專利名稱:抗美尼爾氏病藥青陽(yáng)參、用途和制備方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及青陽(yáng)參在制藥領(lǐng)域中的用途,具體地,涉及青陽(yáng)參在制備抗美尼爾氏病的藥物中的應(yīng)用,用青陽(yáng)參作為原料制成的治療美尼爾氏的藥物和制備該藥物的方法。
美尼爾氏病是一種常見(jiàn)的多發(fā)病,患病率為總?cè)丝诘?.5%,我世界約有2500-3000萬(wàn)美尼耳氏病人,中年女性居多數(shù)。此病是一種突發(fā)性的疾病,其癥狀包括發(fā)作性的眩暈、惡心嘔吐、眼球呆視或震顫,有些不有波動(dòng)性耳聾、耳鳴和耳脹滿感,少數(shù)病人(約20%的患者)留下到殘性眩暈和喪失聽(tīng)力。此癥病因目前尚無(wú)確切的病理研究,因此沒(méi)有對(duì)癥有效的藥物。美尼耳病又稱美尼耳氏綜合癥(Menier′syndrome),是一種病因不確切又無(wú)有效藥物的危害人類健康的疑難病癥。目前世界臨床上從東茛菪堿、暈海寧、山茛菪堿、鹽酸異丙嗪、阿托品、抗眩啶(betahistine)、敏克靜(mecligine)等藥物中選擇若于種藥進(jìn)行試探性治療,效果不能令人滿意。但上述藥物大都有較大的毒副作用,長(zhǎng)期藥物治療會(huì)有不可逆轉(zhuǎn)的毒副作用,如耳聾和經(jīng)常性的耳鳴等。因此研制療效高、毒副作用小的治療美尼爾病藥物已成急需解決的問(wèn)題。從蘿摩科植物青陽(yáng)參中提取藥用成分制成的片劑,在八十年代臨床功用僅用于清熱鎮(zhèn)驚,用于治療癲癇病。迄今沒(méi)有青陽(yáng)參在制備抗美尼爾氏病炎藥物中的應(yīng)用的報(bào)道。此外,抗癲癇藥青陽(yáng)參藥效成分的提取方法復(fù)雜、得率低,該藥僅為片劑一種劑型。
本發(fā)明的目的在于提供青陽(yáng)參在制藥領(lǐng)域中的一種新用途,即青陽(yáng)參在制備抗美尼爾氏病藥物中的應(yīng)用,提供新的提取青陽(yáng)參藥效成分的方法和常規(guī)制劑方法結(jié)合制得的抗美尼爾氏病藥物片劑、口服液、膠囊,具藥源廣、藥效高、毒性低、穩(wěn)定性好、生物吸收利用度高的優(yōu)點(diǎn);同時(shí)提供該藥物的制備方法。
本發(fā)明提供的技術(shù)方案如下一種抗美尼爾氏病的藥物,以青陽(yáng)參為原料,先以下述方法制得藥效部位,再按常規(guī)制劑方法制成的青陽(yáng)參片劑或口服液或膠囊取青陽(yáng)參,用氯仿或乙酸乙酯在60-70℃熱提取2-3次,回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂,底物即為藥效部位。
制備本發(fā)明治療美尼爾氏病藥物片劑的一種方法,取青陽(yáng)參,用氯仿在60-70℃熱提取2-3次,回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂,底物即為藥效部位,按藥效部位與賦形劑重量比為1∶2-1∶4的比例加入賦形劑,制成片劑。
制備本發(fā)明治療美尼爾氏病藥物膠囊的一種方法,取青陽(yáng)參,用氯仿在60-70℃熱提取2-3次,回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂,底物即為藥效部位,壓制成粉后裝入藥用膠囊制得青陽(yáng)參膠囊。
制備本發(fā)明治療美尼爾氏病藥物口服液的一種方法,取青陽(yáng)參,用氯仿在60-70℃熱提取2-3次,回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂,底物即為藥效部位,按常規(guī)制劑方法,將藥效部位制成濃度0.1g-0.5g/10ml一支的糖漿口服液。
制備本發(fā)明治療美尼爾氏病藥物片劑的另一種方法,取青陽(yáng)參,用乙酸乙酯在60-70℃熱提取2-3次,回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂,底物即為藥效部位,按藥效部位與賦形劑重量比為1∶2-1∶4的比例加入賦形劑,制成片劑。
制備本發(fā)明治療美尼爾氏病藥物膠囊的另一種方法,取青陽(yáng)參,用乙酸乙酯在60-70℃熱提取2-3次,回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂,底物即為藥效部位,壓制成粉后裝入藥用膠囊制得青陽(yáng)參膠囊。
