一種促進(jìn)人體腫瘤發(fā)生、發(fā)展的新機(jī)制的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種促進(jìn)人體腫瘤發(fā)生、發(fā)展的新機(jī)制，新的機(jī)制核心就是：細(xì)胞內(nèi)高氨代謝對(duì)于腫瘤細(xì)胞的warburg效應(yīng)形成維持作用；Warburg效應(yīng)是腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及耐受治療過(guò)程的代謝基礎(chǔ)，因此在給予腫瘤細(xì)胞降氨處理后，腫瘤細(xì)胞缺乏氨的持續(xù)供應(yīng)和維持，很快出現(xiàn)凋亡和壞死或者腫瘤細(xì)胞被重新誘導(dǎo)分化，即降低腫瘤細(xì)胞內(nèi)氨濃度是腫瘤治療新的治療靶點(diǎn)；新機(jī)制的降低氨濃度的藥物為：精氨酸。該機(jī)制同時(shí)可應(yīng)用于對(duì)肝癌細(xì)胞的氨濃度的降低，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)肝癌細(xì)胞缺乏氨的持續(xù)供應(yīng)和維持，很快出現(xiàn)凋亡和壞死或者肝癌細(xì)胞被重新誘導(dǎo)分化。
【專利說(shuō)明】
一種促進(jìn)人體腫瘤發(fā)生、發(fā)展的新機(jī)制
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明屬于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，涉及一種促進(jìn)人體腫瘤發(fā)生、發(fā)展的新機(jī)制，具體為細(xì)胞內(nèi)高氨代謝在維持人體腫瘤發(fā)生新的機(jī)制。
【背景技術(shù)】
[0002]我們知道，所有的生物均有利用能量的能力，即代謝。癌癥細(xì)胞大大地加快了代謝過(guò)程，使突變的細(xì)胞瘋狂地生長(zhǎng)。早在20世紀(jì)初，科學(xué)家們就已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，癌癥細(xì)胞更喜歡利用葡萄糖作為能量來(lái)源，即使它們擁有大量的其它能量資源。這種偏愛(ài)使用葡萄糖作為〃燃料〃的現(xiàn)象，被稱為Warburg效應(yīng)，或糖酵解。Warburg效應(yīng)是癌癥細(xì)胞生長(zhǎng)、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及耐受治療等過(guò)程的代謝基礎(chǔ)。細(xì)胞利用營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)生成能量有兩種途徑:線粒體代謝和糖酵解。正常的健康細(xì)胞主要使用線粒體代謝，而快速增殖的癌細(xì)胞主要依賴糖酵解。糖酵解發(fā)生改變是癌癥的標(biāo)志之一，這種代謝重編程對(duì)于癌癥的發(fā)生和發(fā)展意義重大。早在1930年代，因植物的氧化還原反應(yīng)而于1931年獲得諾貝爾獎(jiǎng)的德國(guó)生物化學(xué)家Warburg就注意到，人體的腫瘤細(xì)胞可以在缺少氧氣甚至無(wú)氧的條件下快速生長(zhǎng)。這個(gè)現(xiàn)象在事隔80年后得到重新認(rèn)識(shí)?，F(xiàn)在通過(guò)改變腫瘤細(xì)胞的物質(zhì)代謝流來(lái)控制腫瘤生長(zhǎng)，是繼標(biāo)靶藥物熱潮之后的另一個(gè)研究熱點(diǎn)。近年來(lái)，以腫瘤治療為標(biāo)志的代謝性研究已經(jīng)成為生物醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)領(lǐng)域。