一種茄果類蔬菜專用的生物有機(jī)肥的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種茄果類蔬菜專用生物有機(jī)肥，其通過將粉碎的秸稈與牛糞或雞糞作為發(fā)酵有機(jī)物料，添加5‰比例的有機(jī)物料腐熟劑并加適量的水，與有機(jī)物料均勻混合，控制含水量為60％左右，自然室外溫度下發(fā)酵腐熟5?10天形成初肥。再添加各類營(yíng)養(yǎng)元素與發(fā)酵物料混合均勻后，添加4‰比例的促生長(zhǎng)復(fù)合菌劑均勻混合后造?；虺煞郢@得的生物肥料。本發(fā)明解決了單純施用化肥、普通有機(jī)肥、農(nóng)家肥以及純微生物菌肥所存在的種種弊端，并充分結(jié)合了茄果類蔬菜各個(gè)時(shí)期的生長(zhǎng)特點(diǎn)及對(duì)養(yǎng)分的需求，注意調(diào)節(jié)其營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)與生殖生長(zhǎng)的矛盾，是一種尤其適用于茄果類蔬菜生長(zhǎng)、高效、優(yōu)質(zhì)的生物有機(jī)菌肥。在茄果類蔬菜生產(chǎn)種植方面具有較大的應(yīng)用前景。
【專利說明】
一種茄果類蔬菜專用的生物有機(jī)肥的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及一種生物有機(jī)肥及其制備方法，尤其適用于茄果類蔬菜，屬于農(nóng)業(yè)生 物有機(jī)肥制備的技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 目前我國(guó)化肥年使用量在一億三千萬(wàn)噸左右，廣大農(nóng)民一直以來(lái)都是使用化肥， 然而長(zhǎng)期使用化肥產(chǎn)生的弊端隨之而來(lái)，土地板結(jié)、化學(xué)元素殘留、環(huán)境污染等等一系列問 題浮出水面?；室呀?jīng)不能滿足可持續(xù)發(fā)展的需要，更不能成為綠色農(nóng)業(yè)的支柱，各國(guó)都在 尋找對(duì)策。生物有機(jī)肥就此而誕生，成為化肥的第二次革命，生物有機(jī)菌肥是農(nóng)業(yè)發(fā)展最有 希望、最有前途的不可替代的產(chǎn)品。中央電視二臺(tái)已對(duì)其作了大量的介紹和報(bào)道，目前正由 國(guó)家科委牽頭，國(guó)家技術(shù)監(jiān)督局參與進(jìn)行，而對(duì)這樣的情況如何擴(kuò)大產(chǎn)量，如何盡快將它推 廣到世界各地，造福人類是擺在我們面前的重要問題。生物有機(jī)肥是指特定功能微生物與 主要以動(dòng)植物殘?bào)w(如畜禽糞便、農(nóng)作物秸桿等)為來(lái)源并經(jīng)無(wú)害化處理、腐熟的有機(jī)物料 復(fù)合而成的一類兼具微生物肥料和有機(jī)肥效應(yīng)的肥料。
[0003] 而茄果類蔬菜是一類以食用鮮嫩果實(shí)為主、生長(zhǎng)周期相對(duì)較長(zhǎng)的蔬菜，主要包括 番茄、茄子、辣椒等。這類蔬菜共同特點(diǎn)是邊現(xiàn)蕾，邊開花，邊結(jié)果。因此在生產(chǎn)上要注意調(diào) 節(jié)其營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)與生殖生長(zhǎng)的矛盾，才能獲得好收成。茄果類蔬菜在幼苗期需要N肥多一些， 到成苗時(shí)對(duì)N、P的需求量要相對(duì)多些，這時(shí)氮肥一定不要過多否則會(huì)過于長(zhǎng)枝葉，花期需要 P肥多些，可促進(jìn)開更多的花，收獲更多的果實(shí)。茄果類蔬菜的花芽分化都是在苗床上進(jìn)行 的，所以育苗土要求全營(yíng)養(yǎng)，一定要有豐富的氮、磷、鉀和有機(jī)質(zhì)，還要有適當(dāng)?shù)闹形⒘吭?素。同時(shí)由于它們生長(zhǎng)期長(zhǎng)，所以要求養(yǎng)分釋放期長(zhǎng)，以免后期脫肥。要解決上述問題就要 改變現(xiàn)有的生產(chǎn)模式，從而使養(yǎng)分釋放符合茄果類蔬菜養(yǎng)分吸收要求。隨著科學(xué)的發(fā)展，生 物有機(jī)肥在農(nóng)業(yè)中的作用漸漸顯露出來(lái)。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004] 本發(fā)明所要解決的問題是避免單純施用化肥、普通有機(jī)肥、農(nóng)家肥以及純微生物 菌肥所存在的種種弊端，利用微生物技術(shù)，選配具有特定腐熟功能的菌種制成菌劑，用此菌 劑將固體有機(jī)物料發(fā)酵成初肥，再按適宜的比例添加各類營(yíng)養(yǎng)元素，再配以各類營(yíng)養(yǎng)元素 及功效相應(yīng)的促進(jìn)茄果類蔬菜生長(zhǎng)的復(fù)合菌劑所制成的生物有機(jī)肥，并將其應(yīng)用于茄果類 蔬菜作物的種植中。通過各菌種之間的相互作用，起到刺激植物生長(zhǎng)、緩解土地板結(jié)、改良 土壤生態(tài)環(huán)境、防病抗病等作用，從而達(dá)到增產(chǎn)、高產(chǎn)的目的。
