專(zhuān)利名稱(chēng)：：局部用皮膚增白美容產(chǎn)品的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種人體皮膚局部用增白美容產(chǎn)品以及使人體皮膚增白的方法。許多人擔(dān)心他們皮膚上的某些色素沉淀現(xiàn)象。例如有老年斑或皺紋的人們希望這些色斑能變得不太明顯。其他人則希望降低因日曬造成的皮膚黑化，或者能使其天然膚色變淺。為滿(mǎn)足這些要求，嘗試研制了許多能降低黑素細(xì)胞中色素生成的產(chǎn)品。但目前發(fā)現(xiàn)的這些物質(zhì)都有不利的副作用，例如皮膚刺激性。因此這些物質(zhì)不適用于化妝品，或者當(dāng)能以一定濃度用于局部涂敷而其皮膚增白效果低于所預(yù)期的效果。人們認(rèn)為將各種皮膚增白物質(zhì)共用會(huì)降低副作用，但這樣做的主要麻煩在于由于各物質(zhì)的競(jìng)爭(zhēng)作用，這種共用也會(huì)使皮膚增白作用降低。因此需要對(duì)皮膚增白美容產(chǎn)品的效能進(jìn)行改進(jìn)。英國(guó)專(zhuān)利公開(kāi)2287405中公開(kāi)了一種皮膚增白美容制劑，其中含有光果甘草提取物或相應(yīng)種的植物提取物，以及α-羥基酸、β-羥基酸或酮酸，或其酰胺、鹽或酯。這種混合物據(jù)說(shuō)對(duì)酪氨酸酶具有協(xié)同抑制作用，從而能抑制黑色素的形成。國(guó)際專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)94/07462公開(kāi)的組合物特別是皮膚增白組合物中含有視黃醇或其衍生物以及一種雙羧基酸。美國(guó)專(zhuān)利5523077提出了一種皮膚增白和抑曬組合物，其中含有一種化合物，該化合物不含谷胱甘肽和氫醌或者氫醌的烷基醚或芳烷基醚。優(yōu)選采用的該不含谷胱甘肽的化合物是buthioninesulfoximine或胱氨。《皮膚生物學(xué)進(jìn)展》(AdvancesinBiologyofskin,W.Motagna和F.Hu編，PergamonPress,Oxford,1967,421-445頁(yè))第26章所示的防曬研究結(jié)果包括脫色劑對(duì)正常色素細(xì)胞的作用的一覽表。在研究中，對(duì)黑色金魚(yú)皮下注射濃度為0.5％的被測(cè)化合物。報(bào)道稱(chēng)包括巰基乙胺(MEA)和胱氨在內(nèi)的巰基胺衍生物能減輕色素沉著。目前我們發(fā)現(xiàn)將某些巰基胺衍生物與雙羧基酸或甘草提取物共用能增進(jìn)對(duì)黑色素生成的抑制作用。因此本發(fā)明提供了一種局部用皮膚增白美容產(chǎn)品，其中包含存在于適用于化妝品的載體中的組分(A)半胱氨和(B)甘草提取物或含7-30個(gè)碳原子的雙羧基酸。本發(fā)明包括一種用于人體皮膚增白的美容方法，該方法是通過(guò)在皮膚上局部涂敷本發(fā)明的產(chǎn)品。組分A是半胱胺。半胱胺的概念包括2-巰基乙胺(2-MEA)，即，其堿以及鹽酸巰基乙胺。最優(yōu)選的組分A是2-巰基乙胺。組分B是含7-30個(gè)碳原子的雙羧基酸、甘草提取物或其混合物。雙羧基酸是具有HOOC-R-COOH結(jié)構(gòu)的酸。R是直鏈或支鏈的飽和或不飽和的，它可被取代，例如可經(jīng)羥基化。優(yōu)選R基是不飽和的，并含8-23個(gè)碳原子，特別優(yōu)選含13-20個(gè)碳原子。