專利名稱：：微紅新月蕨化合物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于化學(xué)
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及從植物微紅新月蕨中制備得到的化合物及其制備方法及化合物的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：植物和昆蟲由于相同的生境，自遠(yuǎn)古時(shí)代起就一直生活在一起，兩者相互依存、相互制約、共同演化發(fā)展。在漫長(zhǎng)的進(jìn)化過程中，植物為了防御昆蟲的危害，在代謝過程中產(chǎn)生次生物質(zhì)，這些次生代謝產(chǎn)物對(duì)昆蟲具有拒食、忌避、毒殺和抑制昆蟲的生長(zhǎng)發(fā)育等作用。目前植物性農(nóng)藥是生物農(nóng)藥研發(fā)的一個(gè)熱點(diǎn)，植物性農(nóng)藥研究的理論基礎(chǔ)是植物與昆蟲的協(xié)同進(jìn)化關(guān)系，由于被子植物和現(xiàn)代農(nóng)業(yè)昆蟲的密切關(guān)系，人們的研究焦點(diǎn)主要集中在被子植物。如印楝素、魚藤酮等已經(jīng)商品化的植物性殺蟲劑均是被子植物源殺蟲活性成分，而氨基甲酸酯類、擬除蟲菊酯類、新煙堿類殺蟲劑的活性母體或者說是先導(dǎo)化合物也均來源于被子植物。目前應(yīng)用的商品化植物性殺蟲劑，沒有來源于蕨類和裸子植物的活性成分。然而，根據(jù)協(xié)同進(jìn)化關(guān)系來看，蕨類植物與昆蟲的協(xié)同進(jìn)化歷史遠(yuǎn)遠(yuǎn)長(zhǎng)于被子植物，自原始昆蟲開始一直到現(xiàn)代昆蟲形成，蕨類植物就開始與昆蟲協(xié)同進(jìn)化，整個(gè)過程持續(xù)將近3億年。被子植物起源于白堊紀(jì)，與昆蟲的協(xié)同進(jìn)化史只有6500萬年，在這6500萬年里，被子植物就對(duì)昆蟲形成了完善的防御體系，其中次生代謝物質(zhì)是植物防御害蟲的重要手段之一。某種程度上來說，蕨類或裸子植物對(duì)昆蟲的防御體系可能比被子植物更為完善。進(jìn)入新生代后，就是在顯花植物出現(xiàn)后，現(xiàn)代農(nóng)業(yè)昆蟲才放棄了裸子和蕨類植物，這些植物的一些防御手段可能湮滅在歷史的長(zhǎng)河中，但也可能保留下來了。蕨類或裸子植物挺過了第三紀(jì)和第四紀(jì)的兩次冰川時(shí)期，并在與占優(yōu)勢(shì)地位的被子植物的競(jìng)爭(zhēng)中繁衍下來，說明它們的抗逆性更強(qiáng)，而防蟲抗病是這些能力的重要體現(xiàn)。因此，我們從蕨類和裸子植物中可能找到古老的對(duì)現(xiàn)代昆蟲具有毒殺活性的化合物，這些化合物在防治當(dāng)今害蟲中可能起到意想不到的效果?；谶@一點(diǎn)，目前尚無相關(guān)技術(shù)報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一類從植物微紅新月蕨CPraw印/zn'wwAwegac^;e)制備得到的化合物。本發(fā)明的另一目的是提供所述化合物的制備方法。具體是提供一種從微紅新月蕨(尸ra^/7/^騰megact^7e)中制備化合物新月蕨素A(I)、新月蕨素b(m)、新月蕨素C(IV)、新月蕨素d(V)、新月蕨素E(VI)和新月蕨素F(II)的方法。本發(fā)明還有一個(gè)目的就是提供所述化合物的應(yīng)用。本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)提供一種微紅新月蕨化合物，化學(xué)結(jié)構(gòu)式如式(I)(VI)所示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>上述化合物分別命名為新月蕨素A(i)、新月蕨素b(m)、新月蕨素C(W)、新月蕨素D(V)、新月蕨素E(VI)和新月蕨素F(11)。