專利名稱：小檗堿13位衍生物和小檗紅堿13位衍生物的合成方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種小檗堿13位衍生物和小檗紅堿13位衍生物的合 成方法。
背景技術(shù)：
革蘭氏陽(yáng)性菌引起的下列各種感染性疾病泌尿系統(tǒng)感染急性 尿道炎、急性腎盂炎、前列腺炎等；扁桃體炎、化膿性中耳炎、鼻竇 炎等；急性支氣管炎、慢性支氣管炎發(fā)作、肺炎、肺膿腫和支氣管擴(kuò) 張合并感染等。大多數(shù)化膿性球菌都屬于革蘭氏氏陽(yáng)性菌，它們 能產(chǎn)生外毒素使人致病。常見(jiàn)的革蘭氏陽(yáng)性菌有葡萄球菌、鏈 球菌、肺炎雙球菌、炭疽桿菌、白喉?xiàng)U菌、破傷風(fēng)桿菌等。
小檗堿亦稱黃連素，它是從中藥黃連、黃檗等原料中提出的 一種抗菌性生物堿，其鹽酸鹽為黃色粉末，味苦，微溶于水。其 在試管中能殺死痢疾桿菌、結(jié)核桿菌和葡萄球菌等，藥效較一般 抗菌素低，其口服后吸收較差，對(duì)細(xì)菌性痢疾和某些腸道感染有 效。其注射后對(duì)循環(huán)和呼吸有一定的抑制作用。其外用可治療化 膿性感染和眼結(jié)膜炎等。
小檗堿的抗菌作用應(yīng)用廣泛，研究發(fā)現(xiàn)其能夠穿透磷脂雙分子膜 和金葡菌細(xì)胞膜，是一種穿透性陽(yáng)離子和多藥耐藥泵作用物。小檗堿 還可通過(guò)抑制惡性瘧原蟲(chóng)端粒酶活性治療瘧疾。楊柳萌等研究了小檗堿、己基小檗堿(13—hexylberberine)、巴馬汀(palmatine)和己 基巴馬汀(13—hexylpalmatine)4種結(jié)構(gòu)非常相似的季胺型異喹啉類 生物堿對(duì)HIV—1的作用，發(fā)現(xiàn)小檗堿和巴馬汀有較強(qiáng)的體外抑制HIV 一l重組逆轉(zhuǎn)錄酶活性，己基巴馬汀有一定的抗HIV—1活性，巴馬汀 對(duì)各種細(xì)胞系的細(xì)胞毒性較其他3種化合物小。另有研究表明，小檗 堿衍生物HB—13有抗單純皰疹病毒的作用。Hayashi等還發(fā)現(xiàn)，小檗 堿能在病毒侵入宿主細(xì)胞后和病毒DNA復(fù)制前起作用，抑制人巨細(xì)胞 病毒的復(fù)制。
科研人員對(duì)小檗堿抗菌抗病毒的課題已進(jìn)行了近十年的研究，大 量的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明小檗堿對(duì)白色念珠菌、熱帶假絲酵母、魯希特念 珠菌、克柔念珠菌、煙曲霉、土曲霉及隱球菌均具有較好的抑制作用。 Hong等[1]研究了 9位酰氧取代的小檗堿的抗菌活性隨著9位酰氧鏈的 增長(zhǎng)，其抗革蘭陽(yáng)性菌的活性增強(qiáng)，說(shuō)明9位取代基親脂性的增強(qiáng)有 助于抗菌活性的增強(qiáng)；其中9-月桂酰小檗堿的抗菌活性較強(qiáng)，它抑制 革蘭陽(yáng)性菌的活性比小檗堿強(qiáng)32倍，但卻僅是卡那霉素硫酸鹽的 1/2 1/8。 Kim等w比較了小檗堿9位酰氧基和9位垸氧基取代對(duì)抗菌 活性的影響，發(fā)現(xiàn)烷氧基類似物比酰氧基類似物有更強(qiáng)的抗菌活性， 太長(zhǎng)或太短的取代基都會(huì)降低活性。還研究了9位酰氧基和9位苯甲酰 氧基取代9一去甲基小檗堿對(duì)其抗菌活性的影響，發(fā)現(xiàn)取代基的親脂 性和大小對(duì)活性影響較大。
小檗堿的抗菌的作用機(jī)制是因?yàn)槠淠軌虼┩噶字p分子膜和金 葡菌屬細(xì)胞膜，而且取代基的親脂性和大小對(duì)其抗菌活性有活性較大影響。(參考文獻(xiàn) [1] Hong SW， Kim SH， Jeun JA， et al. Antimicrobial activity of 9-0誦acyl誦and 9-0誦benzyl-substituted berberrubines[J].Planta Med,2000,66: 361-363.Kim SH. Lee SJ. Lee JH， et al. Antimicrobial activity of 9-O-acyl-and 9-0-alkylberberrubinederivatives[J]. PlantaMed， 2002,68: 277-281.)