制備本發(fā)明治療美尼爾氏病藥物口服液的另一種方法,取青陽(yáng)參,用乙酸乙酯在60-70℃熱提取2-3次,回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂,底物即為藥效部位,按常規(guī)制劑方法,將藥效部位制成濃度0.1g-0.5g/10ml一支的糖漿口服液。
本發(fā)明同時(shí)提供了青陽(yáng)參在制備抗美尼爾氏病的藥物中的應(yīng)用。
為了更好地理解本發(fā)明的實(shí)質(zhì),下面用抗美尼爾氏藥青陽(yáng)參的免疫藥理、毒性來(lái)說(shuō)明青陽(yáng)參抗美尼爾氏病的新用途及其有益效果。
采用本發(fā)明的實(shí)施例制得的青陽(yáng)參片劑、膠囊、口服液用于下述實(shí)驗(yàn)一、急性毒性實(shí)驗(yàn)用昆明種小鼠,體重18-24克,大鼠,體重200-250克,雌雄皆用,實(shí)驗(yàn)前12小時(shí)禁食不禁水(下同),均腹空注射不同劑量的青陽(yáng)參,動(dòng)物分成4組,每組10只,小鼠以24小時(shí),大鼠以72小時(shí)的死亡為指標(biāo),以Weil’s氏法計(jì)算LD50,結(jié)果小鼠=496.2(427.3-576.1)mg/kg,大鼠=349.0-451.7mg/kg。
二、抗驚厥作用1、抗超強(qiáng)電休克發(fā)作(MES)作用
選用18-24克雄小鼠隨分組,每組10只,分別雌雄(ip),本品40.80mg/kg,4h后實(shí)驗(yàn),結(jié)果證明,對(duì)WES無(wú)效,另取16組小鼠,每組5只,其中8組分別ip苯巴比妥鈉,另4組ip苯妥英納,lh后測(cè)其ED50,另外組分別ip本品青陽(yáng)參80mg/kg,3h后4組即不同劑量的苯巴比妥鈉,另外4組ip不同劑量的苯妥英,再過(guò)1h測(cè)其抗MES的ED50。結(jié)果可見(jiàn),本品單用對(duì)MES無(wú)效,但能加強(qiáng)苯巴比妥和苯妥英鈉的作用,結(jié)果如表1。
藥物ED501、青陽(yáng)參 40-80mg/kg2、苯巴比妥鈉13.0(9.7-17.4)3、苯巴比妥鈉+青陽(yáng)參(800g/kg) 2.4(1.5-3.91)(1.5-3.91)4、苯荽英鈉 4.8(3.4-6.7)5、苯妥英鈉+青陽(yáng)參(80mg/kg) 2.0(1.8-3.4)2、抗聽(tīng)源性發(fā)作作用實(shí)驗(yàn)用聽(tīng)源性發(fā)作敏感的Pπ-PMc大鼠,雌雄皆用,隨機(jī)分組,每組10只,本重200-270克,首先測(cè)定發(fā)作敏感性,連續(xù)3日,反應(yīng)恒定者用于實(shí)驗(yàn),而后分組ip本品青陽(yáng)參,4小時(shí)后再測(cè)其抗驚厥效應(yīng),以完全防止發(fā)作為指標(biāo),計(jì)算其ED50,結(jié)果證明其ED50為18.8mg/kg,用量在12.5mg/kg時(shí)已使發(fā)作明顯減輕(P<0.01)。
3、對(duì)點(diǎn)燃效應(yīng)發(fā)作的影響將點(diǎn)燃效應(yīng)(KE)5-6級(jí)的大鼠分成2組,一組口服本品100mg/kg,在給藥后4.6小時(shí)和12小實(shí)驗(yàn),另一組口服60mg/kg,連用2日,每次組藥后4.6和12小時(shí)實(shí)驗(yàn),以完全對(duì)抗為指標(biāo),結(jié)果無(wú)效。
三、抗美尼爾氏綜合癥實(shí)驗(yàn)(Meniere′s Disease)實(shí)驗(yàn)用240-300克的豚鼠雌雄皆用,隨機(jī)分組,實(shí)驗(yàn)前12小時(shí)禁食不禁水,對(duì)照組10只腹腔注射(ip)等容量的2%吐溫80,藥物組每組5只,第一組ip本品青陽(yáng)參60mg/kg,第二組ip60mg/kg一周后再給60mg/kg,第三組ip120mg/kg,均在給藥后4小時(shí)實(shí)驗(yàn),第4組ip鹽酸地芬尼多(眩暈停)100mg/kg,90分鐘后實(shí)驗(yàn)。