[0005] 本發(fā)明產(chǎn)品所選用腐熟菌劑，其采用枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis) CICC10088,米曲霉（Aspergillus niger)CICC2436,白腐菌（Phanerochaete chrysosporium)ACCC30414等具有特殊腐熟功效的菌種，按適當(dāng)?shù)谋壤龔?fù)合發(fā)酵而成的微 生物菌劑。所選用各菌種均能夠產(chǎn)生纖維素酶、木質(zhì)素酶、半纖維素酶、蠟質(zhì)素酶、果膠酶等 多種生物酶，通過中溫菌和耐高溫菌的協(xié)同作用，快速將各類廢棄的有機(jī)物料發(fā)酵腐熟成 肥料，變廢為寶，節(jié)省資源，大大減少了環(huán)境污染。
[0006] 本發(fā)明所選用茄果類專用的促生長(zhǎng)復(fù)合菌劑，其含有大量的對(duì)茄果類蔬菜生長(zhǎng)發(fā) 育有特殊功效的有益微生物，其采用膠質(zhì)芽孢桿菌（Baci Ilus muci laginosus)CGMCC 1.153,褐色球形固氣菌（Azotobacter chroococcum)CGMCC 1.142,巨大芽抱桿菌 (Bacillus megaterium)ACCC 10010,枯草芽抱桿菌（Bacillus subtilis)ACCC 01183等菌 種發(fā)酵液混合后作為混合菌劑，經(jīng)再次發(fā)酵而制備的微生物復(fù)合菌劑。本發(fā)明選取各菌種 是經(jīng)查閱大量的文獻(xiàn)資料，進(jìn)行研究總結(jié)，根據(jù)實(shí)際要求選擇幾種針對(duì)茄果類蔬菜生長(zhǎng)發(fā) 育有特殊功效的有益微生物，然后通過實(shí)際反復(fù)實(shí)驗(yàn)，最后確定各微生物的最佳比例，從而 保證茄果類蔬菜各階段的營(yíng)養(yǎng)需求。
[0007] 具體的本發(fā)明所述茄果類蔬菜專用的生物有機(jī)肥的制備方法，該方法包括如下步 驟：
[0008] (一)有機(jī)物料腐熟劑的制備
[0009] 將菌種數(shù)量分別達(dá)到IO8個(gè)/mL以上的枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis) CICC10088,米曲霉（Aspergillus niger)CICC2436,白腐菌（Phanerochaete chrysosporium)ACCC30414的菌種發(fā)酵液按1.5~2.0:0.8~1.3:0.8~1.3的比例混合均勾 后，接種于盛有復(fù)合菌劑培養(yǎng)基A的發(fā)酵罐中，接種量為復(fù)合菌劑培養(yǎng)基A總體積的5%，復(fù) 合菌劑培養(yǎng)基A的pH 6.0~8.0，30°C下培養(yǎng)4~7天，使發(fā)酵液中總菌數(shù)達(dá)到IO8個(gè)/mL，即得 到有機(jī)物料腐熟劑；
[0010] 所述復(fù)合菌劑培養(yǎng)基A配方為：玉米面0.5~1.5g/L、玉米秸桿粉15~17g/L、麩皮 0 · 2~0 · 4g/L、_a餅粉0 · 2~0 · 4g/L、4mL/100mL Vogel ' s母液，pH值6 · 0~8 · 0;
[0011] 步驟(一)的具體制備過程為：
[0012] 1.菌種活化:將所述各菌種接于斜面培養(yǎng)基上;枯草芽孢桿菌28~32°C，pH為7.2 ~7.4,培養(yǎng)時(shí)間為1~3天;米曲霉培養(yǎng)溫度25~28°C，pH為6.0~6.5,培養(yǎng)時(shí)間為4~7天； 白腐菌培養(yǎng)溫度25~28°C，培養(yǎng)時(shí)間為4~7天；
[0013] 2.-級(jí)菌種培養(yǎng):將所述菌種分別接種于盛有液體培養(yǎng)基的50mL錐形瓶中，培養(yǎng) 基pH為6.0~8.0，錐形瓶放入搖床振蕩培養(yǎng)，溫度為30°C，振蕩24~48h;采用血球計(jì)數(shù)板計(jì) 數(shù)，菌液中菌種數(shù)量分別達(dá)到IO8個(gè)/mL;
[0014] 3.二級(jí)發(fā)酵:將所述菌種分別接種于盛有液體培養(yǎng)基的1000 mL錐形瓶中，培養(yǎng)基 pH6.0~8.0，放入搖床振蕩，溫度為30°C，振蕩48~72h;從而獲得菌種數(shù)量分別達(dá)到IO8個(gè)/ mL以上的枯草芽抱桿菌（BacilIus subtiIis)CICC10088，米曲霉（AspergilIus niger) CICC2436，白腐菌（Phanerochaete chrysosporium)ACCC30414。
[0015] 所述斜面培養(yǎng)基配方為：
[0016] 1.枯草芽孢桿菌采用的斜面培養(yǎng)基配方為:牛肉浸液1.0L，蛋白胨IOg，NaC15.Og， 瓊脂20.0-20.5g，PH7.2-7.4，牛肉浸液的制備：瘦牛肉洗凈，切碎，稱取550g浸泡于1375mL 水中，浸泡一夜，過濾，過濾分裝后〇.6kgf/cm2 40min備用。
[0017] 2.米曲霉采用的斜面培養(yǎng)基配方為：5 OBe麥芽汁瓊脂，5 OBe麥芽汁1.0L，瓊脂 15 .OgdSPH0
[0018] 3.白腐菌的斜面培養(yǎng)基配方為:PDA培養(yǎng)基，取去皮的馬鈴薯200克，切成小塊，加 水1000毫升煮沸30分鐘濾去馬鈴薯塊，將濾液補(bǔ)足至1000毫升，加葡萄糖20克，瓊脂15克， 溶化后分裝，15鎊滅菌30分鐘；自然PH。
[0019]所述液體培養(yǎng)基為斜面培養(yǎng)基不加瓊脂即可。