早在1920年，德國(guó)生物化學(xué)家Otto Warburg就發(fā)現(xiàn)了腫瘤細(xì)胞代謝的特點(diǎn)-高水平的糖酵解作用，并據(jù)此拿下了第二個(gè)諾貝爾獎(jiǎng)。Warburg認(rèn)為，腫瘤發(fā)生的最初原因是線粒體呼吸功能障礙，為了維持細(xì)胞生存和滿足大分子合成的需要，細(xì)胞選擇激活另一種能量代謝方式-有氧糖酵解(aerobic glycolysis)。腫瘤細(xì)胞用有氧糖酵解替代正常組織細(xì)胞的氧化磷酸化(Oxidative Phosphorylat1n ,0XPH0S)。這些不能經(jīng)由線粒體途徑獲得ATP的腫瘤細(xì)胞，只能進(jìn)行代謝重組，以維持細(xì)胞內(nèi)的ATP和NADH水平正常。眾所周知，ATP和NADH不僅是維持腫瘤細(xì)胞生物大分子合成、生物膜整合、離子濃度和DNA合成所必需的，還是腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移和增殖所必需的。換言之就是即使在有氧狀態(tài)下，腫瘤細(xì)胞也會(huì)優(yōu)先進(jìn)行糖酵解，而不是通過(guò)產(chǎn)能效率更高的氧化磷酸化途徑為細(xì)胞生長(zhǎng)提供能量，這就是著名的Warburg(瓦博格)效應(yīng)。表現(xiàn)為葡萄糖攝取率高，糖酵解活躍，代謝產(chǎn)物乳酸含量高，糖酵解雖然消耗更多葡萄糖，但產(chǎn)生的ATP數(shù)量比較少。腫瘤細(xì)胞利用特殊的代謝方式獲得能量和構(gòu)筑細(xì)胞結(jié)構(gòu)的材料，以滿足細(xì)胞無(wú)限制的增殖，葡萄糖代謝至丙酮酸(pyruvate)后不再通過(guò)線粒體的三羧酸循環(huán)進(jìn)行有氧氧化，而是通過(guò)乳酸脫氫酶(LDH)Jf變成乳酸排出細(xì)胞。
[0003]基于以上理論背景，將肝細(xì)胞作為研究對(duì)象，我們的實(shí)驗(yàn)早期發(fā)現(xiàn)用高氨(濃度為lOmmol/L)處理正常肝細(xì)胞后，通過(guò)代謝組學(xué)的方法檢驗(yàn)處理細(xì)胞的代謝產(chǎn)物，得到與腫瘤細(xì)胞有氧糖酵解相一致的代謝產(chǎn)物，即糖酵解途徑增強(qiáng)后止于丙酮酸，磷酸戊糖途徑增強(qiáng)和三羧酸途徑受到抑制。我們大膽推測(cè)，高氨處理后的細(xì)胞代謝類型與腫瘤細(xì)胞相似，換言之高氨對(duì)于腫瘤細(xì)胞的warburg效應(yīng)形成維持作用，有利于腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)。
[0004]眾所周知，原發(fā)性肝癌是指發(fā)生于肝細(xì)胞與肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞的癌變，是人類最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一。我國(guó)肝癌中，肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)約占80%—90%，其次為膽管細(xì)胞癌和肝細(xì)胞膽管細(xì)胞混合癌。起源于肝臟其他細(xì)胞成分的惡性腫瘤罕見(jiàn)。臨床可見(jiàn)肝區(qū)疼痛，上腹部腫塊，進(jìn)行性消瘦等。肝癌具有起病隱匿、潛伏期長(zhǎng)、高度惡性、進(jìn)展快、侵襲性強(qiáng)、易轉(zhuǎn)移、預(yù)后差等特點(diǎn)。其發(fā)病率有逐年上升趨勢(shì)，肝細(xì)胞肝癌是一種高死亡率的原發(fā)性肝癌，它是一種全球范圍最常見(jiàn)的惡性腫瘤，每年超過(guò)600,000患者死于肝細(xì)胞肝癌。自60年代肝癌細(xì)胞系的建立、乙型肝炎病毒和黃曲霉素的發(fā)現(xiàn)，尤其是甲胎蛋白(AFP)在肝癌病人血中的檢出，越來(lái)越多證據(jù)表明AFP是肝細(xì)胞肝癌發(fā)生的重要標(biāo)記，AFP降低也是判斷肝細(xì)胞肝癌的治療預(yù)后的重要標(biāo)志。
