、IgA、IgE和IgD，其通過存在于分子中的重鏈的性質(zhì)而相互不同。某些類還具有亞類，例如IgG”化(；2及其它。而且，在人中輕鏈可以是κ鏈或λ鏈。術(shù)語“抗原結(jié)合位點”或“結(jié)合部分”是指免疫球蛋白分子參與抗原結(jié)合的部分。 抗原結(jié)合位點是由重鏈(“H”)和輕鏈(“L”)的N-末端可變(“V”)區(qū)的氨基酸殘基形成。重鏈和輕鏈的V區(qū)內(nèi)稱為“高變區(qū)”的3個高度發(fā)散的延伸介于稱為“框架區(qū)”或 “FR”的更保守的側(cè)面延伸之間。因此，術(shù)語“FR”是指通常在免疫球蛋白中的高變區(qū)之間和鄰近免疫球蛋白中的高變區(qū)天然存在的氨基酸序列。在抗體分子中，輕鏈的3個高變區(qū)和重鏈的3個高變區(qū)在三維空間中相對于彼此排列以形成抗原結(jié)合表面?？乖Y(jié)合表面互補(bǔ)于結(jié)合的抗原的三維表面，并且每條重鏈和輕鏈的3個高變區(qū)稱為“互補(bǔ)決定區(qū)”或 “CDR”。每個結(jié)構(gòu)域氨基酸的分配是根據(jù)Kabat Sequences of Proteins of immunologicalInterest(National Institutes of Health,Bethesda,Md. (1987 禾口 1991)),或 Chothia & Lesk J. Mol. Biol. 196 :901-917 (1987)，Chothia 等人，Nature 342 :878-883 (1989)。如本文所使用，術(shù)語“表位”包括能夠特異性結(jié)合到免疫球蛋白或其片段或T-細(xì)胞受體的任何蛋白決定簇。術(shù)語“表位”包括能夠特異性結(jié)合到免疫球蛋白或T-細(xì)胞受體的任何蛋白決定簇。表位決定簇通常由分子例如氨基酸或糖側(cè)鏈的化學(xué)活性的表面分類組成并且通常具有特定的三維結(jié)構(gòu)特征，以及特定的帶電特征。據(jù)說當(dāng)解離常數(shù)μ M、例如 (ΙΟΟηΜ、優(yōu)選地彡IOnM并且更優(yōu)選地彡InM時，抗體特異性結(jié)合抗原。如本文所使用，術(shù)語“免疫結(jié)合”和“免疫結(jié)合性質(zhì)”是指在免疫球蛋白分子和對免疫球蛋白特異性的抗原之間發(fā)生的非共價相互作用類型。免疫結(jié)合相互作用的強(qiáng)度或親和力可以以相互作用的解離常數(shù)(Kd)的方式來表達(dá)，其中Kd越小表示親和力越強(qiáng)。選擇的多肽的免疫結(jié)合性質(zhì)可使用本領(lǐng)域熟知的方法來定量。這些方法之一需要測量抗原結(jié)合位點/抗原復(fù)合體形成和解離的速率，其中那些速率取決于復(fù)合體伴侶的濃度、相互作用的親和力，及同樣地影響兩個方向的速率的幾何參數(shù)。因此，“結(jié)合速率常數(shù)”(KJ和“解離速率常數(shù)”(K。ff)兩者可通過計算濃度及結(jié)合和解離的實際速率來測定。(參見Nature 361 :186-87(1993))。K。ff/K。n的比率使得與親和力不相關(guān)的所有參數(shù)抵消，并且等于解離常數(shù) Kd。(一般參見，Davies 等人，(1990) Annual Rev Biochem 59:439-473)。如通過測定例如放射性配體結(jié)合測定或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的類似測定所測量，據(jù)說當(dāng)平衡結(jié)合常數(shù) (Kd) ^ ΙμΜ、優(yōu)選地彡ΙΟΟηΜ、更優(yōu)選地彡IOnM并且最優(yōu)選地彡IOOpM至約IpM時，本發(fā)明的抗體特異性結(jié)合到IL-17F和/或IL-17A/IL-17F異二聚體。如本文所使用的術(shù)語“分離的多核苷酸”應(yīng)指基因組、cDNA或合成來源的或它們的一些組合的多核苷酸，由于其來源，“分離的多核苷酸”(1)與全部或部分的多核苷酸不結(jié)合，其中“分離的多核苷酸”在自然界中被發(fā)現(xiàn)，(2)可操作地連接至在自然界中不與其連接的多核苷酸，或C3)在自然界中不作為較大序列的一部分而存在。根據(jù)本發(fā)明的多核苷酸包括編碼SEQ ID N0S:1、5、9、13、17、21、25J9、33、37*41中所示的重鏈免疫球蛋白分子的核酸分子、及編碼SEQ ID NOS :3、7、11、15、19、23、27、31、35、39和43中所示的輕鏈免疫球蛋白分子的核酸分子。本文提到的術(shù)語“分離的蛋白質(zhì)”是指cDNA、重組RNA或合成來源的或它們的一些組合的蛋白質(zhì)，由于其來源或衍生的來源，“分離的蛋白質(zhì)”(1)與在自然界中發(fā)現(xiàn)的蛋白質(zhì)不結(jié)合，(2)不含來自相同的來源的其它蛋白質(zhì)，例如無不含海洋蛋白質(zhì)，(3)由來自不同物種的細(xì)胞表達(dá)，或(4)在自然界中不存在。本文作為通用術(shù)語使用的術(shù)語“多肽”是指天然蛋白質(zhì)、片段、或多肽序列的類似物。因此，天然蛋白質(zhì)片段及類似物是多肽屬的種類。根據(jù)本發(fā)明的多肽包含SEQ ID NOS 2、6、10、14、18、22、26、30、34、38和42中所示的重鏈免疫球蛋白分子，和SEQ ID NOS :4、8、 12、16、20、M、28、32、36、40和44中所示的輕鏈免疫球蛋白分子，以及由包含重鏈免疫球蛋白分子和輕鏈免疫球蛋白分子(例如κ輕鏈免疫球蛋白分子)的組合形成的抗體分子，并且反之亦然，及其片段及類似物。如本文所使用應(yīng)用于對象的術(shù)語“天然存在”是指可在自然界中發(fā)現(xiàn)的對象的事實。例如，存在于生物體(包括病毒)中可從自然界來源分離并且沒有被實驗室人員有意修飾或以其它方式修飾的多肽或多核苷酸序列是天然存在的。
如本文所使用的術(shù)語“可操作地連接”是指所描述的組分的位置處于容許它們以其預(yù)期的方式發(fā)揮功能的關(guān)系?！翱刹僮鞯剡B接”至編碼序列的對照序列以這樣的方式配接以使在與對照序列相容的條件下實現(xiàn)編碼序列的表達(dá)。如本文所使用的術(shù)語“控制序列”是指完成編碼序列表達(dá)和加工效果所需的多核苷酸序列，所述控制序列與編碼序列連接。控制測序的性質(zhì)根據(jù)原核生物中的宿主生物體而不同，該控制序列一般包括啟動子、核糖體結(jié)合位點和真核生物中的轉(zhuǎn)錄終止序列，一般來說，該控制序列包括啟動子和轉(zhuǎn)錄終止序列。術(shù)語“控制序列”預(yù)期至少包括，其存在對于表達(dá)和加工來說是必要的所有組分，并且還可包括其存在是有益的另外組分，例如前導(dǎo)序列和融合伴侶序列。本文提到的術(shù)語“多核苷酸”是指至少10個堿基長度的核苷酸的硼聚合物，所述核苷酸為核糖核苷酸或脫氧核苷酸或任一類型核苷酸的修飾形式。該術(shù)語包括DNA的單鏈和雙鏈形式。本文提到的術(shù)語“寡核苷酸”包括通過天然存在的和非天然存在的寡核苷酸鍵合連接在一起的天然存在的核苷酸和修飾的核苷酸。寡核苷酸是一般包含200個堿基或更少的長度的多核苷酸子集。優(yōu)選地寡核苷酸是10至60個堿基長度并且最優(yōu)選地是12、13、 14、15、16、17、18、19或20至40個堿基長度。雖然寡核苷酸可以是雙鏈的(例如用于構(gòu)建基因突變)，但寡核苷酸通常是單鏈的(例如對于探針)。本發(fā)明的寡核苷酸是正義的或反義的寡核苷酸。本文提到的術(shù)語“天然存在的核苷酸”包括脫氧核糖核苷酸和核糖核苷酸。本文提到的術(shù)語“修飾的核苷酸”包括具有修飾的或取代的糖基等的核苷酸。本文提到的術(shù)語“寡核苷酸鍵合”包括寡核苷酸鍵合，例如硫代磷酸酯、二硫硫代磷酸酯、硒代磷酸酯、二硒代磷酸酉旨(phosphorodiselenoate)、phosphoroaniIothioate> phoshoraniIadate、氛基憐酸酉旨 (phosphoronmidate)等。參見例如 LaPlanche 等人，Nucl. Acids Res. 14 :9081(1986) ；Stec 等人，J. Am. Chem. Soc. 106 :6077 (1984)，Stein 等人，Nucl. Acids Res. 16 :3209 (1988)， Zon 等人’ Anti Cancer Drug Design 6 :539(1991) ；Zon 等人’ Oligonucleotides and Analogues :A Practical Approach,第 87-108 頁(F. Eckstein 編，Oxford University Press, Oxford England(1991)) ；Stec 等人，美國專利 No. 5，151，510 ；Uhlmann 和 Peyman Chemical Reviews 90:543(1990)。如果需要，寡核苷酸可包括用于檢測的標(biāo)記。本文提到的術(shù)語“選擇性雜交”是指可檢測性和特異性結(jié)合。在雜交和沖洗條件下，根據(jù)本發(fā)明的多核苷酸、寡核苷酸及其片段選擇性雜交至核酸鏈，所述雜交和沖洗條件使與非特異性核酸可檢測性結(jié)合的可察覺的量最小化?？