[0020](二)混拌、發(fā)酵
[0021] 將步驟(一）制備好的有機(jī)物料腐熟劑按發(fā)酵物料總質(zhì)量的5%。比例混合，再兌入 適量的水，使總水分控制在60 %左右，在發(fā)酵池經(jīng)過5-10天發(fā)酵，即制得初肥；
[0022] 所述發(fā)酵具體為:將混合攪拌均勻的發(fā)酵物料放進(jìn)發(fā)酵設(shè)施，壓實(shí)填滿排去空氣， 發(fā)酵池頂部覆蓋一層塑料薄膜，上蓋密封發(fā)酵、適時(shí)翻垛，翻堆時(shí)補(bǔ)充水分，將總水分控制 在60%左右，原料手握成團(tuán)，指縫有水但不滴，而松手即散為好。
[0023] 在優(yōu)選的技術(shù)方案中，步驟(二）的發(fā)酵時(shí)間是指:一般夏天4-5天，春秋6-7天，冬 季10天。
[0024](三)深加工
[0025] 將初肥進(jìn)行粉碎、烘干，按初肥質(zhì)量百分比，具體添加如下營(yíng)養(yǎng)元素：
[0026] 氮2.5~3.5%、磷0.8~1.5%、鉀5.0~7.0%;鈣1.5~2.0%、鎂 1.0~1.5% ;硼 0.05~0.1 %;腐植酸類肥料5.0~10.0%;
[0027] 優(yōu)選情況下，添加營(yíng)養(yǎng)元素的比例為：
[0028] a.大量元素(氮、磷、鉀)的添加比例:氮3.0%、磷1.1%、鉀6.0%;
[0029] b.中量元素(鈣、鎂)的添加比例:媽1.8%、鎂1 · 2% ;
[0030] c ·微量元素（硼）的添加比例：0 · 08% ;
[0031] d.腐植酸銨的添加比例:5.0%。
[0032] (四）茄果類蔬菜專用促生長(zhǎng)復(fù)合菌劑的制備
[0033] 將菌種數(shù)量分別達(dá)到IO8個(gè)/mL以上的膠質(zhì)芽孢桿菌(BaciIlus muciIaginosus) CGMCCl · 153，褐色球形固氣菌（Azotobacter chroococcum)CGMCC 1 · 142，巨大芽抱桿菌 (Bacillus megaterium)ACCC 10010,枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis)ACCC 01183的菌 種發(fā)酵液，按(30~40% ): (10~20% ): (30~40% ): (5~10% )的比例混合均勻后作為混合 菌劑，接種于盛有復(fù)合菌劑培養(yǎng)基B的發(fā)酵罐中，接種量為復(fù)合菌劑培養(yǎng)基B總體積的5%， 復(fù)合菌劑培養(yǎng)基B的pH 6.5~7.5，30°C下培養(yǎng)4~7天，使發(fā)酵液中總菌數(shù)達(dá)到6~10 X IO8 個(gè)/mL，即得到茄果類蔬菜專用微生物復(fù)合菌劑，pH為6.8，總有效活菌數(shù)為9 X IO8個(gè)/mL; [0034] 所述復(fù)合菌劑培養(yǎng)基B的配方為：玉米粉15~18g/100mL、豆栢粉5~8g/100mL、酵 母膏0· 1 ~0.2g/100mL、KH2P04 0.2~2g/100mL、K2HP〇4 0.5~2g/100mL、MgS〇4 · 7H20 0.001~0.028/10011^、似(：10.5~0.88/10011^、（順4)2304 0.001~0.018/10011^，其余為蒸 餾水；
[0035]所述步驟（四）的具體過程如下：
[0036] 1.接種:將所述各菌種(膠質(zhì)芽孢桿菌、褐色球形固氮菌、巨大芽孢桿菌、枯草芽孢 桿菌)分別接于斜面培養(yǎng)基上;膠質(zhì)芽孢桿菌(鉀細(xì)菌)培養(yǎng)溫度25~35 °C，pH為7.5~8.0， 培養(yǎng)時(shí)間為5天;褐色球形固氮菌培養(yǎng)溫度25~30°C，pH為7.0~8.0，培養(yǎng)時(shí)間為5天；巨大 芽孢桿菌為27~37°C，pH為6.5~7.5，培養(yǎng)時(shí)間為4天;枯草芽孢桿菌培養(yǎng)溫度27~37°(：，？!1 為6.5~7.5,培養(yǎng)時(shí)間為4天；
[0037] 2.-級(jí)菌種培養(yǎng):將所述步驟1制備的菌種分別按接種環(huán)一環(huán)的量接種于盛有相 應(yīng)液體培養(yǎng)基的50mL錐形瓶中，培養(yǎng)基pH為6.5~7.5，錐形瓶放入搖床振蕩，溫度為30°C， 振蕩24~48h;采用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，菌液中菌種數(shù)量分別達(dá)到IO8個(gè)/mL;
[0038] 3.二級(jí)發(fā)酵:將所述步驟2制備的菌種分別按5%接種于盛有液體培養(yǎng)基的1000 mL 錐形瓶中，培養(yǎng)基pH 6.5~7.5，放入搖床振蕩，溫度為30°C，振蕩48~72h;使菌種數(shù)量分別 達(dá)到IO8個(gè)/mL以上，從而制得菌種數(shù)量分別達(dá)到IO8個(gè)/mL以上的膠質(zhì)芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus)CGMCC 1.153,褐色球形固氮菌（Azotobacter chroococcum)CGMCC 1.142， 巨大芽抱桿菌(Bacillus megaterium)ACCC 10010,枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis) ACCC 01183的菌種發(fā)酵液。