[0005]70年代由于AFP檢測(cè)用于人群普查，使肝癌的臨床研究進(jìn)入了亞臨床階段，再加上彩超的普及、肝臟高分辨率CT、磁共振等使診斷水平明顯提高，近年來(lái)局部介入治療方法的出現(xiàn)，使得過(guò)去不能切除的肝癌中的一部分有可能縮小后行二期切除，這種二期切除的5年生存率可與小肝癌切除者媲美，但由于肝癌對(duì)現(xiàn)有的放療和化療藥物均不敏感，因此肝癌的治療也是現(xiàn)代臨床醫(yī)學(xué)研究的重點(diǎn)。肝細(xì)胞從靜息狀態(tài)轉(zhuǎn)化為持續(xù)復(fù)制的惡性細(xì)胞就標(biāo)志著肝臟癌變的開(kāi)始，AFP增高，相反如果肝癌細(xì)胞被重新誘導(dǎo)分化，AFP則降低。另外近期多項(xiàng)肝細(xì)胞肝癌的代謝組學(xué)研究表明，肝細(xì)胞肝癌細(xì)胞內(nèi)也呈現(xiàn)典型的warburg效應(yīng):葡萄糖代謝至丙酮酸(pyruvate)后不再通過(guò)線粒體的三羧酸循環(huán)進(jìn)行有氧氧化，而是通過(guò)乳酸脫氫酶(LDH)，轉(zhuǎn)變成乳酸排出細(xì)胞，細(xì)胞主要能量依賴糖酵解和谷氨酰胺回補(bǔ)途徑。
[0006]

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]針對(duì)以上的發(fā)現(xiàn)和猜想，本發(fā)明通過(guò)一系列的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)及早期肝癌患者的臨床實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)了高氨是誘導(dǎo)腫瘤發(fā)生新機(jī)制，尤其導(dǎo)致原發(fā)性肝癌新因素，為以后腫瘤治療開(kāi)辟新的治療途徑。
[0008]本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的:
一種促進(jìn)人體腫瘤發(fā)生、發(fā)展的新機(jī)制，新的機(jī)制核心就是:細(xì)胞內(nèi)高氨代謝對(duì)于腫瘤細(xì)胞的warburg效應(yīng)形成維持作用；Warburg效應(yīng)是腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及耐受治療過(guò)程的代謝基礎(chǔ)，因此在給予腫瘤細(xì)胞降氨處理后，腫瘤細(xì)胞缺乏氨的持續(xù)供應(yīng)和維持，很快出現(xiàn)凋亡和壞死或者腫瘤細(xì)胞被重新誘導(dǎo)分化，即降低腫瘤細(xì)胞內(nèi)氨濃度是腫瘤治療新的治療靶點(diǎn)。
[0009]所述的一種促進(jìn)人體腫瘤發(fā)生、發(fā)展的新機(jī)制的降低氨濃度的藥物為:精氨酸。
[0010]所述的一種促進(jìn)人體腫瘤發(fā)生、發(fā)展的新機(jī)制應(yīng)用，應(yīng)用于對(duì)肝癌細(xì)胞的氨濃度的降低，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)肝癌細(xì)胞缺乏氨的持續(xù)供應(yīng)和維持，很快出現(xiàn)凋亡和壞死或者肝癌細(xì)胞被重新誘導(dǎo)分化。
[0011]積極有益效果:本發(fā)明通過(guò)實(shí)驗(yàn)和大量臨床得出，細(xì)胞內(nèi)高氨代謝對(duì)于腫瘤細(xì)胞效應(yīng)形成維持作用，并通過(guò)精氨酸作為降低肝癌細(xì)胞內(nèi)氨濃度的藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行新的治療，很好的實(shí)現(xiàn)了腫瘤細(xì)胞在缺乏氨的持續(xù)供應(yīng)和維持，很快出現(xiàn)凋亡和壞死或者腫瘤細(xì)胞被重新誘導(dǎo)分化，是腫瘤和肝癌治療的新靶點(diǎn)。