將20μL三氯甲烷用微量注射器通過(guò)一細(xì)塑管準(zhǔn)確的注入外耳道深部,一般在給藥后10分鐘左右出現(xiàn)臨床癥狀全身迅速向給藥側(cè)旋轉(zhuǎn),常在給三氯甲烷后15-20分鐘出現(xiàn),而后時(shí)停時(shí)旋轉(zhuǎn),約在60-80分鐘停止,這是最嚴(yán)重的癥狀;眼球震顫和頭向左右搖擺,為次要癥狀,后兩種指標(biāo)在給三甲烷后20、40、60、80、100和120分各記數(shù)一次,取組間均值為指標(biāo)。結(jié)果證明青陽(yáng)參在60mg/kg,可使旋轉(zhuǎn)明顯減少,部分動(dòng)物完全消失(P<0.001),但對(duì)眼球震顫和頭左右搖擺影響較輕,對(duì)癥狀持續(xù)時(shí)間也無(wú)影響,而60mg/kg一周后再給60mg/kg組,效果更好,旋轉(zhuǎn)完全消失,眼球震顫和頭左右搖擺明顯減少(P<0.01),癥狀維持時(shí)間也明顯縮短。120mg/kg給藥一次組旋轉(zhuǎn)基本消失,眼球震顫和頭左右搖擺次數(shù)明顯減少,癥狀持續(xù)時(shí)間縮短,一周后再約120mg/kg,效果與一次藥相似。眩暈停100g/kg也可使旋轉(zhuǎn)基本消失,眼球震顫和頭左右搖擺總?cè)藬?shù)明顯減少,持續(xù)時(shí)間明顯縮短,結(jié)果見(jiàn)表2
表2 青陽(yáng)參藥物對(duì)三氯甲烷引起的豚鼠美尼爾氏病的影響藥物 對(duì)照組 青陽(yáng)參 一周后再給120 一周后再給眩暈停(mg/kg) 60 60120 100旋轉(zhuǎn)2h 123.7+27.4 10.8+3.9** 0** 3.1+2.3** 0** 9.4+6.4**眼 20 150+17.5133.2+4.2 45.6+8.9 110+11.2 88+17.587.6+24.2*40 130+23.2110+10.132+14.8* 76.8+20.4* 46+16.7* 40.8+17*球 60 109+6.7 95+11.2 11.2+11.2* 58.4+158* 29.6+12.3* 40+14.3*80 78.4+4.596.2+22.3 0 18.6+8.9* 6.0+6.0* 18+8.4*震 100 66.9+24.4 75.2+10.6 0 3.0+3.0* 0 0顫 120 10.7+5.630.4+16.3 0 0 0 0頭 20 111+28.699.6+45 20+20**56+16.4* 28.6+18.2* 54.4+23.1*左 40 104+20 78.4+3.90 28.8+14.8* 9.6+9.6* 40.8+17.0*右 60 95.9+7.262.4+6.60 18.6+8.9 6.4+6.4* 29.6+13.2*搖 80 60.6+23.8 52.8+23.7 0 18.6+8.9* 03.2+3.2擺 100 29.4+10.1 43.2+9.40 3.0+3.0 0 0120 22.3+10.1 20+13.8 0 0 0 0注x+Sx**P>0.001 *P>0.01由以上結(jié)果可見(jiàn)青陽(yáng)參對(duì)美尼爾氏病病理模型有很好的治療作用,療效近似眩暈停,60mg/kg一次給藥巳使嚴(yán)重癥狀基本消失,60mg/kg一周內(nèi)2次給藥效果更好,與120mg/kg一次給藥的效果近似,也與100mg/kg的眩暈停效果近似。
三、免疫藥理作用將動(dòng)物(小鼠體重18-22克)隨機(jī)分組,每組10只,青陽(yáng)參加環(huán)磷酰胺組(簡(jiǎn)稱青陽(yáng)參組),溶劑聚乙二醇(PEG)加環(huán)磷酰胺組(簡(jiǎn)稱CP組),空白對(duì)照組每日注射生理鹽水0.2ml/只。青陽(yáng)參組按1/4LD50(70mg/kg)每日肌肉注射,環(huán)磷酰胺于10日按100mg/kg皮下注射一次,于實(shí)驗(yàn)第1,14,17,24,31日由尾靜脈采血測(cè)定白細(xì)胞總數(shù),淋巴細(xì)胞百分比,ANAE陽(yáng)性淋巴細(xì)胞百分比,淋巴細(xì)胞DNA含量(按計(jì)分法)1、對(duì)ANAE陽(yáng)性淋巴細(xì)胞的影響于給CP后第4日,CP組ANAE陽(yáng)性淋巴細(xì)胞百分比改變不大,但其絕對(duì)數(shù)明顯下降,在注射CP后第7日降到最低水平,然后逐漸恢復(fù)正常;青陽(yáng)參級(jí)ANAE陽(yáng)性淋巴細(xì)胞在注射CP后第4天下降不顯著,也在第7日下降到最低點(diǎn),但下降程度較單用CP組明顯為輕。
