專利名稱:豬囊蟲蟲苗制備方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及一種豬用疫苗的制備方法。
囊蟲病是一種人畜共患的寄生蟲病。在我國北方,豬囊蟲病的分布十分普遍。應(yīng)用10%吡喹酮等藥物治療雖能收到較好的效果,但卻不能從根本上防治。
本發(fā)明針對上述問題,提出了一種制備豬囊蟲蟲苗的方法,其目的是使豬囊蟲病的防治,可以通過免疫的途徑來解決。
本發(fā)明是采用如下技術(shù)方案來完成的。
1、收集囊蟲蟲體。選擇重度感染的囊蟲豬作為抗原來源,屠宰后剝離收集囊蟲蟲體。而后將收集好的蟲體用滅菌生理鹽水洗滌去雜,再用雙抗生理鹽水(青霉素100萬單位、鏈霉素100萬單位、生理鹽水1000毫升)浸泡并置于4℃的冰箱中。浸泡時間為12-24小時,保存期不得超過48小時。
2、制備培養(yǎng)基。培養(yǎng)基的配比是健康豬血清20毫升、滅菌生理鹽水80毫升、胰蛋白酶1克、青霉素10萬單位、鏈霉素10萬單位,其中健康豬血清要在56℃的溫度下滅能30分鐘。將上述物質(zhì)混合均勻后再存放于37℃的恒溫箱中消化,消化時間為12-24小時。
3、培養(yǎng)豬囊蟲。在培養(yǎng)基中,按每100毫升1100個的比例加入經(jīng)雙抗生理鹽水浸泡后的豬囊蟲,而后放入37℃恒溫箱中培養(yǎng)6-12小時。待75%的豬囊蟲伸出頭節(jié)時,將培養(yǎng)基和豬囊蟲一起放入離心機中,每分鐘3000轉(zhuǎn),運轉(zhuǎn)10分鐘,取其上清液放入滅菌容器中,并在4℃的冰箱中保存。
4、制備成品蟲苗。制備成品蟲苗分為兩步,第一步用反向間接血凝反應(yīng)法測定抗原效價,當(dāng)上清液效價高于豬囊蟲囊泡原液效價一個滴度時即可用來制做成品蟲苗。第二步添加佐劑,其成份和比例是上清液47.5毫升、液體石臘(高壓滅菌)47.5毫升、吐溫-80 5毫升、青霉素10萬單位、鏈霉素10萬單位。將上述物質(zhì)混勻后即完成了本發(fā)明的全過程。
利用上述方法制成的豬囊蟲蟲苗,在4℃的條件下,可保存6個月。使用時采用肌注的方法注入待免疫的豬中,就可達到免疫的效果。從而解決了用免疫的途徑防治豬囊蟲病的問題,為發(fā)展養(yǎng)豬業(yè)、防治豬囊蟲病提供了一種科學(xué)的方法。
權(quán)利要求
1.一種豬囊蟲蟲苗的制備方法,其特征在于其是通過收集囊蟲蟲體、制備培養(yǎng)基、培養(yǎng)豬囊蟲、制備成品蟲苗四個步驟完成的。
2.如權(quán)利要求1所述的豬囊蟲蟲苗制備方法,其特征在于所說的收集豬囊蟲蟲體是將其用滅菌生理鹽水洗滌去雜,再用雙抗生理鹽水浸泡并置于4℃的冰箱中,浸泡時間為12-24小時。
3.如權(quán)利要求1、2所述的豬囊蟲蟲苗制備方法,其特征在于所說的制備培養(yǎng)基,是用在56℃的溫度下滅能30分鐘的健康豬血清、滅菌生理鹽水、胰蛋白酶、青霉素和鏈霉素進行混合配制,并在37℃的恒溫箱中消化12-24小時。
4.如權(quán)利要求1、2所述的豬囊蟲蟲苗制備方法,其特征在于所說的培養(yǎng)豬囊蟲是在培養(yǎng)基中按每100毫升1100個的比例加入經(jīng)雙抗生理鹽水浸泡后的豬囊蟲,而后放入37℃恒溫箱中培養(yǎng)6-12小時,待75%的豬囊蟲伸出頭節(jié)時,將培養(yǎng)基和豬囊蟲一起在每分鐘3000轉(zhuǎn)的離心機中離心10分鐘,取其上清液在4℃的冰箱中保存待用。
5.如權(quán)利要求3所述的豬囊蟲蟲苗制備方法,其特征在于所說的培養(yǎng)豬囊蟲是在培養(yǎng)基中按每100毫升1100個的比例加入經(jīng)雙抗生理鹽水浸泡后的豬囊蟲,而后放入37℃恒溫箱中培養(yǎng)6-12小時,待75%的豬囊蟲伸出頭節(jié)時,將培養(yǎng)基和豬囊蟲一起在每分鐘3000轉(zhuǎn)的離心機中離心10分鐘,取其上清液在4℃的冰箱中保存待用。
6.如權(quán)利要求1、2所述的豬囊蟲蟲苗制備方法,其特征在于所說的制備成品蟲苗是在上清液效價高于豬囊蟲囊泡原液效價一個滴度的條件下,在上清液中加入液體石臘、吐溫-80、青霉素和鏈霉素并混合均勻。
7.如權(quán)利要求3所述的豬囊蟲蟲苗制備方法,其特征在于所說的制備成品蟲苗是在上清液效價高于豬囊蟲囊泡原液效價一個滴度的條件下,在上清液中加入液體石臘、吐溫-80、青霉素和鏈霉素并混合均勻。
8.如權(quán)利要求4所述的豬囊蟲蟲苗制備方法,其特征在于所說的制備成品蟲苗,是在上清液效價高于豬囊蟲囊泡原液效價一個滴度的條件下,在上清液中加入液體石臘、吐溫-80、青霉素和鏈霉素并混合均勻。
9.如權(quán)利要求5所述的豬囊蟲蟲苗制備方法,其特征在于所說的制備成品蟲苗是在上清液效價高于豬囊蟲囊泡效價一個滴度的條件下,在上清液中加入液體石臘、吐溫-80、青霉素和鏈霉素并混合均勻。
全文摘要
本發(fā)明介紹了一種豬用疫苗的制備方法。采用本方法制成的豬囊蟲蟲苗可以使豬囊蟲病的防治得到根本性的解決。本方法的要點是通過對豬囊蟲蟲體的培養(yǎng)、處理和添加佐劑,制成豬囊蟲蟲苗。而后可采用肌注的方法注入待免疫的豬中,即可收到令人滿意的免疫效果,從而為防治豬囊蟲病提供了一種科學(xué)的方法。
文檔編號A61K39/002GK1062662SQ9011022
公開日1992年7月15日 申請日期1990年12月25日 優(yōu)先權(quán)日1990年12月25日
發(fā)明者張高迪 申請人:內(nèi)蒙古哲里木盟畜牧獸醫(yī)科學(xué)研究所