專(zhuān)利名稱(chēng)：白刺籽油的超臨界co的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種白刺籽油的萃取方法，具體涉及一種利用超臨界CO2萃取白刺籽的工藝；本發(fā)明同時(shí)涉及白刺籽油在醫(yī)藥上的應(yīng)用及白刺籽油軟膠囊的制備工藝。
背景技術(shù)：
柴達(dá)木盆地集中分布具有良好開(kāi)發(fā)條件的天然白刺林約50-60萬(wàn)畝，每年產(chǎn)白刺鮮果5-10萬(wàn)噸。成熟果實(shí)中，白刺種籽占果實(shí)總質(zhì)量的30％～35％，在利用白刺果實(shí)開(kāi)發(fā)產(chǎn)品時(shí)，產(chǎn)出大量白刺種籽，資源量很大。白刺種籽含油率11％～13％，其中不飽和脂肪酸含量很高，占整個(gè)油脂的95％左右，而亞油酸高達(dá)65％～70％，是自然界較為少見(jiàn)的富含不飽和脂肪酸的功能性油脂。業(yè)已證明，不飽和脂肪酸具有多種營(yíng)養(yǎng)保健作用，如降血脂、抗血栓，改善動(dòng)脈粥樣硬化、保護(hù)化學(xué)性肝損傷等，是近年來(lái)藥品和保健食品研究與開(kāi)發(fā)的熱點(diǎn)。
現(xiàn)有技術(shù)中提取種籽油的常用方法是溶劑法，該法存在效率低、組分不足、溶劑殘留、某些不飽和脂肪酸被氧化等缺點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是為了彌補(bǔ)溶劑法提取刺種籽油的不足，提供一種應(yīng)用超臨界CO2萃取技術(shù)提取白刺籽油的工藝方法。
本發(fā)明的另一目的是提供白刺籽油在醫(yī)藥上的應(yīng)用即在降血脂中的應(yīng)用；同時(shí)還提供了一種白刺籽油降血脂軟膠囊的制備方法。
一、白刺籽油的超臨界CO2萃取工藝將干燥的白刺種籽粉碎成20-80目后放在超臨界萃取裝置中用CO2進(jìn)行萃取，萃取壓力為15-45MPa，萃取溫度25-50℃，CO2流量45-250L/h，萃取時(shí)間1-8h。
所述超臨界萃取裝置為一萃二分循環(huán)式超臨界萃取裝置，其一級(jí)解析壓力為6-120MPa，解析溫度45-65℃；二級(jí)解析壓力為5-15MPa，解析溫度30-50℃。
本發(fā)明對(duì)溶劑提取法與超臨界CO2萃取法兩者進(jìn)行了比較，結(jié)果見(jiàn)表1。
表1 溶劑提取法與超臨界CO2萃取法的比較

本發(fā)明對(duì)超臨界CO2萃取和有機(jī)溶劑提取的白刺籽油采用氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行化學(xué)成分測(cè)定，白刺籽油經(jīng)氣相色譜石英毛細(xì)管柱分離，質(zhì)譜儀記錄質(zhì)譜圖，各色譜峰相應(yīng)的質(zhì)譜圖經(jīng)解析質(zhì)譜圖及計(jì)算機(jī)檢索譜庫(kù)確定其化學(xué)結(jié)構(gòu)，并以面積歸一法測(cè)定其相對(duì)含量。結(jié)果表明，不飽和烴及不飽和脂肪酸(不包括其衍生物)相對(duì)含量以CO2超臨界萃取物中最高，可達(dá)總解析組分的89.55％，其中(Z，Z)-9，12-十八碳二烯酸(亞油酸)占不飽和成分的85％，而有機(jī)溶劑提取產(chǎn)物中不飽和脂肪酸或不飽和烴類(lèi)的氧化產(chǎn)物醛類(lèi)、酯類(lèi)和烷烴類(lèi)衍生物相對(duì)種類(lèi)和含量較多。說(shuō)明在超臨界萃取過(guò)程中，由于絕氧，可明顯減少不飽和油脂的氧化程度。
本發(fā)明研究了萃取時(shí)間對(duì)白刺籽油產(chǎn)率及脂肪酸質(zhì)量的影響，結(jié)果見(jiàn)表2。