[0012]
【附圖說(shuō)明】
[0013]圖1為正常肝細(xì)胞高氨處理后代謝組學(xué)Heatmap圖；
圖2為糖酵解途徑圖；
圖3為三羧酸循環(huán)途徑圖；
圖4為不同濃度的氨處理不同肝癌細(xì)胞系圖；
圖5為7721細(xì)胞空白對(duì)照的凋亡率圖；
圖6為7721細(xì)胞加入精氨酸后的細(xì)胞凋亡率圖；
圖7為7721細(xì)胞加入精氨酸及氨基胍后的細(xì)胞凋亡率圖。
【具體實(shí)施方式】
[0014]下面結(jié)合附圖及實(shí)例，對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的說(shuō)明:
目前，國(guó)內(nèi)外關(guān)于氨對(duì)肝癌細(xì)胞的影響相關(guān)機(jī)制的研究較少。相關(guān)文獻(xiàn)指出肝硬化病人經(jīng)TIPS術(shù)后比保守治療的患者更容易發(fā)生肝細(xì)胞肝癌。經(jīng)頸靜脈肝內(nèi)門腔靜脈分流術(shù)(trans jugular intrahepatic portosystemic shunt ,TIPS)是近20年發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)介入放射學(xué)治療技術(shù)。它是以頸內(nèi)靜脈為穿刺入口，將導(dǎo)管經(jīng)門靜脈，上腔靜脈，右心房，下腔靜脈，插入肝靜脈并在X線的導(dǎo)向下由肝靜脈穿刺進(jìn)入肝內(nèi)靜脈內(nèi)，在擴(kuò)張兩者間肝實(shí)質(zhì)通道后，植入支架在肝靜脈與門靜脈之間建立人工分流通道，使門靜脈血流直接分流到下腔靜脈，從而降低門靜脈壓力，達(dá)到治療靜脈曲張破裂出血，頑固性腹水等門靜脈高壓癥的目的。首先是此病例毫無(wú)例外的都是肝功較差的患者，其次TIPS手術(shù)也是一種分流術(shù)，門脈系的血液沒(méi)有經(jīng)肝臟解毒，所以易出現(xiàn)血氨升高，繼而出現(xiàn)肝昏迷，肝性腦病是影響TIPS療效的一個(gè)主要并發(fā)癥。然而肝癌發(fā)生率的提高是影響TIPS療效的另一個(gè)主要并發(fā)癥。相關(guān)文獻(xiàn)指出，肝硬化病人行TIPS術(shù)后，在第1、3、5年肝癌的發(fā)生率分別是3%、24%和34%，而對(duì)于那些具有相同基線水平的沒(méi)有行TIPS術(shù)的肝硬化病人其在同樣的時(shí)間內(nèi)肝癌發(fā)生率只有1%、6%和25%。我們的前期研究表明隨氨濃度的升高，正常肝細(xì)胞內(nèi)丙酮酸、丙酮酸激酶、乳酸脫氫酶含量升高，而乙酰C0A、丙酮酸脫氫酶含量降低，證明了氨可以促進(jìn)糖酵解，抑制三羧酸循環(huán)。
[0015]用于降低血氨的藥物主要有精氨酸及門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸。精氨酸是鳥(niǎo)氨酸循環(huán)中的一個(gè)組成成分，有助于將血液中的氨轉(zhuǎn)變?yōu)槟蛩囟判钩鋈?。所以精氨酸是臨床常用的去除高氨血癥，改善肝臟機(jī)能障礙等常用藥物。門冬氨酸鳥(niǎo)氨酸水解產(chǎn)生的鳥(niǎo)氨酸和門冬氨酸，作用于兩個(gè)主要的氨解毒途徑一一尿素循環(huán)和谷氨酰胺合成，鳥(niǎo)氨酸幾乎涉及尿素循環(huán)的活化和氨的解毒的全過(guò)程;但由于門冬氨酸對(duì)肝癌細(xì)胞內(nèi)三羧酸循環(huán)代謝過(guò)程的間接促進(jìn)作用，有可能促進(jìn)肝癌細(xì)胞內(nèi)的能量合成，促進(jìn)肝癌細(xì)胞的增殖及DNA合成。故我們的細(xì)胞試驗(yàn)中選擇精氨酸作為降氨的藥物。
