專利名稱：：一種制備黃芪甲苷的生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于中藥有效成分的提取制備方法，具體是一種制備黃芪甲苷的生產(chǎn)方法。(二)現(xiàn)有技術(shù)黃芪(耆)素以"補(bǔ)氣諸藥之最"著稱，是一種名貴的中藥材，也是一種最常用中藥材?！吨袊?guó)藥典》收載的黃芪為豆科植物蒙古黃芪或膜莢黃芪的干燥根。黃芪性微溫，味甘，有補(bǔ)氣固表、止汗脫毒、生肌、利尿、退腫之功效。用于治療氣虛乏力，中氣下陷，久瀉脫肛，便血崩漏，表虛自汗，癰疽難潰，久潰不斂，血虛萎黃，內(nèi)熱消渴，慢性腎炎，蛋白尿，糖尿病等。炙黃芪益氣補(bǔ)中，生用固表托瘡。目前從黃芪根中已分離鑒定出數(shù)十種黃芪皂苷，如乙酰黃芪皂苷1，黃芪皂苷1、II，黃芪皂苷i-vn，黃芪皂苷乙，綿毛黃芪皂苷1-XVI，其中黃芪甲苷IV是藥用黃芪中主要有效成分之一。黃芪中皂苷含量較低(以黃芪甲苷計(jì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.04%-0.30%)，黃芪中皂苷含量較低，種類雜而結(jié)構(gòu)相近，提取分離比較困難。黃芪皂苷類化合物的分離，傳統(tǒng)方法多先以醇類溶劑(如乙醇或甲醇等)提取，然后以正丁醇萃取，如果要分離皂苷單體，可將萃取物進(jìn)行硅膠柱層析。黃芪皂苷極性較弱，主要靠夾帶劑帶出或向初皂苷內(nèi)加入乙酸乙酯處理后，用甲醇重結(jié)晶即得黃芪甲苷。上述傳統(tǒng)工藝在實(shí)際生產(chǎn)中存在著較多不足。首先是有效成分損失嚴(yán)重，有效成分本來(lái)含量就很低，再經(jīng)溶劑沉淀、萃取等除雜工藝，這些成分可能全部被除去；另外，由于雜質(zhì)沉淀時(shí)的吸附和包埋等因素，也造成了有效成分較大的損失。其次除雜效果不理想，中藥提取液中的鞣質(zhì)、淀粉、樹(shù)脂和蛋白等物質(zhì)，用傳統(tǒng)方法很難除盡；再就是某些傳統(tǒng)分離方法過(guò)分強(qiáng)調(diào)單個(gè)組分，使中藥失去了原有的復(fù)方特色，影響藥效。而在濃縮過(guò)程中主要存在著濃縮溫度高，濃縮時(shí)間長(zhǎng)，有效成分損失嚴(yán)重，一步濃縮難以實(shí)現(xiàn)高相對(duì)密度的質(zhì)量要求，設(shè)備易結(jié)垢等問(wèn)題。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的就是對(duì)現(xiàn)有制備方法中存在的問(wèn)題進(jìn)行改進(jìn)，提出一種生產(chǎn)周期短，生產(chǎn)成本及能耗低，能最大限度地保留有效成分的一種制備黃芪甲苷的生產(chǎn)方法。本發(fā)明包括下述步驟1.—種制備黃芪甲苷的生產(chǎn)方法，其特征在于包括下述步驟a.黃芪提取液的制備先將黃芪藥材平均加至由A、B、C三個(gè)提取罐組成的動(dòng)態(tài)逆流提取機(jī)組內(nèi)，提取溫度5(TC-e(TC，以藥材重量6-8倍量的60%_80%的乙醇為提取溶劑，在梯度形成階段，A罐首次提取時(shí)間為30min，溶劑轉(zhuǎn)入B罐后在B罐中提取時(shí)間為40min;A罐中加入提取溶劑后再提取40min;在提取階段，各罐提取時(shí)間為1.5h;在提取結(jié)束階段，提取時(shí)間為2.0h，結(jié)束后將各罐提取液合并，即得；b.