[0039]所述茄果類蔬菜微生物復(fù)合菌劑制備過程中用到的斜面培養(yǎng)基配方為：
[0040] 1.膠質(zhì)芽孢桿菌采用的斜面培養(yǎng)基配方為:KH2P04 0.06g、MgS04 · 7H20 0.05g、
[0041 ] CaS04 · 5H20 0.004g、蛋白胨5g、玉米楽_(50%干重）2.5g、乳糖 15g、NaCl 4g、蒸餾 水1000 mU瓊脂25g、pH 7.1;
[0042] 2.褐色球形固氮菌采用的斜面培養(yǎng)基配方為：KH2P04 0.2g、K2HP04 0.8g、 MgS04 · 7H20 0.2g、CaS04 · 2H20 0.1g、Na2Mo04 · 2H20微量、酵母膏0.5g、甘露醇20g、 FeC13微量、瓊脂 15g、蒸餾水1000 mUpH 7.2;
[0043] 3.巨大芽孢桿菌采用的斜面培養(yǎng)基配方為：牛肉膏3g、蛋白胨5g、瓊脂15g、NaCl 5g、蒸饋水 1000mL、pH 7.0;
[0044] 4.枯草芽孢桿菌采用的斜面培養(yǎng)基配方為:牛肉膏10g、蛋白胨10g、NaCl 5g、葡萄 糖 10g，瓊脂15g，蒸餾水1000 mUpH 7.0;
[0045] 所述液體培養(yǎng)基配方為斜面培養(yǎng)基不加瓊脂制得。
[0046](五）按步驟(三)深加工所獲得的發(fā)酵物料總質(zhì)量的3~5%。比例添加步驟（四）獲 得的茄果類蔬菜專用的促生長(zhǎng)復(fù)合菌劑獲得終產(chǎn)品，將物料混合均勻后，經(jīng)造粒機(jī)造?；?成粉，檢測(cè)合格后，包裝入庫(kù)。
[0047]對(duì)于上述技術(shù)方案，在優(yōu)選的情況下，步驟(一)所述復(fù)合菌劑培養(yǎng)基A配方為：玉 米面0 · 5g/L、玉米猜桿粉 15g/L、麩皮0 · 25g/L、豆餅粉0 · 25g/L、4mL/100mL Vogel ' s母液，pH 8.5〇
[0048]對(duì)于上述技術(shù)方案，在優(yōu)選的情況下，步驟（一）所述枯草芽孢桿菌（Bacillus subtil is )CICC10088，米曲霉（Aspergi Ilus n iger)CICC2436，白腐菌（Phanerochaete chrysosporium)ACCC30414的菌種發(fā)酵液按2:1:1的比例混合均勾。
[0049]對(duì)于上述技術(shù)方案，在優(yōu)選的情況下，步驟(二)所述發(fā)酵有機(jī)物料為粉碎的玉米 秸桿與動(dòng)物糞便按1~2:0.5~2質(zhì)量比混合，所述動(dòng)物糞便通常為雞糞或牛糞。
[0050] 對(duì)于上述技術(shù)方案，在優(yōu)選的情況下，步驟(三)所述復(fù)合菌劑培養(yǎng)基B的配方為： 玉米粉 16g/100mL、豆栢粉7g/100mL、酵母膏0· lg/100mL、KH2P04 lg/100mL、K2HP〇4lg/ 100mL、MgS〇4.7H20 0.01g/100mL、NaCl 0.6g/100mL、（NH4)2S〇4 0.01g/100mL，其余為蒸餾 水。
[0051] 本發(fā)明的技術(shù)方案是經(jīng)過近幾年的不懈努力，結(jié)合茄果類蔬菜各個(gè)時(shí)期的生長(zhǎng)特 點(diǎn)及對(duì)養(yǎng)分的需求，注意調(diào)節(jié)其營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)與生殖生長(zhǎng)的矛盾，最終研制出一種高效優(yōu)質(zhì)的 生物有機(jī)肥。其綜合運(yùn)用了微生物技術(shù)、化肥工業(yè)和農(nóng)業(yè)技術(shù)等最新成果，優(yōu)先制備了一種 高效的富含有機(jī)質(zhì)、N · P · K營(yíng)養(yǎng)元素和某些微量元素、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑等物質(zhì)有機(jī)結(jié)合起 來(lái)，由特定工藝最終形成了以有機(jī)質(zhì)為主體的營(yíng)養(yǎng)合理、N · P · K比例適當(dāng)?shù)念w粒狀營(yíng)養(yǎng) 源。該種肥料不僅具有高利用率、肥效期長(zhǎng)的優(yōu)點(diǎn)，而且具有改良土壤、提高農(nóng)作物品質(zhì)，增 強(qiáng)作物抗逆性，增加產(chǎn)量，減少污染，刺激作物生長(zhǎng)發(fā)育等特點(diǎn)，省時(shí)省工，具有良好的社會(huì) 效益和經(jīng)濟(jì)效益。
[0052]有益效果
[0053]本發(fā)明所述的茄果類蔬菜專用的生物有機(jī)肥是選用具有特定具有腐熟功能的菌 種制成菌劑，用此菌劑將有機(jī)固體物料發(fā)酵腐熟成初肥，再按適宜的比例添加大量元素 (氮、磷、鉀）、微量元素(鈣、鎂)及其他特殊物質(zhì)，再配以功效相應(yīng)的促進(jìn)茄果類蔬菜生長(zhǎng)的 菌劑所制成的肥料。腐熟劑中含有大量的枯草芽孢桿菌、米曲霉、白腐菌等菌種，能夠產(chǎn)生 纖維素酶、木質(zhì)素酶、半纖維素酶、蠟質(zhì)素酶、果膠酶等多種生物酶，通過中溫菌和耐高溫菌 的協(xié)同作用，快速將各類廢棄的固體有機(jī)物料發(fā)酵腐熟成肥料，變廢為寶，節(jié)省資源，大大 減少了環(huán)境污染;又添加各類營(yíng)養(yǎng)元素及茄果類蔬菜專用的促生長(zhǎng)菌劑，通過對(duì)茄果蔬菜 有特殊功效的有益微生物膠質(zhì)芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌及圓褐固氮菌等各 菌種之間的相互作用，起到刺激植物生長(zhǎng)、緩解土地板結(jié)、改良土壤生態(tài)環(huán)境、增加土壤的 腐殖質(zhì)及有益微生物菌群、防病抗病等作用，從而達(dá)到增產(chǎn)、高產(chǎn)的目的。
