專(zhuān)利名稱(chēng)：從毛冬青地上部分分離提取98%槲皮素的工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及植物有效成分的分離提取工藝，具體是從毛冬青地上部分分離提取 98%槲皮素的工藝。
背景技術(shù)：
槲皮素，又名櫟精，槲皮黃素，具有典型的黃酮醇化學(xué)結(jié)構(gòu)，是一種具有多種生物 活性的黃酮類(lèi)化合物，是黃酮類(lèi)化合物的主要成分，藥用價(jià)值很高。它是一種重要的醫(yī)藥原 料和中間體，可作為藥品、保健品，具有良好的祛痰、止咳、平喘作用；并有降低血壓、增強(qiáng)毛 細(xì)血管抵抗力、減少毛細(xì)血管脆性、降血脂、擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈，增加冠脈血流量等作用。臨床用 于治療慢性支氣管炎，輔助治療冠心病及高血壓。近些年的研究表明，槲皮素能顯著抑制促癌劑的作用、抑制離體惡性細(xì)胞的生長(zhǎng)、 抑制艾氏腹水癌細(xì)胞DNA、RNA和蛋白質(zhì)合成；抑制血小板聚集和5-羥色胺(5-HT)的釋放； 對(duì)ADP、凝血酶和血小板活化因子(PAF)誘導(dǎo)的血小板聚集均有明顯抑制作用，其中對(duì)PAF 的抑制作用最強(qiáng)；明顯抑制凝血酶誘導(dǎo)的兔血小板3H-5-HT釋放。此外，槲皮素具有預(yù)防和 減少糖尿病發(fā)生、降血糖、抗氧化作用 。我國(guó)是槲皮素及其苷_蘆丁的最大出口國(guó)，槲皮素 及其系列衍生物因具有多種顯著的藥理活性而廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、保健品、化妝品領(lǐng)域。槲皮素雖廣泛存在于多種植物中，但含量都很低，一般只有0. 1%_1%，目前尚無(wú)從 植物中直接分離出高純度的槲皮素的報(bào)道，工業(yè)生產(chǎn)的槲皮素是以槐米為原料，先生產(chǎn)出 高純度的蘆丁，然后將蘆丁酸水解，再精制成槲皮素。用槐米生產(chǎn)槲皮素，以原料槐米中蘆 丁含量23%計(jì)，1噸槐米30000元，生產(chǎn)加工各項(xiàng)費(fèi)用按8000元，從槐米原料到蘆丁的轉(zhuǎn)移 率85%，從蘆丁到槲皮素的轉(zhuǎn)移率85%，1噸槐米可得1000 X 23%X 85%X0. 495 X 85%=82kg槲 皮素，而加工1噸槐米投入成本38000元，即得每kg槲皮素(以槐米為原料)的生產(chǎn)成本為 38000 + 82=463元。而實(shí)際生產(chǎn)中，很難做到每批槐米中蘆丁的含量均達(dá)到23%，生產(chǎn)成本 就會(huì)有所不同，按全年平均生產(chǎn)總和計(jì)算，生產(chǎn)成本有的甚至高達(dá)550元/kg。槲皮素的市 場(chǎng)價(jià)格為50(Γ800元/kg，具體價(jià)格受市場(chǎng)行情的制約，生產(chǎn)企業(yè)基本上無(wú)利可賺。另外，生產(chǎn)技術(shù)也有缺陷，用飽和石灰水調(diào)節(jié)水提液的PH值，降低了蘆丁的提取 率；產(chǎn)品質(zhì)量也存在問(wèn)題，從槐米中提取槲皮素含量為96%-98%，少見(jiàn)有98%以上的槲皮素。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是為克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，而提供一種從毛冬青地上部分分離提取 98%槲皮素的工藝。這種工藝不僅能開(kāi)辟了新的原料來(lái)源，而且能提高產(chǎn)量，降低成本，所得 的槲皮素的含量達(dá)到HPLC級(jí)98%以上。本發(fā)明所述槲皮素是以廣西特產(chǎn)的藥用植物一鮮毛冬青(Ilex pubescens Hook, et Arn)的地上部分為原料經(jīng)切段一弱堿水提一調(diào)中濃縮一堿化板框過(guò)濾一酸化保溫沉淀 —過(guò)濾洗滌一結(jié)晶過(guò)濾一酸解一抽濾洗滌一脫色結(jié)晶一抽濾洗滌一真空干燥制成。具體工 藝包括如下步驟(1)切段取新鮮的毛冬青地上部分切成小段；