提取液固液分離采用離心機(jī)對(duì)上述提取液進(jìn)行高速離心，收集上清液；c.微濾分離采用膜孔徑為0.05um0.2um的陶瓷膜機(jī)組對(duì)上述離心液進(jìn)行微濾分離處理，其中機(jī)組的組合方式為四并兩串式，每根膜管里裝0.05um0.2咖膜芯61根，共488根；微3濾后，以水對(duì)截留液頂洗三次，頂洗溫度305(TC，頂洗壓力1.02.0bar，得微濾液；d.超濾分離上述微濾液以超濾膜組進(jìn)行超濾，用5-8根膜管并聯(lián)，其中每根超濾膜膜管裝50000分子量膜芯4根，共計(jì)20-32根膜芯，總膜面積800-1000平方米；超濾溫度3545t:，跨膜壓力0.61.OMpa，超濾結(jié)束后以超濾液2倍量的60%80%乙醇頂洗三次，頂洗溫度3050。C、頂洗壓力6.010.Obar，得超濾液；e.納濾濃縮采用膜型號(hào)為200分子量的納濾膜機(jī)組對(duì)上述超濾液進(jìn)行濃縮處理，其中機(jī)組的組合方式為58根納濾膜管并聯(lián)，每根納濾膜膜管中裝200分子量膜芯4根，共計(jì)2032根膜芯，總膜面積8001000平方米，得截留液；f.將截留液干燥，干燥溫度6(TC以下，干燥物水份《5.0%，干燥物即為黃芪甲苷有效成分富集物。所述的陶瓷膜為A1203陶瓷膜。所述的超濾膜為聚偏氟乙烯超濾膜。所述的納濾膜為聚酰胺納濾膜。所述的對(duì)納濾截留物的干燥方法為噴霧干燥、冷凍干燥、微波真空低溫干燥或帶式真空減壓干燥中的任意一種。由于黃芪提取液中含有較多的固體和高相對(duì)分子質(zhì)量的雜質(zhì)，直接用超濾技術(shù)分離會(huì)造成膜的嚴(yán)重污染，降低膜的使用壽命，因而藥液的預(yù)處理是保證分離和質(zhì)量的關(guān)鍵，并能延長(zhǎng)膜的使用壽命。預(yù)處理主要包括固液分離、微濾分離等。微濾分離處理主要去除黃芪提取液中的一些細(xì)菌、懸浮顆粒和膠體類物質(zhì)。超濾膜一般是不對(duì)稱膜，由致密的皮層和多孔的支撐層構(gòu)成，皮層上微孔的孔徑小至20150A，而支撐層空隙大于150A。這種膜結(jié)構(gòu)使得液體在分離過(guò)程中大分子溶質(zhì)的微粒隨溶液切向流經(jīng)膜表面時(shí)，由于液體的快速流動(dòng)使得這些物質(zhì)既不能進(jìn)入致密細(xì)孔、引起膜的內(nèi)堵塞，也不能停留在膜表面上而形成表面的堵塞。而小分子物質(zhì)和溶劑則在壓力驅(qū)動(dòng)下穿過(guò)致密層上的微孔后，即能順利穿過(guò)下部的疏松支撐層，進(jìn)入膜的另一側(cè)，從而使超濾膜在長(zhǎng)期連續(xù)運(yùn)行中保持較恒定的分離效果。在中藥有效成分超濾膜分離過(guò)程中，根據(jù)有效成分相對(duì)分子質(zhì)量大小選擇適當(dāng)孔徑的濾膜，是保證分離效果最重要的一環(huán)。膜的孔徑或截留分子量的選擇雖然主要是根據(jù)被分離物質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量，但物質(zhì)分子的實(shí)際尺寸還與物質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)、物質(zhì)的聚集狀態(tài)及物質(zhì)的柔韌性等有關(guān)。