一種用于消腫止痛的火把花根外用制劑、制備方法及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明提供了一種中藥外用制劑，更具體的說涉及一種用于消腫止痛的火把花根 外用制劑、制備方法及其應(yīng)用。 技術(shù)背景
[0002]昆明山海棠[Tripterygiumhypoglaucum(Level)Hutch，簡(jiǎn)稱THH]又名粉背雷公 藤、火把花、金剛藤，屬衛(wèi)矛科雷公藤屬植物，含有二萜類及生物堿類等活性成分。產(chǎn)于黔東 南州，尤其是雷山縣雷公山一帶，藥用部位主要是根部；因此，也被成為火把花根。昆明山海 棠與雷公藤同屬衛(wèi)矛科雷公藤屬植物，二者在化學(xué)結(jié)構(gòu)及藥理作用方而相似，具有抗炎、調(diào) 節(jié)免疫、抗腫瘤等作用。但是昆明山海棠屬于有毒中藥，中醫(yī)認(rèn)為"有大毒"，所含總生物堿 是其主要毒性成分，并顯示出肯定的細(xì)胞毒性。近年來研究發(fā)現(xiàn)昆明山海棠有抗生育、誘導(dǎo) 染色體畸變、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡等作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 為解決上述問題，本發(fā)明提供了一種火把花根外用制劑中的活性成分為火把花根 的去皮根芯的乙醇提取物。
[0004] 所述提取火把花根去皮根芯的乙醇濃度為50-60 %。
[0005] 上述所述的用于消腫止痛的火把花根外用制劑的制備方法，所述用于制備外用制 劑的火把花根根芯浸膏的制備方法包括以下步驟：
[0006] 1)將火把花根去皮，保留根芯，將根芯粉碎，得到提取原料；
[0007] 2)將提取原料用50-60 %的乙醇提取，得到乙醇提取液；
[0008] 3)回收乙醇提取液中的乙醇，將乙醇提取液的乙醇濃度降低到5-10%;
[0009] 4)將步驟3得到的乙醇提取液，在低于10°C條件下，靜置超過12h，上清液過濾，濃 縮，得到火把花根根芯浸膏；
[0010] 5)稱取0. 93g火把花根根芯浸膏，加入20mL蒸餾水，不斷攪拌使其溶解，制成含藥 基質(zhì)；
[0011] 6)向含藥基質(zhì)中緩慢加入5mLl，2-丙二醇，0. 3g苯甲酸鈉，0. 5g吐溫-80,0. 3g冰 片，攪拌混勻后，用80%乙醇定容至100mL。過濾，分裝，灌裝入噴霧劑瓶中，即得用于消腫 止痛的火把花根外用制劑。
[0012] 所述的用于消腫止痛的火把花根外用制劑在制備鎮(zhèn)痛外用制劑藥物中的應(yīng)用。
[0013] 本發(fā)明的有益技術(shù)效果是：本發(fā)明提供了的火把花根提取的外用制劑，作為外用 制劑可以有效的降低火把花根提取物的細(xì)胞毒性。并且以火把花根的根芯入藥，并采用低 醇濃度的除雜方法，也更加進(jìn)一步的降低了火把花根外用制劑的毒性。
[0014] 實(shí)施例1火把花根提取方法方法的考察
[0015] 1.將火把花根去皮，保留根芯，稱取去皮的火把花根根芯10kg，將根芯粉碎，得到 提取原料；將提取原料用3倍以上提取原料重量的50-60%的乙醇提取3次以上，得到乙醇 提取液；在低于l〇°C條件下，靜置超過12h，上清液過濾，濃縮上清液，得到火把花根根芯浸 膏1。
[0016] 2.將火把花根去皮，保留根芯，稱取去皮的火把花根根芯10kg，將根芯粉碎，得到 提取原料；將提取原料用3倍以上提取原料重量的50-60%的乙醇提取3次以上，得到乙醇 提取液；回收乙醇提取液中的乙醇，將乙醇提取液的乙醇濃度降低到5-10% ;在低于10°C 條件下，靜置超過12h，上清液過濾，濃縮上清液，得到火把花根根芯浸膏2。
[0017] 3.將火把花根去皮，保留根芯，稱取去皮的火把花根根芯10kg，將根芯粉碎，得到 提取原料；將提取原料用3倍以上提取原料重量的50-60%的乙醇提取3次以，得到乙醇 提取液；回收乙醇提取液中的乙醇至無醇味，加水至原體積；在低于l〇°C條件下，靜置超過 12h，上清液過濾，濃縮上清液，得到火把花根根芯浸膏3。