表2 不同萃取時(shí)間對(duì)白刺籽油產(chǎn)量和產(chǎn)率的影響

從表2中可以看出主要成分亞油酸含量在h1-h3階段性逐步增加，在h4階段含量達(dá)到最大值后，在h5-h6又階段性逐步降低；而飽和脂肪酸n-16烷酸含量呈增加趨勢(shì)。由此認(rèn)為萃取時(shí)間定為6小時(shí)，基本可將白刺籽油中的主要有效成分提取完全且萃取質(zhì)量可以得到保證。
二、白刺籽油在制備降血脂藥物中的應(yīng)用白刺籽油的降血脂作用研究1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物Wistar大白鼠，由青海省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。高脂飼料按照普通鼠飼料88.5％、豬油10％、膽固醇1％、膽酸鈉0.3％、甲基硫氧嘧啶0.2％的比例配制。
2、高血脂大鼠模型建立與降血脂實(shí)驗(yàn)健康大白鼠50只，雌雄兼用，體重164.3±19.2g。隨機(jī)分為普通飼料喂養(yǎng)大鼠10只(空白對(duì)照組)，高脂飼料喂養(yǎng)鼠40只。飼喂21天后禁食12h，剪鼠尾采血，分離血清測(cè)定TC，以大鼠血清TC值和體重為依據(jù)，隨機(jī)將高脂飼料喂養(yǎng)鼠分為高脂模型組，白刺籽油高、中、低3個(gè)劑量組。飼喂方法同前，灌胃給予受試物，空白對(duì)照組和高脂模型組給予蒸餾水，每天1次，共28天。末次給予受試物前禁食10h，給予受試物1.5h后股動(dòng)脈放血，分離血清，用試劑盒分別測(cè)定TC、TG、HDL-C；用肝素-氯化錳比濁法測(cè)定血清低密度脂蛋白(LDL-C)。并計(jì)算HDL/TC和LDL/HDL比值。
3、血液生化指標(biāo)測(cè)定方法(1)血清總膽固醇(TC)膽固醇氧化酶法。
(2)血清甘油三酯(TG)液體型甘油磷酸氧化酶法。
(3)血清高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)磷鎢酸-鎂沉淀法。
(4)血清低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)肝素-氯化錳比濁法。
4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果各實(shí)驗(yàn)組大鼠的TC、TG、HDL-C和LDL-C測(cè)定平均值和標(biāo)準(zhǔn)差，及計(jì)算出的HDL/TC和LDL/HDL比值見(jiàn)表3-表5。
表3 白刺籽油對(duì)高血脂大鼠血脂TC和TG的影響

注與高脂模型組相比*p＜0.05.**p＜0.01.***p＜0.001
表4 白刺籽油對(duì)高血脂大鼠血脂HDL-C和LDL-C的影響

注與高脂模型組相比*p＜0.05.**p＜0.01.***p＜0.001表5 白刺籽油對(duì)高血脂大鼠血脂HDL/TC和LDL/HDL比值的影響

注與高脂模型組相比*p＜0.05.**p＜0.01.***p＜0.001結(jié)果顯示，模型組大鼠飼喂高脂飼料49天、TC、TG和LDL三項(xiàng)指標(biāo)均高于對(duì)照組，HDL顯著低于對(duì)照組，即高血脂動(dòng)物模型成立。白刺籽油可顯著和極顯著抑制高脂大鼠的TC、TG、LDL-C，各劑量組對(duì)HDL有升高的趨勢(shì)，其中高劑量組HDL顯著升高，對(duì)HDL/TC比值有顯著的升高作用，對(duì)LDL/HDL比值有顯著的降低作用。
5、實(shí)驗(yàn)結(jié)論(1)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M大鼠飼喂高脂飼料49天，血清TC、TG和LDL 3項(xiàng)指標(biāo)均極顯著地高于對(duì)照組，高血脂動(dòng)物模型建立，降血脂實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)成立。
