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來自植物提取物的新型害蟲驅(qū)避劑的制作方法_4

文檔序號(hào):8475952閱讀:來源:國知局
50%的對(duì)照植物展示了薊馬侵襲的跡象,而實(shí)驗(yàn)溫室中沒有一株植物展示薊馬侵襲的跡象,從而證明了本發(fā)明與B1-Bee技術(shù)結(jié)合使用相對(duì)于單獨(dú)使用B1-Bee技術(shù)的改進(jìn)的效果實(shí)施例4
在兩個(gè)花盆中的每個(gè)花盆種植若干棉花幼苗,并將其放置在單個(gè)籠內(nèi)。一個(gè)花盆中的幼苗用根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例的蓍屬提取物(1% w/v, 60 ml/m2)處理,而第二個(gè)花盆中的幼苗作為對(duì)照不進(jìn)行處理。將約100只粉虱釋放至籠中,36小時(shí)后,測(cè)量?jī)蓚€(gè)花盆中各個(gè)花盆的粉虱。進(jìn)行三個(gè)獨(dú)立的重復(fù)實(shí)驗(yàn)。在含有對(duì)照植物的花盆中發(fā)現(xiàn)平均>80只粉虱,而在含有處理過的植物的花盆中發(fā)現(xiàn)〈5只粉虱,即,在此公開的本發(fā)明使粉虱侵襲數(shù)量下降 >90%ο
[0110]實(shí)施例5
用含有約75個(gè)直徑約5-10mm的孔的40目網(wǎng)覆蓋含有番茄植物的6個(gè)花盆。覆蓋3個(gè)花盆的網(wǎng)用根據(jù)在此公布的本發(fā)明的蓍提取物涂布并且在陽光下干燥大約半小時(shí),而剩余三個(gè)花盆用乙醇/水溶液涂布作為對(duì)照。將6個(gè)花盆引入含有約兩打番茄潛葉蟲(番茄斑潛蠅)的容器中。在試驗(yàn)開始后15天,對(duì)花盆檢查番茄潛葉蟲侵襲。在每個(gè)對(duì)照花盆中發(fā)現(xiàn)死亡的番茄潛葉蟲(在兩個(gè)花盆中每個(gè)花盆有三只,并且在第三個(gè)花盆中有一只),并且其中所有的植物展示了啃咬過的證據(jù)。在實(shí)驗(yàn)植物中既沒有發(fā)現(xiàn)死亡的潛葉蟲也沒有發(fā)現(xiàn)被潛葉蟲攻擊的證據(jù)。
[0111]實(shí)施例6
2012 年 12 月,與 Jacob Nakash, Bet Shean Valley 合作進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
[0112]用EdenShield產(chǎn)品(濃度為20 mg/ml的蓍提取物)處理甜椒葉,并與未處理的葉子和用紅蜘蛛螨侵襲的另外的葉子放置在皮氏培養(yǎng)皿中。如上所述,制備5個(gè)相同的培養(yǎng)皿。3天后監(jiān)測(cè)培養(yǎng)皿,計(jì)算多少紅蜘蛛螨侵襲處理過的葉子和對(duì)照的葉子。
[0113]現(xiàn)在參見圖5A,其展示了實(shí)驗(yàn)設(shè)置的照片。
[0114]圖5B圖形化地展示了所述實(shí)驗(yàn)的結(jié)果??梢郧宄闯?,三天后,相比未處理的葉子中的紅蜘蛛螨的數(shù)量,用EdenShield產(chǎn)品處理的葉子中的紅蜘蛛螨的數(shù)量顯著減少。
[0115]實(shí)施例7
2012 年 12 月,與 Jacob Nakash, Bet Shean Valley 合作進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
[0116]用抗害蟲網(wǎng)覆蓋各具有一株甜椒植物的兩個(gè)盆,并且通過引入紅蜘蛛螨的管道互相連接該兩個(gè)盆。接著,蜘蛛螨自由選擇其將轉(zhuǎn)向哪個(gè)盆。通過將EdenShield產(chǎn)品(濃度為20 mg/ml的蓍提取物)噴射在網(wǎng)蓋上用該產(chǎn)品處理一個(gè)盆的網(wǎng)蓋,并且另一個(gè)盆作為對(duì)照,因此其網(wǎng)不用任何材料處理。利用所述的實(shí)驗(yàn)設(shè)置實(shí)施兩個(gè)實(shí)驗(yàn),并且不同之處僅在于引入管道中的蜘蛛螨的數(shù)量。
[0117]現(xiàn)在參見圖6A,其展示了實(shí)驗(yàn)設(shè)置的照片。