本發(fā)明同時(shí)提供了上述化合物的制備方法，包括以下步驟(1)采集微紅新月蕨全草，陰干后粉碎；(2)用有機(jī)溶劑提取粉碎后的微紅新月蕨全草，提取液減壓濃縮制得膏狀提取物；(3)將膏狀提取物溶解后用有機(jī)溶劑萃取，得到有機(jī)溶劑部分浸膏產(chǎn)物；(4)有機(jī)溶劑部分浸膏產(chǎn)物經(jīng)硅膠常壓柱層析后收集餾分分別上HP-20大孔吸附樹脂、硅膠常壓柱層析、Sephdex-20即可得到純化合物。步驟(2)所述有機(jī)溶劑為95%甲醇;所述提取是冷浸提取，優(yōu)選提取3次，每次提取的時(shí)間是3天。步驟(3)所述有機(jī)溶劑為乙酸乙酯；步驟(4)所述硅膠為200300目，所述常壓柱層析采用三氯甲烷甲醇=1:01:1。步驟(4)所述餾分分別為三氯甲烷甲醇=1:0、三氯甲烷甲醇=20:1、三氯甲烷甲醇=10:1、三氯甲烷甲醇=1:1。本發(fā)明同時(shí)提供了上述化合物在制備殺蟲劑、殺菌劑或治療癌癥的藥物方面的應(yīng)用。尤其是所述新月蕨素E和香豆素的配合使用應(yīng)用于制備治療肝癌藥物；特別是二者以1:1的比例配合使用對(duì)人體外肝癌細(xì)胞的毒性更強(qiáng)。所述新月蕨素B和新月蕨素F配合使用在制備抑菌制劑方面的應(yīng)用；特別地，二者的配合對(duì)荔枝霜疫霉菌的抑菌活性很強(qiáng)，其中新月蕨素B:新月蕨素F=l:l混合使用對(duì)荔枝霜疫霉菌的抑菌活性更強(qiáng)。本發(fā)明的有益效果是.-本發(fā)明提供了一類具有殺蟲、殺菌、抑制癌細(xì)胞活性的化合物，所述化合物是從蕨類植物中找到的，為進(jìn)一步研究蕨類植物的防蟲抗病提供重要的啟示；本發(fā)明經(jīng)過大量的實(shí)驗(yàn)也已經(jīng)證明所述化合物的生物活性，可廣泛應(yīng)用于制備殺蟲劑、殺菌劑和治療癌癥的藥物；本發(fā)明制備方法簡(jiǎn)單，制備成本很低，適合工業(yè)化推廣。具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例來進(jìn)一步詳細(xì)說明本發(fā)明。實(shí)施例l化合物新月蕨素A、新月蕨素B、新月蕨素C、新月蕨素D、新月蕨素E和新月蕨素F的制備(1)取微紅新月蕨全草7.5Kg，陰干，粉碎，用95。/。甲醇共80ml冷浸提取3次，每次3天，將3次冷浸提取的濾液合并后減壓濃縮后得浸膏約800g;(2)將浸膏懸浮于l升水中，分別用1.5升、l升、l升乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液減壓回收，得乙酸乙酯部分浸膏230g;(3)乙酸乙酯萃取部分經(jīng)300目硅膠常壓柱層析后得到4個(gè)餾分，柱層析條件三氯甲烷甲醇=1:0至l:l;4個(gè)餾分分別為三氯甲垸甲醇=1:0、三氯甲烷甲醇=20:1、三氯甲垸甲醇=10:1、三氯甲垸甲酉享=5:1、三氯甲'烷甲醇=1:1。餾分2至5(Fr.25)分別上HP-20大孔吸附樹脂，HP-20大孔吸附樹脂條件水甲醇=1:0、水甲醇=90:10、水甲醇=0:1，水甲醇=1:0沖洗下來的部分棄去，分別收集水甲醇=90:10、水甲醇=0:1咅卩么、，《導(dǎo)至U1:留6、Fr.2.1、Fr.2.2、Fr.3.1、Fr.3.2、Fr.4.1、Fr.4.2、Fr.5.1、Fr.5.2;餾分Fr.2.1經(jīng)2次硅膠常壓柱層析，所述硅膠常壓柱層析條件石油醚丙酮=1:0~0:1、石油醚乙酸乙酯=1:0~0:1，收集石油醚丙酮體積比95:5到90:10的餾分經(jīng)羥丙基葡聚糖凝膠(SephadexLH-20)純化，以甲醇洗脫，得到新月蕨素B3.5mg;收集石油醚丙酮體積比85:15到60:40的餾分經(jīng)第2次硅膠常壓柱層析，收集石油醚乙酸乙酯體積比4:1到3:1的餾分經(jīng)羥丙基葡聚糖凝膠(S印hadexLH-20)純化，以甲醇洗脫，得到新月蕨素A2.6mg;餾分Fr.2.2經(jīng)過一次硅膠常壓柱層析，所述硅膠常壓柱層析條件石油醚乙酸乙酯=1:00:1，收集石油醚乙酸乙酯體積比90:5到80:10的餾分經(jīng)羥丙基葡聚糖凝膠(SephadexLH-20)純化，以甲醇洗脫，得到新月蕨素C2.0mg;餾分Fr.3.1經(jīng)過硅膠常壓柱層析，所述硅膠常壓柱層析條件石油醚三氯甲烷=1:00:1，收集石油醚乙酸乙酯體積比90:5到IO'.I和8:1到3:1的餾分分別經(jīng)羥丙基葡聚糖凝膠(SephadexLH-20)純化，以甲醇洗脫，得到新月蕨素D2.8mg和新月蕨素E3.2mg;餾分Fr.5.2經(jīng)過硅膠常壓柱層析，所述硅膠常壓柱層析條件三氯甲垸丙酮=1:0~0:1，收集三氯甲烷丙酮體積比95:5到85:15的餾分經(jīng)羥丙基葡聚糖凝膠(SephadexLH-20)純化，以甲醇洗脫，得到新月蕨素F4.2mg.