發(fā)明內(nèi)容
為了解決已有技術(shù)存在的問(wèn)題，通過(guò)在小檗堿和小檗紅堿的13 位引入芐基類親脂取代基顯著提高其抗菌活性。本發(fā)明的目的是提供 一種小檗堿13位衍生物和小檗紅堿13位衍生物的制備方法。
本發(fā)明提供的小檗堿13位衍生物和小檗紅堿13位衍生物的制備 方法，所述的小檗堿13位衍生物和小檗紅堿13位衍生物分別為13-芐基小檗堿、13- (2，， 4， -二硝基)芐基小檗堿、13-芐基小檗紅堿 和13- (2'， 4' -二硝基)節(jié)基小檗紅堿；其分子結(jié)構(gòu)式分別如式1-4 所示
式l ， 式2
8式3 ， 式4 ;
本發(fā)明還提供了一種由小檗堿制備小檗紅堿的方法；小檗紅堿的 分子結(jié)構(gòu)式5如下-
式5 ;
小檗堿13位衍生物和小檗紅堿13位衍生物的制備過(guò)程中需要 合成兩個(gè)反應(yīng)中間體，分別為8-乙酰基小檗堿和8-乙?；￠藜t堿; 8-乙酰基小檗堿和8-乙?；￠藜t堿的分子結(jié)構(gòu)式6和7分別如下:1)、 13-芐基小檗堿的制備
a. 8-乙酰基小檗堿的制備
將小檗堿用l-7mol/L氫氧化鈉溶液溶解，小檗堿在氫氧化鈉溶 液中的濃度不高于0. 025g/mL，以0. 17亳升/分鐘的速度滴加丙酮進(jìn) 行反應(yīng)，丙酮與小檗堿的摩爾比為1-5: 1，反應(yīng)溫度為20-50。C，反 應(yīng)時(shí)間不少于4h，反應(yīng)完畢后抽濾，濾出不溶物，不溶物經(jīng)硅膠柱 純化，得最終產(chǎn)物；經(jīng)紅外光譜、電噴霧質(zhì)譜和氫核磁共振檢測(cè)其分 子量為396. 3，分子式為[C23H26N04]+，確定化合物為8-乙酰基小檗堿，；
結(jié)構(gòu)表征數(shù)據(jù)如下熔點(diǎn):283-284"C;111 NMR(300MHz,DMSO)S: U3(s,2H,CH2),2.17(d,J=2.652HZ,3H,CH3),3.26 (s,2H,CH2) ,3.39(s,2H ,CH2),3.58(dd,J=13.62HZ,2H,CH2),3.67 (s,2H,CH2) ,3.78(s,3H,CH3),3. 84(s,3H,CH3)，4.83(d,J-1.61HZ,lH，CH),6.68(d,J-3.009HZ,lH,CH苯環(huán)), 6.82(s,lH,CH苯環(huán)),6.86(s,lH,CH苯環(huán)),6.99(s,lH,CH苯環(huán)),7.19(dd,J-4. 137HZ,lH,CH雙鍵);IR(KBr)v: 1715， 1254、 1046、 2853、 3067、 699 、1120、 3082、 730、 1429、 2926;MS附/z:396.3。
b. 13-芐基小檗堿的制備
將8-乙?；￠迚A用甲醇溶解，8-乙?；￠迚A在甲醇中的濃 度不高于0. 025g/mL，加入催化劑溴化鈉或溴化鉀和氯芐進(jìn)行反應(yīng)，， 催化劑與8-乙酰基小檗堿的質(zhì)量比為1.6-4: 1，氯芐與8-乙酰基小 檗堿的摩爾比為l-4: 1，反應(yīng)溫度為50-80。C，反應(yīng)時(shí)間不少于6h， 反應(yīng)完畢后抽濾，濾液減壓蒸餾，經(jīng)硅膠柱純化，得最終產(chǎn)物；經(jīng)紅 外光譜、電噴霧質(zhì)譜和氫核磁共振檢測(cè)其分子量為426.3，分子式為化合物為13-芐基小檗堿。
結(jié)構(gòu)表征數(shù)據(jù)如下熔點(diǎn):296-297'C，H NMR(300MHz,DMSO)S: 1.13(s,2H,CH2),2.17(s,2H,CH2),2.63(d,J=6.741,2H,CH2),3.78(d,J=2.133,3 H,CH3),3.84(s，3H，CH3),3.92(s,2H,CH2),6.07(d,J-8.436,lH,苯環(huán)CH),6,86 (d,hl.936,lH,CH苯環(huán)),6.99(s,lH,CH苯環(huán)),7.06 (d,J=4.312,2H,CH苯 環(huán))，7.24 (d,J-6.334,2H,CH苯環(huán))，7.69 (dd，J-2.069,4.51,lH,CH苯環(huán) ),9.78(s,lH,吡疲H);IR(KBr)v: 1254、 1046、 2853、 3067、 699、 1120 、3082、 730、 1429、 2926;MS w/z:426.3。
2) 13- (2'， 4' -二硝基)芐基小檗堿的制備
將8-乙酰基小檗堿用甲醇溶解，8-乙酰基小檗堿在甲醇中的濃 度不高于0. 025g/mL，加入催化劑溴化鈉或溴化鉀和2， 4-二硝基氯 化節(jié)進(jìn)行反應(yīng),催化劑與8-乙?；￠迚A的質(zhì)量比為1.6-4: 1， 2， 4-二硝基氯化芐與8-乙酰基小檗堿的摩爾比為1-4: 1，反應(yīng)溫度為 50-80°C，反應(yīng)時(shí)間不少于10h，反應(yīng)完畢后抽濾，濾液減壓蒸餾， 硅膠柱純化，得最終產(chǎn)物，經(jīng)紅外光譜、電噴霧質(zhì)譜和氫核磁共振檢 測(cè)其分子量為516.3，分子式為[(:2晶扎08]+，確定化合物為13- (2'， 4' -二硝基)芐基小檗堿。