[0018] 4.稱取火把花根10kg，將火把花根粉碎，得到提取原料；將提取原料用3倍以上提 取原料重量的50-60%的乙醇提取3次以上，得到乙醇提取液；回收乙醇提取液中的乙醇， 將乙醇提取液在低于l〇°C條件下，靜置超過12h，上清液過濾，濃縮上清液，得到火把花根 浸膏4。
[0019] 以雷公藤甲素為指標(biāo)對(duì)上述三組火把花根根芯浸膏進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)，具體如表1所 不。
[0020] 表1不同火把花根提取物的質(zhì)量比較
[0021]
[0022] 對(duì)上述三組浸膏進(jìn)行急性毒理檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為體重20 ±2g的小鼠。具體如表2 所示。
[0023] 表2不同火把花根提取物急毒考察
[0024]

[0025] 由此可知，采用火把花根芯的乙醇提取物并對(duì)乙醇提取物采用醇濃度降低到 5-10%靜置除雜，不僅能夠降低雜質(zhì)率，不影響活性成分含量，而且浸膏的色素含量大幅度 的降低，有利于制劑。并且浸膏的毒性大幅度的降低。
[0026] 實(shí)施例2火把花根外用制劑的制備
[0027] 將實(shí)施例1中的四種浸膏，分別稱取0. 93g火把花根根芯浸膏，加入20mL蒸餾水， 不斷攪拌使其溶解，制成含藥基質(zhì)；向含藥基質(zhì)中緩慢加入5mLl，2-丙二醇，0.3g苯甲酸 鈉，0. 5g吐溫-80,0. 3g冰片，攪拌混勾后，用80%乙醇定容至100mL。過濾，分裝，灌裝入噴 霧劑瓶中，分別制得火把花根噴霧劑1、火把花根噴霧劑2、火把花根噴霧劑3、火把花根噴 霧劑4。
[0028] 綜合比較火把花根噴霧劑1、火把花根噴霧劑2、火把花根噴霧劑3、火把花根噴霧 劑4四種制劑，發(fā)現(xiàn)火把花根噴霧劑1和火把花根噴霧劑4制劑粘稠，顏色較深，噴霧到人 體的皮膚上有油膩不適感。
[0029] 實(shí)施例3火把花根外用制劑對(duì)熱板法所致小鼠疼痛的影響
[0030] 取雌性小鼠60只隨機(jī)分6組，即空白對(duì)照組、陽性對(duì)照組（法斯通凝膠）、火把花 根噴霧劑1、火把花根噴霧劑2、火把花根噴霧劑3和火把花根噴霧劑4組，各組小鼠腹部剃 毛約2X2. 5cm2,空白組外涂卡波姆基質(zhì)0.lg/只，陽性對(duì)照組外涂法斯通凝膠0.lg/只，其 余給藥組外涂火把花根噴霧劑0. 3ml/只，每天涂藥1次于剃毛皮膚上，連續(xù)7天，末次涂藥 后30、60、90min各把小鼠放在預(yù)熱至50°C的智能熱板儀上，以小鼠舔后足反應(yīng)的潛伏期為 痛閉指標(biāo)，比較各組差異。實(shí)驗(yàn)前篩選動(dòng)物，將反應(yīng)潛伏期小于5s或大于30s的動(dòng)物剔除。 以SPSS13. 0完成統(tǒng)計(jì)。
[0031] 表3火把花根噴霧劑對(duì)小鼠痛反應(yīng)潛伏期（s)的影響的動(dòng)態(tài)變化（S士s,η= 10)
[0032]
[0033] 注：*Ρ〈0.05,#Ρ〈0.01，與空白對(duì)照組比較；#Ρ〈0.01，與陽性對(duì)照組比較。
[0034] 表4火把花根噴霧劑對(duì)小鼠痛反應(yīng)潛伏期（s)的影響（S±S，η= 10)
[0035]
[0036] 注：*P〈0. 01，與空白對(duì)照組比較；#P〈0. 01，與陽性對(duì)照組比較。
[0037] 由表2可知，藥后60min，火把花根噴霧劑1和火把花根噴霧劑2組小鼠痛反應(yīng)潛 伏期顯著高于空白組（P〈〇. 01)，也顯著高于陽性對(duì)照組（P〈〇. 01)，陽性對(duì)照組、3%和12} 蟾酥軟膏組與空白組比較無顯著性差異（P>〇. 05);藥后90min，火把花根噴霧劑3和火把花 根噴霧劑4與空白組比較無顯著性差異（P>0. 05)。