通過NMR譜、質(zhì)譜等相關(guān)圖譜確認(rèn)純化合物的結(jié)構(gòu)式，即得化合物新月蕨素A、新月蕨素B、新月蕨素C、新月蕨素D、新月蕨素E和新月蕨素F。實(shí)施例1制備的相關(guān)化合物的波譜數(shù)據(jù)見表16。表1新月蕨素A的波譜數(shù)據(jù)(5inppm，/inHz,C5D5N)Position!H13CPosition13c25.4312.6,2.4)78.82",6〃7.36(d，J=7.2)128.633.0918.4,13.2)43.53〃，5〃7.26(t,J=7.8)129.02.9118.4,3)4196.64"7.15m126.4160.03.14(t,7.8)30.362.34s105.03.71(t,聲7.8)45.27165.0r〃105.98107.32'〃163.29158.93〃，6.18s91.110102.94'〃164.5140.5S'〃107.12'，6'7.67(d，>/=7.2)126.36'〃158.73',5'7.46(t,_/=7.8)128.9了'〃4.31(d,聲15.6),16.74.21(d,15.6)4,7.34m128.63-CH32.34s7.91"142.34〃-OCH32.37s55.2表2新月蕨素B的波譜數(shù)據(jù)(Sinppm,/inHz，C5D5N)Position13CPosition13C2，2"5.22(dd,/=2.0,3.6)80.410,10〃104.73,3"2.93(dd，《/=6.8，16)44.9r,r〃141.72.7916.8，3.0)4，4〃198.02'，6',2'〃，6〃'7.42(d,/=7.2)128.65，5〃162.13',5',3〃'，5〃'7.34(t，/=7.2)130.66，6〃106.94',4〃'7.28(t,7=7.2)130.27，7〃166.05-OH,5〃-OH13.07brs8，8〃109.56-CH3,2.36s10.06〃-CH39,9〃159.98-CH2-4.45s19.8表3新月蕨素C的波譜數(shù)據(jù)(Sinppm，/inHz,DMSO-d6)PositionPosition25,8012,3.6)78.53',5'7.48(t，《/=7.8)127.333.4417.4,12),41.64,7.43m128.73.03(dd,J=n.4，12)4197.21"138.42〃，6〃7.38m126.46101.73"，5〃7.43m127.67158.64"7.43m128.48104.37〃9161.28"6.04s113.410104.09"159.5r138.18-CH32.16s7.862'，6'7.57(d,聲7.2)126.45-OH13.2s表4新月蕨素D的波譜數(shù)據(jù)(Sinppm,JinHz，C5D5N)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>面積。對(duì)小菜蛾3齡幼蟲觸殺活性的測(cè)定方法:觸殺活性的測(cè)定使用點(diǎn)滴法。每處理3次重復(fù)，每重復(fù)10頭幼蟲。本發(fā)明方法制備的化合物用丙酮溶解，配制成濃度為2000pg/mL的母液，用丙酮稀釋母液，分別配制成濃度為1500|ig/mL、75(Vg/mL、375jxg/mL、187.5|ig/mL、93.75嗎/mL的藥液。用微量點(diǎn)滴儀將1^L本發(fā)明制備的化合物各濃度藥液點(diǎn)滴到小菜蛾3齡幼蟲的前胸背板，以丙酮為對(duì)照。處理完畢后把小菜蛾3齡幼蟲轉(zhuǎn)移至干凈培養(yǎng)皿中，飼喂新鮮無藥劑的甘藍(lán)葉子，72h后檢查試蟲的死亡率。