結(jié)構(gòu)表征數(shù)據(jù)如下熔點(diǎn):309-31(TC;111 NMR(300MHz,DMSO)S: U3(s,2H,CH2),2.17(s,2H,CH2),2,63(s,2H,CH2),3.78(s,3H,CH3),3.84(s,3 H,CH3),3.92(s,2H,CH2),6.07(MH,苯環(huán)CH),6.86(s,lH,CH苯環(huán)),6.99(s,1 H,CH苯環(huán)),7.06 (s,2H,CH苯環(huán))，8.38 (d,2H,CH苯環(huán))，8.93 (s,l H,CH苯環(huán))9.78(s,lH,吡啶H);IR(KBr)v: 1355、 853、 3113、 3082、 1254、 1046、 2853、 699、 1120、 3082、 730、 1429、 2926;MS附/z:51 6.3。
3) 13-芐基小檗紅堿的制備
a. 小檗紅堿的制備
將小檗堿用甲苯溶解，小檗堿在甲苯中的濃度不高于 0.025g/mL，加入lewis酸與其反應(yīng)，lewis酸為氯化鋁、氯化鋅或 氯化銻，lewis酸與小檗堿的摩爾比為3-6: 1，反應(yīng)溫度為90-120 °C，反應(yīng)時(shí)間不少于9h，反應(yīng)完畢后減壓蒸餾，經(jīng)硅膠柱純化，得 最終產(chǎn)物，經(jīng)紅外光譜、電噴霧質(zhì)譜和氫核磁共振檢測(cè)其分子量為 322.3，分子式為[d晶6N04]+，確定化合物為小檗紅堿。
結(jié)構(gòu)表征數(shù)據(jù)如下熔點(diǎn)249-250。C。H NMR (300MHz,DMSO) S: 1.13(s,2H,CH2)， 2.17(s,2H,CH2),2.63(d,J=14.746， 2H,CH2),3.78(d,J= 9.387， 3H,CH3),3.84(s，2H,CH2),4.85(d,h6.506,lH,OH),6.28(s,lH,CH苯 環(huán)),6.99(s,lH,CH苯環(huán),6.24(s,lH,苯環(huán)CH),8.84(cUN5.907,lH,吡啶H)，9. 55(d,J-1.606,lH，吡啶H);IR(KBr)v: 1231、 3244、 650、 1254、 1046、 2 853、 3067、 699、 1120、 3082、 730、 1429、 2926;MS附々:322.3。
b. 8-乙酰基小檗紅堿
將小檗紅堿用lmol/L-7mol/L氫氧化鈉溶液溶解，小檗紅堿在氫 氧化鈉溶液中的濃度不高于0. 025g/mL，以0. 17毫升/分鐘的速度滴 加丙酮，小檗堿與丙酮的摩爾比為1-5: 1，反應(yīng)溫度為20-50°C，反 應(yīng)時(shí)間不少于4h，反應(yīng)完畢后抽濾，濾出不溶物，不溶物硅膠柱純 化，得最終產(chǎn)物，經(jīng)紅外光譜、電噴霧質(zhì)譜和氫核磁共振檢測(cè)其分子量為382.3，分子式為[(:2晶4,5]+，確定化合物為8-乙?；￠藜t堿。 結(jié)構(gòu)表征數(shù)據(jù)如下熔點(diǎn):278-279"C;lH NMR(300MHz,DMSO)S: U3(s,2H,CH2),2.17(d,J=2.652HZ,3H,CH3),3.2 (s,2H,CH2) ,3.39(s,2H, CH2),3.58(dd,J=13.62HZ,2H,CH2),3.67 (s,2H,CH2) ,3.78(s,3H,CH3),4. 83(d,J=1.61HZ,lH,CH),5.23(s,lH,OH),6.68(d,J=3.009HZ,lH,CH苯環(huán)), 6.82(s,lH,CH苯環(huán)),6.86(s,lH,CH苯環(huán)),6.99(s,lH,CH苯環(huán)),7.19^(1^= 4.137HZ,lH,CH雙鍵);IR(KBr)v: 1231、 3244、 650、 1715， 1254、 10 46、 2853、 3067、 699、 1120、 3082、 730、 1429、 2926;MS附/z:382.3。 c.將8-乙?；￠藜t堿用甲醇溶解，8-乙?；￠藜t堿在甲醇 中的濃度不高于0. 025g/mL，加入催化劑溴化鈉或溴化鉀和氯芐進(jìn)行 反應(yīng)，催化劑與8-乙酰基小檗紅堿的質(zhì)量比為1.6-4: 1，氯芐與8-乙酰基小檗紅堿的摩爾比為1-4: 1，反應(yīng)溫度為50-8(TC，反應(yīng)時(shí)間 不少于6h，反應(yīng)完畢后抽濾，濾液減壓蒸餾，硅膠柱純化，得最終 產(chǎn)物，經(jīng)紅外光譜、電噴霧質(zhì)譜和氫核磁共振檢測(cè)其分子量為412. 3， 分子式為[C2eH22N04]+，確定化合物為13-芐基小檗紅堿。