【具體實(shí)施方式】
[0054]本發(fā)明的下述非限制性實(shí)施例可以使本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員更全面地理解本發(fā) 明，但不以任何方式限制本發(fā)明。實(shí)施例中所用的生物材料均可以由商業(yè)途徑獲得。
[0055] 實(shí)施例一:茄果類蔬菜專用生物有機(jī)肥的制備
[0056] 本發(fā)明茄果類蔬菜專用的生物有機(jī)肥產(chǎn)品是指利用微生物技術(shù)，選配具有特定腐 熟功能的菌種制成菌劑，用此菌劑將有機(jī)固體物料發(fā)酵腐熟成初肥，再配以各種營(yíng)養(yǎng)元素 及茄果類蔬菜專用的促生長(zhǎng)復(fù)合菌劑所制成的生物肥料。其【具體實(shí)施方式】如下：
[0057](一)有機(jī)物料腐熟劑的制備
[0058]米用枯草芽抱桿菌（Baci I Ius subti I i s) CICC10088，米曲霉（Aspergi I Ius niger)CICC2436，白腐菌（Phanerochaete chrysosporium)ACCC30414等具有高效腐熟作用 的菌種按適當(dāng)?shù)谋壤龔?fù)合發(fā)酵而成的腐熟菌劑。
[0059] 1.菌種活化:將所述各菌種接于斜面培養(yǎng)基上;枯草芽孢桿菌28~32°C，pH為7.2 ~7.4,培養(yǎng)時(shí)間為1~3天;米曲霉培養(yǎng)溫度25~28°C，pH為6.0~6.5,培養(yǎng)時(shí)間為4~7天； 白腐菌培養(yǎng)溫度25~28°C，培養(yǎng)時(shí)間為4~7天；
[0060] 2.-級(jí)菌種培養(yǎng):將所述菌種分別接種于盛有液體培養(yǎng)基的50mL錐形瓶中，培養(yǎng) 基pH為6.0~8.0，錐形瓶放入搖床振蕩培養(yǎng)，溫度為30°C，振蕩24~48h;采用血球計(jì)數(shù)板計(jì) 數(shù)，菌液中菌種數(shù)量分別達(dá)到IO 8個(gè)/mL;
[0061] 3.二級(jí)發(fā)酵:將所述菌種分別接種于盛有液體培養(yǎng)基的1000 mL錐形瓶中，培養(yǎng)基 PH6.0~8.0,放入搖床振蕩，溫度為30°C，振蕩48~72h;使菌種數(shù)量分別達(dá)到IO8個(gè)/mL以 上，將各菌種按所述菌種的質(zhì)量百分比混合；
[0062] 4.三級(jí)發(fā)酵：分別將枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis)CICC10088,米曲霉 (Aspergillus niger)ClCC2436，白腐菌（Phanerochaete chrysosporium)ACCC30414的菌 種發(fā)酵液按2:1:1的比例混合均勻后，接種于盛有復(fù)合菌劑培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，復(fù)合菌劑培 養(yǎng)基pH 6.0~8.0，接種量為5 %，30 °C下培養(yǎng)4~7天，使發(fā)酵液中菌數(shù)達(dá)到IO8個(gè)/mL，即得 到有機(jī)物料秸桿腐熟劑。
[0063]所述斜面培養(yǎng)基配方為：
[0064] 1.枯草芽孢桿菌采用的斜面培養(yǎng)基配方為:普通瓊脂：牛肉浸液1.0L，蛋白胨10g， NaC15. Og，瓊脂20.0-20.5g，PH7.2-7.4，牛肉浸液的制備:瘦牛肉洗凈，切碎，稱取550g浸泡 于1375mL水中，浸泡一夜，過濾，過濾分裝后0.6kgf/cm240min備用。
[0065] 2.米曲霉采用的斜面培養(yǎng)基配方為：5 t3Be麥芽汁瓊脂，5 t3Be麥芽汁1.0L，瓊脂 15 .OgdSPH0
[0066] 3.白腐菌的斜面培養(yǎng)基配方為:PDA培養(yǎng)基，取去皮的馬鈴薯200克，切成小塊，加 水1000毫升煮沸30分鐘濾去馬鈴薯塊，將濾液補(bǔ)足至1000毫升，加葡萄糖20克，瓊脂15克， 溶化后分裝，15鎊滅菌30分鐘。自然PH。
[0067]所述液體培養(yǎng)基為斜面培養(yǎng)基不加瓊脂即可。
[0068]所述復(fù)合菌劑培養(yǎng)基配方為：玉米面0 · 5g/L、玉米秸桿粉15g/L、麩皮0 · 25g/L、豆 餅粉0·25g/L、4mL/100mL Vogel's母液，pH值8·5。
[0069](二)混拌、發(fā)酵