因此優(yōu)選的酸所含的碳原子總數(shù)為10-25個(gè)碳原子，特別為15-22個(gè)碳原子。特別優(yōu)選的雙羧基酸含有該鏈長(zhǎng)且碳鏈為直鏈、未經(jīng)取代的，并且是含一個(gè)、二個(gè)或三個(gè)不飽和鍵。甘草提取物例如可根據(jù)J02204495所述的方法進(jìn)行制備，例如采用10份(體積)己烷與1-4份(體積)丙酮或0.5-1.5份(體積)乙醇的混合溶劑提取甘草根或其水提剩余物并除去溶劑。甘草提取物是可商購(gòu)的，例如購(gòu)自MaruzenPharmaceuticalCompany,Japan。優(yōu)選該產(chǎn)品的pH為5-9，更優(yōu)選為6-8。將組分A和組分B加入適用于化妝品的載體中以制得該美容產(chǎn)品。載體可包括常用于護(hù)膚品的成分，例如水、液體或固體護(hù)膚劑、硅油、乳化劑、溶劑、保濕劑、增稠劑、撒粉、噴灑劑等。其它特殊的皮膚有效活性成分如防曬劑和羥基酸也可加入載體中。特別優(yōu)選在本發(fā)明產(chǎn)品加入防曬劑，特別是當(dāng)產(chǎn)品用于一般性皮膚增白而不是色斑護(hù)理時(shí)。載體中還可包含輔劑如香精、抗氧劑、防腐劑、著色劑和緩沖劑。該產(chǎn)品適宜制成常用的護(hù)膚品劑型如膏霜或乳液等。該產(chǎn)品也可以是被稱(chēng)為“洗除式產(chǎn)品”的產(chǎn)品，例如浴用凝膠，其中可能包含活性成分輸送系統(tǒng)，能增進(jìn)漂洗過(guò)程中皮膚對(duì)活性成分的吸附，但優(yōu)選該產(chǎn)品是免洗產(chǎn)品，即涂敷在皮膚上后無(wú)需仔細(xì)漂洗以便從皮膚基本除去的產(chǎn)品?？刹捎贸Ｓ糜谥苽渥o(hù)膚品的相同方法制備該產(chǎn)品。適宜先將活性成分溶解或分散于組合物的一部分水或其它溶劑或者液體中?？刹捎贸Ｒ?guī)方法將產(chǎn)品盛裝于例如小罐、瓶等容器中。優(yōu)選產(chǎn)品中所含的組分A和組分B的重量比為100∶1至1∶5000，更優(yōu)選為10∶1至1∶500。產(chǎn)品中半胱胺的用量?jī)?yōu)選為0.001-10％(重量)，更優(yōu)選為0.1-8％(重量)，特別是1-5％(重量)。產(chǎn)品中組分B的用量?jī)?yōu)選為0.001-20％(重量)，更優(yōu)選為0.1-15(重量)特別是1-10％(重量)。組分A和B的混合用量?jī)?yōu)選占產(chǎn)品的0.1-25％(重量)，更優(yōu)選為1-15％(重量)。如必要，雙羧基酸可以其鹽或酯的形式加入本發(fā)明產(chǎn)品中，它可在產(chǎn)品中或皮膚上或者皮膚內(nèi)部分釋放出酸。同樣，能釋放出半胱胺的半胱胺衍生物也可用作組分A?？砂凑粘Ｒ?guī)護(hù)膚品的相似涂敷方法將該產(chǎn)品涂敷在皮膚上。例如可將其每日1-3次涂敷在皮膚(例如面部和/或手部或手臂)上。對(duì)于色斑，用戶(hù)例如可選擇將該產(chǎn)品僅涂敷在作用部位。一般經(jīng)2-4月會(huì)出現(xiàn)可見(jiàn)的皮膚增白效果，這要視皮膚的情況、產(chǎn)品中組分A和B的用量和產(chǎn)品的用量、以及涂敷頻率而定。本發(fā)明產(chǎn)品特別適用于一般性皮膚增白，當(dāng)產(chǎn)品用于日用時(shí)，其中還可特定地包含防曬劑。