對(duì)小菜蛾3齡幼蟲和亞洲玉米螟3齡幼蟲的生物活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表7和表8:表7lpg/頭供試化合物對(duì)小菜蛾3齡幼蟲的觸殺活性(72h)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>表850pg/mL供試化合物對(duì)玉米螟的拒食活性測(cè)定供試化合物平均取食葉面積士SE平均拒食率士SECK31.23±2.51新月蕨素A6.60士2.3378.86±7.46新月蕨素B10.63±1.0465.97±3.34新月蕨素c10.32±2.5866.97±8.27新月蕨素D3.18士0.6389.82±2.03新月蕨素E5.50士0.5482.39±1.72新月蕨素F14.43±1.9353.79士6.17實(shí)驗(yàn)證明，本發(fā)明提供的化合物對(duì)昆蟲具有良好的生物活性。實(shí)施例3本發(fā)明化合物具有細(xì)胞毒性的實(shí)驗(yàn)藥液配制用少量丙酮或二甲基亞砜(DMSO)將本發(fā)明制備得到的供試化合物溶解后配成母液，在超凈工作臺(tái)上以0.22pm的微孔濾膜過濾除菌，并用含1%DMS0的培養(yǎng)基分別將藥劑配成試驗(yàn)所需濃度，丙酮的最終濃度為2.5%，DMSO的最終濃度為1%。以含l%DMSO或2.5%丙酮的培養(yǎng)基為對(duì)照。離體細(xì)胞毒性試驗(yàn)方法采用MTT法。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的SL細(xì)胞、人體肝癌細(xì)胞(SMMC-7721)、人乳腺癌細(xì)胞(MCF—7)接種于96孔培養(yǎng)板內(nèi)，每孔加入10(HiL，培養(yǎng)24h，將培養(yǎng)板翻轉(zhuǎn)倒出培養(yǎng)液，每孔加入100pL相應(yīng)濃度的藥液，繼續(xù)培養(yǎng)20h、44h，即測(cè)定前4小時(shí)加入MTT母液10pL并輕微震蕩，放入27。C繼續(xù)培養(yǎng)4h后倒出培養(yǎng)液，每孔加入IOOiliLDMSO用酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè)490nm的吸光值，整個(gè)過程需避光。以對(duì)照的細(xì)胞相對(duì)活力為100%，將各組吸光值按以下公式換算為細(xì)胞相對(duì)活力。細(xì)胞抑制率％調(diào)零后受試組OD490調(diào)零后對(duì)照組ODx100490乂供試化合物對(duì)人體外肝癌細(xì)胞的毒性結(jié)果見表l(h表950|ig/mL供試化合物對(duì)斜紋夜蛾卵巢細(xì)胞的細(xì)胞毒性供試化合物24h平均細(xì)胞抑制率(％)48h平均細(xì)胞抑制率(％)新月蕨素A16.64±3.7360.98±4.29新月蕨素B47.29±3.3265.23±1.65新月蕨素C58.86±3.4271.64±5.40新月蕨素D50.15±0.9958.67±6.23新月蕨素E66.75±2.7781.39±2.54新月蕨素F57.47±1.677U1士3.27表10供試化合物對(duì)人肝癌細(xì)胞(SMMC-7721)的細(xì)胞毒性(48h)<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>表11供試化合物對(duì)人乳腺癌細(xì)胞(MCF—7)的細(xì)胞毒性(48h)供試化合物回歸方程IC50(mg/L)相關(guān)系數(shù)新月蕨素AY==9.2421+2.6262x-22.42x100.9968新月蕨素BY==9.4283+2.3490x-21.30x100.9977新月蕨素cY==7.7269+1.6199x-22.07x100.9859新月蕨素DY==7.2528+1.2656x-31.66x100.9885新月蕨素EY==9.0216+1.4994x-20.21x100.9960新月蕨素FY==7.1302+1.4073x-23.06x100.9923紫杉醇(Taxol)新月蕨素E+香豆素Y==8.4095+1.2935x-30.23x100.9839(1:1)新月蕨素A+紫杉醇Y==8.3612+1.9775x-32.00x100.9943(Taxol)(1:1)Y=:7.4675+1.4957x-22.24x100.9911實(shí)驗(yàn)證明本發(fā)明提供的化合物具有細(xì)胞毒性。