[0118]現(xiàn)在參見圖6B,其圖形化地描述了每個(gè)盆中的蜘蛛螨的數(shù)量。可以看出,雖然在各實(shí)驗(yàn)中引入的蜘蛛螨的數(shù)量不同,但其優(yōu)選百分比是類似的。
[0119]實(shí)施例8
與Jacob Nakash, Bet Shean Valley合作進(jìn)行實(shí)驗(yàn),在以色列的Kibutz Shluchot,和Sde-Elyahu, Bet Shean Valley 實(shí)施。
[0120]在Kibutz Shluchot進(jìn)行的一個(gè)實(shí)驗(yàn)中,選作試驗(yàn)的4株果樹為Hatrawi種群,6-7年,各自含有約15-20束花束。
[0121]如常規(guī)農(nóng)業(yè)措施,在果樹上的所有花束用10目塑料網(wǎng)覆蓋。
[0122]在20/9/2012,選作實(shí)驗(yàn)的4株樹中每株樹上的4束花束另外用具有10 mm開口的棉網(wǎng)覆蓋,在放置前,在植物提取物溶液中浸潰該棉網(wǎng)。未用棉網(wǎng)覆蓋的花束作為對(duì)照。
[0123]在10/10/2012 (用棉網(wǎng)覆蓋后20天),用植物提取物溶液噴射網(wǎng)。
[0124]在18/10/2012(用植物提取物溶液噴射網(wǎng)后8天),經(jīng)處理的花束抽取露尾甲樣品,并且與未處理的樹的花束平均量比較。
[0125]現(xiàn)在參見圖7A,其展示了 Kibutz Shluchot中的實(shí)驗(yàn)設(shè)置的照片。
[0126]在Kibutz Sde Eliyahu進(jìn)行的第二實(shí)驗(yàn)中,2株選作試驗(yàn)的15年的果樹為Halawi種群并且含有約18束花束。
[0127]如常規(guī)農(nóng)業(yè)措施,在果樹上的所有花束用10目塑料網(wǎng)覆蓋。
[0128]類似Kibutz Shluchot 實(shí)驗(yàn):
在20/9/2012,一株樹上的所有花束另外用具有10 mm開口的棉網(wǎng)覆蓋,在放置前,在植物提取物溶液中浸潰該棉網(wǎng)。第二株樹的的花束用棉網(wǎng)覆蓋并且作為實(shí)驗(yàn)對(duì)照。
[0129]在10/10/2012 (用棉網(wǎng)覆蓋后20天),用植物提取物溶液噴射棉網(wǎng)。
[0130]在24/10/2012(用植物提取物溶液噴射網(wǎng)后2周),經(jīng)處理的花束抽取露尾甲樣品,并且與未處理的樹的花束平均量比較。
[0131]現(xiàn)在參見圖7b,其展示了 Kibutz Sde Eliyahu的實(shí)驗(yàn)設(shè)置的照片。
[0132]現(xiàn)在參見圖7C,其在圖表中總結(jié)了實(shí)驗(yàn)結(jié)果。表明在Kibutz Shluhot中,處理使露尾甲的平均數(shù)量下降66%,而在Kibutz Sde Eliyahu,下降88%。
[0133]實(shí)施例9
在具有不同生物鑒定活性的Achillea Fragrantissima提取物上進(jìn)行特定的薄層色譜(TLC)實(shí)驗(yàn)以檢測(cè)黃酮類。如實(shí)施例6所述,使用薊馬代替蜘蛛螨確定生物鑒定活性。
[0134]將樣品放置在作為固定相的TLC硅膠60F254覆蓋的25塊20x20鋁板上。移動(dòng)相由乙酸乙酯、甲酸、乙酸和水分別以100:11:11: 27的關(guān)系組成。
[0135]樣品用二苯基硼基氧基乙胺(Diphenylboryloxyethylamine)的1%甲醇溶液,隨后用聚乙二醇-4600的5%乙醇溶液染色,接著在室溫下干燥。
[0136]在uv-366nm下進(jìn)行可視化。
[0137]現(xiàn)在參見圖8,其展示了 TLC實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。
[0138]道I為由提取過程的固態(tài)殘?jiān)苽涞摹包S金標(biāo)準(zhǔn)”;道2-在室溫(RT)下,96%乙醇中進(jìn)行3個(gè)小時(shí)的植物提取物;道3-在沸騰的96%乙醇中進(jìn)行I小時(shí)的植物提取物(第一提取物);道4-在沸騰的96%乙醇中進(jìn)行I小時(shí)的植物提取物(第二提取物);道5-在沸騰的96%乙醇中進(jìn)行I小時(shí)的植物提取物(第三提取物)-M 6-在室溫下保持3個(gè)小時(shí)的25%乙醇。