[0070]準(zhǔn)備500kg粉碎的玉米秸桿與500kg牛糞作為發(fā)酵的原始有機(jī)物料，將制備好的有 機(jī)物料腐熟劑按發(fā)酵物料總質(zhì)量的5%。兌入適量的水中，與有機(jī)物料均勻混拌，原料手握成 團(tuán)，指縫有水但不滴，而松手即散為好(總水分在60%左右）。將混合攪拌均勻的發(fā)酵物料放 進(jìn)發(fā)酵設(shè)施，壓實(shí)填滿排去空氣，發(fā)酵池頂部覆蓋一層塑料薄膜，上蓋密封發(fā)酵、適時(shí)翻垛， 翻堆時(shí)補(bǔ)充水分，將總水分控制在60 %左右。經(jīng)過10天發(fā)酵，即制得初肥。
[0071] (三)各類營(yíng)養(yǎng)元素的添加
[0072] 物料發(fā)酵完成后，按肥劑型要求進(jìn)行粉碎、烘干，而后添加各類營(yíng)養(yǎng)元素，包括大 量元素(氮、磷、鉀）、中量元素(鈣、鎂）、微量元素(硼），按發(fā)酵物料質(zhì)量計(jì)算，具體添加比例 如下：
[0073] a.大量元素(氮、磷、鉀)的添加比例:氮3.0%、磷1.1%、鉀6.0%;
[0074] b.中量元素(鈣、鎂)的添加比例:媽1.8%、鎂1.2% ;
[0075] c ·微量元素（硼）的添加比例:0 · 08% ;
[0076] d.腐植酸銨的添加比例:5.0%。
[0077] (四）茄果類蔬菜專用促生長(zhǎng)復(fù)合菌劑制備及添加
[0078] 米用膠質(zhì)芽抱桿菌（Bacillus mucilaginosus)CGMCC 1 · 153，褐色球形固氮菌 (Azotobacter chroococcum)CGMCC 1.142,巨大芽抱桿菌（Bacillus megaterium)ACCC 10010,枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)ACCC 01183等具有特殊功效的菌種發(fā)酵液混合 后作為混合菌劑，經(jīng)再次發(fā)酵而制備的微生物復(fù)合菌劑。
[0079] 所述的茄果類蔬菜微生物復(fù)合菌劑制備步驟如下：
[0080] 1.接種:將所述各菌種(膠質(zhì)芽孢桿菌、褐色球形固氮菌、巨大芽孢桿菌、枯草芽孢 桿菌)分別接于斜面培養(yǎng)基上;膠質(zhì)芽孢桿菌(鉀細(xì)菌)培養(yǎng)溫度25~35 °C，pH為7.5~8.0， 培養(yǎng)時(shí)間為5天;褐色球形固氮菌培養(yǎng)溫度25~30°C，pH為7.0~8.0，培養(yǎng)時(shí)間為5天；巨大 芽孢桿菌為27~37°C，pH為6.5~7.5，培養(yǎng)時(shí)間為4天;枯草芽孢桿菌培養(yǎng)溫度27~37°(：，？!1 為6.5~7.5,培養(yǎng)時(shí)間為4天；
[0081] 2.-級(jí)菌種培養(yǎng):將所述步驟1制備的菌種分別按接種環(huán)一環(huán)的量接種于盛有相 應(yīng)液體培養(yǎng)基的50mL錐形瓶中，培養(yǎng)基pH為6.5~7.5，錐形瓶放入搖床振蕩，溫度為30°C， 振蕩24~48h;采用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，菌液中菌種數(shù)量分別達(dá)到IO8個(gè)/mL;
[0082] 3.二級(jí)發(fā)酵:將所述步驟2制備的菌種分別按5%接種于盛有液體培養(yǎng)基的1000 mL 錐形瓶中，培養(yǎng)基pH 6.5~7.5，放入搖床振蕩，溫度為30°C，振蕩48~72h;使菌種數(shù)量分別 達(dá)到IO8個(gè)/mL以上，從而制得膠質(zhì)芽孢桿菌(鉀細(xì)菌)發(fā)酵液、褐色球形固氮菌發(fā)酵液、巨大 芽孢桿菌發(fā)酵液和枯草芽孢桿菌發(fā)酵液。
[0083] 將各菌種按質(zhì)量百分比混合后進(jìn)行再次發(fā)酵:膠質(zhì)芽孢桿菌(鉀細(xì)菌)發(fā)酵液30~ 40%、巨大芽孢桿菌發(fā)酵液30~40%、褐色球形固氮菌發(fā)酵液10~20%、枯草芽孢桿菌發(fā)酵 液5~10%，如表1常用配方表。
[0084] 表1.常用配方表
[0086] 4.三級(jí)發(fā)酵:將所述步驟3制備的混合后的菌液接種于盛有復(fù)合菌劑培養(yǎng)基的發(fā) 酵罐中，復(fù)合菌劑培養(yǎng)基pH 6.5~7.5,接種量為復(fù)合菌劑培養(yǎng)基總質(zhì)量的5%，30°C下培養(yǎng) 4~7天，使發(fā)酵液中菌數(shù)達(dá)到6~10 X IO8個(gè)/mL，即得到茄果類蔬菜專用微生物復(fù)合菌劑， pH為6.8，菌數(shù)含量均達(dá)到9 X IO8個(gè)/mL。
[0087] 所述斜面培養(yǎng)基配方為：
[0088] 1.膠質(zhì)芽孢桿菌采用的斜面培養(yǎng)基配方為:KH2P04 0.06g、MgS04 · 7H20 0.05g、
[0089] CaS04 · 5H20 0.004g、蛋白胨5g、玉米楽_(50%干重）2.5g、乳糖 15g、NaCl 4g、蒸餾 水1000 mU瓊脂25g、pH 7.1;
[0090] 2.褐色球形固氮菌采用的斜面培養(yǎng)基配方為：KH2P04 0.2g、K2HP04 0.8g、 MgS04 · 7H20 0.2g、CaS04 · 2H20 0.1g、Na2Mo04 · 2H20微量、酵母膏0.5g、甘露醇20g、 FeC13微量、瓊脂 15g、蒸餾水1000 mUpH 7.2;
[0091] 3.巨大芽孢桿菌采用的斜面培養(yǎng)基配方為：牛肉膏3g、蛋白胨5g、瓊脂15g、NaCl 5g、蒸饋水 1000mL、pH 7.0;