測(cè)定方法*細(xì)胞維持在37℃、濕度飽和、5％二氧化碳存在條件下，將B16-F1小鼠黑素瘤細(xì)胞(AmericanTypeCultureCollection,Maryland,USA)在75平方厘米的含RPMI1640培養(yǎng)基(ICN-Flow，分類(lèi)號(hào)12-60-54)的培養(yǎng)瓶中維持，培養(yǎng)基中額外加入了L-葡糖胺(4mM)和10％胎牛血清(FBS)。細(xì)胞每周經(jīng)繼代移植2次。*色素沉著試驗(yàn)微融合的第3代和第25代間的B16細(xì)胞的接種密度達(dá)5×105細(xì)胞/75平方厘米后72小時(shí)進(jìn)行采集。對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)，經(jīng)離心(60克)成球，并再懸浮于加有L-葡糖胺(4mM)和10％FBS的DMEM(ICN-Flow分類(lèi)號(hào)16-427-54)。將細(xì)胞再接種在含100μlDMEM的微量滴定盤(pán)的圓底孔中，接種密度為5×103細(xì)胞/孔。接種盤(pán)培養(yǎng)過(guò)夜。約24小時(shí)后，除去培養(yǎng)基并立即更換成200μl含或不含被測(cè)物的經(jīng)預(yù)熱的新鮮培養(yǎng)基。每項(xiàng)處理過(guò)程重復(fù)4次。將180μl已著色的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到干凈的平底微量滴定盤(pán)中，在每孔中充入正辛烷蒸氣以除去氣泡，用微滴定盤(pán)讀數(shù)器(DynatechMR5000)測(cè)定其在540nm下的吸光度，并用新鮮培養(yǎng)基的吸光度基準(zhǔn)值校準(zhǔn)，從而測(cè)定出約120小時(shí)后每孔中產(chǎn)生的黑色素量。校準(zhǔn)的吸光度值與黑色素濃度成正比，被測(cè)的皮膚增白成分的色素沉著百分比可按下式計(jì)算色素沉著百分比=(540nm下被測(cè)物光密度/540nm下參照物光密度)×100％其中540nm下和被測(cè)物光密度和540nm下參照物光密度是指孔中含被測(cè)物的培養(yǎng)基和不含被測(cè)物的培養(yǎng)基經(jīng)校準(zhǔn)的吸光度平均值。被測(cè)物產(chǎn)生的抑制百分比即為色素沉著百分比。*細(xì)胞成活率試驗(yàn)可通過(guò)抑制黑色素生成過(guò)程來(lái)減少黑色素產(chǎn)生，細(xì)胞毒性和細(xì)胞增殖對(duì)黑色素的產(chǎn)生也有影響。為測(cè)定這是否存在，通過(guò)中性紅色染料的吸光度來(lái)測(cè)定細(xì)胞成活率。中性紅是水溶性染料，能透過(guò)完整的胞質(zhì)膜并在完整細(xì)胞的溶菌體內(nèi)部富集。中性紅染料的吸收量與培養(yǎng)物中活細(xì)胞數(shù)成正比。換除微量滴定盤(pán)中黑色素分析用培養(yǎng)基后，立即將200μl含濃度為25μl/ml的中性紅(購(gòu)自Sigma,UK，分類(lèi)號(hào)2889)的200μl經(jīng)預(yù)熱的新鮮培養(yǎng)基加入細(xì)胞中，培養(yǎng)3小時(shí)以維持細(xì)胞。倒置滴定盤(pán)并在吸水紙上輕拍可除去沒(méi)有吸收染料的細(xì)胞。用200μlPBS洗滌細(xì)胞，然后再除去PBS。加入100μl溶劑(50％水、49％乙醇、1％乙酸)。在室溫下靜置20分鐘，然后用微量滴定盤(pán)振蕩器將各滴定盤(pán)振蕩5秒鐘。按上述方法測(cè)定吸光度。在對(duì)下述的被測(cè)皮膚增白成分的測(cè)定中，被測(cè)物對(duì)細(xì)胞的成活率并無(wú)顯著影響。