[0139]圖8可見,道6的樣品中缺乏在Rf 0.4 (801)的化合物并且在道4_5的樣品中該化合物以較小的濃度存在。
[0140]道1-3中的樣品在不同的生物鑒定中是穩(wěn)定的。
[0141]在連續(xù)提取(道3_%的樣品)的情況下,各連續(xù)提取物中,驅(qū)避劑活性顯著下降。在生物鑒定中,樣品6沒有活性。
[0142]顯然,Rf 0.4中的材料的成分和提取物的驅(qū)避劑活性之間有關(guān)聯(lián)。
[0143]實(shí)施例10
在具有不同生物鑒定活性的Achillea Fragrantissima提取物上進(jìn)行特定的薄層色譜(TLC)實(shí)驗(yàn)以檢測(cè)皂苷。如實(shí)施例6所述,使用薊馬代替蜘蛛螨確定生物鑒定活性。
[0144]將樣品放置在作為固定相的TLC硅膠60F254覆蓋的25塊20x20鋁板上。移動(dòng)相由三氯甲烷、乙酸、甲醇和水分別以64:32:12:8的關(guān)系組成。
[0145]樣品用茴香醒-硫酸(0.5ml的茴香醒與1ml冰乙酸、85ml甲醇和5ml濃硫酸(H2S04)混合)染色,接著在100° C干燥2-3min。
[0146]在uv-366nm下進(jìn)行可視化。
[0147]現(xiàn)在參見圖98,其展示了 TLC實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。
[0148]道I為有提取過程的固態(tài)殘?jiān)苽涞摹包S金標(biāo)準(zhǔn)”;道2-在室溫(RT)下,96%乙醇中進(jìn)行3個(gè)小時(shí)的植物提取物;道3-在沸騰的96%乙醇中進(jìn)行I小時(shí)的植物提取物(第一提取物);道4-在沸騰的96%乙醇中進(jìn)行I小時(shí)的植物提取物(第二提取物);道5-在沸騰的96%乙醇中進(jìn)行I小時(shí)的植物提取物(第三提取物)-M 6-25%乙醇在室溫下保持3個(gè)小時(shí)。
[0149]Rf 0.35 (901)的化合物和Rf 0.56 (902)的化合物僅在活性提取物中存在并且是樣品#1、2和3的活性原因。Rf 0.44 (903)化合物2僅在無活性的提取物中存在。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種用于驅(qū)除害蟲的方法,該方法包括施加從選自下組的至少一種植物生產(chǎn)的提取物的步驟:蓍屬、Varthemia iph1noides、Haplophyllum turberculatum、Pulicariaincisa、Asteriscus graveolens、Tanacetum sinaicum、毛蕊花屬、艾屬,和阿米療。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述至少一種植物為蓍屬成員。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法,其特征在于,所述蓍屬的所述成員選自:(a)Achilleasantolina、(b) Achillea fragrantissima、(c)鳳尾蓍、(d)千葉蓍,及其任意組合。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,另外包括制備提取物的步驟,所述制備提取物的步驟包括:(a)將所述至少一種植物的地上根部在溶劑中放置預(yù)定時(shí)間長(zhǎng)度,藉此在所述溶劑中形成所述至少一種植物的提取物;以及(b)在所述預(yù)定時(shí)間長(zhǎng)度之后,移除剩余的提取物固體。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,所述溶劑為至少95%純度的乙醇。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,所述將所述至少一種植物的地上根部在溶劑中放置預(yù)定時(shí)間長(zhǎng)度的步驟包括將所述至少一種植物的所述地上部分在96%乙醇中放置約24小時(shí)。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,所述將所述至少一種
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