由于中藥的粘度較大，高分子膠體物質(zhì)較多，膜污染較嚴(yán)重，因此一般情況下，膜的截留分子量應(yīng)選擇稍大些，在本工藝中，黃芪提取液是用60%-80%乙醇提取而得，其有效成分的相對(duì)分子量一般在100050000之間，pH值48，根據(jù)以上理化性質(zhì)，因此選用分子量為50000的聚偏氟乙烯超濾膜進(jìn)行超濾分離。本工藝與傳統(tǒng)工藝的區(qū)別是采用罐組逆流式提取技術(shù)制備黃芪提取液，利用強(qiáng)制循環(huán)，加快了溶劑與物料擴(kuò)散界面層的相對(duì)運(yùn)動(dòng)，溶劑與物料間界面層更新快，使有效成分浸出速度快，有效成分得率和提取效率高。再以具有選擇透過(guò)性的膜為分離介質(zhì)，在壓力差的作用下，物料中不同分子量的成分依據(jù)濾膜孔徑的大小或通過(guò)或被截留，達(dá)到分離、濃縮的目的，它實(shí)現(xiàn)了中藥有效部位的分離，充分保留了中藥的藥效。本發(fā)明分離濃縮過(guò)程中無(wú)相變，有利于保存黃芪有效成分的理化特性，且超濾、納濾技術(shù)的應(yīng)用會(huì)盡量多地保留黃芪甲苷有效成分，使產(chǎn)品質(zhì)量得到較大提高。由于不耗用有機(jī)溶劑，與傳統(tǒng)方法相比，膜分離濃縮技術(shù)可減少工序，縮短生產(chǎn)周期，降低生產(chǎn)成本，且整個(gè)工藝可連續(xù)進(jìn)行，利于大規(guī)模生產(chǎn)。下表是現(xiàn)有技術(shù)與本發(fā)明方法在濃縮時(shí)間和有效成分損失率方面的對(duì)比情況表1<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>從表1中可看出，納濾濃縮溫度低，時(shí)間短，有效成分損失率大大低于真空濃縮。本發(fā)明所制得的黃芪甲苷其質(zhì)量指標(biāo)如下1、性狀棕黃色粉末，無(wú)臭。2、鑒別①取本品用甲醇制成1%溶液，點(diǎn)于硅膠G板，氯仿/甲醇/水=65:35:10或30:10:l下層展開(kāi)，噴5%磷鉬酸，150"顯色，與黃芪甲苷對(duì)照液相應(yīng)位置，顯相同的棕褐色斑點(diǎn)；再置于365nm紫外燈下檢測(cè)，顯相同的橙黃色熒光斑點(diǎn)，則為正品；②HPLC檢查，指紋圖譜與黃芪提取物對(duì)照品指紋圖譜吻合。3、檢查①干燥失重《5%;②灰分《3%;③重金屬《10mg/kg;農(nóng)殘《2mg/kg;⑤溶劑殘留《0.5%。4、含量測(cè)定黃芪甲苷含量>10.0%。HPLC條件如下固定相TSKgel0DS-120A(150X4)mm;流動(dòng)相水/乙腈=2:1;流速1.0ml/min;檢測(cè)波長(zhǎng):200nm;柱溫:50。C5、衛(wèi)生檢查①細(xì)菌總數(shù)《1000/g;②霉菌總數(shù)《100/g;③大腸桿菌、沙門菌無(wú)。6、粒度100%通過(guò)80目篩具體實(shí)施例方式實(shí)施例1a.黃芪提取液的制備先將黃芪藥材平均加至由A、B、C三個(gè)提取罐組成的動(dòng)態(tài)逆流提取機(jī)組內(nèi)，提取溫度5(TC，以藥材重量6倍量的60X的乙醇為提取溶劑，在梯度形成階段，A罐首次提取時(shí)間為30min，溶劑轉(zhuǎn)入B罐后在B罐中提取時(shí)間為40min;A罐中加入提取溶劑后再提取40min;在提取階段，各罐提取時(shí)間為1.5h;在提取結(jié)束階段，提取時(shí)間為2.Oh，結(jié)束后將各罐提取液合并，即得；b.