測(cè)定下表所示的是對(duì)被測(cè)的皮膚增白成分及其混合物的測(cè)定及其用量。所有成分的用量均以mmol計(jì)，但甘草提取物的用量以百萬(wàn)分之一重量份(ppm)計(jì)。被測(cè)成分引起黑色素生成抑制百分比也列于表中。試驗(yàn)中，被測(cè)物取自2-巰基乙胺和檸檬酸的含水基液。首先將甘草提取物溶于DMSO。使得每孔中DMSO濃度為0.5％(重量)。當(dāng)采用DMSO時(shí)，應(yīng)確保對(duì)照組每孔中DMSO的用量(0.5％)也相同。先將雙羧基酸溶于1N氫氧化鈉中。將p調(diào)節(jié)至8.0至9.0，然后進(jìn)一步稀釋該溶液，得到適用的基液。其pH為7.4。表A中所示的測(cè)定用雙羧基酸是C18-雙羧基酸。該雙羧基酸產(chǎn)品購(gòu)自UnichemaNetherlands。它主要由帶有含18個(gè)碳原子的直鏈的單-和雙-不飽和雙羧基酸構(gòu)成，如R基帶有16個(gè)碳原子。表A2-巰基乙胺和雙羧基酸<tablesid="table1"num="001"><tablewidth="510">％抑制百分比二羧基酸(mM)00.512-巰基乙胺(mM)00-9390.011-10890.029-3900.03192888</table></tables>表B2-巰基乙胺和甘草提取物<tablesid="table2"num="002"><tablewidth="536">％抑制百分比甘草提取物(ppm)01.83.572-巰基乙胺(mM)001625720.0172430890.02104453890.0326535291</table></tables>表C2-基乙胺和煙酰胺(對(duì)照組)<tablesid="table3"num="003"><tablewidth="518">％抑制百分比煙酰胺0510152-巰基乙胺(mM)00-23-17-140.0136-17-10-60.0248-4350.0361025</table></tables>表D甘草提取物和檸檬酸(對(duì)照組)<tablesid="table4"num="004"><tablewidth="508">％抑制百分比甘草提取物(ppm)01.83.5檸檬酸(mM)0013690.5425817157516458</table></tables>如果兩種皮膚增白成分彼此不相互反應(yīng)，可以預(yù)知將其共用時(shí)的色素沉著比例(色素沉著百分比/100)應(yīng)為其單獨(dú)使用時(shí)色素沉著比例之和。由此可計(jì)算出共用并且無(wú)相互反應(yīng)時(shí)的抑制百分比。上述結(jié)果表明半胱胺與雙羧基酸或甘草提取物的結(jié)合物對(duì)抑制黑色素產(chǎn)生具有協(xié)同作用。與此相反，半胱胺與常用的皮膚增白成分煙酰胺的結(jié)合物卻顯示不產(chǎn)生增效作用?？磥?lái)這些藥劑有害地相互影響而不是相互增強(qiáng)彼此的效應(yīng)。表D表明將甘草提取物和檸檬酸(一種α-羥基酸)共用并無(wú)相互作用，盡管根據(jù)英國(guó)專(zhuān)利公開(kāi)GB2287405的內(nèi)容本應(yīng)具有協(xié)同作用。加入檸檬酸還會(huì)對(duì)甘草提取物的黑色素生成抑制作用產(chǎn)生不利影響。實(shí)施例1以下組合物描述的是本發(fā)明的膏霜乳化體。