墒褂酶叨葒?yán)格以實現(xiàn)本領(lǐng)域已知的和本文所討論的選擇性雜交條件。一般來說，多核苷酸、寡核苷酸及本發(fā)明的片段和目標(biāo)核酸序列之間的核酸序列同源性將為至少80%，并且更典型地，優(yōu)選地至少85%、90%、 95%、99%和100%的提高的同源性。如果兩個氨基酸序列之間存在部分或完全同一性， 則它們是同源的。例如當(dāng)比對兩個序列以達(dá)到最大匹配時85%同源性是指85%的氨基酸具有同一性。最大化匹配中允許有缺口(匹配的兩個序列中的任一個)，缺口長度優(yōu)選5 個或更少，更優(yōu)選具有2個或更少?？蛇x地且優(yōu)選地，如果使用具有突變數(shù)據(jù)矩陣的程序 ALIGN，兩個蛋白質(zhì)序列(或至少30個氨基酸長度的源自它們的多肽序列)的比對評分大于5(以標(biāo)準(zhǔn)偏差單位計)并且缺口罰分為6或更高時，則它們是同源的(該術(shù)語如本文所使用的)。Dayhoff, Μ. 0.，Atlas of Protein Sequence and Structure,第 101—110頁(第 5 卷，National Biomedical Research Foundation (1972))和該卷的增刊 2，第 1-10 頁。當(dāng)使用ALIGN程序最佳比對時，如果兩個序列或其部分的氨基酸具有大于或等于50% 的同一性，則它們是更優(yōu)選地同源。本文使用的術(shù)語“對應(yīng)于”是指多核苷酸序列與參考多核苷酸序列的全部或部分同源(即，具有同一性，不嚴(yán)格的進(jìn)化性相關(guān))，或指多肽序列與參考多肽序列具有同一性。相比之下，本文使用的術(shù)語“互補(bǔ)于”是指互補(bǔ)序列與參考多核苷酸序列的全部或部分同源。舉例說明，核苷酸序列“TATAC”對應(yīng)于參考序列“TATAC”并且互補(bǔ)于參考序列“GTATA”。以下術(shù)語用于描述兩個或多個多核苷酸或氨基酸序列之間的序列關(guān)系“參考序列”、“比較窗口”、“序列同一性”、“序列同一性百分比”和“基本同一性”?！皡⒖夹蛄小笔怯米餍蛄斜容^的基礎(chǔ)的確定序列，參考序列可以是較大序列的子集，例如作為全長cDNA或序列表中給定的基因序列的片段或可包含完整的cDNA或基因序列。一般來說，參考序列為至少 18個核苷酸或6個氨基酸長度，經(jīng)常至少M個核苷酸或8個氨基酸長度，并且經(jīng)常至少48 個核苷酸或16個氨基酸長度。因為兩個多核苷酸或氨基酸序列各自可(1)包含兩個分子之間相似的序列(即，完整多核苷酸或氨基酸序列的一部分)，以及( 還可包含兩個多核苷酸或氨基酸序列之間趨異的序列，所以通常通過在“比較窗口”上比較兩個分子的序列進(jìn)行兩個(或以上)分子之間的序列比較以鑒定和比較序列相似性的局部區(qū)域。如本文所使用， “比較窗口 ”是指至少18個連續(xù)核苷酸位置或6個氨基酸的概念片段，其中多核苷酸序列或氨基酸序列可與至少18個連續(xù)核苷酸或6個氨基酸序列的參考序列相比較，并且其中比較窗口中的多核苷酸序列部分相較于參考序列(其不包含添加或缺失)可包含20%或更少的添加、缺失、取代等(即缺口)以達(dá)到兩個序列的最佳比對。通過Smith和Waterman Adv. App 1. Math. 2 :482(1981)的局部同源性算法，通過 Needleman 和 Wunsch J. Mol. Biol. 48 443(1970)的同源比對算法，通過 Pearson 和 Lipman Proc. Natl. Acad. Sci. (U. S. A. )85 2444(1988)的相似法的研究，通過這些算法的計算機(jī)執(zhí)行(Wisconsin Genetics Software Package Release 7. O (Genetics Computer Group, 575Science Dr. , Madison, Wis.)中的 GAP、BESTFIT、FASTA和TFASTA，Geneworks或MacVector軟件包)，或通過檢查可進(jìn)行用于比對比較窗口的序列的最佳比對，并且選擇通過多種方法產(chǎn)生的最佳比對(即，在比較窗口導(dǎo)致同源的最高百分比)。術(shù)語“序列同一性”是指在比較窗口上兩個多核苷酸或氨基酸序列具有同一性 (即，基于核苷酸-核苷酸或殘基-殘基)。術(shù)語“序列同一性百分比”是通過下述來計算 在比較窗口上比較兩個最佳比對序列，確定在兩個序列上存在的相同核酸堿基(例如A、T、 C、G、U或I)或殘基的位置的數(shù)目以產(chǎn)生匹配的位置的數(shù)目，將匹配的位置的數(shù)目除以比較窗口中位置的總數(shù)目(即窗口的大小)，并且將結(jié)果乘以100以產(chǎn)生序列同一性百分比。如本文所使用的術(shù)語“基本同一性”表示多核苷酸或氨基酸序列的特征，其中多核苷酸或氨基酸包含這樣的序列其與參考序列相比，在具有至少18個核苷酸(6個氨基酸)位置的比較窗口、通常具有至少對-48個核苷酸(8-16個氨基酸)位置的窗口上具有至少85百分比的序列同一性，優(yōu)選地至少90至95百分比的序列同一性，更通常至少99百分比的序列同一性，其中序列同一性百分比通過在比較窗口上比較參考序列與可包括缺失或添加總計20 百分比或更少的的序列來計算。參考序列可以是較大序列的子集。如本文所使用，20個常規(guī)氨基酸及它們的縮寫遵循常規(guī)用法。參見Immimology-ASynthesis (第 2 版，Ε. S. Golub 禾口 D. R. Gren 編，Sinauer Associates, Sunderland7 Mass. (1991))。20個常規(guī)氨基酸的立體異構(gòu)體(例如D-氨基酸)，非天然氨基酸例如α _、α -雙取代氨基酸、N-烷基氨基酸、乳酸，和其它非常見氨基酸還可以是本發(fā)明的多肽的合適的組分。非常見氨基酸的實例包括4-羥基脯氨酸、Y-羧基谷氨酸、ε -N，N，N-三甲基賴氨酸、 ε -N-乙?；嚢彼?、0-磷酸絲氨酸、N-乙?；z氨酸、N-甲?；琢虬彼?、3-甲基組氨酸、5-羥基賴氨酸、σ -N-甲基精氨酸、和其它類似的氨基酸和亞氨基酸(例如4-羥基脯氨酸)。本文使用的多肽標(biāo)記法中，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)用法和慣例，左手方向是氨基末端方向并且右手方向是羧基末端方向。類似地，除非另外指出，單鏈多核苷酸序列的左手端是5'端，雙鏈多核苷酸序列的左手方向稱為5'方向。5'到3'添加RNA轉(zhuǎn)錄物的方向稱為轉(zhuǎn)錄方向，在DNA鏈上與 RNA具有相同的序列并且對于RNA轉(zhuǎn)錄物的5'端為5'的序列區(qū)稱為“上游序列”，DNA鏈上與RNA具有相同的序列并且對于RNA轉(zhuǎn)錄物的3'端為3'的序列區(qū)稱為“下游序列”。應(yīng)用于多肽的術(shù)語“基本同一性”是指當(dāng)例如使用默認(rèn)缺口權(quán)重(default gap weight)通過程序GAP或BESTFIT最佳比對時，兩條肽序列共享至少80百分比的序列同一性，優(yōu)選地至少90百分比的序列同一性，更優(yōu)選地至少95百分比的序列同一性，并且最優(yōu)選地至少99百分比的序列同一性。優(yōu)選地，不具有同一性的殘基位置由保守氨基酸取代而不同。保守氨基酸取代是指具有相似側(cè)鏈的殘基的可互換性。例如一組具有脂肪族側(cè)鏈的氨基酸是甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸；一組具有脂肪族-羥基側(cè)鏈的氨基酸是絲氨酸和蘇氨酸；一組具有含酰胺側(cè)鏈的氨基酸是天冬酰胺和谷氨酰胺；一組具有芳香族側(cè)鏈的氨基酸是苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸；一組具有堿性側(cè)鏈氨基酸是賴氨酸、精氨酸和組氨酸；及一組具有含硫側(cè)鏈氨基酸是半胱氨酸和甲硫氨酸。優(yōu)選的保守氨基酸取代組是纈氨酸-亮氨酸-異亮氨酸、苯丙氨酸-酪氨酸、賴氨酸-精氨酸、丙氨酸-纈氨酸、谷氨酸-天冬氨酸和天冬酰胺-谷氨酰胺。如本文所討論，認(rèn)為抗體或免疫球蛋白分子的氨基酸序列中的輕微改變包含于本發(fā)明，條件是氨基酸序列中的改變保持至少75 %，更優(yōu)選地至少80 %、90 %、95 %，并且最優(yōu)選地99%。特別地，包括保守氨基酸取代。保守取代是那些發(fā)生于氨基酸家族內(nèi)與它們的側(cè)鏈相關(guān)的取代?；蚓幋a的氨基酸一般分為以下家族(1)酸性氨基酸是天冬氨酸、谷氨酸；(2)堿性氨基酸是賴氨酸、精氨酸、組氨酸；(3)非極性氨基酸是丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、色氨酸，及(4)不帶電極性氨基酸是甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、半胱氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸。親水氨基酸包括精氨酸、天冬酰胺、 天冬氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、組氨酸、賴氨酸、絲氨酸和蘇氨酸。疏水氨基酸包括丙氨酸、半胱氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、色氨酸、酪氨酸和纈氨酸。氨基酸的其它家族包括(i)絲氨酸和蘇氨酸，其為脂肪族-羥基家族；(ii)天冬酰胺和谷氨酰胺， 其為包含酰胺的家族；(iii)丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸，其為脂肪族家族；及(iv) 苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸，其為芳香族家族。例如，合理預(yù)期分別用異亮氨酸或纈氨酸替換亮氨酸、用谷氨酸替換天冬氨酸、用絲氨酸替換蘇氨酸或用結(jié)構(gòu)相關(guān)的氨基酸相似替換氨基酸對生成分子的結(jié)合或性質(zhì)將無重大影響，特別是如果替換不涉及框架位置內(nèi)的氨基酸。功能肽中的氨基酸改變結(jié)果是否可容易地通過測定多肽衍生物的比活性來確定。該測定在本文詳述?？贵w或免疫球蛋白分子的片段或類似物可由本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員容易地制備。片段或類似物優(yōu)選的氨基端和羧基端出現(xiàn)在功能結(jié)構(gòu)域的邊界附近。結(jié)構(gòu)和功能結(jié)構(gòu)域可通過將核苷酸和/或氨基酸序列數(shù)據(jù)與公共或?qū)Ｓ行蛄袛?shù)據(jù)庫比較來鑒定。優(yōu)選地，計算機(jī)化比較方法用于鑒定序列基序或預(yù)測出現(xiàn)在已知結(jié)構(gòu)和/或功能的其它蛋白質(zhì)上的蛋白質(zhì)構(gòu)象結(jié)構(gòu)域。已知鑒定折疊成已知三維結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)序列的方法。Bowie等人， Science 253 164(1991)。因此，上述實例證明本領(lǐng)域技術(shù)人員可識別可用于界定根據(jù)本發(fā)明的結(jié)構(gòu)和功能結(jié)構(gòu)域的序列基序和結(jié)構(gòu)構(gòu)象。優(yōu)選的氨基酸取代是以下氨基酸取代，所述氨基酸取代(1)降低對蛋白質(zhì)水解的敏感性，(2)降低對氧化作用的敏感性，(3)改變用于形成蛋白質(zhì)復(fù)合體的結(jié)合親和力， 改變結(jié)合親和力，和(4)賦予或修飾此類似物的其它物理化學(xué)或功能性質(zhì)。類似物可包括序列的多種突變型蛋白而非天然存在的肽序列。例如單個或多個氨基酸取代(優(yōu)選地是保守氨基酸取代)可產(chǎn)生于天然存在的序列中(優(yōu)選地在形成分子間接觸的結(jié)構(gòu)域外的多肽部分)。保守氨基酸取代不應(yīng)該大致上改變親本序列的結(jié)構(gòu)特征(例如替換氨基酸不應(yīng)該傾向于破壞出現(xiàn)在親本序列中的螺旋，或破壞表征親本序列的二級結(jié)構(gòu)的其它類型)。 本領(lǐng)域公認(rèn)的多肽二級和三級結(jié)構(gòu)的實例描述于Proteins，Structures and Molecular Principles(Creighton 編，W. H. Freeman and Company, New York(1984)) ；Introduction to Protein Structure (C. Branden 禾口 J. Tooze 編，Garland Publishing, New York, N. Y. (1991))；及 Thornton 等人，Nature 354:105(1991)。如本文所使用的術(shù)語“多肽片段”是指具有氨基末端和/或羧基末端缺失但其中殘留的氨基酸序列與推導(dǎo)的天然存在序列(例如從全長cDNA序列)在對應(yīng)位置具有同一性的多肽。片段通常為至少5、6、8或10個氨基酸長度，優(yōu)選地至少14個氨基酸長度，更優(yōu)選地至少20個氨基酸長度，通常至少50個氨基酸長度，并且甚至更優(yōu)選地至少70個氨基酸長度。如本文所使用的術(shù)語“類似物”是指由與推導(dǎo)的氨基酸序列的部分具有基本同一性的至少25個氨基酸的片段構(gòu)成并且在合適的結(jié)合條件下僅特異性結(jié)合到IL-17F或特異性結(jié)合到IL-17A/IL-17F異二聚體(即復(fù)合體)的多肽。典型地，多肽類似物包含關(guān)于天然存在的序列的保守氨基酸取代(或添加或缺失)。類似物通常是至少20個氨基酸長度， 優(yōu)選地至少50個氨基酸長度或更長，并且可通常與全長天然存在的多肽一樣長。肽類似物作為具有類似于模板肽性質(zhì)的非肽藥物常用于制藥業(yè)。這些類型的非肽化合物稱為“肽模擬物(peptide mimetic)” 或“模擬肽(ρ 印 tidomimetic) ”。Fauchere, J. Adv. Drug Res. 15 :29 (1986)，Veber 和 Freidinger TINS 第 392 頁(1985)；以及 Evans 等人，J.Med. Chem. 30 :12 (1987)。這種化合物的開發(fā)通常借助于計算機(jī)分子模型。與治療上使用的肽在結(jié)構(gòu)上類似的肽模擬物可用于產(chǎn)生等同的治療或預(yù)防效果。一般來說， 肽模擬物結(jié)構(gòu)上類似于范本多肽(即具有生化性質(zhì)或藥理學(xué)活性的多肽)例如人抗體，但具有通過本領(lǐng)域熟知的方法被選自由-CH2NH-、-CH2S-, -CH2-CH2-, -CH = CH-(順式和反式)、-C0CH2-、CH(OH) CH2-和-CH2SO-組成的組的鍵合所任選地替換的一種或多種肽鍵合。 用相同的類型的D-氨基酸(例如D-賴氨酸替換L-賴氨酸)系統(tǒng)取代共有序列的一個或多個氨基酸可用于產(chǎn)生更加穩(wěn)定的肽。另外，包含共有序列或基本相同的共有序列改變的限制性肽可通過本領(lǐng)域已知方法產(chǎn)生(Rizo和Gierasch Ann. Rev. Biochem. 61 :387(1992))； 例如通過添加內(nèi)部半胱氨酸殘基能夠形成使肽環(huán)化的分子內(nèi)二硫鍵。
本文使用的術(shù)語“試劑(agent) ”表示化合物、化合物的混合物、生物大分子、或從生物材料制得的提取物。如本文所使用，術(shù)語“標(biāo)記”或“標(biāo)記的”是指摻入可檢測的標(biāo)記物，例如通過摻入放射標(biāo)記的氨基酸或附接到可通過標(biāo)記的抗生物素蛋白(例如包含可通過光學(xué)方法或量熱法檢測的熒光標(biāo)記物或酶活性的鏈霉抗生物素蛋白)檢測的生物素基部分的多肽。在某些情況下，標(biāo)記或標(biāo)記物還可以是治療性的。標(biāo)記多肽和糖蛋白的多種方法是本領(lǐng)域已知的并且可以使用。用于多肽的標(biāo)記的實例包括但不限于以下放射性同位素或放射性核素 (例如3H、14C、15N、35S、9°Y、99Tc、mh、125I、131I)、熒光標(biāo)記(例如FITC、羅丹明、鑭系磷光體)、 酶標(biāo)記(例如辣根過氧化物酶、P"半乳糖苷酶、螢光素酶、堿性磷酸酶)、化學(xué)發(fā)光、生物素基組、由二級報道分子(例如亮氨酸拉鏈對序列、二級抗體的結(jié)合位點、金屬結(jié)合結(jié)構(gòu)域、 表位標(biāo)簽)識別的預(yù)設(shè)的多肽表位。在一些實施方案中，由多種長度的間隔臂附接標(biāo)記以降低可能的位阻。如本文所使用的術(shù)語“藥用試劑或藥物”是指當(dāng)適當(dāng)?shù)厥┯媒o患者時能夠誘導(dǎo)所需的治療效果的化合物或組合物。本文使用的其它化學(xué)術(shù)語依照本領(lǐng)域常規(guī)用法，如由McGraw-Hill化學(xué)術(shù)語詞典 (McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms)所不例(Parker, S.編，McGraw-Hill，San Francisco(1985))。本文使用的術(shù)語“抗腫瘤劑”是指具有抑制人腫瘤、特別是惡性(癌性)損害例如癌、肉瘤、淋巴瘤或白血病的發(fā)展或進(jìn)展的功能特性的試劑。抑制轉(zhuǎn)移通常是抗腫瘤劑的特性。如本文所使用，“基本純的”是指對象種類是存在的占優(yōu)勢的種類(即，以于摩爾計，它比組合物中的任何其它單個種類更豐富)，并且優(yōu)選地基本純化的餾分是其中對象種類包含所有存在的大分子種類的至少約50百分比(以摩爾計)的組合物。一般來說，基本純的組合物包含存在于組合物中的所有大分子種類的多于約80 百分比，更優(yōu)選地多于約85^^90^^95%和99%。最優(yōu)選地，對象種類被純化至必需的均一性(通過常規(guī)檢測方法未能在組合物中檢測出污染種類)，其中組合物基本上由單一大分子種類組成。