提取液固液分離將上述提取液采用阿法拉伐碟片式離心機(jī)進(jìn)行固液分離，轉(zhuǎn)速為600012000r/min，每次離心時(shí)間為2-10分鐘，收集上清液；離心后的沉淀直接排掉。離心后的黃芪提取液要求澄清透明。c.微濾分離采用膜孔徑為0.2um、膜材質(zhì)為AL203的陶瓷膜機(jī)組進(jìn)行微濾分離處理，其中機(jī)組的組合方式為四并兩串式，即四組并聯(lián)，每組又由兩根膜管串聯(lián)組成，每根膜管里裝0.2um膜芯61根，共488根；微濾后，以水對(duì)截留液頂洗三次，頂洗溫度305(TC，頂洗壓力1.02.Obar，得微濾液;d.超濾分離以聚偏氟乙烯的超濾膜組對(duì)上述微濾液進(jìn)行超濾，用8根膜管并聯(lián)，其中每根超濾膜膜管裝50000分子量膜芯4根，共計(jì)32根膜芯，總膜面積1000平方米；超濾溫度35t:，跨膜壓力6.Obar，超濾結(jié)束后以超濾液2倍量的60%80%乙醇頂洗三次，頂洗溫度305(TC、頂洗壓力6.010.Obar，得超濾液；e.納濾濃縮上述超濾液采用膜型號(hào)為200分子量、膜材質(zhì)為聚酰胺的納濾膜機(jī)組進(jìn)行濃縮處理，其中機(jī)組的組合方式為5根納濾膜管并聯(lián)，每根納濾膜膜管中裝200分子量膜芯4根，共計(jì)20根膜芯，總膜面積800平方米，得截留液；f.將截留液噴霧干燥，干燥溫度6(TC以下，干燥物水份《5.0%，干燥物即為黃芪甲苷有效成分富集物。實(shí)施例21、黃芪藥材逆流提取溫度為60°C，以藥材重量8倍量的80%乙醇為提取溶劑；2、采用膜孔徑為0.05um、膜材質(zhì)為AL203的陶瓷膜機(jī)組進(jìn)行微濾分離處理；3、采用5根超濾膜管并聯(lián)，每根膜管內(nèi)裝50000分子量膜芯4根，共計(jì)20根膜芯，總膜面積800平方米；超濾溫度45t:，跨膜壓力10.Obar;4、以8根納濾膜管并聯(lián)，每根膜管中裝200分子量膜芯4根，共計(jì)32根，總膜面積1000平方米。5、將納濾截留液冷凍干燥。其余操作步驟及工藝條件均同實(shí)施例1。實(shí)施例31、采用膜孔徑為0.lum、膜材質(zhì)為AL203的陶瓷膜機(jī)組進(jìn)行微濾分離處理；2、將納濾截留液真空減壓干燥。其余操作步驟及工藝條件均同實(shí)施例1。實(shí)施例41、采用膜孔徑為0.8um、膜材質(zhì)為AL203的陶瓷膜機(jī)組進(jìn)行微濾分離處理；2、將納濾截留液微波真空低溫干燥。其余操作步驟及工藝條件均同實(shí)施例1。權(quán)利要求一種制備黃芪甲苷的生產(chǎn)方法，其特征在于包括下述步驟a.黃芪提取液的制備先將黃芪藥材平均加至由A、B、C三個(gè)提取罐組成的動(dòng)態(tài)逆流提取機(jī)組內(nèi)，提取溫度50℃-60℃，以藥材重量6-8倍量的60％-80％的乙醇為提取溶劑，在梯度形成階段，A罐首次提取時(shí)間為30min，溶劑轉(zhuǎn)入B罐后在B罐中提取時(shí)間為40min；A罐中加入提取溶劑后再提取40min；在提取階段，各罐提取時(shí)間為1.5h；在提取結(jié)束階段，提取時(shí)間為2.0h，結(jié)束后將各罐提取液合并，即得；b.