2、青陽(yáng)參對(duì)淋巴細(xì)胞DNA的保護(hù)作用CP組淋巴細(xì)胞DNA的含量于第4日開(kāi)始下降,第7日下降到最低水平。青陽(yáng)參組也是第4日開(kāi)始下降,到7日下降到最低點(diǎn),但均顯著高于CP組。淋巴細(xì)胞DAN的動(dòng)態(tài)變化來(lái)看,CP組的DNA值的下降急劇,而且持續(xù)一段時(shí)間;青陽(yáng)參組的DNA含量雖有下降,但急劇下降的時(shí)間發(fā) 生較冕,維持下降的最低點(diǎn)的時(shí)間短,就開(kāi)始回升。CP組和PEG組淋巴細(xì)胞核內(nèi)DNA著色區(qū)均出現(xiàn)大量空泡,而青陽(yáng)參組未觀察到這一現(xiàn)象,可見(jiàn)青陽(yáng)參對(duì)淋巴細(xì)胞DNA有保護(hù)作用。
3、對(duì)血漿及尿液影響44例治療前后白細(xì)胞總數(shù)、分類、血小板計(jì)數(shù),出凝血時(shí)間無(wú)明顯改變;尿常規(guī)檢查也無(wú)異常發(fā)現(xiàn)。
綜觀以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果,本發(fā)明的有益效果在于本發(fā)明的青陽(yáng)參片劑、膠囊、口服液具藥源廣、藥效高、毒性低、穩(wěn)定性好、生物吸收利用度高的優(yōu)點(diǎn)本發(fā)明的青陽(yáng)參具有免疫活性,對(duì)氯仿注入豚鼠外耳道深部造成的美尼爾氏病病理模型(豚鼠眩暈旋轉(zhuǎn)、眼球震顫、頭左右搖擺)有很好的治療作用。有效率為85-90%,與對(duì)照組有明顯差異;青陽(yáng)參片劑、膠囊、口服液三種劑型副作用小,口服方便,是一個(gè)有效低毒的抗美尼爾氏藥。青陽(yáng)參用乙酸乙酯或氯仿提取物,經(jīng)石油醚脫脂后的產(chǎn)物為青陽(yáng)參藥效部位,簡(jiǎn)稱為青陽(yáng)參總甙,它不同于一般免疫藥物的單一免疫活性,它對(duì)免疫系統(tǒng)—中樞神經(jīng)—內(nèi)分泌同時(shí)起作用,這表現(xiàn)在藥理和臨床效果上,。用藥理實(shí)驗(yàn)確認(rèn)其免疫活性成分,結(jié)果證明該植物活性成分是C21-甾體酯甙類,進(jìn)一步分離提純證實(shí)單體為該類化合物。臨床用青陽(yáng)參總甙,腹腔注射有效劑量60mg/kg,其安全比為12-16倍,顯示此藥安全方便。綜合上述化學(xué)、藥理和臨床的結(jié)果,證實(shí)青陽(yáng)參的C21-甾體成分具有免疫調(diào)節(jié)和增強(qiáng)作用,同時(shí)對(duì)美尼爾氏病有治療作用,而且青陽(yáng)參抗美尼爾氏藥毒副作用小,其他類藥物大都有較大的毒副作用。
實(shí)施例一取蘿摩科鵝絨藤屬植物青陽(yáng)參(Cynanchum otophyllum Schneid)根10kg,用氯仿在70℃熱提取2次,回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂,得底物即藥效部位塊狀物200g,按藥效部位與賦形劑重量比為1∶2的比例加入賦形劑淀粉400g,制成2000片片劑。
實(shí)施例二取蘿摩科鵝絨藤屬植物青陽(yáng)參(Cynanchum otophyllum Schneid)根10kg,用氯仿在70℃熱提取3次,回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂,得底物即藥效部位塊狀物300g,壓制成粉后裝入藥用膠囊制得3000個(gè)青陽(yáng)參膠囊。
實(shí)施例三取蘿摩科鵝絨藤屬植物青陽(yáng)參(Cynanchum otophyllum Schneid)根10kg,用氯仿在65℃熱提取3次,回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂,得底物即為藥效部位塊狀物250g,按常規(guī)制劑方法,將藥效部位制成濃度0.5g/10ml一支的糖漿口服液。
實(shí)施例四取蘿摩科鵝絨藤屬植物青陽(yáng)參(Cynanchum otophyllum Schneid)根10kg,用乙酸乙酯在65℃熱提取2次,回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂,得底物即藥效部位塊狀物300g,按藥效部位與賦形劑重量比為1∶4的比例加入賦形劑淀粉,制成片劑。