(2)白刺籽油各劑量組均可降低TC、TC和LDL的含量水平，而且有顯著的量效相關(guān)性。其中中、高劑量白刺籽油可顯著和極顯著地抑制高脂大鼠的TC、TG和LDL，表明其降血脂作用顯著；白刺籽油對(duì)HDL有升高的趨勢(shì)，其中高劑量明顯提高HDL，有利于血脂控制和動(dòng)脈硬化的預(yù)防。
(3)白刺籽油高、中劑量對(duì)HDL/TC比值有極顯著和顯著的升高作用，對(duì)LDL/HDL比值有極顯著和顯著的降低作用，HDL/TC和LDL/HDL比值比TC、TG、HDL和LDL更能準(zhǔn)確地反映血脂水平與動(dòng)脈硬化、冠心病之間的關(guān)系。
(4)白刺籽油降血脂作用突出，有明顯清除血管壁上的膽固醇的作用，這對(duì)于臨床防治動(dòng)脈粥樣硬化，降低冠心病發(fā)病率有重要意義。同時(shí)提示我們，開(kāi)發(fā)豐富的柴達(dá)木白刺資源，充分利用白刺籽油開(kāi)發(fā)改善心腦血管功能的藥品和降血脂的保健食品具有良好的前景。
6、白刺籽油的安全性實(shí)驗(yàn)(1)實(shí)驗(yàn)方法取健康小白鼠40只，雌雄各半，禁食16h后稱(chēng)重，體重20.8±1.9g，1天內(nèi)灌胃給予白刺籽油軟膠囊1次，給予體積為0.4ml/10g體重，連續(xù)給予14天，每日給油劑量為40.0ml/kg，給予受試物后，觀察結(jié)果。
(2)實(shí)驗(yàn)結(jié)果小鼠灌胃給予白刺籽油，經(jīng)多次預(yù)試驗(yàn)，無(wú)法測(cè)定出受試物灌胃給藥的半數(shù)致死量LD50，小鼠的最大耐受量大于40ml/kg，該劑量相當(dāng)于臨床成年人擬推薦日服劑量(2.0ml/日)的1200倍；連續(xù)觀察14天，未見(jiàn)外觀、毛發(fā)、活動(dòng)行為、體重等有其它異?，F(xiàn)象；解剖動(dòng)物，肉眼觀察心、肝、脾、肺、腎、腸等組織器官，均未見(jiàn)任何異常變化。因此，白刺籽油軟膠囊產(chǎn)品急性毒性極小，屬實(shí)際無(wú)毒性產(chǎn)品。
三、以白刺籽油為主要原料制備降血脂藥物用白刺籽油制備的降血脂藥物，是以白刺籽油為主要成分，并配以不同的鋪料制備成藥物學(xué)上的任何一種劑型。
所述用白刺籽油制備的將血脂藥物，其劑型為軟膠囊制劑。
所述用白刺籽油制備的降血脂軟膠囊，由藥液和囊殼兩部分組成，其中囊殼由明膠與甘油組成；藥液為純白刺籽油。
白刺種籽油降血脂軟膠囊的制備工藝包括化膠-壓丸-冷風(fēng)定型-洗丸-干燥-擦丸拋光-撿丸-包裝-儲(chǔ)存其中化膠物料配比明膠∶甘油∶純凈水為100∶35∶94；化膠溫度60～70℃。
白刺種籽油降血脂軟膠囊的性狀本品為淡黃色透明軟膠囊，除去膠囊外殼后，內(nèi)容物為淡黃色油狀液體；本發(fā)明的工藝試制的樣品，各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)均符合要求。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1白刺籽油的超臨界CO2萃取工藝首先將白刺種籽陰干或曬干，使水分含量小于10％，然后粉碎(粒度為20-80目)，然后放入20L-100L規(guī)模的一萃二分循環(huán)式超臨界萃取裝置中用CO2進(jìn)行萃取，萃取的工藝參數(shù)為萃取壓力45MPa，萃取溫度25℃，一級(jí)解析壓力120MPa，解析溫度65℃，二級(jí)解析壓力15MPa，解析溫度50℃，CO2流量250L/h，萃取時(shí)間1h，測(cè)得白刺籽油的得率為。