提取液固液分離采用離心機(jī)對(duì)上述提取液進(jìn)行高速離心，收集上清液；c.微濾分離采用膜孔徑為0.05um～0.2um的陶瓷膜機(jī)組對(duì)上述離心液進(jìn)行微濾分離處理，其中機(jī)組的組合方式為四并兩串式，每根膜管里裝0.05um～0.2um膜芯61根，共488根；微濾后，以水對(duì)截留液頂洗三次，頂洗溫度30～50℃，頂洗壓力1.0～2.0bar，得微濾液；d.超濾分離上述微濾液以超濾膜組進(jìn)行超濾，用5-8根膜管并聯(lián)，其中每根超濾膜膜管裝50000分子量膜芯4根，共計(jì)20-32根膜芯，總膜面積800-1000平方米；超濾溫度35～45℃，跨膜壓力6.0～10.0bar，超濾結(jié)束后以超濾液2倍量的60％～80％乙醇頂洗三次，頂洗溫度30～50℃、頂洗壓力6.0～10.0bar，得超濾液；e.納濾濃縮采用膜型號(hào)為200分子量的納濾膜機(jī)組對(duì)上述超濾液進(jìn)行濃縮處理，其中機(jī)組的組合方式為5～8根納濾膜管并聯(lián)，每根納濾膜膜管中裝200分子量膜芯4根，共計(jì)20～32根膜芯，總膜面積800～1000平方米，得截留液；f.將截留液干燥，干燥溫度60℃以下，干燥物水份≤5.0％，干燥物即為黃芪甲苷有效成分富集物。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種制備黃芪甲苷的生產(chǎn)方法，其特征在于所述的陶瓷膜為A1A陶瓷膜。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種制備黃芪甲苷的生產(chǎn)方法，其特征在于所述的超濾膜為聚偏氟乙烯超濾膜。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種制備黃芪甲苷的生產(chǎn)方法，其特征在于所述的納濾膜為聚酰胺納濾膜。5.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3或4所述的一種制備黃芪甲苷的生產(chǎn)方法，其特征在于所述的對(duì)納濾截留物的干燥方法為噴霧干燥、冷凍干燥、微波真空低溫干燥或帶式真空減壓干燥中的任意一種。全文摘要一種制備黃芪甲苷的生產(chǎn)方法，包括采用罐組逆流式提取技術(shù)制備黃芪提取液，再采用離心機(jī)對(duì)提取液進(jìn)行高速離心，收集上清液，選用相應(yīng)的微濾膜和超濾膜進(jìn)行微濾、超濾分離，分離液以納濾膜機(jī)組進(jìn)行納濾濃縮，得截留液；將截留液干燥，干燥物即為黃芪甲苷有效成分富集物；本發(fā)明采用組逆流式提取技術(shù)制備黃芪提取液，使有效成分浸出速率快，提取效率高，再以具有選擇透過(guò)性的膜為分離介質(zhì)，實(shí)現(xiàn)了中藥有效成分的分離，由于不耗用有機(jī)溶劑，與傳統(tǒng)方法相比，膜分離濃縮技術(shù)可減少工序，縮短生產(chǎn)周期，降低生產(chǎn)成本，且整個(gè)工藝可連續(xù)進(jìn)行，利于大規(guī)模生產(chǎn)。文檔編號(hào)C07J53/00GK101781354SQ20091006058公開(kāi)日2010年7月21日申請(qǐng)日期2009年1月16日優(yōu)先權(quán)日2009年1月16日發(fā)明者余達(dá)焱,劉世龍,劉源才,張帆,楊躍軍,趙國(guó)鋒,陳凱申請(qǐng)人:勁牌有限公司