實(shí)施例五取蘿摩科鵝絨藤屬植物青陽(yáng)參(Cynanchum otophyllum Schneid)根10kg,用乙酸乙酯在70℃熱提取3次,回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂,得底物即藥效部位塊狀物300g,壓制成粉后裝入藥用膠囊制得青陽(yáng)參膠囊。
實(shí)施例六取蘿摩科鵝絨藤屬植物青陽(yáng)參(Cynanchum otophyllum Schneid)根10kg,用乙酸乙酯在60℃熱提取3次,回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂,得底物即藥效部位塊狀物,按常規(guī)制劑方法,將藥效部位塊狀物制成濃度0.2g/ml一支的糖漿口服液。
權(quán)利要求
1.一種抗美尼爾氏病的藥物,其特征是以青陽(yáng)參為原料,先以下述方法制得藥效部位,再按常規(guī)制劑方法制成的青陽(yáng)參片劑或口服液或膠囊取青陽(yáng)參,用氯仿或乙酸乙酯在60-70℃熱提取2-3次,回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂,底物即為藥效部位。
2.制備權(quán)利要求1的藥物的方法,其特征是取青陽(yáng)參,用氯仿在60-70℃熱提取2-3次,回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂,底物即為藥效部位,按藥效部位與賦形劑重量比為1∶2-1∶4的比例加入賦形劑,制成片劑。
3.制備權(quán)利要求1的藥物的方法,其特征是取青陽(yáng)參,用氯仿在60-70℃熱提取2-3次,回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂,底物即為藥效部位,壓制成粉后裝入藥用膠囊制得青陽(yáng)參膠囊。
4.制備權(quán)利要求1的藥物的方法,其特征是取青陽(yáng)參,用氯仿在60-70℃熱提取2-3次,回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂,底物即為藥效部位,按常規(guī)制劑方法,將藥效部位制成濃度0.1g-0.5g/10ml一支的糖漿口服液。
5.制備權(quán)利要求1的藥物的方法,其特征是取青陽(yáng)參,用乙酸乙酯在60-70℃熱提取2-3次,回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂,底物即為藥效部位,按藥效部位與賦形劑重量比為1∶2-1∶4的比例加入賦形劑,制成片劑。
6.制備權(quán)利要求1的藥物的方法,其特征是取青陽(yáng)參,用乙酸乙酯在60-70℃熱提取2-3次,回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂,底物即為藥效部位,壓制成粉后裝入藥用膠囊制得青陽(yáng)參膠囊。
7.制備權(quán)利要求1的藥物的方法,其特征是取青陽(yáng)參,用乙酸乙酯在60-70℃熱提取2-3次,回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂,底物即為藥效部位,按常規(guī)制劑方法,將藥效部位制成濃度0.1g-0.5g/10ml一支的糖漿口服液。
8.青陽(yáng)參在制備抗美尼爾氏病的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及青陽(yáng)參在制藥領(lǐng)域中的用途。具體地,涉及青陽(yáng)參在制備抗美尼爾氏病的藥物中的應(yīng)用,用青陽(yáng)參作為原料制成的治療美尼爾氏的藥物和制備該藥物的方法。本發(fā)明的青陽(yáng)參片劑、膠囊、口服液具藥源廣、藥效高、毒性低、穩(wěn)定性好、生物吸收利用度高的優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)A61K9/48GK1149485SQ96111270
公開(kāi)日1997年5月14日 申請(qǐng)日期1996年8月29日 優(yōu)先權(quán)日1996年8月29日
發(fā)明者木全章, 沈月毛, 周茜蘭, 郝小江 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所