結(jié)構(gòu)表征數(shù)據(jù)如下熔點(diǎn):290-291。C;111 NMR(300MHz,DMSO) S: 1.13(s,2H,CH2),2.17(s,2H,CH2),2.63(s,2H,CH2),3.78(s,3H,CH3),3.92 (s,2H,CH2),5.23(s,lH,OH),6.07(s,lH,苯環(huán)CH),6.86(s,lH,CH苯環(huán)),6.99 (s,lH,CH苯環(huán)),7.06 (s,2H,CH苯環(huán))，7.24 (s,2H,CH苯環(huán))，7.69 (s, 1H,CH苯環(huán))9.78(s,lH,吡淀H);IR(KBr)v: 1231、 3244、 650、 1254、 1046、 2853、 3067、 699、 1120、 3082、 730、 1429、 2926;MS w/z:41 2.3。4)13- (2'， 4' -二硝基)芐基小檗紅堿的制備
將8-乙?；￠藜t堿用甲醇溶解，8-乙酰基小檗紅堿在甲醇中 的濃度不高于0. 025g/mL，加入催化劑溴化鈉或溴化鉀和2， 4-二硝 基氯化芐進(jìn)行反應(yīng)，催化劑與8-乙?；￠藜t堿的質(zhì)量比為1.6-4: 1， 2， 4-二硝基氯化芐與小檗堿的摩爾比為1-4: 1，反應(yīng)溫度為50-80 °C，反應(yīng)時(shí)間不少于10h，反應(yīng)完畢后抽濾，濾液減壓蒸餾，硅膠柱
純化，得最終產(chǎn)物，經(jīng)紅外光譜、電噴霧質(zhì)譜和氫核磁共振檢測(cè)其分 子量為502.3，分子式為[(:2晶具08]+，確定化合物為13- (2'， 4， -
二硝基)芐基小檗紅堿。
結(jié)構(gòu)表征數(shù)據(jù)如下Mp:301-302"C;111 NMR(300MHz，DMSO)S: 1.13(s,2H,CH2),2.17(s,2H,CH2),2.63(s,2H,CH2)，3.78(s,3H,CH3), 3.92(s, 2H,CH2),5.23(s,lH,OH),6.07(s,lH,苯環(huán)CH),6.86(s,lH,CH苯環(huán)),6.99(s, 1H,CH苯環(huán)),7.06 (s,2H,CH苯環(huán))，8.38 (d,2H,CH苯環(huán))，8.93 (s,l H,CH苯環(huán))9.78(s,lH,吡啶H);IR(KBr)v:1231、 3244、 650、 1254、 1 046、 2853、 3067、 699、 1120、 3082、 730、 1429、 2926、 1355、 85 3;MS附々:502.3。
有益效果對(duì)上述制得的小檗堿和小檗紅堿的衍生物進(jìn)行藥物活 性的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，其抗革蘭氏陽(yáng)性菌作用顯著，具體地說(shuō)
本發(fā)明制得的小檗堿13位衍生物和小檗紅堿13位衍生物在抗菌 實(shí)驗(yàn)中顯示出了優(yōu)異的抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的作用，它比目前公認(rèn)具有 抗革蘭氏陽(yáng)性菌作用的、結(jié)構(gòu)最相關(guān)的化合物鹽酸小檗堿和小檗紅堿 的效果要好的多，MIC值低很多。從表l中數(shù)據(jù)可知，小檗堿的最低抑菌濃度即MIC值為64 ii g/mL，小檗紅堿的最低抑菌濃度即MIC值 為大于128ug/mL，而本發(fā)明制得的小檗堿13位衍生物和小檗紅堿 13位衍生物與小檗堿與小檗紅堿相比，最低抑菌濃度即MIC值顯著 下降，13-芐基小檗堿為32ug/mL， 13- (2，， 4， -二硝基)芐基小檗 堿為16ug/mL， 13-芐基小檗紅堿為32ug/mL， 13- (2，， 4， -二硝 基)芐基小檗紅堿為8"g/mL，因此本發(fā)明制得的小檗堿13位衍生 物和小檗紅堿13位衍生物顯示出更高的抗菌活性。
本發(fā)明制得的小檗堿13位衍生物和小檗紅堿13位衍生物抗革蘭 氏陽(yáng)性菌的作用，主要是體現(xiàn)在抑制金黃色葡萄球菌、白色念珠菌、 熱帶假絲酵母菌、魯西特念珠菌、克柔念珠菌、煙曲霉、土曲霉和隱
球菌的生長(zhǎng)。
本發(fā)明按照前體藥物的設(shè)計(jì)原理，以小檗堿和小檗紅堿為母體進(jìn) 行化學(xué)結(jié)構(gòu)修飾合成，得到能更加優(yōu)良的小檗堿和小檗紅堿氯節(jié)及2， 4-二硝基氯化芐衍生物，為開(kāi)發(fā)新的抗菌藥物組合物打下了基礎(chǔ)，有 利于擴(kuò)大其應(yīng)用范圍。小檗堿、小檗紅堿及小檗堿13位衍生物和小 檗紅堿13位衍生物的抗菌活性見(jiàn)表1。從表1的數(shù)據(jù)可以看出，小 檗堿的最低抑菌濃度即MIC值為64ug/mL，小檗紅堿的最低抑菌濃 度即MIC值為大于128" g/mL，而本發(fā)明制得的小檗堿13位衍生物 和小檗紅堿13位衍生物與小檗堿與小檗紅堿相比，最低抑菌濃度即 MIC值顯著下降，13-芐基小檗堿為32ug/mL， 13- (2，， 4， -二硝 基)芐基小檗堿為16ug/mL， 13-芐基小檗紅堿為32ug/mL， 13-(2'， 4， -二硝基)芐基小檗紅堿為8ug/mL。因此所合成的小檗堿13位衍生物和小檗紅堿13位衍生物表現(xiàn)出比其母體更好的抗菌活性，可
作為抗菌藥的原料。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例l:8-乙?；￠迚A的制備