(2)弱堿水提將切成的小段投入提取罐中，用PH為8.5^10. 0的Na2CO3水溶液提取 3次，加入提取液的量為藥材重量的5、4、4. 5倍，提取時(shí)間為`1. 0,0. 5,0. 5h，提取溫度為 500C 60°C。過(guò)濾，合并前2次濾液，第3次濾液套提；
(3)調(diào)中濃縮用29Γ4%的稀硫酸將前2次合并濾液的PH調(diào)節(jié)至6.(Γ7. 0，真空減壓濃 縮至料液比1:0. 6 1. 2，控制真空度彡0. 07Mpa，溫度`50°C 60°C ；
(4)堿化板框過(guò)濾將濃縮液投入攪拌罐中，用Na2CO3調(diào)節(jié)濃縮液PH為9.(Til. 0，攪拌 均勻，然后板框過(guò)濾，得濾液；
(5)酸化保溫沉淀將濾液投入帶攪拌的搪瓷罐中，用29Γ4%的稀硫酸調(diào)節(jié)濾液的PH為 2. (Γ3. 0，于70°C 80°C保溫，然后用水冷卻至室溫，靜置沉淀6h ；
(6)過(guò)濾洗滌沉淀完全以后，抽濾，得沉淀，并將沉淀洗滌至中性；
(7)結(jié)晶過(guò)濾將沉淀投入夾層鍋中，采用冷熱水結(jié)晶與重結(jié)晶法在不斷攪拌下加入濕 沉淀重量120倍的自來(lái)水，升溫至溶液呈沸騰狀態(tài)，保溫20min，趁熱過(guò)濾，濾液用水冷卻至 室溫，靜置沉淀6h，然后抽濾，得蘆丁結(jié)晶；
(8)酸解將蘆丁結(jié)晶投入帶攪拌的搪瓷罐，加入濕沉淀重量3(Γ40倍、濃度29Γ4%的 稀硫酸，控制溫度70°C 80°C，水解時(shí)間2. (Γ3. Oh ；
(9)抽濾洗滌將酸解液抽濾，得沉淀，再用水洗滌沉淀，至流出液中性止，然后將沉 淀投入夾層鍋中，在不斷攪拌下加入濕沉淀重量20倍的水，升溫至溶液呈沸騰狀態(tài)，保溫 lOmin，趁熱抽濾，收集沉淀；
(10)脫色結(jié)晶將沉淀投入攪拌罐中，采用冷熱乙醇結(jié)晶與重結(jié)晶法在不斷攪拌下加 入濕沉淀重量25倍濃度70%乙醇，升濕至溶液呈沸騰狀態(tài)；然后加入濕沉淀重量59Γ7%的 活性炭，保溫20min，趁熱過(guò)濾；濾液轉(zhuǎn)入沉淀罐中，通自來(lái)水冷卻至室溫，靜置沉淀6h ；
(11)抽濾洗滌沉淀完全以后，抽濾，得沉淀，然后用純化水洗滌沉淀，至流出液近無(wú)色 止；濾液送濃縮回收乙醇，析出的沉淀同法抽濾后投入下批物料純化；
(12)真空干燥將沉淀真空干燥，控制真空度彡0.07Mpa，溫度50°C飛0°C，得成品-槲 皮素。產(chǎn)品經(jīng)檢測(cè)成品為黃綠色粉末，槲皮素含量> 98%。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是
(1)找到了提取槲皮素的新原料——毛冬青地上部分；
(2)降低了槲皮素的生產(chǎn)成本，增加企業(yè)利潤(rùn)，節(jié)能減排，提升產(chǎn)品的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力；
(3)建立工業(yè)化生產(chǎn)槲皮素的標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)線(xiàn)以及配套設(shè)備，為工業(yè)化生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ)；