[0092] 4.枯草芽孢桿菌采用的斜面培養(yǎng)基配方為:牛肉膏10g、蛋白胨10g、NaCl 5g、葡萄 糖1(^，瓊脂158，蒸餾水100〇1111^4!17.0;
[0093] 所述液體培養(yǎng)基配方為斜面培養(yǎng)基不加瓊脂制得。
[0094]所述復(fù)合菌劑培養(yǎng)基配方為:玉米粉2~20g/100mL、豆栢粉1~10g/100mL、酵母膏 0.05~0.2g/100mL、KH2P04 0.2~2g/100mL、K2HP04 0.5~2g/100mL、MgS04.7H20 0.001 ~0·02g/100mL、NaCl 0·5~0·8g/100mL、（NH4)2S04 0·001 ~0·01g/100mL，其余為蒸餾水。 [0095]按發(fā)酵物料總質(zhì)量的4%。比例添加茄果類蔬菜專用的促生長(zhǎng)復(fù)合菌劑，再次混合 均勻。
[0096](五)造粒或成粉，檢測(cè)、包裝、入庫(kù)
[0097]將物料混合均勻后，經(jīng)造粒機(jī)造?；虺煞郏瑱z測(cè)合格后，包裝入庫(kù)。
[0098] 實(shí)施例二:茄果類蔬菜專用生物有機(jī)肥在番茄上的應(yīng)用效果
[0099] 采用本發(fā)明制備的茄果類蔬菜專用生物有機(jī)肥在番茄種植中應(yīng)用的效果試驗(yàn)： [0100] 1.試驗(yàn)材料與方法
[0101] 供試品種:金番一號(hào)
[0102] 試驗(yàn)方法:試驗(yàn)設(shè)置為兩組，采用隨機(jī)排列，分別三次重復(fù)，每個(gè)試驗(yàn)小區(qū)面積100 平方米。
[0103] 所述的兩組處理：
[0104] ①對(duì)照組，常規(guī)施肥;②試驗(yàn)組，嚴(yán)格按照生物有機(jī)物肥產(chǎn)品使用說明施用。
[0105] 經(jīng)實(shí)際調(diào)查，2015年番茄生育期自然條件較好，有利于番茄的生長(zhǎng)。
[0106] 2.本發(fā)明制備的茄果類蔬菜專用生物有機(jī)肥在番茄上的應(yīng)用試驗(yàn)結(jié)果見表1: [0107]表1.茄果類蔬菜專用生物有機(jī)肥對(duì)番茄作物性狀及產(chǎn)量影響
[0109] 從表1數(shù)據(jù)可以看出，試驗(yàn)組比對(duì)照組的番茄每畝增加888kg，增產(chǎn)率為18.8%，因 此說明施用茄果類蔬菜專用生物有機(jī)肥能夠明顯提高番茄的產(chǎn)量。通過對(duì)試驗(yàn)番茄生育的 主要植物性狀調(diào)查數(shù)據(jù)來(lái)看，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)區(qū)秧苗更墩實(shí)，葉色深綠，葉片相對(duì)較多、 大而厚，底部葉片的老化程度低，莖粗壯，根系發(fā)達(dá)，果實(shí)大，著色好，無(wú)畸形果，口味甘甜； 該試驗(yàn)區(qū)作物耐旱，抗早衰，抗植株萎蔫、青枯病、早疫病及晚疫病等發(fā)病率較低。
[0110] 3.本發(fā)明制備的茄果類蔬菜專用的生物有機(jī)肥對(duì)番茄地土壤影響的應(yīng)用試驗(yàn)效 果數(shù)據(jù)見表2:
[0111] 表2.茄果類蔬菜專用生物有機(jī)肥對(duì)番茄地土壤的腐殖質(zhì)含量及有益菌含量的影 響
[0113] 從表2數(shù)據(jù)可以看出，試驗(yàn)組比對(duì)照組番茄地土壤中的腐殖質(zhì)含量增加3.8%，每 克土壤樣品所含的有益菌數(shù)量比對(duì)照組多12.2億。這說明施用茄果類蔬菜專用生物有機(jī)肥 后，不但對(duì)番茄本身性狀和產(chǎn)量有很大的促進(jìn)作用，其對(duì)番茄地土壤的作用也十分顯著，能 夠明顯改善土壤的理化特性，改良土壤生態(tài)環(huán)境增加腐殖質(zhì)含量及有益微生物數(shù)量。
[0114] 4.結(jié)論:番茄施用茄果類蔬菜專用生物有機(jī)肥后，植株生長(zhǎng)健壯，根系發(fā)達(dá)，葉片 深綠，葉面積增加，光合能力增強(qiáng)，番茄果個(gè)大，著色鮮艷，口感甘甜，能改善果實(shí)外觀質(zhì)量 和提高果實(shí)品質(zhì)，且增產(chǎn)效果明顯，能顯著提高經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。
[0115] 茄果類蔬菜專用生物有機(jī)肥在番茄上的試驗(yàn)效果證明，該產(chǎn)品可在茄果類蔬菜生 產(chǎn)中擴(kuò)大示范面積，并進(jìn)行大面積推廣使用。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種茄果類蔬菜專用的生物有機(jī)肥，其特征在于， (一) 有機(jī)物料腐熟劑的制備 將菌種數(shù)量分別達(dá)到1〇8個(gè)/mL以上的枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)CICC10088， 米曲霉（Aspergi 1 lus niger )CICC2436，白腐菌（Phanerochaete chrysosporium) ACCC30414的菌種發(fā)酵液按1.5~2.0:0.8~1.3:0.8~1.3的比例混合均勻后，接種于盛有 復(fù)合菌劑培養(yǎng)基A的發(fā)酵罐中，接種量為復(fù)合菌劑培養(yǎng)基A總體積的5%，復(fù)合菌劑培養(yǎng)基A 的pH 6.0~8.0，30°C下培養(yǎng)4~7天，使發(fā)酵液中總菌數(shù)達(dá)到108個(gè)/mL，即得到有機(jī)物料腐 熟劑； 所述復(fù)合菌劑培養(yǎng)基A配方為：玉米面0.5~1.5g/L、玉米猜桿粉15~17g/L、麩皮0.2~ 0 · 4g/L、_a餅粉0 · 2~0 · 4g/L、4mL/100mL Vogel ' s母液，pH值6 · 0~8 · 0; (二) 混拌、發(fā)酵 將步驟(一）制備好的有機(jī)物料腐熟劑按發(fā)酵物料總質(zhì)量的5%。