稱取小檗堿0. 5g于50ml三頸瓶中，加入20ml摩爾濃度為lmol/L 的氫氧化鈉溶液，使其全部溶解，以0.17毫升/分鐘的速度緩慢滴加 0. llmL丙酮，于24。C下攪拌反應(yīng)4小時(shí)，得到8-乙酰基小檗堿0. 25g。 收率為42%。
實(shí)施例2: 8-乙?；￠迚A的制備
稱取小檗堿0. 5g于50mL三頸瓶中，加入20mL摩爾濃度為4mol/L 的氫氧化鈉溶液，使其全部溶解，以0. 17毫升/分鐘的速度緩慢滴加 0. 33mL丙酮，于24。C下攪拌反應(yīng)4小時(shí)，得到8-乙?；￠迚A0. 49g。 收率為84%。
實(shí)施例3: 8-乙?；￠迚A的制備
稱取小檗堿0. 5g于50mL三頸瓶中，加入20mL摩爾濃度為7mol/L 的氫氧化鈉溶液，使其全部溶解，以0. 17毫升/分鐘的速度緩慢滴加 0. 55依1丙酮，24。C攪拌反應(yīng)4小時(shí)，得到8-乙?；￠迚A0. 39g。 收率為67%。
實(shí)施例4: 13-芐基小檗堿的制備
將0. 5g8-乙?；￠迚A用20mL甲醇溶解，加入0. 8g溴化鉀和 .15ml氯芐，溴化鉀與8-乙?；￠迚A的質(zhì)量比為1.6: 1，氯芐與 8-乙?；￠迚A的摩爾比為1: 1，于64"C攪拌下反應(yīng)6h，反應(yīng)完畢后抽濾，減壓蒸餾，硅膠柱純化(氯仿甲醇=9: 1)，得到13-芐基
小檗堿0.29g。收率為53%。 實(shí)施例5: 13-芐基小檗堿的制備
將0. 5g8-乙?；￠迚A用20mL甲醇溶解，加入1. 5g溴化鉀和 0.3ml氯芐，溴化鉀與8-乙?；￠迚A的質(zhì)量比為3: 1，氯芐與8-乙?；￠迚A的摩爾比為2: 1，于64X:攪拌下反應(yīng)6h，反應(yīng)完畢后
抽濾，減壓蒸餾，硅膠柱純化(氯仿甲醇=9: 1)得13-節(jié)基小檗
堿0.46g。收率為86%。 實(shí)施例6: 13-芐基小檗堿的制備
將0. 5g8-乙?；￠迚A用30mL甲醇溶解，加入2. 0g溴化鉀和 0.6ml氯芐，溴化鉀與8-乙酰基小檗堿的質(zhì)量比為4: 1，氯芐與8-乙?；￠迚A的摩爾比為4: 1，于64。C攪拌下反應(yīng)6h，反應(yīng)完畢后
抽濾，減壓蒸餾，硅膠柱純化(氯仿甲醇=9: 1)，得到13-芐基小
檗堿0.37g。收率為68%。 實(shí)施例7: 13-芐基小檗堿的制備
將0. 5g8-乙酰基小檗堿用20mL甲醇溶解，加入1. 5g溴化鈉和 0.3ml氯芐，溴化鈉與8-乙酰基小檗堿的質(zhì)量比為3: 1，氯芐與8-乙酰基小檗堿的摩爾比為2: 1，于64。C攪拌下反應(yīng)6h，反應(yīng)完畢后
抽濾，減壓蒸餾，硅膠柱純化(氯仿甲醇=9: 1)，得到13-芐基小 檗堿0.39g。收率為72%。
實(shí)施例8: 13- (2'， 4' -二硝基)芐基小檗堿的制備
將0. 5g8-乙?；￠迚A用20mL甲醇溶解，加入0. 8g溴化鉀和0. 32g2， 4-二硝基氯化芐，溴化鉀與8-乙酰基小檗堿的質(zhì)量比為1. 6: 1， 2， 4-二硝基氯化芐與8-乙?；￠迚A的摩爾比為1: 1，于64。C 攪拌下反應(yīng)10h，反應(yīng)完畢后抽濾，減壓蒸餾，硅膠柱純化(氯仿 甲醇=9: 1)，得到13- (2'， 4' -二硝基)芐基小檗堿0.27g。收率 為41%。
實(shí)施例9: 13- (2'， 4' -二硝基)芐基小檗堿的制備
將0. 5g8-乙?；￠迚A用20mL甲醇溶解，加入1. 5g溴化鉀和 0.64g2， 4-二硝基氯化芐，溴化鉀與8-乙酰基小檗堿的質(zhì)量比為3: 1， 2， 4-二硝基氯化芐與8-乙?；￠迚A的摩爾比為2: 1，于64。C 攪拌下反應(yīng)10h，反應(yīng)完畢后抽濾，減壓蒸餾，硅膠柱純化(氯仿.-甲醇=9: 1)，得到13- (2'， 4' -二硝基)芐基小檗堿0.55g。收率 為84%。
實(shí)施例10: 13- (2'， 4' -二硝基)芐基小檗堿的制備
將0. 5g8-乙?；￠迚A用20mL甲醇溶解，加入2. Og溴化鉀和 1.28g2， 4-二硝基氯化芐，溴化鉀與8-乙酰基小檗堿的質(zhì)量比為4: 1， 2， 4-二硝基氯化芐與8-乙?；￠迚A的摩爾比為4: 1，于64。C 攪拌下反應(yīng)10h，反應(yīng)完畢后抽濾，減壓蒸餾，硅膠柱純化(氯仿 甲醇=9: 1)，得到13- (2'， 4' -二硝基)芐基小檗堿0.38g。收率 為58%。
實(shí)施例11:13- (2'， 4' -二硝基)芐基小檗堿的制備
將0. 5g8-乙?；￠迚A用20mL甲醇溶解，加入1. 5g溴化鈉和 0.64g2， 4-二硝基氯化芐，溴化鈉與8-乙?；￠迚A的質(zhì)量比為3:1， 2， 4-二硝基氯化芐與8-乙?；￠迚A的摩爾比為2: 1，于64。C 攪拌下反應(yīng)10h，反應(yīng)完畢后抽濾，減壓蒸餾，硅膠柱純化(氯仿 甲醇=9: 1)，得到13- (2'， 4' -二硝基)芐基小檗堿0.44g。收率 為67%
實(shí)施例12:小檗紅堿的制備
稱取0. 5g小檗堿于50ml三頸瓶中，加入20ml甲苯使其全部溶 解，加入0.6g氯化鋁，氯化鋁與小檗堿的摩爾比為3: 1，于11(TC下 加熱回流反應(yīng)9小時(shí)。反應(yīng)完畢后抽濾，干燥，硅膠柱純化(氯仿 甲醇:9: 1)，得到小檗紅堿O. 16g。收率為34%。 實(shí)施例13:小檗紅堿的制備