(4)此工藝解決了現(xiàn)有的槲皮素純度問(wèn)題，將槲皮素的含量做到HPLC級(jí)98%以上。


圖1為本發(fā)明實(shí)施例從毛冬青地上部分分離提取98%槲皮素的工藝流程圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的闡述，但不是對(duì)本發(fā)明保護(hù)內(nèi)容的限定。實(shí)施例1參照?qǐng)D1，本發(fā)明從毛冬青地上部分分離提取98%槲皮素的工藝，包括如下步驟
(1)切段取新鮮毛冬青地上部分1000kg，切段至0.5-2cm ；
(2)弱堿水提取將藥材小段投入6cm3提取罐中，用PH為8.5的Na2CO3水溶液提取3 次，加入提取液的量第1次為5000L，第2次為4000L，第3次為4500L，提取時(shí)間為1. 0、 0. 5,0. 5h，提取溫度為50°C飛0°C。過(guò)濾，合并前2次濾液，第3次濾液套提，作為下批物料 的第1次提取液。殘?jiān)鼦壢ィ?br> (3)調(diào)中濃縮用濃度為2%的稀硫酸將前2次合并濾液的PH調(diào)節(jié)至6.(Γ7. 0，真空減 壓濃縮至料液比1:0. 6 1.2，即IOOOkg原料的提取液濃縮至600廣1200L左右，控制真空度 彡 0. 07Mpa，溫度 50°C "60°C ；
(4)堿化板框過(guò)濾將濃縮液投入攪拌罐中，用Na2CO3調(diào)節(jié)濃縮液PH為9.(Til. 0，攪拌 均勻，然后板框過(guò)濾，得濾液；
(5)酸化保溫沉淀將濾液投入帶攪拌的搪瓷罐中，用濃度為2%的稀硫酸調(diào)節(jié)濾液的 PH為2. 0 3. 0，于70°C 80°C保溫3(T40min，然后通自來(lái)水冷卻至室溫，靜置沉淀6h ；
(6)過(guò)濾洗滌沉淀完全以后，抽濾，得沉淀，然后用自來(lái)水洗滌沉淀，至流出液中性
止；
(7)結(jié)晶過(guò)濾將沉淀投入夾層鍋中，采用冷熱水結(jié)晶與重結(jié)晶法在不斷攪拌下加入濕 沉淀重量120倍的自來(lái)水，升溫至溶液呈沸騰狀態(tài)，保溫20min，趁熱過(guò)濾，濾液通自來(lái)水冷 卻至室溫，靜置沉淀6h，然后抽濾，得蘆丁結(jié)晶；
(8)酸解將蘆丁結(jié)晶投入帶攪拌的搪瓷罐，加入濕沉淀重量3(Γ40倍、濃度29Γ4%的 稀硫酸，控制溫度70V 80°C，水解時(shí)間2. (Γ3. Oh ；
(9)抽濾洗滌將酸解液抽濾，得沉淀，再用自來(lái)水洗滌沉淀，至流出液中性止。然后 將沉淀投入夾層鍋中，在不斷攪拌下加入濕沉淀重量20倍的自來(lái)水，升溫至溶液呈沸騰狀 態(tài)，保溫lOmin，趁熱抽濾，收集沉淀；
(10)脫色結(jié)晶將沉淀投入攪拌罐中，采用冷熱乙醇結(jié)晶與重結(jié)晶法在不斷攪拌下加 入濕沉淀重量25倍濃度70%乙醇，升濕至溶液呈沸騰狀態(tài)；然后加入濕沉淀重量59Γ7%的 活性炭，保溫20min，趁熱過(guò)濾；濾液轉(zhuǎn)入沉淀罐中，通自來(lái)水冷卻至室溫，靜置沉淀6h ；
(11)抽濾洗滌沉淀完全以后，抽濾，得沉淀，然后用純化水洗滌沉淀，至流出液近無(wú)色 止；濾液送濃縮回收乙醇，析出的沉淀同法抽濾后投入下批物料純化；
(12)真空干燥將沉淀真空干燥，控制真空度彡0.07Mpa，溫度50°C飛0°C，得成品-槲 皮素 9. 0 12· Okgo成品經(jīng)檢測(cè)為黃綠色粉末，收率為9. 0-12. 0%，槲皮素含量彡98%。槲皮素為3，3’，4’ 5，7-五羥基黃酮，分子式C15HltlO7,分子量302. 23，其結(jié)構(gòu)式如
下.