自身免疫性疾病包括，例如獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS，其為具有自身免疫性組分的病毒性疾病)、斑禿、強(qiáng)直性脊柱炎、抗磷脂綜合征、自身免疫性艾迪生病、自身免疫性溶血性貧血、自身免疫性肝炎、自身免疫性內(nèi)耳病(AIED)、自身免疫性淋巴細(xì)胞增生綜合征 (ALPS)、自身免疫性血小板減少性紫癜(ATP)、貝切特氏病、心肌癥、口炎性腹瀉-皰疹樣皮炎(celiac sprue-dermatitis hepetiformis)；慢性疲勞免疫功能紊亂綜合征(CFIDS)、 慢性炎性脫髓鞘多發(fā)性神經(jīng)病(CIPD)、疤痕性類天皰瘡(cicatricial pemphigoid)、冷凝集素病、CREST綜合征(crest syndrome)、克羅氏病、德戈斯氏病、幼年型皮肌炎、盤狀狼瘡、原發(fā)性混合型冷球蛋白血癥、纖維肌痛-纖維肌炎、格雷夫斯氏病、吉蘭-巴雷綜合征、橋本甲狀腺炎、特發(fā)性肺纖維化、特發(fā)性血小板減少性紫癜(ITP)、IgA腎病、胰島素依賴型糖尿病、幼年型慢性關(guān)節(jié)炎(斯提耳氏病)、幼年型類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、美尼爾氏綜合癥(Μ ι Γθ’ s disease)、混合性結(jié)締組織病、多發(fā)性硬化、重癥肌無力、惡性貧血 (pernacious anemia)、結(jié)節(jié)性多動脈炎、多軟骨炎、多腺體綜合征、風(fēng)濕性多肌痛、多發(fā)性肌炎和皮肌炎、原發(fā)性無丙種球蛋白血癥、原發(fā)性膽汁性肝硬變、銀屑病、銀屑病關(guān)節(jié)炎、雷諾氏現(xiàn)象、萊特爾綜合征、風(fēng)濕熱、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、肉樣瘤病、硬皮病(進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化病(PSS)，也稱為系統(tǒng)性硬化病(SQ)、干燥綜合征、僵人綜合征、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、大動脈炎、顳動脈炎/巨細(xì)胞動脈炎潰瘍性結(jié)腸炎、葡萄膜炎、白癜風(fēng)和韋格納氏肉芽腫病。炎性病癥包括，例如慢性和急性炎性病癥。炎性病癥的實例包括阿爾茨海默氏病、 哮喘、特應(yīng)性變態(tài)反應(yīng)、變態(tài)反應(yīng)、動脈粥樣硬化、支氣管哮喘、濕疹、腎小球性腎炎、移植物抗宿主病(graft vs. host disease)、溶血性貧血、骨關(guān)節(jié)炎、敗血病、中風(fēng)、組織和器官移植、血管炎、糖尿病性視網(wǎng)膜病和呼吸機(jī)所致的肺損傷。huIL_17F 抗體本發(fā)明的單克隆抗體(例如全人單克隆抗體)結(jié)合IL-17F，并且在一些實施方案中，結(jié)合IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合體，但不結(jié)合IL-17A或IL-17A同二聚體。這些單克隆抗體具有抑制IL-17F誘導(dǎo)的促炎細(xì)胞因子(例如IL-6)產(chǎn)生的能力。測定抑制，例如通過本文所述IL-17F刺激的小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF)細(xì)胞測定。本發(fā)明的示例性抗體包括，例如本文所述5E12抗體、41B10抗體、11C5抗體、21B10 抗體、IFl抗體、2E12抗體、5D3抗體、22F8抗體、28B11抗體、41A4抗體和43G6抗體。這些抗體對人IL-17F和/或異二聚體IL-17A/IL-17F復(fù)合體顯示特異性，并且它們已顯示在體外抑制促炎細(xì)胞因子IL-6的人IL-17F誘導(dǎo)。本文所述的huIL_17F單克隆抗體中的每一個包括如氨基酸和以下所列的相應(yīng)核酸序列中所示的重鏈可變區(qū)(VH)和輕鏈可變區(qū)(VL)。5E12抗體包括由SEQ ID NO 1中所示的核酸序列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 2)、和由SEQ ID NO :3中所示的核酸序列編碼的輕鏈可變區(qū)(SEQ ID NO :4)。> 5E12VH 核酸序列(SEQ ID NO 1)CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTG
GCAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTGATGATTATGCCATGCACTGGGTCCGGCAAGCTCCAGGGAAGGGCCTGGAGTGGGTCTCAGGTATTAGTTGGAATAGTGGTACCATAGGCTATGCGGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAACGCCAAGAACTCCCTGTATCTGCAAATGAACAGTCTGAGAGCTGAGGACACGGCCTTGTATTACTGTGCAAAAGAACTGTATATCAGTGACTGGGACTCCTACTCCTACGGTATGGACGTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA> 5E12VH 氨基酸序列(SEQ ID NO 2)QVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFDDYAMHWVRQAPGK
GLEWVSGISWNSGTIGYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTALYYCAKELYISDWDSYSYGMDVWGQGTTVTVSS> 5E12VL 核酸序列(SEQ ID NO 3)GAAATTGTGTTGACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGTGCATCCAGCAGGGCCACTGGC
ATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTGGAGCCTGAAGATTTTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGTATGGTAGCTCACCTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA> 5E12VL 氨基酸序列(SEQ ID NO 4)EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYGSSPFGGGTKVEIK41B10抗體包括由SEQ ID NO :5中所示的核酸序列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 6)、和由SEQ ID NO 7中所示的核酸序列編碼的輕鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 8)。>41B10VH 核酸序列(SEQ ID NO 5)GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTAAAGCCTGGGGGGTCCCTTAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACTTTCAGTAACGCCTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAATGGGTTGGCCGTATTAAAAGCAAAACTGATGGTGGGACAACAGACTACGTTGCACCCGTGAAAGGCAGATTCACCATCTCAAGAGATGATTCAAAAAACACCCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAAAACCGAGGACACAGCCGTATATTACTGTACCACATCGTATAGCAGTTACTGGTTCCCCTACTACTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA> 41B10VH 氨基酸序列(SEQ ID NO 6)EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSNAWMSWVRQAPGKGLEWVGRIKSKTDGGTTDYVAPVKGRFTISRDDSKNTLYLQMNSLKTEDTAVYYCTTSYSSYWFPYYFDYWGQGTLVTVSS> 41B10VL 核酸序列(SEQ ID NO 7)GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCACTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGTCGGGCGAGTCAGGGTATTAGCAGCTGGTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGAGAAAGCCCCTAAGTCCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGCCAACAGTATAATAGTTACCCGATCACCTTCGGCCAAGGGACACGACTGGAGATTAAA> 41B10VL 氨基酸序列(SEQ ID NO 8)DIQMTQSPSSLSASV⑶RVTITCRASQGISSWLAWYQQKPEKAPKSLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYNSYPITFGQGTRLEIKThe 11C5抗體包括由SEQ ID NO :9中所示的核酸序列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID N0:10)、和由SEQ ID NO :11中所示的核酸序列編碼的輕鏈可變區(qū)(SEQ ID N0:12)。