稱取0. 5g小檗堿于50ml三頸瓶中，加入20ml甲苯使其全部溶 解，加入0.8g氯化鋁，氯化鋁與小檗堿的摩爾比為4: 1，于110'C下 加熱回流反應(yīng)9小時(shí)。反應(yīng)完畢后抽濾，干燥，硅膠柱純化(氯仿 甲醇=9: 1)，得到小檗紅堿0.35g。收率為72%。 實(shí)施例14:小檗紅堿的制備
稱取0. 5g小檗堿于50ml三頸瓶中，加入20ml甲苯使其全部溶 解，加入1.2g氯化鋁，氯化鋁與小檗堿的摩爾比為6: 1，于110'C下 加熱回流反應(yīng)9小時(shí)。反應(yīng)完畢后抽濾，干燥，硅膠柱純化(氯仿 甲醇9: 1)，得到小檗紅堿0.26g。收率為54%。 實(shí)施例15: 8-乙?；￠藜t堿的制備
稱取小檗紅堿0.5g于50ml三頸瓶中，加入20ml摩爾濃度為 lmol/L的氫氧化鈉溶液，使其全部溶解，以0. 17毫升/分鐘的速度緩慢滴加0. llml丙酮，于24。C下攪拌反應(yīng)4小時(shí)，得到8-乙?；?br> 檗紅堿0.24g。收率為41%。
實(shí)施例16: 8-乙?；￠藜t堿的制備
稱取小檗堿0. 5g于50ml三頸瓶中，加入20ml摩爾濃度為4mol/L 的氫氧化鈉溶液，使其全部溶解，以0.17毫升/分鐘的速度緩慢滴加 0.33ml丙酮，于24。C下攪拌反應(yīng)4小時(shí)，得到8-乙酰基小檗紅堿 0.50g。收率為84%。 實(shí)施例17: 8-乙?；￠藜t堿的制備
稱取小檗堿0. 5g于50ml三頸瓶中，加入20ml摩爾濃度為7mol/L 的氫氧化鈉溶液，使其全部溶解，以0.17毫升/分鐘的速度緩慢滴加 0. 55ml丙酮，24。C攪拌反應(yīng)4小時(shí)，得到8-乙?；￠藜t堿0. 39g。 收率為65%。
實(shí)施例18: 13-芐基小檗紅堿的制備
將0. 5g8-乙酰基小檗紅堿用20mL甲醇溶解，加入0. 8g溴化鉀和 0.15ml氯芐，溴化鉀與8-乙?；￠藜t堿的質(zhì)量比為1.6: 1，氯芐 與8-乙?；￠藜t堿的摩爾比為1: 1，于64'C攪拌下反應(yīng)6h，反應(yīng) 完畢后抽濾，減壓蒸餾，硅膠柱純化(氯仿甲醇=9: 1)，得到13-芐基小檗紅堿0.28g。收率為52%。 實(shí)施例19: 13-芐基小檗紅堿的制備
將0. 5g8-乙?；￠藜t堿用20mL甲醇溶解，加入1. 5g溴化鉀和 0.3ml氯芐，溴化鉀與8-乙?；￠藜t堿的質(zhì)量比為3: 1，氯芐與 8-乙?；￠藜t堿的摩爾比為2: 1，于64。C攪拌下反應(yīng)6h，反應(yīng)完畢后抽濾，減壓蒸餾，硅膠柱純化(氯仿甲醇=9: 1)，得到13-芐
基小檗紅堿0.50g。收率為93%。 實(shí)施例20: 13-芐基小檗紅堿的制備
將0. 5g8-乙?；￠藜t堿用20mL甲醇溶解，加入2. 0g溴化鉀和 0.6ml氯芐，溴化鉀與8-乙酰基小檗紅堿的質(zhì)量比為4: 1，氯芐與 8-乙酰基小檗紅堿的摩爾比為4: 1，于64'C攪拌下反應(yīng)6h，反應(yīng)完 畢后抽濾，減壓蒸餾，硅膠柱純化(氯仿甲醇=9: 1)，得到13-芐 基小檗紅堿0.39g。收率為72%。 實(shí)施例21: 13-芐基小檗紅堿的制備
將0. 5g8-乙?；￠藜t堿用20mL甲醇溶解，加入1. 5g溴化鈉 和0.3ml氯芐，溴化鈉與8-乙?；￠藜t堿的質(zhì)量比為3: 1，氯芐 與8-乙?；￠藜t堿的摩爾比為2: 1，于64-C攪拌下反應(yīng)6h，反應(yīng) 完畢后抽濾，減壓蒸餾，硅膠柱純化(氯仿甲醇=9: 1)，得到13-芐基小檗堿0.44g。收率為81%。
實(shí)施例22: 13- (2，， 4， -二硝基)芐基小檗紅堿的制備
將0. 5g8-乙?；￠藜t堿用20mL甲醇溶解，加入0. 8g溴化鉀 和0.32g2， 4-二硝基氯化芐，溴化鉀與8-乙?；￠藜t堿的質(zhì)量比 為1.6: 1， 2， 4-二硝基氯化芐與8-乙酰基小檗紅堿的摩爾比為1: 1，于64。C攪拌下反應(yīng)10h，反應(yīng)完畢后抽濾，減壓蒸餾，硅膠柱純 化(氯仿甲醇=9: 1)，得到13- (2'， 4' -二硝基)芐基小檗紅堿 0.30g。收率為45%。
實(shí)施例23: 13- (2'， 4， -二硝基)芐基小檗紅堿的制備將0. 5g8-乙酰基小檗紅堿用20mL甲醇溶解，加入1. 5g溴化鉀和0.64g2， 4-二硝基氯化芐，溴化鉀與8-乙酰基小檗紅堿的質(zhì)量比為3: 1， 2， 4-二硝基氯化芐與8-乙?；￠藜t堿的摩爾比為2: 1，于64。C攪拌下反應(yīng)10h，反應(yīng)完畢后抽濾，減壓蒸餾，硅膠柱純化(氯仿甲醇=9: 1)，得到13- (2，， 4， -二硝基)芐基小檗紅堿0.57g。收率為87%。
實(shí)施例24: 13- (2，， 4， -二硝基)芐基小檗紅堿的制備
將0. 5g8-乙?；￠藜t堿用20mL甲醇溶解，加入2. 0g溴化鉀和1.28g2， 4-二硝基氯化芐，溴化鉀與8-乙?；￠藜t堿的質(zhì)量比為4: 1， 2， 4-二硝基氯化芐與8-乙?；￠迚A的摩爾比為4: 1，于64'C攪拌下反應(yīng)10h，反應(yīng)完畢后抽濾，減壓蒸餾，硅膠柱純化(氯仿甲醇=9: 1)，得到13- (2，， 4， -二硝基)芐基小檗紅堿0.34g。收率為51%。