權(quán)利要求
從毛冬青地上部分分離提取98%槲皮素的工藝，其特征是包括如下步驟(1)切段取新鮮的毛冬青地上部分切成小段；(2)弱堿水提將切成的小段投入提取罐中，用PH為8.5~10.0的Na2CO3水溶液提取3次，加入提取液的量為藥材重量的5、4、4.5倍，提取時(shí)間為1.0、0.5、0.5h，提取溫度為50℃~60℃，過(guò)濾，合并前2次濾液，第3次濾液套提；(3)調(diào)中濃縮用2%~4%的稀硫酸將前2次合并濾液的PH調(diào)節(jié)至6.0~7.0，真空減壓濃縮至料液比1:0.6~1.2，控制真空度≥0.07Mpa，溫度50℃~60℃；(4)堿化板框過(guò)濾將濃縮液投入攪拌罐中，用Na2CO3調(diào)節(jié)濃縮液PH為9.0~11.0，攪拌均勻，然后板框過(guò)濾，得濾液；(5)酸化保溫沉淀將濾液投入帶攪拌的搪瓷罐中，用2%~4%的稀硫酸調(diào)節(jié)濾液的PH為2.0~3.0，于70℃~80℃保溫，然后用水冷卻至室溫，靜置沉淀6h；(6)過(guò)濾洗滌沉淀完全以后，抽濾，得沉淀，并將沉淀洗滌至中性；(7)結(jié)晶過(guò)濾將沉淀投入夾層鍋中，采用冷熱水結(jié)晶與重結(jié)晶法在不斷攪拌下加入濕沉淀重量120倍的自來(lái)水，升溫至溶液呈沸騰狀態(tài)，保溫20min，趁熱過(guò)濾，濾液用水冷卻至室溫，靜置沉淀6h，然后抽濾，得蘆丁結(jié)晶；(8)酸解將蘆丁結(jié)晶投入帶攪拌的搪瓷罐，加入濕沉淀重量30~40倍、濃度2%~4%的稀硫酸，控制溫度70℃~80℃，水解時(shí)間2.0~3.0h；(9)抽濾洗滌將酸解液抽濾，得沉淀，再用水洗滌沉淀，至流出液中性止，然后將沉淀投入夾層鍋中，在不斷攪拌下加入濕沉淀重量20倍的水，升溫至溶液呈沸騰狀態(tài)，保溫10min，趁熱抽濾，收集沉淀；(10)脫色結(jié)晶將沉淀投入攪拌罐中，采用冷熱乙醇結(jié)晶與重結(jié)晶法在不斷攪拌下加入濕沉淀重量25倍濃度70%乙醇，升濕至溶液呈沸騰狀態(tài)；然后加入濕沉淀重量5%~7%的活性炭，保溫20min，趁熱過(guò)濾；濾液轉(zhuǎn)入沉淀罐中，通自來(lái)水冷卻至室溫，靜置沉淀6h；(11)抽濾洗滌沉淀完全以后，抽濾，得沉淀，然后用純化水洗滌沉淀，至流出液近無(wú)色止；濾液送濃縮回收乙醇，析出的沉淀同法抽濾后投入下批物料純化；(12)真空干燥將沉淀真空干燥，控制真空度≥0.07Mpa，溫度50℃~60℃，得成品 槲皮素。
2.用權(quán)利要求1所述的工藝制成的含量>98%的槲皮素。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種從毛冬青地上部分分離提取98%槲皮素的工藝，其特征是以毛冬青地上部分為原料經(jīng)切段→弱堿水提→調(diào)中濃縮→堿化板框過(guò)濾→酸化保溫沉淀→過(guò)濾洗滌→結(jié)晶過(guò)濾→酸解→抽濾洗滌→脫色結(jié)晶→抽濾洗滌→真空干燥制成。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是(1)找到了提取槲皮素的新原料——毛冬青地上部分；(2)降低了槲皮素的生產(chǎn)成本，增加企業(yè)利潤(rùn)，節(jié)能減排，提升產(chǎn)品的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力；(3)建立工業(yè)化生產(chǎn)槲皮素的標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)線(xiàn)以及配套設(shè)備，為工業(yè)化生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ)；(4)此工藝解決了現(xiàn)有的槲皮素純度問(wèn)題，將槲皮素的含量做到HPLC級(jí)98%以上。
文檔編號(hào)C07D311/30GK101985439SQ201010550720
公開(kāi)日2011年3月16日 申請(qǐng)日期2010年11月18日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月18日
發(fā)明者劉庚貴, 周迪平, 蔣新芳 申請(qǐng)人:桂林市三棱生物制品有限公司