[0038] 取大鼠60只隨機(jī)分6組，即空白對(duì)照組、陽性對(duì)照組（法斯通凝膠）、火把花根噴 霧劑1、2、3、4組。先用足趾容積測(cè)量?jī)x測(cè)量大鼠后肢足趾容積，然后每天足趾部涂藥1次， 空白組外涂卡波姆基質(zhì)lg/只，陽性對(duì)照組外涂法斯通凝膠1留只，其余給藥組外涂各濃度 蟾酥軟膏1留只，連續(xù)7天。末次涂藥后lh每鼠右后足踢皮下注射新鮮蛋清0. 2ml，分別于 1，2, 3,4h測(cè)量大鼠后肢足趾容積各一次，計(jì)算足趾腫脹程度，比較各組差異。
[0039] 腫脹程度=致炎后同側(cè)足趾容積-致炎前同側(cè)足趾容積
[0040] 表5火把花根噴霧劑對(duì)蛋清所致大鼠足腫脹的影響（η=10)
[0041 ]
[0042] 注：*Ρ〈0· 05, #Ρ〈0· 01，與空白對(duì)照組比較。
[0043] 由表5可知，火把花根噴霧劑2組大鼠右足趾腫脹度顯著低于空白組（Ρ〈0. 01); 另外，陽性對(duì)照組、火把花根噴霧劑1、火把花根噴霧劑3、火把花根噴霧劑4組右足趾腫脹 度均顯著低于空白組（P〈〇. 05)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種用于消腫止痛的火把花根外用制劑，其特征在于：所述火把花根外用制劑中的 活性成分為火把花根的去皮根芯的乙醇提取物。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于消腫止痛的火把花根外用制劑，其特征在于：所述提取 火把花根去皮根芯的乙醇濃度為50-60%。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于消腫止痛的火把花根外用制劑的制備方法，其特征在 于：所述用于制備外用制劑的火把花根根芯浸膏的制備方法包括以下步驟： 1) 將火把花根去皮，保留根芯，將根芯粉碎，得到提取原料； 2) 將提取原料用50-60%的乙醇提取，得到乙醇提取液； 3) 回收乙醇提取液中的乙醇，將乙醇提取液的乙醇濃度降低到5-10% ; 4) 將步驟3得到的乙醇提取液，在低于10°C條件下，靜置超過12h，上清液過濾，濃縮， 得到火把花根根芯浸膏。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于消腫止痛的火把花根外用制劑的制備方法，其特征在 于：所述制劑的制備方法包括以下步驟： 1) 稱取0.93g火把花根根芯浸膏，加入20mL蒸餾水，不斷攪拌使其溶解，制成含藥基 質(zhì)； 2) 向含藥基質(zhì)中緩慢加入5mLl，2-丙二醇，0.3g苯甲酸鈉，0.5g吐溫-80,0.3g冰 片，攪拌混勾后，用80%乙醇定容至100mL; 過濾，分裝，灌裝入噴霧劑瓶中，即得用于消腫止痛的火把花根外用制劑。5. 權(quán)利要求1、2所述的用于消腫止痛的火把花根外用制劑在制備消腫止痛外用制劑 藥物中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種用于消腫止痛的火把花根外用制劑、制備方法及其應(yīng)用，其中的活性成分為火把花根的去皮根芯的乙醇提取物。本發(fā)明提供了的火把花根提取的外用制劑，作為外用制劑可以有效的降低火把花根提取物的細(xì)胞毒性。并且以火把花根的根芯入藥，并采用低醇濃度的除雜方法，也更加進(jìn)一步的降低了火把花根外用制劑的毒性。
【IPC分類】A61P29/00, A61K36/37, A61K125/00, A61K9/12
【公開號(hào)】CN105250348
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510797473
【發(fā)明人】勵(lì)娜, 梁旭明, 楊大堅(jiān), 姚媛媛, 陳一龍, 張小梅, 廖系晗, 陽勇, 秦偉瀚
【申請(qǐng)人】重慶市中藥研究院
【公開日】2016年1月20日
【申請(qǐng)日】2015年11月18日