實(shí)施例25: 13- (2，， 4， -二硝基)芐基小檗紅堿的制備
將0. 5g8-乙酰基小檗紅堿用20mL甲醇溶解，加入1. 5g溴化鈉和0.64g2， 4-二硝基氯化芐，溴化鈉與8-乙?；￠藜t堿的質(zhì)量比為3: 1， 2， 4-二硝基氯化芐與8-乙?；￠迚A的摩爾比為2: 1，于64。C攪拌下反應(yīng)10h，反應(yīng)完畢后抽濾，減壓蒸餾，硅膠柱純化(氯仿甲醇=9: 1)，得到13- (2，， 4， -二硝基)芐基小檗紅堿0.49g。收率為74%。試驗(yàn)例
實(shí)施例4、 5、 6、 7、 8、 9、 10、 18、 19、 20、 21、 22、 23、 24、25所制備的小檗堿13位衍生物和小檗紅堿13位衍生物在抗菌實(shí)驗(yàn)
中表現(xiàn)出良好的抑菌活性。具體實(shí)驗(yàn)過(guò)程如下
配制牛肉膏胰蛋白胨培養(yǎng)基(每lOOmL培養(yǎng)基含牛肉膏0. 3g， 胰蛋白胨lg，氯化鈉0. 5g，瓊脂2g，蒸餾水100mL)，于121。C， 0, lMPa 下高壓蒸汽滅菌0.5小時(shí)，取無(wú)菌試管12個(gè)，編號(hào)分別為l、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8、 9、 10、 11、 12; 1號(hào)試管加入8mL牛肉膏胰蛋白胨 培養(yǎng)基，其余每個(gè)試管中加入5mL牛肉膏胰蛋白胨培養(yǎng)基；在1號(hào)試 管中加入濃度為1280 u g/mL的13-芐基小檗堿2mL，混勻后從1號(hào)試 管中吸取13-芐基小檗堿與牛肉膏胰蛋白胨培養(yǎng)基的混合液5mL至2 號(hào)試管，混勻后再?gòu)?號(hào)試管中吸取5mL13-芐基小檗堿與牛肉膏胰 蛋白胨培養(yǎng)基的混合液至3號(hào)試管，……，如此倍比稀釋至ll號(hào)試 管；并從11號(hào)試管中吸取13-芐基小檗堿與牛肉膏胰蛋白胨培養(yǎng)基 的混合液5mL棄去；12號(hào)試管為不含13-芐基小檗堿的空白培養(yǎng)基對(duì) 照。此時(shí)1號(hào)至11號(hào)試管中13-芐基小檗堿的濃度(分別為256、 128、 64、 32、 16、 8、 4、 2、 1、 0. 5和0. 25u g/mL。
取無(wú)菌培養(yǎng)皿12個(gè)，編號(hào)分別為l、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8、 9、 10、 11、 12;在無(wú)菌操作下，按相應(yīng)的順序?qū)⒏髟嚬艿蛊桨澹磳⒃?管中13-芐基小檗堿與培養(yǎng)基的混合物倒入無(wú)菌培養(yǎng)皿中，然后靜置 冷卻形成平板。各平板接種金黃色葡萄球菌。培養(yǎng)皿放入二氧化碳細(xì) 胞培養(yǎng)箱中，于37'C培養(yǎng)48小時(shí)，測(cè)定13-芐基小檗堿的最低抑菌 濃度即MIC值。
測(cè)定13-芐基小檗堿抑制白色念珠菌、魯西特念珠菌、克柔念珠菌、煙曲霉、土曲霉、隱球菌生長(zhǎng)的試驗(yàn)例方法同上。
測(cè)定13- (2'， 4' -二硝基)芐基小檗堿、13-芐基小檗紅堿和13- (2'， 4' -二硝基)節(jié)基小檗紅堿抑制白色念珠菌、魯西特念珠菌、克柔念珠菌、煙曲霉、土曲霉、隱球菌生長(zhǎng)的試驗(yàn)例方法同上。
試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表l。從表l的數(shù)據(jù)可以看出，小檗堿的最低抑菌濃度即MIC值為64u g/mL，小檗紅堿的最低抑菌濃度即MIC值為大于128u g/mL，而本發(fā)明制得的小檗堿13位衍生物和小檗紅堿13位衍生物與小檗堿與小檗紅堿相比，最低抑菌濃度即MIC值顯著下降，13-芐基小檗堿為32"g/mL， 13- (2'， 4' -二硝基)芐基小檗堿為16pg/mL， 13-芐基小檗紅堿為32ug/mL， 13- (2，， 4， -二硝基)芐基小檗紅堿為8Pg/mL。因此所合成的小檗堿13位衍生物和小檗紅堿13位衍生物表現(xiàn)出比其母體更好的抗菌活性，可作為抗菌藥的原料。
表l小檗堿、小檗紅堿及小檗堿13位衍生物和小檗紅堿13位衍生物的
體外抗菌活性
MIC ( y g/mL)衍生物金黃 色葡 萄球 菌白色 念珠 菌魯西 特念 珠菌克柔念 珠菌煙曲霉土曲霉隱球菌
小檗堿64128>12832>128〉12864
小檗紅堿>128>128>128>128>128>128>128
13-芐基小檗堿3212812864〉128>12832
13- (2， 4-二硝基芐 基)小檗堿16323232>128>12816
13-芐基小檗紅堿32646464>128〉12832
13- (2， 4-二硝基芐 基)小檗紅堿83232321281288
2權(quán)利要求