比例混合，再兌入適量 的水，使總水分控制在60 %左右，在發(fā)酵池經(jīng)過5-10天發(fā)酵，即制得初肥； (三) 深加工 將初肥進(jìn)行粉碎、烘干，按初肥質(zhì)量百分比，具體添加如下營(yíng)養(yǎng)元素： 氮2.5~3.5%、磷0.8~1.5%、鉀5.0~7.0% ;鈣1.5~2.0%、鎂1.0~1.5% ;硼0.05~ 0.1% ;腐植酸類肥料5.0~10.0% ; (四） 茄果類蔬菜專用促生長(zhǎng)復(fù)合菌劑的制備 將菌種數(shù)量分別達(dá)到1〇8個(gè)/mL以上的膠質(zhì)芽孢桿菌（Baci 1 lus mucilaginosus) CGMCC1 · 153，褐色球形固氣菌（Azotobacter chroococcum)CGMCC 1 · 142，巨大芽抱桿菌 (Bacillus megaterium)ACCC 10010,枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis)ACCC 01183的菌 種發(fā)酵液，按(30~40% ): (10~20% ): (30~40% ): (5~10% )的比例混合均勻后作為混合 菌劑，接種于盛有復(fù)合菌劑培養(yǎng)基B的發(fā)酵罐中，接種量為復(fù)合菌劑培養(yǎng)基B總體積的5%， 復(fù)合菌劑培養(yǎng)基B的pH 6.5~7.5，30°C下培養(yǎng)4~7天，使發(fā)酵液中總菌數(shù)達(dá)到6~10 X108 個(gè)/mL，即得到茄果類蔬菜專用微生物復(fù)合菌劑，pH為6.8，總有效活菌數(shù)為9 X 108個(gè)/mL; 所述復(fù)合菌劑培養(yǎng)基B的配方為：玉米粉15~18g/100mL、豆栢粉5~8g/100mL、酵母膏 0.1 ~0.2g/100mL、KH2P04 0.2~2g/100mL、K2HP〇4 0.5~2g/100mL、MgS〇4.7H20 0.001 ~ 0·02g/100mL、NaCl 0·5~0·8g/100mL、（NH4)2S〇4 0·001 ~0·01g/100mL，其余為蒸餾水； (五） 按步驟(三)深加工所獲得的發(fā)酵物料總質(zhì)量的3~5%。比例添加步驟（四）獲得的 茄果類蔬菜專用的促生長(zhǎng)復(fù)合菌劑獲得終產(chǎn)品。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的茄果類蔬菜專用的生物有機(jī)肥的制備方法，其特征在于，步驟 (一)所述復(fù)合菌劑培養(yǎng)基A配方為:玉米面0.5g/L、玉米秸桿粉15g/L、麩皮0.25g/L、豆餅粉 0.25g/L、4mL/100mL Vogel's母液，pH 8.5。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的茄果類蔬菜專用的生物有機(jī)肥的制備方法，其特征在于，步驟 (一） 所述枯草芽抱桿菌（Bacillus subtil is )CICC10088,米曲霉(Aspergillus niger) CICC2436,白腐菌（Phanerochaete chrysosporium)ACCC30414的菌種發(fā)酵液按2:1:1的比 例混合均勻。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的茄果類蔬菜專用的生物有機(jī)肥的制備方法，其特征在于，步驟 (二) 所述發(fā)酵有機(jī)物料為粉碎的玉米秸桿與動(dòng)物糞便按1~2:0.5~2質(zhì)量比混合。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的茄果類蔬菜專用的生物有機(jī)肥的制備方法，其特征在于，步驟 (三)所述營(yíng)養(yǎng)元素為氮3.0%、磷1.1 %、鉀6.0% ;鈣1.8%、鎂1.2% ;硼0.08% ;腐植酸類肥 料5.0%，腐植酸類肥料為腐植酸銨或者腐植酸鉀。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的茄果類蔬菜專用的生物有機(jī)肥的制備方法，其特征在于，步驟 (三）所述復(fù)合菌劑培養(yǎng)基B的配方為：玉米粉16g/100mL、豆栢粉7g/100mL、酵母膏0. lg/ 100mL、KH2P04 lg/100mL、K2HP〇4 lg/100mL、MgS〇4.7H20 0.01g/100mL、NaC10.6g/100mL、 (NH4)2S〇4 0.01g/100mL，其余為蒸餾水。
【文檔編號(hào)】C05F17/00GK105859480SQ201610227683
【公開日】2016年8月17日
【申請(qǐng)日】2016年4月13日
【發(fā)明人】崔國(guó)臣, 崔昌娜
【申請(qǐng)人】大連三科生物工程有限公司