<tablesid="table5"num="005"><tablewidth="550">化學(xué)成分全名或其CIFA命名商標(biāo)名重量％甘草提取物3.02-巰基乙胺2.0EDTA二鈉SequestereneNa20.05硅酸鋁鎂VeegumUltra0.6對(duì)羥苯甲酸甲酯MethylParaben0.15單甲基聚硅氧烷DCAntifoamEmulsion0.011、3-丁二醇ButyleneGlycol1,33.0羥乙基纖維素Natrosol250HHR0.5甘油(美國(guó)藥典)GlycerineUSP2.0黃原膠Keltrol10000.2三乙醇胺Triethanolamine(99％)1.2硬脂酸Pristerene49113.0對(duì)羥苯甲酸丙酯NFPropylparabenNF0.1氫化硬脂酸甘油酯NaturechemGMHS1.5硬脂醇Lanette18DEO1.5棕櫚酸異硬脂醇酯ProtachemISP6.0辛酸C12-15醇酯HetesterFAO3.0二甲基聚硅氧烷SiliconeFluid200(50cts)1.0膽甾醇NFCholesterolNF0.5脫水山梨醇硬脂酸酯SorbitanStearate1.0丁基化羥甲苯EmbanoxBHT0.05乙酸生育酚酯VitaminEAcetate0.1PEG-100硬脂酸酯Myrj592.0硬脂酰乳酸鈉PationicSSL0.5羥基辛酸HydroxycaprylicAcid0.1棕櫚酸和黃醇酯VitaminAPalmitate0.062-紅沒(méi)藥醇Alpha-bisabolol0.2去離子水加至100</table></tables>實(shí)施例2實(shí)施例1的組合物中，用8.0％(C18，單-和雙-不飽和)雙羧基酸替代3.0％甘草提取物。權(quán)利要求1．人體皮膚局部用增白美容產(chǎn)品，其中包含存在于適用于化妝品的載體中的組分(A)半胱氨和(B)甘草提取物或含7-30個(gè)碳原子的雙羧基酸。2．權(quán)利要求1的產(chǎn)品，其中雙羧基酸是含10-25個(gè)碳原子、優(yōu)選15-22個(gè)碳原子的不飽和雙羧基酸。3．權(quán)利要求1或2的產(chǎn)品，其中所含組分A和組分B的重量比為100∶1至1∶5000，優(yōu)選為10∶1至1∶500。4．權(quán)利要求1-3中任一權(quán)利要求的產(chǎn)品，其中包含0.001-10％(重量)、優(yōu)選0.1-8％(重量)、更優(yōu)選1-5％(重量)的半胱胺。5．權(quán)利要求1-4中任一權(quán)利要求的產(chǎn)品，其中包含0.001-20％(重量)、優(yōu)選0.1-15％(重量)、更優(yōu)選1-10％(重量)的組分B。6．權(quán)利要求1-5中任一權(quán)利要求的產(chǎn)品，其中含有防曬劑。7．用于人體皮膚增白的美容方法，其中是通過(guò)在皮膚上局部涂敷權(quán)利要求1-6中任一權(quán)利要求的產(chǎn)品。全文摘要一種人體皮膚局部用增白美容產(chǎn)品,其中包含存在于適用于化妝品的載體中的組分(A)半胱氨和(B)甘草提取物或含7—30個(gè)碳原子的雙羧基酸。共用的組分在減少黑色素產(chǎn)生方面具有協(xié)同作用。文檔編號(hào)A61K31/44GK1213535SQ9812058公開(kāi)日1999年4月14日申請(qǐng)日期1998年10月3日優(yōu)先權(quán)日1997年10月3日發(fā)明者M(jìn)·R·格林,A·D·赫斯,J·P·麥庫(kù)克,G·拉曼,I·R·斯科特申請(qǐng)人:尤尼利弗公司