11C5抗體的輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列包括位于5’端以將殘基轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的人種系序列中發(fā)現(xiàn)的殘基的突變。11C5抗體的輕鏈可變區(qū)氨基酸序列的非突變版本在SEQ ID NO :102中示出、11C5抗體的輕鏈可變區(qū)核酸序列的非突變版本在SEQ ID NO :103中示出。> 11C5VH 核酸序列(SEQ ID NO 9)CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTTTCCTGCAAGGCATCTGGATACACCTTCACCATCTATTATTTGCACTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAATAATCAACCCTAGTGGTGGTAGGACAAACTACGCACAGAAGTTCCAGGGCAGGGTCACCATGACCAGGGACCCGTCCACGAACACAGTCTACATGGAACTGAGCAGCCTGACATCTGAGGACGCGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGGGGAATTTAGCAGTGGCTGGCTTGACTACTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA> 11C5VH 氨基酸序列(SEQ ID NO 10)QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTIYYLHWVRQAPGQGLEWMGIINPSGGRTNYAQKFQGRVTMTRDPSTNTVYMELSSLTSEDAAVYYCARGEFSSGWLDYffGQGTTVTVS S> 11C5VL 核酸序列(SEQ ID NOjIllGACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCTTCCGTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGTCGGGCGAGTCAGGGTATTAGCAGCTGGTTAGCCTGGTATCAGCATAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTACTATTGTCAACAGGCTAATAGTTTCCCGCTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA> 11C5VL 氨基酸序列(SEQ ID NO 12)DIQMTQSPSSVSASV⑶RVTITCRASQGISSWLAWYQHKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQANSFPLTFGGGTKVEIK>非突變 11C5VL 核酸序列(SEQ ID NO :102)GACATCGTGATGACCCAGTCTCCATCTTCCGTGTCTGCATCTGTA
GGAGACAGAGTCACCATCACTTGTCGGGCGAGTCAGGGTATTAGCAGCTGGTTAGCCTGGTATCAGCATAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTACTATTGTCAACAGGCTAATAGTTTCCCGCTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA>非突變 11C5VL 氨基酸序列(SEQ ID NO :103)DIVMTQSPSSVSASV⑶RVTITCRASQGISSWLAWYQHKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQANSFPLTFGGGTKVEIK21B10抗體包括由SEQ ID NO 13中所示的核酸序列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 14)、和由SEQ ID NO 15中所示的核酸序列編碼的輕鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 16)。>21B10VH 核酸序列(SEQ ID NO 13)GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAGCTATAGCATGAACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTTTCATACATTAGTGGTGGTAGTAGTACCATATACTACGCAGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATGCCAAGAACTCACTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGACGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGAGAGGGCTATGTTTCGGGGACCTATTACAACTACTACTACGGTATGGACGTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA> 21B10VH 氨基酸序列(SEQ ID NO 14)EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYSMNWVRQAPGKGLEWVSYISGGSSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRDEDTAVYYCAREGYVSGTYYNYYYGMDVffGQGTTVTVSS>21B10VL 核酸序列(SEQ ID NO 15)GAAATTGTGTTGACCCAGTCTCCAGCCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACC
CTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGTTACTTAGCCTGGTACCAACAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATGCACCCAACAGGGCCACTGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAGCAGCGTAGCAACTGGTCGCTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA> 21B10VL 氨基酸序列(SEQ ID NO 16)EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDAPNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWSLTFGGGTKVEIKIFl抗體包括由SEQ ID NO 17中所示的核酸序列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 18)、和由SEQ ID NO :19中所示的核酸序列編碼的輕鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 20)。IFl抗體的輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列包括位于5’端以將殘基轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的人種系序列中發(fā)現(xiàn)的殘基的突變。IFl抗體的輕鏈可變區(qū)氨基酸序列的非突變版本在SEQ ID NO :104中示出、和 IFl抗體的輕鏈可變區(qū)核酸序列的非突變版本在SEQ ID NO :105中示出。> IFlVH 核酸序列(SEQ ID NO 17)GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGTCATGAGCTGGGTCCGCCAGGTTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGGTCGTGGTGGTAACACATTCTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGGACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTATATTACTGTGCGAAAGATGATCGGCGTATAGCAGCAGGTAGTTTTGACTATTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA> IFlVH 氨基酸序列(SEQ ID NO 18)EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYVMSWVRQVPGKGLEffVSAISGRGGNTFYADSVKGRF TISRDNSKNTLYLQMDSLRAEDTAVYYCAKDDRRIAAGSFDYffGQGTTVTVSS> IFlVL 核酸序列(SEQ ID NO 19)
GCCATCCAGTTGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGGGCATTAGCAGTGCTTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCTCCTAAGCTCCTGATCTATGATGTCTCCAGTTTGGAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGTCAACAGTTTAATAGTTACCCTCTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA> IFlVL 氨基酸序列(SEQ ID NO 20)AIQLTQSPSSLSASV⑶RVTITCRASQGISSALAWYQQKPGKAPKLLIYDVS SLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFNSYPLTFGGGTKVEIK>非突變 IFlVL 核酸序列(SEQ ID NO :104)GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGGGCATTAGCAGTGCTTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCTCCTAAGCTCCTGATCTATGATGTCTCCAGTTTGGAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGTCAACAGTTTAATAGTTACCCTCTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA>非突變 IFlVL 氨基酸序列(SEQ ID NO :105)DIQMTQSPSSLSASV⑶RVTITCRASQGISSALAWYQQKPGKAPKLLIYDVS SLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFNSYPLTFGGGTKVEIK2E12抗體包括由SEQ ID NO :21中所示的核酸序列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 22)、和由SEQ ID NO :23中所示的核酸序列編碼的輕鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 24) 0> 2E12VH 核酸序列(SEQ ID NO 21)GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCGGGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAGCTATAGCATGAACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATTTCATACATTAGTAGTAGTAG
TAGTGCCATATACTACGCAGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATGCCAAGAACTCACTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGACGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGAGAGGGCTATGCTTCGGGGAGGTATTACAACTACTACTACGGTATGGACGTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA> 2E12VH 氨基酸序列(SEQ ID NO 22)EVQLVESGGGLVQRGGSLRLSCAASGFTFSSYSMNWVRQAPGKGLEWISYISSSSSAIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRDEDTAVYYCAREGYASGRYYNYYYGMDVffGQGTTVTVSS> 2E12VL 核酸序列(SEQ ID NO 23)GAAATTGTGTTGACGCAGTCTCCAGCCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCTACTTGGCCTGGTACCAACAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATGCATCCAACAGGGCCACTGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGTCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCGGTTTATTACTGTCAGCAGCGTAGCAGCTGGTCGCTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA> 2E12VL 氨基酸序列(SEQ ID NO 24)EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSVSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSSWSLTFGGGTKVEIK5D3抗體包括由SEQ ID NO :25中所示的核酸序列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 沈)、和由SEQ ID NO :27中所示的核酸序列編碼的輕鏈可變區(qū)(SEQ ID NO :28)。> 5D3VH 核酸序列(SEQ ID NO 25)GAAGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGCAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTGATGATTATGCCATGCACTGGGTCCGGCAAGCTCCAGGGAAGGGCCTGGAGTGGGTCTCAGGTATTAGTTGGAATAGTGGTAGCAGAGGCTAT
GCGGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAACGCCAAGAACTCCCTGTATCTGCAAATGAACAGTCTGAGAGCTGAGGACACGGCCTTGTATTACTGTGCAAAAGATATGGTCTACGCTTTGGACGTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA> 5D3VH 氨基酸序列(SEQ ID NO 26)EVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFDDYAMHWVRQAPGKGLEffVSGISffNSGSRGYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTALYYCAKDMVYALDVffGQGTTVTVSS> 5D3VL 核酸序列(SEQ ID NO 27)GAAATTGTGTTGACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTTTTAGCGGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATACATCCAGCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTGGAGCCTGAAGATTTTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGTATGGTACGTGGACGTTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAA> 5D3VL 核酸序列(SEQ ID NO 28)EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSFSGSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDTSSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYGTWTFGQGTKVEIK22F8抗體包括由SEQ ID NO : 中所示的核酸序列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 30)、和由SEQ ID NO 31中所示的核酸序列編碼的輕鏈可變區(qū)(SEQ ID NO :32)。> 22F8VH 核酸序列(SEQ ID NO 29)GAGGTGCAGTTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAACTATTAGTGGTCGTGGTGGTAGCATATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCCGTATATT
ACTGTGCGAAAGAGGAGGCTACCTGGGACTTTGACTACTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA> 22F8VH 氨基酸序列(SEQ ID NO 30)EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMNWVRQAPGKGLEffVSTISGRGGSIYYADSVKGRF TISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKEEATffDFDYffGQGTTVTVSS> 22F8VL 核酸序列(SEQ ID NO 31)GAAATTGTGTTGACACAGTCTCCAGCCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCTTCTTAGCCTGGTTCCAACAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATGCATCCAACAGGGCCACTGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAGCAGCGTAGCAACTGGCCTCCGACGTTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAA> 22F8VL 氨基酸序列(SEQ ID NO 32)EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSFLAWFQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPPTFGQGTKVEIK28B11抗體包括由SEQ ID NO :33中所示的核酸序列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 34)、和由SEQ ID NO 35中所示的核酸序列編碼的輕鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 36)。> 28B11VH 核酸序列(SEQ ID NO 33)CAGGTGCAACTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCAAGCCTGGAGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAACTACTACATGACCTGGATCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATTTCATACATTAGTAGTACTGGTGGTAACATCTACTACGCAGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGGGACAACGCCCAGAATTCACTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGAGATGGGGGTGTAATAATCTCAACTGCTATGTTTGACTATTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA
> 28B11VH 氨基酸序列(SEQ ID NO 34)QVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSNYYMTWIRQAPGKGLEWISYISSTGGNIYYADSVKGRFTISRDNAQNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDGGVIISTAMFDYffGQGTTVTVSS>28B11VL 核酸序列(SEQ ID NO 35)GCCATCCAGTTGACCCAGTCTCCCTCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGGGCATTAGCAGTGCTTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCTCCTAAGCTCCTGATCTATGATGCCTCCAGTTTGGAAAGTGGGGTCCCATCAAGGCTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGTCAACAGTTTAATAGTTACCCGCTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA> 28B11VL 氨基酸序列(SEQ ID NO 36)AIQLTQSPSSLSASV⑶RVTITCRASQGISSALAWYQQKPGKAPKLLIYDASSLESGVPSRLSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFNSYPLTFGGGTKVEIK41A4抗體包括由SEQ ID NO :37中所示的核酸序列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 38)、和由SEQ ID NO 39中所示的核酸序列編碼的輕鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 40)。>41A4VH 核酸序列(SEQ ID NO 37)GAAGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGCAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTGATGATTGTGCCATGCACTGGGTCCGGCAAGCTCCAGGGAAGGGCCTGGAATGGGTCTCAGGTATTAGTTGGAATAGTGGTAGCGTATACTATGCGGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAACGCCAAGAATTCCCTGTATCTGCAAATGAACAGTCTGAGAGCTGAGGACACGGCCTTGTATTACTGTACAAAAGAAAAATACAACTGGAACGACGAGGGGGAATACTTCTACGGAATGGACGTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA>41A4VH 氨基酸序列(SEQ ID NO 38)
EVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFDDCAMHWVRQAPGKGLEffVSGISffNSGSVYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTALYYCTKEKYNWNDEGEYFYGMDVffGQGTTVTVSS> 41A4VL 核酸序列(SEQ ID NO :39)GAAATTGTGTTGACACAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAGCAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGTGCATCCAGCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTGGAGCCTGAAGATTTTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGTATGGTAGCTCTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA> 41A4VL 氨基酸序列(SEQ ID NO :40)EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYGAS SRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYGSSFGGGTKVEIK43G6抗體包括由SEQ ID NO :41中所示的核酸序列編碼的重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO 42)、和由SEQ ID NO :43中所示的核酸序列編碼的輕鏈可變區(qū)(SEQ ID NO :44)。