[0016]精氨酸是一種堿性氨基酸，在生物體內(nèi)以具有生理活性的L-精氨酸形式發(fā)揮生物學(xué)功能。它不僅是動(dòng)物體蛋白合成的必需氨基酸，同時(shí)也是多種生物活性物質(zhì)的合成前體，如多胺和NO等。精氨酸是合成NO的唯一底物，精氨酸一NO途徑在動(dòng)物體內(nèi)發(fā)揮著重要的作用。精氨酸代謝在體內(nèi)有3條途徑，一是精氨酸在一氧化氮合酶(NOS)催化下代謝產(chǎn)生NO，并生成瓜氨酸;二是在精氨酸分解酶作用下，精氨酸生成鳥(niǎo)氨酸和尿素;三是由鳥(niǎo)氨酸生成多胺，多胺是腐胺、亞精胺和精胺的統(tǒng)稱，對(duì)于調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)和發(fā)育具有重要作用。氨基胍是一種選擇性一氧化氮合酶抑制劑，在實(shí)驗(yàn)中加入一定濃度的氨基胍后，精氨酸一 NO的代謝途徑就被阻斷，那么此時(shí)精氨酸在細(xì)胞內(nèi)的主要代謝途徑就是參與降氨的過(guò)程，即氨降低，腫瘤細(xì)胞內(nèi)代謝紊亂，必然會(huì)導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的凋亡增加。
[0017]結(jié)果:用氨(濃度為lOmmol/L的NH4CL)處理正常肝細(xì)胞后，通過(guò)代謝組學(xué)的方法檢驗(yàn)處理細(xì)胞的代謝產(chǎn)物，如圖1所示，得到與腫瘤細(xì)胞有氧糖酵解相一致的代謝產(chǎn)物，如圖
2、圖3所示。
[0018]圖1中，葡萄糖代謝至丙酮酸后不再通過(guò)線粒體的三羧酸循環(huán)進(jìn)行有氧氧化，而是通過(guò)乳酸脫氫酶，轉(zhuǎn)變成乳酸排出細(xì)胞，同時(shí)磷酸戊糖途徑增強(qiáng)；
圖2中，糖酵解途徑增強(qiáng)，但止于丙酮酸，其中紅色表示高氨處理的肝細(xì)胞，綠色表示空白對(duì)照組。
[0019]圖3中，高氨處理后肝細(xì)胞糖酵解止于丙酮酸，三羧酸循環(huán)(檸檬酸，α酮戊二酸等降低)受到抑制，同時(shí)磷酸戊糖途徑增強(qiáng)(G5MP增加)；
氨處理不同細(xì)胞后的尿素水平，用不同濃度的NH4CL處理正常的ChangLi ver細(xì)胞，肝癌細(xì)胞如SK細(xì)胞、7402、Hep3B細(xì)胞48小時(shí)后，收集細(xì)胞及上清液進(jìn)行4000r/分的速度離心，通過(guò)生化檢驗(yàn)其中的尿素水平，得到的結(jié)果是肝癌細(xì)胞系中的尿素水平是增加的，那么由此說(shuō)明在肝癌細(xì)胞系中是存在尿素循環(huán)的，如圖4所示，但比正常肝細(xì)胞代謝能力低。
[0020]圖4中，隨著氨的濃度增加，BUN水平也逐漸升高，表明肝癌細(xì)胞系內(nèi)存在完整的尿素循環(huán)途徑。
[0021]精氨酸處理肝癌細(xì)胞7721細(xì)胞，以非肝細(xì)胞來(lái)源細(xì)胞C6細(xì)胞(神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞)為對(duì)照，檢測(cè)細(xì)胞凋亡水平用精氨酸(20mM)，處理4h后，出現(xiàn)細(xì)胞凋亡率的增加，如圖5、圖6所示，加入2mM氨基胍，用流式細(xì)胞儀測(cè)凋亡率明顯增加，如圖7所示，因此精氨酸可以特異性抑制肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)。
[0022]臨床實(shí)例:
病例I:李XX女65歲，發(fā)現(xiàn)HBsAg陽(yáng)性10年，6年前開(kāi)始口服拉米夫定抗病毒治療，期間定期復(fù)查，病情穩(wěn)定，20天前因乏力、食欲欠佳，當(dāng)?shù)蒯t(yī)院復(fù)查提示病毒反彈，肝酶升高，遂于2015年11月17日入我院住院治療，次日復(fù)查結(jié)果回示:乙肝大三陽(yáng)，HBV-DNA: 1.33 X104Iu/ml，甲胎蛋白(AFP)>2000ng/ml ,HBV耐藥突變:基因分型C檢測(cè)到M204I/L類型，因患者AFP明顯升高，為排除肝臟惡性病變，給予肝臟磁共振平掃及馬根維顯動(dòng)態(tài)增強(qiáng)后提示:
1.肝右后葉異常信號(hào)影，考慮退變結(jié)節(jié)，需結(jié)合臨床進(jìn)一步明確診斷2.肝硬化3.右腎小囊腫。因患者乙肝病史時(shí)間長(zhǎng)合并肝硬化，抗病毒治療出現(xiàn)臨床耐藥，甲胎蛋白異常升高，謹(jǐn)慎起見(jiàn)，請(qǐng)磁共振室主任會(huì)診，會(huì)診意見(jiàn):肝右后葉可見(jiàn)片狀短Tl、短T2信號(hào)影，直徑約10mm，動(dòng)態(tài)增強(qiáng)掃描未見(jiàn)明顯強(qiáng)化，考慮肝硬化發(fā)育不良性結(jié)節(jié)，因AFP高，建議行磁共振平掃+普美顯動(dòng)態(tài)增強(qiáng)掃描進(jìn)一步診斷。于11月25日MRI普美顯增強(qiáng)提示:1.肝右后葉異常信號(hào)，表現(xiàn)欠典型，考慮高級(jí)別發(fā)育不良性結(jié)節(jié)伴局部癌變，早期HCC不除外，建議結(jié)合臨床病理協(xié)診2.肝實(shí)質(zhì)內(nèi)多發(fā)短T2信號(hào)影，考慮肝硬化結(jié)節(jié)3.肝硬化、少量腹水4.膽囊結(jié)石5、雙腎小囊腫6、肝門部淋巴結(jié)顯影。因患者不愿行肝臟活檢，故在給予聯(lián)合抗病毒治療的同時(shí)，11月22日開(kāi)始給予精氨酸針20g靜脈滴注直至12月25號(hào)患者出院，期間復(fù)查AFP逐漸下降，由最初的 AFP>2000ng/ml (11.18)-1839 ng/ml(ll.25)-1213 ng/ml( 12.1)-768 ng/ml( 12.8)-625 ng/ml( 12.15)-529 ng/ml( 12.22)，于 12月24號(hào)再次復(fù)查MRI普美顯增強(qiáng)提示:肝右后葉異常信號(hào)，與2015.11.25MRI比較原病變內(nèi)小點(diǎn)狀長(zhǎng)T2信號(hào)未見(jiàn)明確顯示。該患者乙肝病史時(shí)間長(zhǎng)，肝硬化，甲胎蛋白異常升高，磁共振可見(jiàn)直徑1mm的發(fā)育不良結(jié)節(jié)伴局部癌變，精氨酸治療后，病變未見(jiàn)明確顯示，甲胎蛋白明顯下降，治療有效。
[0023]病例2:鄧XX女44歲，丙肝抗體陽(yáng)性10余年，既往曾給予“派羅欣針180ug”聯(lián)合“利巴韋林片9片/天”抗病毒治療5個(gè)月，效果較差，病毒未見(jiàn)明顯下降，遂停用，后定期復(fù)查。因乏力、腹脹伴牙齦出血于2015年11月20號(hào)入院，次日結(jié)果回示:HCV-RNA: 5.08 X 105Iu/ml，AFP228.84ng/ml，血常規(guī)示三系細(xì)胞減少，ALT27U/L，AST87 U/L，A/G(白球比)1.43(降低)，診斷為慢性丙型肝炎肝硬化甲胎蛋白升高原因待查，11月24查上腹部磁共振平掃，未見(jiàn)明確肝臟占位性病變，在給予保肝及口服抗病毒藥物的同時(shí)，給予精氨酸15g靜滴I周后復(fù)查甲胎蛋白降為122.75ng/ml，繼續(xù)上述治療方案治療10天，患者甲胎蛋白降為正常，一般狀況較前明顯改善，辦理出院。
[0024]病例3:徐XX男57歲，乙肝大三陽(yáng)患者，口服阿德福韋酯膠囊抗病毒治療3年，病毒轉(zhuǎn)陰，肝功正常。2年前我院上腹部磁共振提示肝右后葉占位性病變(直徑約18mm)，肝硬化，脾大，門脈高壓，腹水，后在CT引導(dǎo)下行HCC射頻消融術(shù)，術(shù)后恢復(fù)可，未見(jiàn)異常。