實(shí)施例2白刺籽油的超臨界CO2萃取工藝首先將白刺種籽陰干或曬干，使水分含量小于10％，然后粉碎(粒度為20-80目)，然后放入20L-100L規(guī)模的一萃二分循環(huán)式超臨界萃取裝置中用CO2進(jìn)行萃取，萃取的工藝參數(shù)為萃取壓力15MPa，萃取溫度50℃，一級(jí)解析壓力6MPa，解析溫度55℃，二級(jí)解析壓力5MPa，解析溫度50℃，CO2流量45L/h，萃取時(shí)間8h。
實(shí)施例3白刺籽油的超臨界CO2萃取工藝首先將白刺種籽陰干或曬干，使水分含量小于10％，然后粉碎(粒度為20-80目)，然后放入20L-100L規(guī)模的一萃二分循環(huán)式超臨界萃取裝置中用CO2進(jìn)行萃取，萃取的工藝參數(shù)為萃取壓力30MPa，萃取溫度30℃，一級(jí)解析壓力50MPa，解析溫度40℃，二級(jí)解析壓力10MPa，解析溫度40℃，CO2流量100L/h，萃取時(shí)間6h。
實(shí)施例4、白刺種籽油降血脂軟膠囊的制備工藝包括①化膠與配料 化膠物料配比為明膠∶甘油∶純凈水為100∶35∶94，化膠溫度為60-70℃；配料為超臨界CO2萃取的純凈白刺籽油。
②壓丸 明膠保持溫度52～55℃；原料保持溫度35～40℃。
③冷風(fēng)定型 潔凈區(qū)室溫，冷風(fēng)定型。
④洗丸 生產(chǎn)線配套專(zhuān)用超聲波洗丸機(jī)洗丸。
⑤干燥 25Hz專(zhuān)用干燥機(jī)，溫度30℃，濕度20％。
⑥擦丸拋光 專(zhuān)用擦丸拋光機(jī)擦丸拋光⑦撿丸 專(zhuān)用半自動(dòng)撿丸機(jī)撿丸。
⑧包裝 內(nèi)包裝為自動(dòng)鋁塑真空包裝，外包裝為紙盒。
權(quán)利要求
1.一種白刺籽油的超臨界CO2萃取工藝，其特征在于將干燥的白刺種籽粉碎后放在超臨界萃取裝置中用CO2進(jìn)行萃取，萃取壓力為15-45MPa，萃取溫度25-50℃，CO2流量45-250L/h，萃取時(shí)間1-8h。
2.如權(quán)利要求1所述的白刺籽油的超臨界CO2萃取工藝，其特征在于所述超臨界萃取裝置為一萃二分循環(huán)式超臨界萃取裝置，其一級(jí)解析壓力為6-120MPa，解析溫度45-65℃；二級(jí)解析壓力為5-15MPa，解析溫度30-50℃。
3.如權(quán)利要求1所述的白刺籽油的超臨界CO2萃取工藝，其特征在于所述白刺種籽粉碎成20-80目。
4.如權(quán)利要求1所萃取白刺籽油在制備降血脂藥物中的應(yīng)用。
5.如權(quán)利要求4所述用白刺籽油制備的降血脂藥物，是以白刺籽油為主要成分，并配以不同的鋪料制備成藥物學(xué)上的任何一種劑型。
6.如權(quán)利要求5所述用白刺種籽油制備的降血脂藥物，其特征在于所述劑型為軟膠囊制劑。
7.如權(quán)利要求6所述用白刺種籽油制備的降血脂軟膠囊，由藥液和囊殼兩部分組成，其中囊殼由明膠與甘油組成；其特征在于所述藥液為純白刺籽油。
8.制備權(quán)利要求7所述的白刺種籽油降血脂軟膠囊的方法，包括以下工藝過(guò)程化膠—壓丸—冷風(fēng)定型—洗丸—干燥—擦丸拋光—撿丸—包裝—儲(chǔ)存其中化膠物料配比明膠∶甘油∶純凈水為100∶35∶94；化膠溫度60～70℃。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種白刺籽油的超臨界CO
文檔編號(hào)C11B1/00GK1687340SQ200510041879
公開(kāi)日2005年10月26日 申請(qǐng)日期2005年3月23日 優(yōu)先權(quán)日2005年3月23日
發(fā)明者索有瑞, 李玉林, 王洪倫 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院西北高原生物研究所