供試化合物對(duì)斜紋夜蛾卵巢細(xì)胞的細(xì)胞毒性結(jié)果見表9，供試化合物對(duì)人體肝癌細(xì)胞和乳腺癌細(xì)胞的離體細(xì)胞毒性結(jié)果見表10和表11，同時(shí)，新月蕨素E+香豆素(1:1)對(duì)人體外肝癌細(xì)胞的毒性更強(qiáng)。實(shí)施例4本發(fā)明化合物的抑菌活性實(shí)驗(yàn)對(duì)荔枝霜疫霉的活性測(cè)定方法(菌絲生長(zhǎng)抑制法)將本發(fā)明方法制備的化合物用丙酮溶解，配制成濃度為200(Vg/mL的母液。取濃度為2000pg/mL的化合物母液為最高濃度，再對(duì)半稀釋，分別配制成藥液濃度為1000、500、250、125嗎/mL。制備PDA培養(yǎng)基，待PDA培養(yǎng)基冷卻到45X:左右，分別吸取lmL各濃度的化合物藥液加入9mL融化的培養(yǎng)基中，立即混勻后倒平板，每濃度設(shè)置3個(gè)重復(fù)。培養(yǎng)基中最終藥劑濃度分別為200、100、50、25和12.5pg/mL。培養(yǎng)基凝固后接入荔枝霜疫霉菌種(5mm)置于培養(yǎng)皿中央，帶菌絲一面朝下，置于恒溫培養(yǎng)箱(25°C)中培養(yǎng)7d后，采用十字交叉測(cè)量法測(cè)量菌落直徑，計(jì)算生長(zhǎng)抑制率并計(jì)算抑制中濃度(IC50)。p々十長(zhǎng)袖沐u至—(空白對(duì)照菌落增長(zhǎng)直徑-菌種直徑)-(藥劑處理菌落增長(zhǎng)直徑-菌種直徑)腦空白對(duì)照菌落增長(zhǎng)直徑-菌種直徑x實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表12。表12活性化合物對(duì)荔枝霜疫霉病菌的IC5o值(7d)供試化合物回歸方程IC50(mg/L)相關(guān)系數(shù)新月蕨素AY==1.8788+1.5929x91.090.9829新月蕨素BY==0.6955+2.0505x125.690.9802新月蕨素CY=:1.4944+1.7519x100.240.9902新月蕨素DY==0.6445+2.0517x132.710.9928新月蕨素EY==0.9177+2.0740x92.960.9822新月蕨素FY==1.2485+1.9610x81.850.9919新月蕨素B+新月蕨Y==1.9529+1細(xì)7x48.800.9919素F(1:1)20對(duì)香蕉炭疽病菌的活性測(cè)定方法(孢子萌發(fā)抑制率法)將本發(fā)明方法制備的化合物用少量丙酮溶解，配制成濃度為200pg/mL的母液。取濃度為200pg/mL的化合物母液為最高濃度，再對(duì)半稀釋，分別配制成藥液濃度為100、50、25、12.5pg/mL。孢子懸浮液的制備香蕉炭疽病菌在PDA培養(yǎng)基平板上，于25土1。C，RH95。/。條件下培養(yǎng)57d后，用無菌水洗下孢子，配制成孢子懸浮液，濃度為10X40倍顯微鏡下觀察每個(gè)視野3040個(gè)孢子。孢子囊懸浮液和不同濃度的化合物溶液按照體積比1:1混合，得到不同濃度的含藥孢子懸浮液，同時(shí)以溶解提取物或化合物相同體積的對(duì)應(yīng)溶劑加入孢子懸浮液中為空白對(duì)照，在25士1。C，RH98。/。條件下培養(yǎng)57h。取培養(yǎng)后的含藥菌液與空白對(duì)照，在10X40倍顯微鏡下觀察并統(tǒng)計(jì)孢子萌發(fā)結(jié)果。在自然狀態(tài)下植物病原菌的孢子存在一部分就是不萌發(fā)的，所以孢子萌發(fā)抑制率在計(jì)算時(shí)需要加以校正，一般采用Abbott氏公式進(jìn)行校正。孢子萌發(fā)率(％)二』n萌n簡(jiǎn)統(tǒng)計(jì)孢子總數(shù)校正萌發(fā)抑制率W=對(duì)照萌發(fā)率—，萌發(fā)率(％)xlQ。