1、一種小檗堿和小檗紅堿13位衍生物的合成方法，其特征在于，其步驟和條件如下所述的小檗堿13位衍生物和小檗紅堿13位衍生物為13-芐基小檗堿、13-(2’，4’-二硝基)芐基小檗堿、13-芐基小檗紅堿和13-(2’，4’-二硝基)芐基小檗紅堿；其分子結(jié)構(gòu)式如式1-4所示式1， 式2，式3， 式4；下面提供了一種由小檗堿制備小檗紅堿的方法；小檗紅堿的分子結(jié)構(gòu)式5如下<!-- 1 -->小檗堿13位衍生物和小檗紅堿13位衍生物的制備過(guò)程中需要合成兩個(gè)反應(yīng)中間體，分別為8-乙?；￠迚A和8-乙酰基小檗紅堿；8-乙酰基小檗堿、8-乙酰基小檗紅堿的分子結(jié)構(gòu)式6和式7如下式6， 式7；1)13-芐基小檗堿的制備a.8-乙?；￠迚A的制備將小檗堿用1-7mol/L氫氧化鈉溶液溶解，小檗堿在氫氧化鈉溶液中的濃度不高于0.025g/mL，以0.17毫升/分鐘的速度滴加丙酮進(jìn)行反應(yīng)，所述的丙酮與小檗堿的摩爾比為1-5∶1，反應(yīng)溫度為20-50℃，反應(yīng)時(shí)間不少于4h，反應(yīng)完畢后抽濾，濾出不溶物，不溶物經(jīng)硅膠柱純化，得8-乙?；￠迚A；b.13-芐基小檗堿的制備將8-乙酰基小檗堿用甲醇溶解，8-乙?；￠迚A在甲醇中的濃度不高于0.025g/mL，加入催化劑溴化鈉或溴化鉀和氯芐進(jìn)行反應(yīng)，，所述的催化劑與8-乙?；￠迚A的質(zhì)量比為1.6-4∶1，氯芐與8-乙?；￠迚A的摩爾比為1-4∶1，反應(yīng)溫度為50-80℃，反應(yīng)時(shí)間不少于6h，反應(yīng)完畢后抽濾，濾液減壓蒸餾，經(jīng)硅膠柱純化，得13-芐基小檗堿；2)13-(2’，4’-二硝基)芐基小檗堿的制備將8-乙?；￠迚A用甲醇溶解，8-乙?；￠迚A在甲醇中的濃度不高于0.025g/mL，加入催化劑溴化鈉或溴化鉀和2，4-二硝基氯化芐進(jìn)行反應(yīng)，所述的催化劑與8-乙?；￠迚A的質(zhì)量比為1.6-4∶1，2，4-二硝基氯化芐與8-乙?；￠迚A的摩爾比為1-4∶1，反應(yīng)溫度為50-80℃，反應(yīng)時(shí)間不少于10h，反應(yīng)完畢后抽濾，濾液減壓蒸餾，硅膠柱純化，得13-(2’，4’-二硝基)芐基小檗堿；3)13-芐基小檗紅堿的制備a.小檗紅堿的制備將小檗堿用甲苯溶解，小檗堿在甲苯中的濃度不高于0.025g/mL，加入lewis酸與其反應(yīng)，所述的lewis酸為氯化鋁、氯化鋅或氯化銻，lewis酸與小檗堿的摩爾比為3-6∶1，反應(yīng)溫度為90-120℃，反應(yīng)時(shí)間不少于9h，反應(yīng)完畢后減壓蒸餾，經(jīng)硅膠柱純化，得小檗紅堿；b.8-乙?；￠藜t堿的制備將小檗紅堿用1mol/L-7mol/L氫氧化鈉溶液溶解，小檗紅堿在氫氧化鈉溶液中的濃度不高于0.025g/mL，以0.17毫升/分鐘的速度滴加丙酮，所述的小檗堿與丙酮的摩爾比為1-5∶1，反應(yīng)溫度為20-50℃，反應(yīng)時(shí)間不少于4h，反應(yīng)完畢后抽濾，濾出不溶物，不溶物硅膠柱純化，得8-乙?；￠藜t堿；c.將8-乙?；￠藜t堿用甲醇溶解，8-乙?；￠藜t堿在甲醇中的濃度不高于0.025g/mL，加入催化劑溴化鈉或溴化鉀和氯芐進(jìn)行反應(yīng)，所述的催化劑與8-乙?；￠藜t堿的質(zhì)量比為1.6-4∶1，氯芐與8-乙?；￠藜t堿的摩爾比為1-4∶1，反應(yīng)溫度為50-80℃，反應(yīng)時(shí)間不少于6h，反應(yīng)完畢后抽濾，濾液減壓蒸餾，硅膠柱純化，得13-芐基小檗紅堿；4)13-(2’，4’-二硝基)芐基小檗紅堿的制備將8-乙?；￠藜t堿用甲醇溶解，8-乙?；￠藜t堿在甲醇中的濃度不高于0.025g/mL，加入催化劑溴化鈉或溴化鉀和2，4-二硝基氯化芐進(jìn)行反應(yīng)，所述的催化劑與8-乙?；￠藜t堿的質(zhì)量比為1.6-4∶1，2，4-二硝基氯化芐與小檗堿的摩爾比為1-4∶1，反應(yīng)溫度為50-80℃，反應(yīng)時(shí)間不少于10h，反應(yīng)完畢后抽濾，濾液減壓蒸餾，硅膠柱純化，得13-(2’，4’-二硝基)芐基小檗紅堿。
全文摘要
本發(fā)明提供了小檗堿13位衍生物和小檗紅堿13位衍生物的合成方法。所制得的衍生物13-芐基小檗堿、13-(2’，4’-二硝基)芐基小檗堿、13-芐基小檗紅堿和13-(2’，4’-二硝基)芐基小檗紅堿顯示出了優(yōu)異的抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的作用，小檗堿的最低抑菌濃度即MIC值為64μg/mL，小檗紅堿的MIC值大于128μg/mL，13-芐基小檗堿的MIC值為32μg/mL，13-(2’，4’-二硝基)芐基小檗堿的MIC值為16μg/mL，13-芐基小檗紅堿的MIC值為32μg/mL，13-(2’，4’-二硝基)芐基小檗紅堿為8μg/mL。所合成的衍生物表現(xiàn)出比其母體更好的抗菌活性，可作為抗菌藥的原料。
文檔編號(hào)C07D455/03GK101665491SQ20091006754
公開(kāi)日2010年3月10日 申請(qǐng)日期2009年9月17日 優(yōu)先權(quán)日2009年9月17日
發(fā)明者龍 張, 王道武, 凱 邵 申請(qǐng)人:長(zhǎng)春工業(yè)大學(xué)