2月前復(fù)查上腹部磁共振平掃加動(dòng)態(tài)增強(qiáng)提示:門脈主干癌栓形成，第VI段異常信號(hào)，表現(xiàn)不典型，可疑HCC復(fù)發(fā)，再次行HCC介入治療，為進(jìn)一步復(fù)查于2015年11月I號(hào)入院，2號(hào)檢查結(jié)果回示:病毒低于檢測(cè)試劑盒下限，ALT64 U/L ,AST88 U/L，AFP484.30ng/ml，血常規(guī)三系減少，凝血酶原時(shí)間活動(dòng)度69%，磁共振提示肝內(nèi)腫瘤進(jìn)展，門脈侵犯，介入行肝動(dòng)脈栓塞效果預(yù)計(jì)不佳，與患者家屬溝通病情后，建議穿刺門脈粒子置入，4號(hào)在手術(shù)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)穿刺針在導(dǎo)管配合下不能沿門脈下行，手術(shù)失敗。后給予保肝、抗病毒藥物、精氨酸15g/天靜滴保守治療，9號(hào)復(fù)查AFP297.76 ng/ml，ALT45 U/L ,AST61 U/L，繼續(xù)精氨酸治療I月后復(fù)查AFP26.14 ng/ml，ALT32 U/L ,AST67 U/L，對(duì)比影像學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)門脈主干癌栓較前有所縮小，患者尚可維持日常生活，目前仍在應(yīng)用精氨酸。
[0025]病例4朱XX女62歲，4月前體檢發(fā)現(xiàn)肝占位，于河南某醫(yī)院行“肝多發(fā)腫瘤切除術(shù)+膽囊切除術(shù)”，術(shù)后病理提示肝細(xì)胞肝癌，術(shù)后一般狀況可。I月余前來(lái)我院復(fù)查，上腹部CT檢查回示:肝右后葉強(qiáng)化結(jié)節(jié)，平掃呈低密度，動(dòng)脈期強(qiáng)化，門脈期呈等密度，不除外HCC可能，與患者家屬溝通病情后建議行MRI增強(qiáng)或PET-CT檢查有無(wú)微小病灶或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移灶，家屬要求行PET-CT(2015年10月9日)提示肝右葉稍低密度結(jié)節(jié)影代謝較活躍，考慮轉(zhuǎn)移，遂以“HCC切除術(shù)后復(fù)發(fā)慢乙肝”收入院于10月14號(hào)局麻下行TACE術(shù)，術(shù)后轉(zhuǎn)入我科給予保肝及精氨酸20g靜脈應(yīng)用數(shù)天，病情穩(wěn)定后出院，院外繼續(xù)口服精氨酸20g/天?；颊甙l(fā)現(xiàn)“乙肝”病史I年，自體檢發(fā)現(xiàn)肝占位后開(kāi)始給予恩替卡韋抗病毒治療至今，糖尿病3年，規(guī)律應(yīng)用胰島素，血糖控制可?；颊呓槿胄g(shù)后I月余，遵醫(yī)囑于2015年11月23日再次入院復(fù)查，查肝功基本正常，病毒陰性，血象提示三系降低，甲胎蛋白陰性，復(fù)查磁共振提示:肝右葉病變未見(jiàn)明顯動(dòng)脈期血供，邊緣肝實(shí)質(zhì)異常強(qiáng)化考慮灌注異常，肝右葉多發(fā)點(diǎn)、片狀異常強(qiáng)化信號(hào)，HCC不除外，對(duì)比以往影響學(xué)檢查結(jié)果，無(wú)法確診，故再次行PET-CT檢查(2015年12月4號(hào))提示肝右葉見(jiàn)片狀稍低密度影放射性分布稍濃聚，SUVmax約3.6，邊界欠清晰，但與2015年10月9日PET-CT比較，原肝右葉病灶放射性濃聚程度減低(既往SUVmax約7.3)，后仔細(xì)對(duì)比以往所檢查的影像學(xué)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，代謝降低的低密度影在I月前的介入中并未被碘油覆蓋，但I(xiàn)個(gè)多月的時(shí)間，在口服精氨酸的作用下，其代謝值明顯降低，現(xiàn)患者未再選擇繼續(xù)行TACE術(shù)，而是繼續(xù)應(yīng)用精氨酸，目前一般狀況良好，繼續(xù)規(guī)律隨訪中。(注釋:PET采用正電子核素作為示蹤劑，通過(guò)病灶部位對(duì)示蹤劑的攝取了解病灶功能代謝狀態(tài)，可以宏觀的顯示全身各臟器功能，代謝等病理生理特征，更容易發(fā)現(xiàn)病灶。