對(duì)照明發(fā)率(％)實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1321表13活性化合物對(duì)香蕉炭疽病菌的IC50值(57h)供試化合物回歸方程IC50(mg/L)相關(guān)系數(shù)新月蕨素AY==1.3219+2.5541x27.54680.9915新月蕨素BY==1.6746+2.4469x22.85880.9964新月蕨素cY==1.9059+1.8965x42.80340.9816新月蕨素DY==2.4356+1.6438x36.31060.9934新月蕨素EY=:2.8768+1.5316x24.33520.9985新月蕨素FY=:2.5390+1.6664x29.98420.9801新月蕨素B+新月蕨素F(1:1)Y=:2.3514+1.7296x33.99000.9949實(shí)驗(yàn)證明本發(fā)明化合物對(duì)荔枝霜疫霉菌(Perawo;/if/1和香蕉炭疽病菌(。/^0的'^騰附1^6)具有良好的抑菌活性，同時(shí)，新月蕨素B+新月蕨素F(1:1)混合使用對(duì)荔枝霜疫霉菌的抑菌活性更強(qiáng)。2權(quán)利要求1、一種微紅新月蕨化合物，其特征在于具有如式(I)～(VI)所示化學(xué)結(jié)構(gòu)式1.2、一種權(quán)利要求1所述微紅新月蕨化合物的制備方法，其特征在于包括以下步驟(1)采集微紅新月蕨全草，陰干后粉碎；(2)用有機(jī)溶劑提取粉碎后的微紅新月蕨全草，提取液減壓濃縮制得膏狀提取物；(3)將膏狀提取物溶解后用有機(jī)溶劑萃取，得到有機(jī)溶劑部分浸膏產(chǎn)物；(4)有機(jī)溶劑部分浸膏產(chǎn)物經(jīng)硅膠常壓柱層析后收集餾分分別上HP-20大孔吸附樹脂、硅膠常壓柱層析、S印hdex-20即可得到純化合物。3、根據(jù)權(quán)利要求2所述微紅新月蕨化合物的制備方法，其特征在于步驟(2)所述有機(jī)溶劑為95%甲醇；所述提取是冷浸提取3次，每次3天。4、根據(jù)權(quán)利要求2所述微紅新月蕨化合物的制備方法，其特征在于步驟(3)所述有機(jī)溶劑為乙酸乙酯。5、根據(jù)權(quán)利要求2所述微紅新月蕨化合物的制備方法，其特征在于步驟(4)所述硅膠為200300目，所述常壓柱層析采用三氯甲烷甲醇二1:01:1;所述S印hdex-20采用的洗脫劑為丙酮或甲醇。6、一種權(quán)利要求1所述微紅新月蕨化合物的應(yīng)用，其特征在于具有式(i)(vi)所示結(jié)構(gòu)的化合物在制備殺蟲劑、殺菌劑或治療癌癥的藥物方面的應(yīng)用。7、根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于具有式(vi)所述結(jié)構(gòu)的化合物新月蕨素e和香豆素的配合使用應(yīng)用于制備治療肝癌藥物方面。8、根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于所述新月蕨素e和香豆素以1:1的比例配合使用應(yīng)用于制備治療肝癌藥物方面。9、根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于具有式(iii)所示結(jié)構(gòu)的化合物新月蕨素b和式(n)所示結(jié)構(gòu)的化合物新月蕨素f混合使用在制備抑菌制劑方面的應(yīng)用。10、根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于所述新月蕨素b和新月蕨素f以1:1的比例配合使用對(duì)蒸枝霜疫霉菌的抑菌方面。全文摘要本發(fā)明公開了一種微紅新月蕨化合物及其制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明提供了新的微紅新月蕨化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)式，所述化合物從植物微紅新月蕨制備得到，具有殺蟲、殺菌、抑制癌細(xì)胞活性，可廣泛應(yīng)用于制備殺蟲劑、殺菌劑和治療癌癥的藥物。本發(fā)明首次從蕨類植物中找到活性化合物，為進(jìn)一步研究蕨類植物的防蟲抗病提供重要的技術(shù)基礎(chǔ)；本發(fā)明制備方法簡(jiǎn)單，制備成本低，適合工業(yè)化推廣。文檔編號(hào)C07D493/04GK101671325SQ20091019303公開日2010年3月17日申請(qǐng)日期2009年10月12日優(yōu)先權(quán)日2009年10月12日發(fā)明者徐漢虹,田永清,魏孝義,黃素青申請(qǐng)人:華南農(nóng)業(yè)大學(xué)