> 43G6VH3 核酸序列(SEQ ID NO 41)GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAGCTATAGCATGAACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTTTCATACATTAGTAGTGGTAGTAGTACCATATACTACGCAGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATGCCAAGAACTCACTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGACGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGAGAGGGCTATGTTTCGGGGACCTATTACAACTACTACTACGGTATGGACGTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA> 43G6VH3 氨基酸序列(SEQ ID NO 42)EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYSMNWVRQAPGKG
LEWVSYISSGSSTIYYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRDEDTAVYYCAREGYVSGTYYNYYYGMDVffGQGTTVTVSS> 43G6VL3 核酸序列(SEQ ID NO :43)GAAATTGTGTTGACGCAGTCTCCAGCCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGTTACTTAGCCTGGTACCAACAGAAACCT GGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATGCACCCAACAGGGCCACTGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAGCAGCGTAGCAACTGGTCGCTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA> 43G6VL3 氨基酸序列(SEQ ID NO :44)EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDAPNRATGIPA RFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWSLTFGGGTKVEIK本發(fā)明的huIL_17F抗體還包括，例如表1中所示的重鏈互補(bǔ)決定區(qū)(VH OTR)、表 2中所示的輕鏈⑶R(VL⑶I )，及其組合。表1.來自結(jié)合和中和IL-17F生物活性的抗體克隆的VH⑶R序列
權(quán)利要求
1.一種分離的全人單克隆抗IL-17F抗體或其片段，其中所述抗體包含(a)Vh CDRl 區(qū)，其包含 SEQ ID NO :45、48、51、64、67 或 70 的氨基酸序列；(b)VHCDR2 區(qū)，其包含 SEQ ID NO :46、49、52J4、62、65、68、71 或 73 的氨基酸序列;(c)VHCDR3 區(qū)，其包含 SEQ ID NO :47、50、53、55、63、66、69 或 72 的氨基酸序列;(d)VLCDRl 區(qū)，其包含 SEQ ID NO :74、77、80、85、91 或 94 的氨基酸序列；(e)VLCDR2 區(qū)，其包含 SEQ ID NO :75、78、81、83、86、92 或 96 的氨基酸序列；及(f)VlCDR3 區(qū)，其包含 SEQ ID NO :76、79、82、84、93、95、97、98 和 99 的氨基酸序列，其中所述抗體結(jié)合IL-17F。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗體，其中所述抗體不結(jié)合IL-17A同二聚體。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗體，其中所述抗體是IgG同種型。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗體，其中所述抗體是IgGl同種型。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗體，其中所述抗體包含重鏈可變序列，其包含選自SEQID N0:10、14、18、22、26、30、34、38和42的氨基酸序列；和輕鏈可變序列，其包含選自SEQ ID NO :12、16、20、24、28、32、36、40 和 44 的氨基酸序列。
6.一種分離的全人單克隆抗體，所述全人單克隆抗體包含重鏈可變序列，其包含SEQ ID NO :10、14、18、22、26、30、34、38和42的氨基酸序列；和輕鏈可變序列，其包含SEQ ID NO :12、16、20、M、28、32、36、40和44的氨基酸序列，其中所述抗體結(jié)合IL-17F。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的抗體，其中所述抗體不結(jié)合IL-17A同二聚體。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的抗體，其中所述抗體是IgG同種型。
9.一種藥物組合物，其包含權(quán)利要求1所述的抗體和載體。
10.一種藥物組合物，其包含權(quán)利要求6所述的抗體和載體。
11.一種減輕受治療者中與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、克羅氏病、銀屑病、多發(fā)性硬化、慢性阻塞性肺部疾病或哮喘相關(guān)的臨床適應(yīng)癥的癥狀的方法，所述方法包括以足以緩解與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、克羅氏病、銀屑病、多發(fā)性硬化、慢性阻塞性肺部疾病或哮喘相關(guān)的臨床適應(yīng)癥的癥狀的量給需要其的受治療者施用IL-17F的拮抗劑。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中所述受治療者是人。
13.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中所述拮抗劑是單克隆抗體或其片段。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的方法，其中所述單克隆抗體是根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗體或其片段。
15.一種減輕自身免疫性疾病或炎性病癥的癥狀的方法，所述方法包括以足以緩解受治療者中自身免疫性疾病或炎性病癥的癥狀的量給需要其的受治療者施用根據(jù)權(quán)利要求1 所述的抗體。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中所述受治療者是人。
17.一種減輕關(guān)節(jié)炎疾患的癥狀的方法，所述方法包括以足以緩解受治療者中關(guān)節(jié)炎疾患的癥狀的量給需要其的受治療者施用根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗體。
18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法，其中所述受治療者是人。
19.根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法，其中所述關(guān)節(jié)炎疾患是自身免疫性關(guān)節(jié)炎疾患。
20.根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法，其中所述關(guān)節(jié)炎疾患是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。
全文摘要
本發(fā)明提供識別IL-17F和/或異二聚體IL-17A/IL-17F復(fù)合體但不識別IL-17A的全人單克隆抗體。本發(fā)明還提供使用這種單克隆抗體作為治療劑、診斷劑和預(yù)防劑的方法。
文檔編號C07K16/24GK102458437SQ201080029508
公開日2012年5月16日 申請日期2010年5月5日 優(yōu)先權(quán)日2009年5月5日
發(fā)明者F.魯索, K.馬斯特納克 申請人:諾維莫尼公司