CT可以精確定位病灶及顯示病灶細(xì)微結(jié)構(gòu)變化；PET/CT融合圖像可以全面發(fā)現(xiàn)病灶，精確定位及判斷病灶良惡性，故能早期，快速，準(zhǔn)確，全面發(fā)現(xiàn)病灶。目前最常用的PET顯像劑為18F標(biāo)記的FDG(18F-FDG氟化脫氧葡萄糖)，是一種葡萄糖的類似物。腫瘤組織的重要特點(diǎn)之一就是生長(zhǎng)迅速、代謝旺盛，特別是葡萄糖酵解速率增高。因此，代謝顯像是早期診斷惡性腫瘤的最靈敏的方法之一。PET-CT檢查通過(guò)在人體注入18F-FDG示蹤劑，通過(guò)SUV值作為惡性病變的判定標(biāo)準(zhǔn)。SUV即標(biāo)準(zhǔn)攝入值，the Standardized Uptake Value的簡(jiǎn)稱，是目前廣泛使用的18F-FDG在組織中靜態(tài)聚集的半定量的測(cè)定方法，臨床上常將SUV2.5作為惡性病變的判定標(biāo)準(zhǔn)。)
本發(fā)明通過(guò)實(shí)驗(yàn)和大量臨床得出，細(xì)胞內(nèi)高氨代謝對(duì)于腫瘤細(xì)胞的warburg效應(yīng)形成維持作用，并通過(guò)精氨酸作為降低肝癌細(xì)胞內(nèi)氨濃度的藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行新的治療，很好的實(shí)現(xiàn)了腫瘤細(xì)胞在缺乏氨的持續(xù)供應(yīng)和維持，很快出現(xiàn)凋亡和壞死或者腫瘤細(xì)胞被重新誘導(dǎo)分化，是腫瘤和肝癌治療的新靶點(diǎn)。
[0026]以上實(shí)施案例僅用于說(shuō)明本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，但本發(fā)明并不限于上述實(shí)施方式，在所述領(lǐng)域普通技術(shù)人員所具備的知識(shí)范圍內(nèi)，本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替代及改進(jìn)等，均應(yīng)視為本申請(qǐng)的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種促進(jìn)人體腫瘤發(fā)生、發(fā)展的新機(jī)制，其特征在于:新的機(jī)制核心就是:細(xì)胞內(nèi)高氨代謝對(duì)于腫瘤細(xì)胞的warburg效應(yīng)形成維持作用；Warburg效應(yīng)是腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及耐受治療過(guò)程的代謝基礎(chǔ)，因此在給予腫瘤細(xì)胞降氨處理后，腫瘤細(xì)胞缺乏氨的持續(xù)供應(yīng)和維持，很快出現(xiàn)凋亡和壞死或者腫瘤細(xì)胞被重新誘導(dǎo)分化，即降低腫瘤細(xì)胞內(nèi)氨濃度是腫瘤治療新的治療靶點(diǎn)。2.如權(quán)利要求1所述的一種促進(jìn)人體腫瘤發(fā)生、發(fā)展的新機(jī)制的降低氨濃度的藥物為:精氨酸。3.如權(quán)利要求1所述的一種促進(jìn)人體腫瘤發(fā)生、發(fā)展的新機(jī)制應(yīng)用，其特征在于:應(yīng)用于對(duì)肝癌細(xì)胞的氨濃度的降低，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)肝癌細(xì)胞缺乏氨的持續(xù)供應(yīng)和維持，很快出現(xiàn)凋亡和壞死或者肝癌細(xì)胞被重新誘導(dǎo)分化。
【文檔編號(hào)】A61K31/198GK105902528SQ201610107686
【公開(kāi)日】2016年8月31日
【申請(qǐng)日】2016年7月18日
【發(fā)明人】余祖江
【申請(qǐng)人】余祖江